呂娜 ，李巖異 ，馬祝青

1.華北制藥金坦生物技術(shù)股份有限公司，石家莊 050035 2.山東博安生物技術(shù)股份有限公司，山東 煙臺(tái) 264003

隨著新型冠狀病毒的大流行，人們對(duì)與呼吸道相關(guān)病毒引發(fā)疾病的發(fā)病率和死亡率越來(lái)越關(guān)注。呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）感染人類模式 U 形年齡曲線顯示，發(fā)病率峰值人群為年齡小于5歲的嬰幼兒及65歲以上老年人［1］。在全球范圍內(nèi)，RSV每年導(dǎo)致約300萬(wàn)名5歲以下兒童住院，約6萬(wàn)人在院內(nèi)死亡。而在美國(guó)，RSV 是導(dǎo)致1 歲以下嬰兒住院的主要原因；每年因RSV 住院的17.7 萬(wàn)老年人中，有1.4 萬(wàn)人死亡［2］。兒童期感染RSV 可能在以后的生活中引發(fā)持續(xù)性或復(fù)發(fā)性喘息和哮喘，由此成為慢性疾?。?-4］。目前，用于治療或預(yù)防RSV 感染的特異性和非特異性方法很少。本文綜述了當(dāng)前臨床上可用的RSV 感染的治療方法和預(yù)防藥物，包括最新的疫苗研發(fā)進(jìn)展，以期為RSV 的預(yù)防和臨床治療研究提供參考。

1 特異性抗呼吸道合胞病毒感染療法

RSV 是一種線性單鏈RNA 病毒，為副粘病毒，編碼10 種蛋白質(zhì)，該病毒有兩種跨膜糖蛋白參與病毒進(jìn)入細(xì)胞，即附著蛋白（G）和融合糖蛋白（F）。F 蛋白通過構(gòu)象變化可以介導(dǎo)病毒包膜和宿主細(xì)胞的融合，誘導(dǎo)產(chǎn)生特征合胞體［5］。F蛋白以兩種形式存在：一種是高度穩(wěn)定的融合后（post-F）形式，另一種是不穩(wěn)定的融合前（pre-F）形式。在感染期間，當(dāng)病毒和宿主細(xì)胞聚集在一起時(shí)，這種蛋白質(zhì)呈現(xiàn)pre-F 形式，一旦感染發(fā)生，這種蛋白質(zhì)就轉(zhuǎn)變?yōu)楦臃€(wěn)定的post-F 形式［6］。RSV 潛伏期通常為2～8 天，最初感染上呼吸道（upper respiratory tract infection，URTI），如果治療不及時(shí)或選擇錯(cuò)誤的治療方法，就有可能繼發(fā)下呼吸道感染（lower respiratory tract infection，LRTI），對(duì)于健康的兒童來(lái)說，RSV 感染通常是一種自限性疾病，因此，支持治療是治療的基本方法。RSV 特異性治療已被證明對(duì)特定的兒科人群（如骨髓和肺移植受者）有益，這些治療措施的最終目標(biāo)是緩解癥狀，減少疾病的持續(xù)時(shí)間和嚴(yán)重程度，并降低傳播風(fēng)險(xiǎn)。常規(guī)的治療劑主要包括帕利珠單抗（palivizumab）、莫維珠單抗（MEDI-524）、Clesrovimab、尼塞韋單抗（nirsevimab）、免疫球蛋白（RSV-immune globulin intravenous，RSV-IGIV）和利巴韋林（ribavirin）。

1.1 帕利珠單抗

帕利珠單抗是人源化小鼠單克隆抗體（mAb），能與RSV 融合蛋白（F）的抗原位點(diǎn)Ⅱ結(jié)合，并抑制隨后的病毒感染。1998 年，帕利珠單抗被批準(zhǔn)用于預(yù)防特定高危人群的嚴(yán)重 RSV 感染，但至今未在國(guó)內(nèi)獲批。在某些高危嬰兒亞組中，帕利珠單抗預(yù)防因RSV 感染住院的有效率高達(dá) 80%［7］。但是，帕利珠單抗價(jià)格昂貴，并且由于半衰期相對(duì)較短（約20天），需要在易感染RSV 的季節(jié)每月肌內(nèi)注射5 次，因此未獲得廣泛應(yīng)用。在一項(xiàng)雙盲臨床對(duì)照試驗(yàn)中，420 名既往健康的RSV細(xì)支氣管炎嬰兒被隨機(jī)分配到帕利珠單抗組（15 mg·kg-1體重）或安慰劑。結(jié)果顯示兩組在再入院率、住院持續(xù)時(shí)間上未表現(xiàn)出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異［8］。

1.2 莫維珠單抗

莫維珠單抗是帕利珠單抗的第二代人源化抗RSV 單克隆抗體，它突變了位于抗體CDR 序列可變區(qū)域的13 個(gè)特異性氨基酸殘基，從而將其親和力和中和能力分別提高了70 和100 倍［9］。為了隨機(jī)研究莫維珠單抗對(duì) RSV 陽(yáng)性兒童患者的影響，在多中心隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)中，將受試者分為3個(gè)組：莫維珠單抗30 mg·kg-1、100 mg·kg-1和安慰劑組。12個(gè)月的隨訪結(jié)果顯示，3組受試者在住院時(shí)間、疾病嚴(yán)重程度或喘息發(fā)作方面沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異［10］。

1.3 Clesrovimab (MK1654)

Clesrovimab 是一種半衰期延長(zhǎng)的RSV 中和單克隆抗體，目前處于臨床研究階段，它針對(duì)以pre-F 和post-F 形式存在的抗原部位Ⅳ。Plock等［11］通過將流行病學(xué)數(shù)據(jù)擬合到恒定基線值的高斯函數(shù)，創(chuàng)建了感染力（force of infection，F(xiàn)OI）函數(shù)來(lái)描述 RSV 暴露程度隨時(shí)間的變化情況，利用薈萃分析進(jìn)行臨床模擬試驗(yàn)，以預(yù)測(cè)溫帶和熱帶地區(qū) RSV 引起下呼吸道感染的季節(jié)性發(fā)病率（incidence rate，IR）以及Clesrovimab 劑量的有效性。臨床模擬試驗(yàn)表明，熱帶和溫帶氣候的預(yù)測(cè)結(jié)果一致，Clesrovimab 在熱帶氣候地區(qū) RSV 易感季節(jié)開始時(shí)使用，預(yù)計(jì)能在150 天內(nèi)保持預(yù)防RSV 下呼吸道感染疾病的高功效（＞75%）。

1.4 尼塞韋單抗

尼塞韋單抗是一種高效的人中和 IgG1К單克隆抗體，能與pro-F 形式的抗原表位 ? 中的高度保守表位結(jié)合。由于IgG 重鏈（YTE 技術(shù)）FC區(qū)域中的3個(gè)氨基酸被取代，改善了其抗降解性能，從而延長(zhǎng)了抗體在血清中的半衰期（平均半衰期為85～117天）［12］。尼塞韋單抗的推薦劑量為：體重＜5 kg的嬰兒，50 mg肌內(nèi)注射；體重≥5 kg的嬰兒，100 mg肌內(nèi)注射，并且應(yīng)在RSV易染季節(jié)開始之前給藥，對(duì)于在RSV 感染季節(jié)出生的嬰兒，應(yīng)在出生時(shí)給藥。在一項(xiàng)針對(duì)32～35 周健康早產(chǎn)兒的 1b/2a 期劑量范圍（10、25和50 mg 尼塞韋單抗或安慰劑）研究中，90%注射過尼塞韋單抗的嬰兒血清 RSV 中和抗體水平比對(duì)照組增加了4 倍［13］。有試驗(yàn)還顯示抗體的半衰期可以持續(xù)保護(hù)5個(gè)月［14］，并且與安慰劑（生理鹽水）對(duì)照組相比，尼塞韋單抗顯著降低了RSV 感染的就診率和住院率，分別降低了70.1%和78.4%［15］。獲批的尼塞韋單抗Beyfortus可廣泛應(yīng)用于嬰兒人群，包括足月或早產(chǎn)的健康嬰兒，或健康狀況特殊的嬰兒。

1.5 免疫球蛋白（RSV-IVIG）

免疫球蛋白是針對(duì)急性RSV 感染的治療藥物，在動(dòng)物模型中靜脈注射多克隆免疫球蛋白對(duì)RSV 具有很強(qiáng)的中和作用。RSV 在肺部的復(fù)制減少，從而降低了病毒載量并降低了隨后發(fā)生呼吸道疾病的風(fēng)險(xiǎn)［16］。一項(xiàng)雙盲隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)評(píng)估了RSV-IGIV 在治療“高風(fēng)險(xiǎn)”人群RSV 感染中的作用，試驗(yàn)包括107 名2 歲以下的早產(chǎn)兒、先天性心臟病或慢性肺病兒童，積極治療組的患者給予1 500 mg·kg-1的RSV-IVIG，對(duì)照組為安慰劑，兩組的住院時(shí)間或疾病嚴(yán)重程度均無(wú)差異［17］。2019 年，Sanders 等［18］的評(píng)價(jià)研究納入了7 項(xiàng)試驗(yàn)，涉及486例RSV 細(xì)支氣管炎嬰兒，但結(jié)論是沒有足夠的證據(jù)表明免疫球蛋白療效與安慰劑之間存在差異。2003 年，當(dāng)出現(xiàn)其他的替代品時(shí)，RSV-IGIV則不再用于RSV感染的治療［19］。

1.6 利巴韋林

利巴韋林是一種嘌呤核苷酸類似物，對(duì)多種DNA 和RNA 病毒感染有效。已有研究認(rèn)為當(dāng)利巴韋林進(jìn)入被病毒感染的細(xì)胞后能夠迅速磷酸化，通過多種途徑發(fā)揮作用，例如干擾病毒的三磷酸鳥苷合成、抑制病毒mRNA合成、抑制病毒依賴的RNA的RNA聚合酶。利巴韋林有霧化劑、口服劑和靜脈注射3種劑型。有研究表明，其對(duì)動(dòng)物有致畸作用，兔子和大鼠的致畸劑量為1 mg·kg-1，無(wú)致畸作用的安全劑量為 0.3 mg·kg-1，調(diào)整后成人安全劑量相當(dāng)于0.05 mg·kg-1［20］。盡管在利巴韋林暴露的衛(wèi)生保健工作者后代中未觀察到致畸作用，但霧化引起的利巴韋林暴露仍然是一個(gè)值得關(guān)注的問題［21］。

有研究探討了肺移植受者感染RSV 后口服利巴韋林的效果，52 名肺移植受者利巴韋林靜脈注射劑量為33 mg·kg-1（分3 劑），另外21 名患者接受口服利巴韋林（20 mg·kg-1，分兩次服用）持續(xù) 6～31 天，中位持續(xù)時(shí)間為 11 天。結(jié)果提示利巴韋林用于治療肺移植后的RSV 感染，口服可能是靜脈注射的有效替代［22］。此外，薈萃分析和系統(tǒng)評(píng)價(jià)顯示，接受利巴韋林治療的血液病患者的死亡率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著降低［23］?？诜晚f林具有良好的病毒清除率，與霧化形式相比，口服利巴韋林是一種安全、簡(jiǎn)單且成本較低的替代方式。

然而，由于利巴韋林潛在的不良反應(yīng)，目前不推薦用于兒童。鑒于其在嚴(yán)重免疫功能低下患者中療效良好，利巴韋林在這些人群中的臨床應(yīng)用值得推薦。此外，其他抗病毒藥物正在進(jìn)行隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，例如 RV521［24］和AK0529（ziresovir）［25］，這兩種藥物作用機(jī)制主要是抑制RSV 和宿主細(xì)胞的融合或病毒的復(fù)制。

2 非特異性抗呼吸道合胞病毒治療

RSV 感染后在呼吸道內(nèi)壁（從鼻咽到遠(yuǎn)端肺泡）的黏膜中復(fù)制，在兒童中，特別是嬰兒和學(xué)齡前兒童，病毒對(duì)下呼吸道的影響更為突出，這是由于成人呼吸細(xì)支氣管的平均直徑約為 250 μm，而4 個(gè)月嬰兒的平均直徑僅為120 μm［26］，使得嬰兒的細(xì)支氣管管腔在病毒感染期間更容易被堵塞。肺部的這些物理特性與正在發(fā)育的免疫系統(tǒng)，使嬰兒更容易發(fā)生臨床癥狀的細(xì)支氣管炎。對(duì)抗RSV 感染的非特異性療法中最常用的是粘液溶解劑［27］、支氣管擴(kuò)張劑［28］和抗炎劑［29］等，這些藥物能夠逆轉(zhuǎn)氣道阻塞，緩解RSV 感染后的癥狀。

2.1 白三烯受體拮抗劑

白三烯能觸發(fā)RSV 引起的支氣管高反應(yīng)和黏液分泌過多，并且白三烯可通過與支氣管平滑肌的相互作用誘導(dǎo)支氣管收縮［30］。在1 項(xiàng)納入了5項(xiàng)隨機(jī)試驗(yàn)的評(píng)價(jià)研究中，對(duì)年齡＜24 個(gè)月因細(xì)支氣管炎住院的患者（共1 296名嬰兒），檢測(cè)了白三烯受體拮抗劑相關(guān)數(shù)據(jù)，無(wú)法得出使用白三烯受體拮抗劑能使住院時(shí)間縮短或減輕臨床嚴(yán)重程度的結(jié)論［31］。因此，在進(jìn)一步試驗(yàn)之前，不提倡使用白三烯受體拮抗劑治療RSV 感染。

2.2 人重組核酸酶

RSV 細(xì)支氣管炎的粘液中含有大量細(xì)胞外DNA，這是白細(xì)胞招募和降解后形成的［32］。由于人類重組核酸酶（hrDNase）不僅能夠切割細(xì)胞外DNA，而且能明顯降低粘液粘度，因此hrDNase 被用于治療細(xì)支氣管炎。有研究和病例報(bào)告顯示，患有嚴(yán)重疾病的嬰兒因細(xì)支氣管炎而導(dǎo)致的肺不張使用hrDNase 后有所改善［33］。但是，最大的隨機(jī)、雙盲、對(duì)照試驗(yàn)涉及225 名患有細(xì)支氣管炎的住院嬰兒，未能證明hrDNase 治療后住院時(shí)間或補(bǔ)充氧氣時(shí)間有任何統(tǒng)計(jì)學(xué)差異［34］。2012 年，Annabelle 等［35］發(fā)現(xiàn)給予rhDNase 并沒有減少患有RSV細(xì)支氣管炎的氧氣依賴嬰兒的住院時(shí)間或補(bǔ)充氧氣的持續(xù)時(shí)間。但是，在常規(guī)治療方案失敗時(shí)，可以考慮將霧化hrDNase 用于與細(xì)支氣管炎相關(guān)的嚴(yán)重不溶性肺不張癥。

2.3 支氣管擴(kuò)張劑

對(duì)患有細(xì)支氣管炎的嬰兒進(jìn)行聽診時(shí)，可能會(huì)聽到喘息聲，并且伴有特征性的呼氣期延長(zhǎng)的濕啰音。沙丁胺醇是一種β-2 腎上腺素能激動(dòng)劑，可松弛氣道平滑肌并緩解阻塞。早期的綜合分析表明，在某些輕度或中度RSV 病例中，使用這些藥物短期內(nèi)癥狀有所改善［36］。但2014年Gadomski 等［28］薈萃分析了30 項(xiàng)研究，包括1 992 例毛細(xì)支氣管炎嬰兒，結(jié)果顯示使用支氣管擴(kuò)張劑和安慰劑在血氧飽和度、入院率或住院時(shí)間方面無(wú)顯著差異。此外，β-2 腎上腺素能激動(dòng)劑有一定的不良反應(yīng)，包括引起心動(dòng)過速、血氧飽和度下降、震顫和電解質(zhì)異常等。因此，不推薦將支氣管擴(kuò)張劑作為毛細(xì)支氣管炎的常規(guī)治療選擇，不建議常規(guī)使用支氣管擴(kuò)張劑作為細(xì)支氣管炎的治療選擇，但可以嘗試評(píng)估以喘息為主的嬰兒的反應(yīng)用于評(píng)估響應(yīng)的功能。盡管缺乏這方面的數(shù)據(jù)，但RSV 感染的表現(xiàn)和癥狀的異質(zhì)性已得到廣泛認(rèn)可，并且根據(jù)臨床表型對(duì)某些患者亞組選擇使用支氣管擴(kuò)張劑可能是未來(lái)有針對(duì)性的隨機(jī)臨床試驗(yàn)的起點(diǎn)［37］。

2.4 N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）

NAC 既可以切割粘蛋白二硫鍵，又具有額外的抗氧化作用，所以可用于毛細(xì)支氣管炎的治療［38］。在RSV感染的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的體外感染模型中，NAC 可抑制粘蛋白合成并減少促炎原基質(zhì)介質(zhì)的產(chǎn)生［39］。文獻(xiàn)檢索顯示，僅有1項(xiàng)納入100例嬰兒的隨機(jī)對(duì)照研究，比較了霧化吸入NAC與霧化吸入沙丁胺醇的效果，結(jié)果顯示癥狀評(píng)分或入院時(shí)間沒有改善［40］。因此，在考慮將NAC 作為RSV感染的治療方法之前，仍需要進(jìn)一步研究。

2.5 糖皮質(zhì)激素

有研究表明，糖皮質(zhì)激素在RSV 感染中具有有限的抗炎特性［41］。2013年，F(xiàn)ernandes 等［42］評(píng)價(jià)了17 項(xiàng)對(duì)照研究，納入了2 596 例毛細(xì)支氣管炎嬰兒，結(jié)果顯示類固醇治療不會(huì)影響毛細(xì)支氣管炎入院嬰兒和兒童的臨床病程，不推薦將其用于治療其他方面健康、不通氣患者的毛細(xì)支氣管炎。然而，在某些情況下，RSV感染的嬰兒可能受益于類固醇，例如患有潛在支氣管肺發(fā)育不良和哮喘的嬰兒。一項(xiàng)納入200 例毛細(xì)支氣管炎入院嬰兒的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，地塞米松可縮短具有一級(jí)親屬濕疹或哮喘家族史患者的住院時(shí)間［43］。以上研究表明，糖皮質(zhì)激素在成為標(biāo)準(zhǔn)化方法之前，還需要進(jìn)一步的試驗(yàn)驗(yàn)證。

2.6 霧化吸入高滲鹽水

霧化吸入高滲鹽水可增加健康受試者、哮喘患者［44］、支氣管擴(kuò)張患者［45］和囊性纖維化患者［46］的粘液纖毛清除率。高滲鹽水通過產(chǎn)生滲透梯度，將水從黏膜和黏膜下層吸入黏膜層，從而有可能減少氣道水腫［47-48］。黏液層的水合作用有助于調(diào)動(dòng)分泌物，當(dāng)與有效咳嗽的刺激相結(jié)合時(shí)，可緩解氣道阻塞［49］。盡管存在這些機(jī)制聯(lián)系，但臨床評(píng)估和計(jì)算機(jī)化聲學(xué)氣流技術(shù)均未顯示給予3%高滲鹽水可改善喘息或氣流［50］。高滲鹽水治療病毒性細(xì)支氣管炎的臨床試驗(yàn)效果也不理想，大多數(shù)臨床試驗(yàn)顯示，當(dāng)檢查住院時(shí)間和癥狀評(píng)分時(shí)，3%高滲鹽水能夠適度緩解癥狀［51］。2017 年，Zhang 等［52］薈萃分析納入了28 項(xiàng)試驗(yàn)，共納入4 195 例急性細(xì)支氣管炎嬰兒，結(jié)果似乎有利于3%高滲鹽水可以適度縮短住院時(shí)間。然而，隨后的隨機(jī)臨床試驗(yàn)也未能證明3%高滲鹽水與標(biāo)準(zhǔn)支持治療相比有任何益處［53-54］。因此，霧化吸入高滲鹽水仍然不是RSV 細(xì)支氣管炎的標(biāo)準(zhǔn)治療方法。

2.7 其他療法

針對(duì)急性RSV 感染還有許多其他非特異性療法，包括腎上腺素［55］和抗生素，例如阿奇霉素［56］以及上述藥物的各種組合［57］。例如，霧化吸入腎上腺素與3%高滲鹽水的聯(lián)合使用在改善臨床嚴(yán)重程度評(píng)分方面能夠取得較好的結(jié)果［58］。然而，在推薦將其作為治療藥物之前，必須進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)來(lái)重現(xiàn)這些結(jié)果。

一氧化氮（iNO）具有抗菌、抗病毒和抗炎特性，以及支氣管擴(kuò)張作用，高劑量吸入一氧化氮（iNO）也被推薦作為針對(duì)細(xì)支氣管炎的非特異性療法。一項(xiàng)小型試驗(yàn)納入了89 例毛細(xì)支氣管炎的住院嬰兒，每日檢查4 次，以150 μg·L-1的比例給予iNO 治療，持續(xù)5 d，結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比毛細(xì)支氣管炎住院嬰兒耐受性好，臨床改善時(shí)間縮短［59］。盡管如此，目前尚無(wú)推薦iNO 作為急性RSV感染的非特異性療法。

3 呼吸道合胞病毒疫苗研究進(jìn)展

保護(hù)高危人群免受嚴(yán)重RSV 感染的有效疫苗是必不可少的。在19世紀(jì)60年代，福爾馬林滅活RSV 疫苗用于嬰兒的臨床試驗(yàn)加重了RSV 疾病，并最終導(dǎo)致兩名嬰兒死亡［60］。這種情況的發(fā)生可能與疫苗誘導(dǎo)的細(xì)支氣管中免疫復(fù)合物的積累有關(guān)，疫苗誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體中和活性較弱，導(dǎo)致細(xì)胞免疫應(yīng)答中Th2CD4+T 細(xì)胞受損［61-62］。目前，已有兩種疫苗用于60 歲及以上人群預(yù)防RSV 引起的下呼吸道疾病，全球正在研發(fā)幾十種疫苗來(lái)預(yù)防RSV 感染，它們主要包括減毒活疫苗（live attenuated vaccine，LAV）、亞單位疫苗和基于載體的疫苗。無(wú)論何種類型，RSV 疫苗設(shè)計(jì)的最基本原則始終遵循RSV 中和抗體需要以最合理的方式引入氣道黏膜［63］。表1 列出了一些處于臨床階段的疫苗和相關(guān)信息。

表1 處于臨床試驗(yàn)階段hRSV疫苗Table 1 The hRSV vaccines in clinical development

3.1 減毒活疫苗

減毒活疫苗的基本目標(biāo)之一是通過傳統(tǒng)方法（如加熱或化學(xué)處理）或反向遺傳技術(shù)限制RSV在受種者體內(nèi)的復(fù)制，這類疫苗的主要挑戰(zhàn)是在安全性（減毒）和產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)之間取得有利的平衡［64］。目前，美國(guó)臨床試驗(yàn)注冊(cè)庫(kù)顯示大約有15項(xiàng)正在進(jìn)行的RSV 減毒活疫苗臨床試驗(yàn)，這些疫苗中大多數(shù)通過M2、NS2/NS1 和L 基因的突變或剔除產(chǎn)生的基因來(lái)減毒。在L 基因上攜帶兩個(gè)位點(diǎn)突變，例如LIDΔM2-2/1030s，其比母體疫苗具有更好的減毒效果和更高的RSV 中和抗體滴度［65］。基于NS2/NS1 缺失的疫苗，如RSV ΔNS2 Δ1313 I1314L、RSV 6120/Δ NS2/1030s 和RSV 6120/ΔNS1，正在接受臨床評(píng)估。Meissa Vaccines通過優(yōu)化NS2、NS1和G基因的密碼子以及剔除SH基因來(lái)生產(chǎn)MV-012-968，SH基因已被證實(shí)在棉鼠模型中具有很強(qiáng)的保護(hù)作用［66］。最近，Jenkins等［67］通過引入兩種修飾來(lái)設(shè)計(jì)并生產(chǎn)減毒活RSV候選疫苗rgRSV-L（G1857A-G（L208A），一種是L蛋白的衰減突變，另一種是G糖蛋白的突變。前一種突變?cè)赩ero細(xì)胞培養(yǎng)中沒有抑制病毒的產(chǎn)生，但大大減少了病毒在人支氣管上皮中的傳播，后一種突變減少了疫苗病毒在Vero 細(xì)胞中的裂解，從而提高了產(chǎn)量，降低了生產(chǎn)成本。在接受該候選疫苗接種的棉鼠中，即使在105個(gè)PFU劑量下也檢測(cè)不到RSV 復(fù)制，并且在接種500 PFU 疫苗病毒后足以完全預(yù)防RSV A2 感染，提示rgRSV-L 是RSV減毒活疫苗的潛在候選者。

3.2 亞單位/蛋白疫苗

亞單位/蛋白疫苗一般由純化的病毒蛋白和佐劑蛋白組成，在RSVpre-F 的結(jié)構(gòu)被解析清楚以前，大多以post-F 為基礎(chǔ)制備疫苗，但并未獲得成功。葛蘭素史克已獲批的3844766A疫苗由pref-F糖蛋白（RSVPreF3）與GSK 專有的佐劑AS01 組合而成［68］。輝瑞獲批的二價(jià)呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗ABRYSVO（RSVpreF，PF-06928316），是由等量的來(lái)自A 病毒株和B 病毒株的RSV pro-F 蛋白組成［69］。諾華RSV F蛋白納米顆粒主要基于融合后的F構(gòu)象，可以和抗原性位點(diǎn)Ⅱ結(jié)合，但在其Ⅲ期臨床試驗(yàn)中，它未能保護(hù)接種疫苗的新生兒［70］。促成這一臨床結(jié)果的原因之一可能是融合后構(gòu)象不能像融合前構(gòu)象那樣引發(fā)產(chǎn)生更廣泛的中和抗體［71］。BARS13 基于G 蛋白開發(fā)的蛋白質(zhì)疫苗，目前正在對(duì)其在老年人中的安全性和有效性進(jìn)行Ⅰ期臨床評(píng)估（NCT04681833）。最近，Swanson 等［72］將RSV pre-F 蛋白融合成自組裝的鐵蛋白納米顆粒，用聚糖修飾以覆蓋非中和或中和性差的表位，每個(gè)優(yōu)化的pre-F-NP 都含有8 個(gè)pre-F 蛋白。Pre-F-NP 誘導(dǎo)了持續(xù)的Pre-F 特異性抗體，并在小鼠和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型中產(chǎn)生了有效的中和抗體反應(yīng)。與前F 三聚體DS-Cav1 相比，前F-NP刺激了更強(qiáng)的抗體反應(yīng)。這些結(jié)果激勵(lì)了納米R(shí)SV疫苗的持續(xù)開發(fā)。

3.3 mRNA疫苗

mRNA 疫苗不僅可以免除發(fā)酵、純化疫苗蛋白質(zhì)/亞單位等步驟，而且還可能防止載體疫苗引發(fā)的抗載體免疫反應(yīng)。mRNA 疫苗也可以同時(shí)誘導(dǎo)強(qiáng)烈的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)。數(shù)據(jù)表明，包封在脂質(zhì)納米顆粒（mRNA/LNP）中的mRNA 在體外預(yù)防RSV 疾病可能安全有效［73］。mRNA-1345 由Moderna 開發(fā)，編碼一種預(yù)融合F 糖蛋白，該公司正在進(jìn)行一項(xiàng)Ⅰ期臨床研究，以評(píng)估年輕人、育齡婦女、老年人和血清陽(yáng)性兒童的耐受性和反應(yīng)性。臨床Ⅰ期中期結(jié)果顯示，100 μg 劑量下無(wú)不良事件，該疫苗第1 個(gè)月產(chǎn)生的RSV 中和抗體是對(duì)照組的21倍以上［74］。

4 展望

在過去的十年中，人們對(duì)RSV 分子和結(jié)構(gòu)生物學(xué)的認(rèn)識(shí)以及人類對(duì)RSV 的免疫反應(yīng)的研究取得了重大進(jìn)展。一般來(lái)說，針對(duì)任何呼吸道病毒的具體療法都很有限，因此預(yù)防是主要手段，未來(lái)的疫苗、長(zhǎng)效單克隆抗體是RSV 感染預(yù)防治療的熱點(diǎn)。

疫苗是降低與呼吸道合胞病毒相關(guān)疾病的發(fā)病率和死亡率的最佳選擇。目前，已有兩種RSV疫苗獲批，但都是用于老年人，用于孕婦和嬰幼兒的疫苗尚處于臨床研究階段。國(guó)內(nèi)RSV疫苗的開發(fā)也取得了一些進(jìn)展，其中，艾棣維欣的ADV110 已進(jìn)行至Ⅱ期臨床試驗(yàn)，優(yōu)銳醫(yī)藥從Bavarian Nordic 引進(jìn)的MVA-BN RSV 疫苗（病毒載體疫苗）已在國(guó)內(nèi)獲批臨床試驗(yàn)，相信在不遠(yuǎn)的未來(lái)，隨著這些疫苗的獲批和使用，RSV 病毒在全球內(nèi)的感染及危害會(huì)逐漸降低。