馬占軍，蔡金山，都占林，李 靜，張總超，陳 帆

（ 青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，青海 西寧 810000 ）

苦參堿類(lèi)生物堿是存在于豆科槐屬植物中的生物堿，此類(lèi)生物堿化學(xué)結(jié)構(gòu)相似。苦參堿類(lèi)生物堿具有鎮(zhèn)痛、強(qiáng)心、抗心律失常、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、消腫利尿、免疫抑制、抗菌殺蟲(chóng)等藥理作用[1]。本文結(jié)合近年來(lái)國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究進(jìn)展，論述苦參堿類(lèi)生物堿中抗炎藥理活性較強(qiáng)的6 種單體在動(dòng)物臨床中的研究及應(yīng)用情況，為今后動(dòng)物炎癥性疾病的臨床診療及苦參堿類(lèi)生物堿的應(yīng)用提供參考。

1 苦參堿類(lèi)生物堿的抗炎活性及臨床應(yīng)用

苦參堿類(lèi)生物堿的抗炎藥理活性一直是國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的重要內(nèi)容，臨床中該類(lèi)生物堿多用于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎、晶狀體蛋白誘發(fā)的家兔虹膜炎和睫狀體炎、支氣管哮喘急性發(fā)作及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎等。目前，藥理活性相關(guān)研究最多的苦參堿類(lèi)生物堿單體有6種，分別為苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、槐定堿、槐胺堿以及氧化槐果堿[2]。

1.1 苦參堿

苦參堿主要用于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎、乳腺炎及家兔口腔潰瘍等細(xì)菌引起的炎癥性疾病。于曉紅等[3]用脂多糖（LPS）建立奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞炎癥損傷模型，再使用5、10、20 mg/L苦參堿干預(yù)，RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞因子腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果顯示，苦參堿可顯著降低細(xì)胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8）的表達(dá)（P＜0.05），具有較強(qiáng)的抗炎作用。韓歡勝等[4]在苦參堿抑菌試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，苦參堿制劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌和停乳鏈球菌具有較強(qiáng)的抑菌效果。Li 等[5]研究表明，低濃度的苦參堿（1、5 和10 mg/kg）對(duì)微生物菌群具有調(diào)控作用，可間接抑制病原菌生長(zhǎng)。Feng等[6]研究發(fā)現(xiàn)，使用苦參堿干預(yù)后，金黃色葡萄球菌中α-溶血素誘導(dǎo)的牛乳腺上皮細(xì)胞損傷可大幅減少。嚴(yán)俊等[7]在冰醋酸燒灼形成的家兔潰瘍處敷苦參堿生物黏附凝膠，發(fā)現(xiàn)4 d后潰瘍面積顯著縮小，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減少，出現(xiàn)較多成纖維細(xì)胞，組織形態(tài)逐漸恢復(fù)，表明苦參堿對(duì)家兔口腔潰瘍炎癥具有良好的治療及改善作用。

1.2 氧化苦參堿

氧化苦參堿對(duì)動(dòng)物支氣管哮喘、潰瘍性結(jié)腸炎等急慢性炎癥均具有抗炎作用[8]。焦霞等[9]在探討氧化苦參堿對(duì)哮喘小鼠抗炎作用的研究中，建立小鼠哮喘模型，觀察哮喘小鼠支氣管肺泡灌洗液中的炎性細(xì)胞數(shù)目、肺組織病理變化。結(jié)果表明，在氧化苦參堿治療后，哮喘小鼠肺組織中血管周?chē)爸夤芙M織中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減輕，黏膜上皮細(xì)胞脫落也得到了一定控制。白細(xì)胞介素-4（IL-4）mRNA 在體內(nèi)的表達(dá)水平超過(guò)一定界限后會(huì)引發(fā)哮喘，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，哮喘小鼠的IL-4 mRNA表達(dá)受到明顯的抑制。上述試驗(yàn)說(shuō)明，氧化苦參堿能夠有效抑制IL-4 mRNA的表達(dá)水平。

韓運(yùn)洋等[10]在二甲苯致小鼠耳廓腫脹試驗(yàn)中采用25、50、100 mg/kg 氧化苦參堿對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃處理。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同濃度的氧化苦參堿均可降低二甲苯致小鼠耳廓腫脹程度，且隨著氧化苦參堿濃度增加，二甲苯致小鼠耳廓腫脹抑制率升高；連續(xù)給大鼠灌胃50、100、200 mg/kg氧化苦參堿7 d還能夠抑制叉菜膠致大鼠足趾腫脹。李如月等[11]通過(guò)體外試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，氧化苦參堿可通過(guò)上調(diào)微小RNA-211-5p表達(dá)，下調(diào)把關(guān)受體-4/髓樣分化因子88/核因子-κB 信號(hào)通路，抑制炎性細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)，繼而誘導(dǎo)胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)微小RNA-211-5p產(chǎn)生抗炎作用，還能夠?qū)怪嗵窍抡{(diào)胰腺星狀細(xì)胞表達(dá)微小RNA-211-5p。王帥[12]試驗(yàn)中使用40、80 mg/kg兩個(gè)劑量的氧化苦參堿，采用直腸局部給藥方式，探索其對(duì)三硝基苯磺酸（TNBS）誘導(dǎo)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用。結(jié)果表明，氧化苦參堿可顯著改善潰瘍性結(jié)腸炎的病理改變，如杯狀細(xì)胞缺失、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肉芽組織增生等癥狀。

1.3 槐果堿

槐果堿是一種喹諾里西啶生物堿，具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性和抗炎鎮(zhèn)痛作用，主要用于動(dòng)物抗急性炎癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及結(jié)腸炎[13]。季宇彬等[14]研究不同劑量的槐果堿對(duì)小鼠耳輪廓腫脹和角叉菜所致大鼠足腫脹的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，40 mg/kg劑量的槐果堿對(duì)小鼠耳腫脹的抑制率超過(guò)60%，抗炎作用明顯；30 mg/kg 劑量的槐果堿對(duì)大鼠足趾腫脹也具有明顯的抑制作用。槐果堿對(duì)抗急性炎癥具有顯著作用。Zhu 等[15]研究發(fā)現(xiàn)，槐果堿能夠明顯緩解小鼠關(guān)節(jié)腫脹，抑制紅斑擴(kuò)展，緩解小鼠關(guān)節(jié)組織的損害，并降低LPS 誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1（IL-1）、IL-6、TNF-α 和白細(xì)胞介素-12（IL-12）的表達(dá)。付聰敏等[16]采用10、20、40 mg/kg槐果堿對(duì)1%角叉菜膠致炎小鼠足趾腫脹進(jìn)行處理，結(jié)果表明，隨著槐果堿濃度增加，角叉菜膠致小鼠足腫脹的腫脹程度明顯減輕，且炎癥部位氧化應(yīng)激反應(yīng)得到抑制。王婷婷等[17]采用完全弗氏佐劑法建立大鼠炎性疼痛模型，并采用槐果堿（30.0、15.0、7.5 mg/kg）進(jìn)行干預(yù)。結(jié)果表明，干預(yù)后第4、7 d，槐果堿使大鼠熱刺激縮足反射潛伏期顯著延長(zhǎng)，機(jī)械刺激縮足反射閾值顯著升高，可抑制大鼠炎癥部位磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt 及核轉(zhuǎn)錄因子（NF-κB）蛋白表達(dá)水平。Jiang 等[18]建立模擬膿毒型肝損傷小鼠模型，探究槐果堿（30、60 mg/kg）對(duì)LPS介導(dǎo)的炎癥作用。結(jié)果顯示，槐果堿可顯著降低脂多糖誘導(dǎo)小鼠血清TNF-α、IL-1β 和IL-6 表達(dá)水平，表明槐果堿可降低脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)程度。

張宇飛等[19]以小膠質(zhì)細(xì)胞系BV-2 為對(duì)象，研究槐果堿對(duì)LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥作用。結(jié)果表明，槐果堿可通過(guò)AMPK/Nrf-2/HO-1-NF-κB 信號(hào)傳導(dǎo)途徑抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞中的炎癥。莫安薇等[20]建立TNBS結(jié)腸炎模型并采用槐果堿進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腸組織炎癥評(píng)分、結(jié)腸黏膜炎癥介質(zhì)干擾素（IFN-γ）及TNF-α水平顯著降低，表明槐果堿可改善結(jié)腸炎小鼠腸道炎癥。

1.4 槐定堿

槐定堿可通過(guò)抗氧化、抗炎、抗細(xì)胞凋亡等途徑，在炎癥性疾病方面表現(xiàn)出較好的療效[21]。槐定堿在體內(nèi)的藥理活性分布快，范圍廣，不易積蓄，消除快，無(wú)代謝飽和，還具有改善心功能的作用，可正性肌力、減慢心率、對(duì)抗多種心律失常[22]?；倍▔A的抗炎作用通過(guò)抑制炎性細(xì)胞因子或抑制環(huán)氧化酶的活性產(chǎn)生。黃秀梅等[23]用LPS 刺激體外培養(yǎng)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞，使其劑量依賴(lài)性地產(chǎn)生參與早期炎癥反應(yīng)的腫瘤壞死因子，并使用槐定堿進(jìn)行干預(yù)，觀察槐定堿對(duì)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子影響。結(jié)果表明，在一定劑量范圍內(nèi)，槐定堿可劑量依賴(lài)性地抑制小鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)LPS 刺激產(chǎn)生的腫瘤壞死因子。梁錦屏等[24]通過(guò)尾靜脈注射LPS制備內(nèi)毒素血癥小鼠模型，損傷后給予12 mg/kg槐定堿治療。結(jié)果顯示，治療后小鼠腎小管上皮細(xì)胞水腫減輕，炎細(xì)胞浸潤(rùn)減少，血清中炎癥介質(zhì)含量下降，表明槐定堿能夠明顯減輕腎部炎癥損傷。

1.5 槐胺堿

槐胺堿具有鎮(zhèn)痛抗炎和免疫抑制作用，可用于治療移植排斥反應(yīng)[25]。張佩等[26]在大鼠進(jìn)行皮膚移植手術(shù)后滴注一定濃度的槐胺堿，結(jié)果顯示，與皮膚移植手術(shù)后未滴注槐胺堿大鼠相比，滴注槐胺堿的大鼠皮膚片存活時(shí)間長(zhǎng)、存活率高，且無(wú)炎癥發(fā)生，表明槐胺堿對(duì)皮膚移植排斥反應(yīng)具有明顯的抑制作用，且具有一定的抗炎活性。陳靖等[27]采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型觀察30、60 mg/kg的槐胺堿抗炎作用效果，發(fā)現(xiàn)二甲苯致小鼠耳腫脹均得到明顯抑制，說(shuō)明此劑量下槐胺堿的抗炎效果顯著。

1.6 氧化槐果堿

氧化槐果堿可用于治療動(dòng)物乳腺炎、支氣管炎及銀屑病。徐暉等[28]設(shè)置二甲苯致小鼠耳腫脹試驗(yàn)和角叉菜膠致大鼠足跖腫脹試驗(yàn)。結(jié)果表明，氧化槐果堿對(duì)由二甲苯引起的小鼠耳腫脹具有明顯的抑制作用，其有效藥物濃度為80 mg/kg；氧化槐果堿對(duì)角叉菜膠所致大鼠足趾腫脹也具有很好的抑制作用，有效藥物濃度達(dá)60 mg/kg 時(shí)，抗炎效果顯著。吳璟等[29]也在小鼠炎癥性疼痛試驗(yàn)中證實(shí)，氧化槐果堿能夠明顯降低小鼠足組織的TNF-α、IL-1β、IL-6和前列腺素E2（PGE2）水平，抑制二甲苯致小鼠耳腫脹程度和角叉菜膠致小鼠足趾腫脹程度。喬樂(lè)天等[30]采用高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定抗婦炎膠囊中氧化槐果堿活性成分，結(jié)果顯示，氧化槐果堿線(xiàn)性關(guān)系良好（r為4.85～242.50 mg/L），平均回收率99.52%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.81%，表明氧化槐果堿可應(yīng)用于乳腺炎的治療。

2 苦參堿類(lèi)生物堿的藥代動(dòng)力學(xué)研究

生物堿類(lèi)苦參堿中，苦參堿、氧化苦參堿和槐果堿具有豐富的藥理活性而得到了廣泛的臨床應(yīng)用，促使人們對(duì)其藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。賴(lài)遠(yuǎn)波[31]研究發(fā)現(xiàn)，苦參堿的血藥濃度時(shí)程符合二房式開(kāi)放模型，在初期時(shí)血藥濃度下降快，之后血藥濃度下降逐漸緩慢。對(duì)其作用的組織部位觀察，腎臟最高，依次為脾、肺、腦、心、血；試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，臟器藥物濃度約在0.5 h 達(dá)到峰值，血藥濃度也在0.5 h 到達(dá)峰值，在給藥后48 h 內(nèi)仍可測(cè)得。給藥后32 h 時(shí)，尿中藥物原形排泄率超過(guò)50%，其中腎清除率為143.8 mL/min，易通過(guò)血腦屏障，在心臟和肺中分布也比較多。該研究結(jié)果為苦參堿鎮(zhèn)靜、抗炎、抗心律失常等方面的研究提供了藥代學(xué)基礎(chǔ)。

王建明等[32]研究表明，氧化苦參堿透皮吸收后未發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，依以其原形存在。與苦參堿相比，氧化苦參堿吸收較慢，數(shù)據(jù)擬合度顯示，一級(jí)吸收和雙室模型對(duì)氧化苦參堿經(jīng)皮給藥血藥濃度方程是適合的。王素軍等[33]選擇6只比格犬進(jìn)行氧化苦參堿（30 mg/kg）灌胃，結(jié)果顯示，氧化苦參堿在體內(nèi)吸收快、分布快，缺陷為絕對(duì)生物利用度較低。高佩佩等[34]通過(guò)尾靜脈注射和灌胃兩種方式對(duì)氧化苦參堿在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，結(jié)果表明，氧化苦參堿在大鼠體內(nèi)的半衰期較短，生物利用度較低，原因可能是氧化苦參堿具有較強(qiáng)的水溶性，通過(guò)生物膜的難度較大。

董海娟等[35]采用雙周期自身交叉設(shè)計(jì)，將6 只比格犬分為兩組，一組進(jìn)行灌胃（30 mg/kg），另一組進(jìn)行靜脈注射（6 mg/kg），7 d 后交替。試驗(yàn)結(jié)果表明，比格犬灌胃的藥-時(shí)曲線(xiàn)數(shù)據(jù)符合二房式模型，而靜脈注射槐果堿的藥-時(shí)曲線(xiàn)數(shù)據(jù)也符合二房式模型，二者的消除半衰期也基本相當(dāng)；數(shù)據(jù)顯示，該藥的吸收速度快、分布也快，血藥濃度最初下降較為迅速，末端時(shí)較為緩慢，進(jìn)行槐果堿單體灌胃的比格犬絕對(duì)生物利用度達(dá)到45.28%。

3 結(jié)論

苦參堿類(lèi)生物堿廣泛存在于自然界豆科槐屬植物中，具有廣泛而有效的抗炎活性。目前，基于苦參堿類(lèi)生物堿制成的抗炎藥物已在動(dòng)物臨床上得到了廣泛應(yīng)用，并取得了顯著的治療效果。作為一種天然抗炎藥物，苦參堿類(lèi)生物堿具有毒副作用小、安全有效、藥用資源豐富等特點(diǎn)，因此在治療動(dòng)物炎癥性疾病的擴(kuò)展研究和進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)應(yīng)用方面受到國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者重視。

苦參堿類(lèi)生物堿在藥理學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用較多，但其本身也存在一些缺陷：?jiǎn)误w成分比較多，質(zhì)量難以控制；總堿與單體成分活性存在差異，且對(duì)系統(tǒng)性的研究還不夠，未能全面開(kāi)發(fā)出其潛在的抗炎藥理活性。因此，運(yùn)用現(xiàn)代化科技手段開(kāi)展天然活性成分方面的深入研究和藥理開(kāi)發(fā)很有必要，還可進(jìn)一步運(yùn)用化學(xué)理論和技術(shù)對(duì)苦參堿類(lèi)生物堿進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾處理，全面凸顯其抗炎活性能，進(jìn)一步提高其動(dòng)物炎癥性疾病中的抗炎效果。