付 茂 ,杜彩霞 ,陳俊磊 ,倪 銘 ,李歡陽 ,苑春茂 ,楊 玨 ,黃烈軍 ,顧 瑋 *
1. 貴州醫(yī)科大學(xué) 省部共建藥用植物功效與利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州 貴陽 550014
2. 貴州省天然產(chǎn)物研究中心,貴州 貴陽 550014
3. 貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,貴州 貴陽 550025
黑色素是動(dòng)植物中均含有的一種生物色素,由黑色素細(xì)胞生成并儲(chǔ)存,黑色素的含量及分布影響了皮膚顏色,當(dāng)皮膚受到紫外線強(qiáng)烈照射時(shí),紫外線誘導(dǎo)可產(chǎn)生氧自由基,促進(jìn)酪氨酸酶表達(dá),刺激局部皮膚生成黑色素,從而導(dǎo)致皮膚色素沉著。酪氨酸酶是一種含銅的氧化還原酶,酪氨酸經(jīng)其催化形成多巴醌,經(jīng)DHI 氧化酶和DHICA 氧化酶的作用形成黑色素,是黑色素合成過程的主要限速酶[1-2]。研究表明[3],抑制酪氨酸酶活性可以減少皮膚黑色素的生成,具有良好的美白功效。
薔薇屬植物在貴州分布廣泛,目前中國(guó)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并記錄的薔薇屬植物有96 種,其中貴州省內(nèi)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并記錄的薔薇屬植物資源有42 種,占中國(guó)薔薇植物資源的43.8%[4]。薔薇屬植物作為貴州的優(yōu)勢(shì)資源,除了在藥用、食品工藝、城市景觀等方面發(fā)揮著重要作用,以期發(fā)現(xiàn)其更多的利用價(jià)值。已有研究表明[5],薔薇屬植物中含有大量酚酸類、黃酮類、三萜類等化合物,其中,有研究發(fā)現(xiàn)刺梨多糖、刺梨黃酮和刺梨多酚三種提取物均有顯著的抑制酪氨酸酶活性[6]?;谒N薇屬很多植物同時(shí)具有藥食兩用的價(jià)值,安全性較高,因此,推測(cè)薔薇屬植物在作為美白化妝品原料方面具有較高的開發(fā)潛力。
扁刺峨眉薔薇Rosaomeiensisf.pteracanthaRehd. et Wils.是薔薇科(Rosaceae)薔薇屬RosaL.直立灌木,別名扁刺、翅刺峨眉薔薇、紅果螳螂果,是峨眉薔薇R.omeiensisRolfe 的變型,區(qū)別是其新枝直立細(xì)弱,密被針刺及寬扁大形皮刺,常近于相連而呈翅狀,幼時(shí)深紅,半透明[7]。據(jù)本課題組前期實(shí)地調(diào)研得知,該植物果實(shí)可以食用,在當(dāng)?shù)厮追Q“沙糖果”,且根莖葉和果實(shí)均可入藥,在貴州民間主要用于治療腸胃炎、痢疾、支氣管炎等。其果實(shí)味甜可以食用,曬干磨粉摻入面粉可作食品,又可入藥,有止血、止痢、澀精之效,和《高黎貢山藥用植物名錄》中所記載的刺石榴果(峨眉薔薇果實(shí))藥用功效一致[8]。目前尚未有其化學(xué)成分及藥理活性的相關(guān)報(bào)道。本研究為首次研究扁刺峨眉薔薇的化學(xué)成分,并期望通過B16F10 細(xì)胞模型,評(píng)價(jià)扁刺峨眉薔薇中化學(xué)成分對(duì)酪氨酸酶活性的影響,以闡明扁刺峨眉薔薇在美白功效方面的利用價(jià)值。
本實(shí)驗(yàn)從扁刺峨眉薔薇75%甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中共分離得到21 個(gè)化合物,分別鑒定為野鴉椿酸(euscaphic,1)、negundonorin A(2)、覆盆子酸(raspberry acid,3)、刺梨苷(kajiichigoside F1,4)、野薔薇苷(rosamultin,5)、2α,3α-dihydroxy-19-oxo-18,19-seco-urs-11,13(18)-dien-28-oic acid(6)、胡蘿卜苷(β-sitosterol-β-D-glucopyranoside,7)、小麥黃素(tricin,8)、8-甲氧羰基兒茶素(8-methoxycarbonylcatechin,9)、柚皮素(naringenin,10)、槲皮素(quercetin,11)、3,3′-O-二甲基鞣花酸(3,3′-di-O-methylellagic acid,12)、1-hydroxy-2,6-bis-epipinoresinol(13)、東莨菪素(scopoletin,14)、3-吲哚甲醛(indole-3-carboxaldehyde,15)、短葉蘇木酚酸甲酯(methyl brevifolin-carboxylate,16)、3,4,5-trimethoxyphenyl-(6′-O-galloyl)-O-β-D-glucopyranoside(17)、沒食子酸甲酯(methyl gallate,18)、原兒茶酸(protocatechuic acid,19)、β-羥基-3-甲氧基-4-羥基苯乙酮(β-hydroxypropiovanillone,20)、異香草酸(isovanillic acid,21)。21 個(gè)化合物均為首次從扁刺峨眉薔薇中分離得到。對(duì)部分化合物進(jìn)行酪氨酸酶活性評(píng)價(jià),結(jié)果表明,在B16F10 細(xì)胞模型中,多數(shù)化合物表現(xiàn)出顯著的酪氨酸酶抑制活性(P<0.05),且活性高于陽性藥曲酸。
柱色譜硅膠(40~80、200~300、300~400 目)和薄層柱色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠);Sephadex LH-20 凝膠(Pharmacia 公司,美國(guó));HITACHI 高效液相色譜儀(Primaide,日立高新技術(shù)集團(tuán),日本);反相填充材料RP-18(Merck 公司,德國(guó));HPLC 色譜柱為Zorbax SB-C18(半制備柱,250 mm×9.4 mm,5 μm,安捷倫公司,美國(guó));INOVA-600 MHz 核磁共振波譜儀(Bruker 公司,德國(guó));HP 1100 型液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(惠普公司,美國(guó));API Qstar Pulsar 質(zhì)譜儀;BioTek Epoch 全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(BioTek 公司,美國(guó))。本實(shí)驗(yàn)所用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯、丙酮、甲醇等有機(jī)溶劑均為工業(yè)級(jí),重蒸后使用;色譜級(jí)的甲醇(云南新藍(lán)景化學(xué)工業(yè)有限公司)。小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10 來源于ATCC;DMEM 培養(yǎng)基(Solarbio 公司,中國(guó));胎牛血清(Gemini 公司,美國(guó));胰酶(Solarbio 公司,中國(guó));四甲基偶氮噻唑藍(lán)(麥克林生化科技,中國(guó));曲酸(麥克林生化科技,批號(hào)C12718847)。
扁刺峨眉薔薇全株于2021 年7 月采自貴州省畢節(jié)市大方縣,經(jīng)貴州省天然產(chǎn)物研究中心顧瑋副研究員鑒定為扁刺峨眉薔薇R.omeiensisf.pteracanthaRehd. et Wils,憑證標(biāo)本(GZCNG-2021-0235)保存于貴州省天然產(chǎn)物研究中心。
取扁刺峨眉薔薇干燥植株54.0 kg 進(jìn)行粉碎,用75%甲醇-水溶液75 ℃提取5 次(每次4 h),濾過,合并提取液,減壓濃縮得到提取物浸膏,共6.0 kg,加水將其溶解成混懸液,將醇提取物依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取溶液至無色,減壓濃縮各部分萃取液得到石油醚部分、醋酸乙酯部分和正丁醇部分。將醋酸乙酯部位(1.2 kg)用硅膠柱色譜(40~80 目)進(jìn)行分離,洗脫溶劑為三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(30∶1、20∶1、15∶1、10∶1、5∶1、2∶1、1∶1)、甲醇,結(jié)合TLC 檢測(cè),將醋酸乙酯部分分為6 個(gè)組分(Fr. A~F)。
Fr. B(96.0 g)通過RP-18 柱色譜,用甲醇-水(10∶90~100∶0)洗脫得到9 個(gè)組分。Fr. B.1(8.8 g)用硅膠柱色譜(100~200 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到Fr. B 1.1~B 1.9,F(xiàn)r. B 1.3(151.0 mg)用硅膠柱色譜(300~400目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(80∶1~1∶1)梯度洗脫得到得到化合物、15(2.5 mg)、14(4 mg),F(xiàn)r.B 1.6(2.34 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到Fr. B 1.6.1~B 1.6.8,F(xiàn)r. B 1.6.2(253 mg)經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜得到化合物21(30 mg)。Fr. B 1.6.7(253 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到化合物9(5 mg)。Fr. B 1.6.4(1.06 g)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到Fr. B 1.6.4.1~B 1.6.4.10,F(xiàn)r. B 1.6.4.10(153 mg)用硅膠柱色譜(300~400 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-丙酮(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到化合物20(35 mg)。Fr. B 1.6.4.8(200 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到4 個(gè)組分,F(xiàn)r. B 1.6.4.8.4(90 mg)用硅膠柱色譜(300~400 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(100∶1~1∶1)梯度洗脫得到得到化合物3(15 mg)、2(13 mg)。Fr. B.3 中析出白色粉末,濾出得到化合物12(9.3 mg),F(xiàn)r. B.3(14 g)用硅膠柱色譜(100~200 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-丙酮(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到Fr. B3.1~B3.11,F(xiàn)r. B3.1.7 中重結(jié)晶得到化合物8(11.2 mg),F(xiàn)r. B 3.4(3.36 g)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到8 個(gè)組分,F(xiàn)r. B 3.4.4(1.78 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-丙酮(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到化合物1(300 mg),F(xiàn)r. B.4 中析出無色結(jié)晶,得到化合物6(28.2 mg),F(xiàn)r. B 1.7(4.5 g)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到化合物11(8 mg),F(xiàn)r. B 1.7.9(1.34 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,石油醚-醋酸乙酯(30∶1~1∶1)梯度洗脫得到Fr. B 1.7.9.1~B 1.7.9.8,F(xiàn)r. B 1.7.9.6(1.1 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,石油醚-醋酸乙酯(20∶1~1∶1)梯度洗脫得到化合物13(200 mg),F(xiàn)r. B. 2(1.03 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-丙酮(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到Fr. B 2.1~B 2.8,F(xiàn)r. B 2.6(207 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到化合物10(43 mg),F(xiàn)r. B 2.4(300 mg)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到5 個(gè)組分,F(xiàn)r. B 2.4.3(150 mg)經(jīng)半制備RP-HPLC(甲醇-水54∶46,2.0 mL/min)得到化合物18(tR=32.1 min)、19(tR=41.0 min)。
Fr. D(335 g)用RP-18 柱色譜,甲醇-水(10∶90~100∶0)洗脫得到26 個(gè)組分。Fr. D.4(20 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(50∶1~1∶1)梯度洗脫得到得到化合物16(110 mg)。Fr. D 4.4(3.3 g)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到7 個(gè)組分,F(xiàn)r. D 4.4.3(832 mg)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(80∶1~1∶1)梯度洗脫得到得到Fr. D 4.4.3.1~D 4.4.3.9,F(xiàn)r. D 4.4.3.6 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到化合物17(30 mg)。Fr. D.12(2 g)經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜得到3 個(gè)組分,F(xiàn)r. D 12.3(500 mg)經(jīng)半制備RP-HPLC(甲醇-水63∶37,2.0 mL/min)得到化合物5(100 mg,tR=15.1 min)、4(9 mg,tR=12.0 min)。Fr. D.25(1.1 g)用硅膠柱色譜(200~300 目)進(jìn)行分離,三氯甲烷-甲醇(20∶1~1∶1)梯度洗脫得到化合物7(200 mg)。
2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組 將B16F10 細(xì)胞接種于含10%胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)基中,37 ℃、5% CO2飽和濕度環(huán)境下培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)至融合狀態(tài),以胰酶消化傳代,每2 天傳代1 次。收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至5×104個(gè)/mL,接種于96 孔板中,每孔100 μL,細(xì)胞濃度為5×103個(gè)/孔,37 ℃、5%CO2飽和濕度環(huán)境下培養(yǎng)24 h 后,將細(xì)胞分為空白組、正常組、實(shí)驗(yàn)組、陽性對(duì)照組(曲酸),實(shí)驗(yàn)組加入含有不同濃度化合物的培養(yǎng)基100 μL,正常組細(xì)胞中加入100 μL 不含藥物的培養(yǎng)基,空白組不接種細(xì)胞,代之等量培養(yǎng)基,其余各組分別加入100 μL 含有相應(yīng)劑量藥物培養(yǎng)基。每組設(shè)置3 個(gè)重復(fù),于37 ℃、5% CO2孵育48 h。
2.2.2 MTT 比色法測(cè)定化合物對(duì)B16F10 細(xì)胞的毒性 參考已報(bào)道實(shí)驗(yàn)方法[9]并稍作修改,按“2.2.1”項(xiàng)下方法處理細(xì)胞48 h 后,每孔加入10 μL 的MTT溶液,放培養(yǎng)箱4 h 后,棄去上清液,每孔加入100 μL DMSO,震蕩10 min,待結(jié)晶充分溶解后,酶標(biāo)儀測(cè)定570 nm 下吸光度值(A570),實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。計(jì)算細(xì)胞存活率。
細(xì)胞存活率=(實(shí)驗(yàn)組A570-空白組A570)/(正常組A570-空白組A570)
2.2.3 多巴氧化法測(cè)定化合物對(duì)B16F10 細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性的影響 參考已報(bào)道實(shí)驗(yàn)方法[10-11]并稍作修改,按“2.2.1”項(xiàng)下方法處理細(xì)胞48 h 后,棄去上清液,用PBS 洗滌2 次,每孔加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的Triton X-100 溶液100 μL,迅速放入-80 ℃冰箱凍存1 h,隨后移至室溫下裂解細(xì)胞,37 ℃預(yù)溫后每孔加入濃度為10 mmol/LL-DOPA 100 μL,37 ℃培養(yǎng)箱放置2 h,酶標(biāo)儀檢測(cè)475 nm 下吸光度值(A475),實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。
酪氨酸酶活性=(實(shí)驗(yàn)組A475-空白組A475)/(正常組A475-空白組A475)
采用SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用±s表示,多組間比較采用單因素方差分析,以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
化合物1:白色粉末(三氯甲烷-甲醇),分子式C30H48O5,ESI-MSm/z: 487 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 0.77 (3H, s, H-23), 0.85 (3H, s, H-24), 0.91 (3H, d,J= 6.7 Hz, H-30), 0.97 (6H, s, H-25,26), 1.17 (3H, s, H-29), 1.33 (3H, s, H-27), 2.48 (3H, s,H-18), 3.30 (1H, d,J= 2.3 Hz, H-3), 3.91 (1H, dt,J=11.2, 3.2 Hz, H-2), 5.27 (1H, t,J= 3.2 Hz, H-12);13CNMR (150 MHz, CD3OD)δ: 41.1 (C-1), 65.8 (C-2),78.7 (C-3), 38.0 (C-4), 47.9 (C-5, 17), 17.9 (C-6), 32.7(C-7), 39.7 (C-8), 46.8 (C-9), 38.1 (C-10), 23.3 (C-11),128.0 (C-12), 138.7 (C-13), 41.3 (C-14), 27.9 (C-15),25.7 (C-16), 47.6 (C-17), 53.7 (C-18), 72.2 (C-19), 41.7(C-20), 25.2 (C-21), 37.6 (C-22), 28.2 (C-23), 21.6 (C-24), 15.2 (C-25), 16.1 (C-26), 23.5 (C-27), 180.9 (C-28), 25.9 (C-29), 15.5 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[12],故鑒定化合物1 為野鴉椿酸。
化合物 2:無色油狀物(甲醇),分子式C29H40O5,ESI-MSm/z: 467 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 0.94 (3H, d,J= 6.7 Hz, H-29), 1.13(3H, s, H-26), 1.21 (3H, s, H-27), 1.24 (3H, s, H-30),1.32 (3H, s, H-25), 1.57, 2.45 (2H, m, H-16), 2.00 (3H,s, H-23), 2.35, 2.82 (2H, m, H-6), 2.58 (1H, s, H-18),5.40 (1H, t,J= 3.6 Hz, H-12), 6.31 (1H, s, H-1);13CNMR (150 MHz, CD3OD)δ: 126.2 (C-1), 145.0 (C-2),181.8 (C-3), 126.4 (C-4), 166.8 (C-5), 25.2 (C-6), 34.7(C-7), 40.0 (C-8), 45.0 (C-9), 43.5 (C-10), 25.8 (C-11),127.7 (C-12), 139.1 (C-13), 42.2 (C-14), 28.6 (C-15),25.4 (C-16), 47.8 (C-17), 53.9 (C-18), 72.0 (C-19), 41.7(C-20), 25.6 (C-21), 37.4 (C-22), 9.4 (C-23), 20.3 (C-25), 15.9 (C-26), 22.9 (C-27), 181.8 (C-28), 15.2 (C-29),27.2 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[13],故鑒定化合物2 為negundonorin A。
化合物3:白色粉末(甲醇),分子式C30H44O5,ESI-MSm/z: 485 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 0.91 (3H, s, H-24), 0.96 (3H, d,J= 6.7 Hz,H-30), 1.14 (3H, s, H-26), 1.21 (3H, s, H-25), 1.24 (3H,s, H-23), 1.26 (3H, s, H-29), 1.38 (3H, s, H-27), 5.38(1H, t,J= 3.5 Hz, H-12), 6.32 (1H, s, H-1);13C-NMR(150 MHz, CD3OD)δ: 129.0 (C-1), 146.0 (C-2), 202.4(C-3), 45.5 (C-4), 55.3 (C-5), 20.3 (C-6), 34.0 (C-7),39.5 (C-8), 44.1 (C-9), 43.1 (C-10), 24.7 (C-11), 130.2(C-12), 140.4 (C-13), 43.0 (C-14), 29.6 (C-15), 27.1 (C-16), 49.1 (C-17), 55.1 (C-18), 73.5 (C-19), 41.7 (C-20),26.6 (C-21), 39.0 (C-22), 28.1 (C-23), 22.3 (C-24), 20.1(C-25), 17.9 (C-26), 24.9 (C-27), 182.28 (C-28), 27.3(C-29), 16.6 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[14],故鑒定化合物3 為覆盆子酸。
化合物4:白色粉末(甲醇),分子式C36H58O10,ESI-MSm/z: 649 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 0.74 (3H, s, H-26), 0.84 (3H, s, H-19), 0.90(3H, d,J= 6.7 Hz, H-30), 0.96 (3H, s, H-25), 0.97 (3H,s, H-23), 1.18 (3H, s, H-27), 1.32 (3H, s, H-29), 2.49(1H, s, H-18), 3.66 (1H, dd,J= 12.1, 4.8 Hz, H-6a′),3.78 (1H, dd,J= 12.1, 2.3 Hz, H-6b′), 3.91 (1H, dt,J=11.0, 3.1 Hz, H-2), 5.29 (1H, t,J= 3.5 Hz, H-12), 5.30(1H, s, H-1′);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 41.6(C-1), 65.8 (C-2), 78.7 (C-3), 38.1 (C-4), 48.1 (C-5),17.9 (C-6), 32.6 (C-7), 40.0 (C-8), 46.8 (C-9), 38.0 (C-10), 23.4 (C-11), 128.2 (C-12), 138.3 (C-13), 41.2 (C-14), 28.3 (C-15), 25.7 (C-16), 48.0 (C-17), 53.6 (C-18),72.3 (C-19), 41.4 (C-20), 25.8 (C-21), 36.9 (C-22), 27.9(C-23), 21.1 (C-24), 15.6 (C-25), 16.3 (C-26), 23.4 (C-27), 177.2 (C-28), 25.1 (C-29), 15.2 (C-30), 94.4 (C-1′), 72.5 (C-2′), 77.2 (C-3′), 69.7 (C-4′), 76.9 (C-5′),61.0 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[15],故鑒定化合物4 為刺梨苷。
化合物5:白色粉末(甲醇),分子式C36H58O10,ESI-MSm/z: 651 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 0.75 (3H, s, H-26), 0.78 (3H, s, H-19), 0.83(1H, d,J= 12.1 Hz, H-5), 0.87, 1.97 (2H, m, H-1), 0.91(3H, d,J= 6.7 Hz, H-30), 0.97 (3H, s, H-23), 0.99 (3H,s, H-25), 1.18 (3H, s, H-27), 1.21, 1.27 (2H, m, H-21),1.30 (3H, s, H-29), 1.32, 1.50 (2H, m, H-15), 1.35 (1H,H-20), 1.41, 1.52 (2H, m, H-6), 1.59, 2.60 (2H, m, H-16), 1.61, 1.78 (2H, m, H-7), 1.68, 1.82 (2H, m, H-22),1.71 (1H, m, H-9), 1.92 (1H, dd,J= 12.5, 4.6 Hz, H-11a), 1.99 (1H, m, H-11b), 2.50 (1H, s, H-18), 2.89 (1H,d,J= 9.5 Hz, H-3), 3.28~3.39 (4H, m, H-5′~2′), 3.61(1H, m, H-2), 3.65 (1H, dd,J= 11.9, 4.7 Hz, H-6a′),3.78 (1H, dd,J= 12.1, 2.2 Hz, H-6b′), 5.29 (1H, d,J=5.9 Hz, H-12), 5.35 (1H, s, H-1′);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 47.2 (C-1), 68.1 (C-2), 83.1 (C-3), 39.1 (C-4), 55.3 (C-5), 18.3 (C-6), 36.9 (C-7), 41.3 (C-8), 46.8(C-9), 37.8 (C-10), 23.4 (C-11), 128.1 (C-12), 138.3 (C-13), 40.0 (C-14), 32.7 (C-15), 25.1 (C-16), 48.1 (C-17),53.5 (C-18), 72.4 (C-19), 41.5 (C-20), 25.7 (C-21), 28.2(C-22), 27.9 (C-23), 15.7 (C-24), 15.3 (C-25), 16.2 (C-26), 23.3 (C-27), 177.1 (C-28), 25.8 (C-29), 16.1 (C-30), 94.4 (C-1′), 69.7 (C-2′), 72.2 (C-3′), 76.8 (C-4′),77.2 (C-5′), 61.0 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[16],故鑒定化合物5 為野薔薇苷。
化合物6:白色粉末(甲醇),分子式C30H46O5,ESI-MSm/z: 487 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 0.76 (3H, s, H-26), 0.89 (3H, s, H-24), 0.99(3H, s, H-23), 1.00 (3H, s, H-27), 1.01 (3H, s, H-25),1.09 (3H, d,J= 7.2 Hz, H-30), 2.17 (3H, s, H-29), 2.19(1H, s, H-9), 2.56 (1H, m, H-20), 3.38 (1H, s, H-3), 4.01(1H, dt,J= 3.0, 10.8 Hz, H-2), 5.44 (1H, s, H-18), 5.71(1H, dd,J= 1.2, 10.2 Hz, H-11), 6.01 (1H, dd,J= 3.0,10.2 Hz, H-12);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 42.2(C-1), 66.9 (C-2), 80.1 (C-3), 39.6 (C-4), 49.8 (C-5),18.9 (C-6), 33.2 (C-7), 41.8 (C-8), 55.3 (C-9), 39.1 (C-10), 127.9 (C-11), 131.2 (C-12), 143.6 (C-13), 42.4 (C-14), 27.2 (C-15), 28.1 (C-16), 48.3 (C17), 129.0 (C-18),215.3 (C-19), 48.4 (C-20), 28.8 (C-21), 39.5 (C-22),29.1 (C-23), 21.9 (C-24), 20.3 (C-25), 17.1 (C-26), 19.4(C-27), 178.2 (C-28), 28.3 (C-29), 16.5 (C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[17],故鑒定化合物6 為2α,3α-dihydroxy-19-oxo-18,19-seco-urs-11,13(18)-dien-28-oic acid。
化合物7:白色粉末(三氯甲烷),分子式C35H60O6,ESI-MSm/z: 599 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz, C5D5N)δ: 0.58 (3H, s, H-18), 0.86~0.90 (9H,m, H-26, 27, 29), 0.93 (3H, s, H-19), 1.10 (3H, d,J=6.2 Hz, H-21), 2.37 (1H, m, H-4a), 2.63 (1H, d,J= 11.8 Hz, H-4b), 3.87~3.90 (2H, m, H-3, 5′), 3.95 (1H, dd,J= 8.7, 5.2 Hz, H-2′), 4.15~4.24 (2H, m, H-3′, 4′),4.32 (1H, dd,J= 10.6, 4.7 Hz, H-6a′), 4.46 (1H, d,J=11.7 Hz, H-6b′), 4.95 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-1′), 5.25(1H, s, H-5);13C-NMR (150 MHz, C5D5N)δ: 37.2 (C-1), 30.0 (C-2), 78.3 (C-3), 39.0 (C-4), 140.6 (C-5),121.6 (C-6), 31.9 (C-7), 31.8 (C-8), 50.0 (C-9), 36.6 (C-10), 21.0 (C-11), 40.0 (C-12), 42.2 (C-13), 56.5 (C-14),24.2 (C-15), 28.3 (C-16), 56.0 (C-17), 11.9 (C-18), 19.7(C-19), 36.1 (C-20), 19.1 (C-21), 33.9 (C-22), 26.1 (C-23), 45.7 (C-24), 29.2 (C-25), 18.7 (C-26), 18.9 (C-27),23.1 (C-28), 11.7 (C-29), 102.3 (C-1′), 75.0 (C-2′), 78.1(C-3′), 71.3 (C-4′), 77.9 (C-5′), 62.5 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[18],故鑒定化合物7為胡蘿卜苷。
化合物8:黃色針狀結(jié)晶(甲醇),分子式C17H14O7,ESI-MSm/z: 329 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 3.88 (6H, s, -CH3), 6.20 (1H, s, H-6), 6.56 (1H, s, H-8), 6.95 (1H, s, H-3), 7.31 (2H, s, H-6′, 2′), 13.00 (1H, s, 5-OH);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ: 164.1 (C-2), 104.0 (C-3), 182.3 (C-4),161.8 (C-5), 99.3 (C-6), 164.1 (C-7), 94.7 (C-8), 157.8(C-9), 104.1 (C-10), 120.8 (C-1′), 104.7 (C-6′, 2′),148.6 (C-3′, 5′), 140.4 (C-4′), 56.8 (-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[19],故鑒定化合物8 為小麥黃素。
化合物 9:無色油狀物(丙酮),分子式C17H16O8,ESI-MSm/z: 347 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, acetone-d6)δ: 2.53 (1H, dd,J= 16.1, 7.3 Hz, H-4b), 2.80 (1H, dd,J= 16.3, 5.2 Hz, H-4a), 4.05 (1H, s,H-3), 4.06 (3H, s, H-2′′), 4.76 (1H, d,J= 7.1 Hz, H-2),5.92 (1H, s, H-6), 6.71 (1H, dd,J= 8.0, 2.4 Hz, H-6′),6.80 (1H, dd,J= 2.2, 7.9 Hz, H-5′), 6.85 (1H, t,J= 2.4 Hz, H-2′);13C-NMR (150 MHz, acetone-d6)δ: 82.3 (C-2), 66.5 (C-3), 26.6 (C-4), 160.0 (C-5), 95.3 (C-6),160.0 (C-7), 94.6 (C-8), 161.2 (C-9), 100.6 (C-10),130.3 (C-1′), 114.0 (C-2′), 145.0 (C-3′), 145.1 (C-4′),115.0 (C-5′), 118.7 (C-6′), 170.4 (C-1′′), 52.2 (C-2′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[20],故鑒定化合物9 為8-甲氧羰基兒茶素。
化合物10:無色結(jié)晶(甲醇),分子式C15H12O5,ESI-MSm/z: 271 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 2.71 (1H, dd,J= 3.0, 17.1 Hz, H-3cis), 3.16(1H, dd,J= 12.8, 17.1 Hz, H-3trans), 5.36 (1H, dd,J=2.9, 12.9 Hz, H-2), 5.92 (2H, dd,J= 2.2, 7.4 Hz, H-6,8), 6.84 (2H, d,J= 8.6 Hz, H-3′, 5′), 7.33 (2H, d,J=8.5 Hz, H-2′, 6′);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 79.1(C-2), 42.6 (C-3), 196.3 (C-4), 164.1 (C-5), 94.8 (C-6),167.0 (C-7), 95.7 (C-8), 163.5 (C-9), 102.0 (C-10),129.7 (C-1′), 127.7 (C-6′, 2′), 115.0 (C-3′, 5′), 157.6 (C-4′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[21],故鑒定化合物10 為柚皮素。
化合物11:黃色針晶(甲醇),分子式C15H10O7,ESI-MSm/z: 301 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 6.23 (1H, d,J= 1.3 Hz, H-6), 6.44 (1H, s,H-6), 6.93 (1H, d,J= 8.5 Hz, H-5′), 7.65 (1H, dd,J=8.4, 1.3 Hz, H-6′), 7.75 (1H, d,J= 1.2 Hz, H-2′);13CNMR (150 MHz, CD3OD)δ: 146.8 (C-2), 135.8 (C-3),176.0 (C-4), 103.2 (C-4a), 156.8 (C-5), 98.0 (C-6),164.1 (C-7), 93.2 (C-8), 163.9 (C-8a), 122.7 (C-1′),115.0 (C-2′), 144.8 (C-3′), 147.4 (C-4′), 114.7 (C-5′),120.4 (C-6′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[22],故鑒定化合物11 為槲皮素。
化合物12:白色粉末(三氯甲烷),分子式C16H10O8,ESI-MSm/z: 331 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 4.04 (6H, s, 2×OCH3), 7.51 (2H,s, H-5, 5′′);13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ: 112.1(C-1, 1′), 141.6 (C-2, 2′), 140.7 (C-3, 3′), 152.7 (C-4,4′), 111.9 (C-5, 5′), 112.6 (C-6, 6′), 159.0 (C-7, 7′), 61.4(2×OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[23],故鑒定化合物12 為3,3′-O-二甲基鞣花酸。
化合物13:白色粉末(甲醇),分子式C20H22O7,ESI-MSm/z: 375 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 2.71 (1H, t,J= 6.9 Hz, H-5α), 3.46 (1H, d,J= 10.3 Hz, H-8α), 3.64 (1H, d,J= 10.3 Hz, H-8β),3.87 (6H, s, 3′, 3′′-OCH3), 4.02 (1H, d,J= 9.5 Hz, H-4β), 4.10 (1H, dd,J= 6.5, 9.5 Hz, H-4α), 4.45 (1H, d,J= 7.8 Hz, H-6α), 4.68 (1H, s, H-2α), 6.80 (1H, d,J=8.0 Hz, H-6′′), 6.82 (1H, d,J= 8.2 Hz, H-5′′), 6.87 (1H,d,J= 8.0 Hz, H-5′), 6.94 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-2′′), 7.06(1H, d,J= 1.7 Hz, H-6′), 7.09 (1H, d,J= 1.8 Hz, H-2′);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 92.8 (C-1), 85.8(C-2), 69.2 (C-4), 62.5 (C-5), 89.1 (C-6), 75.8 (C-8),128.8 (C-1′), 108.7 (C-2′), 147.3 (C-3′), 145.6 (C-4′),114.6 (C-5′), 117.7 (C-6′), 132.0 (C-1′′), 109.7 (C-2′′),147.8 (C-3′′), 146.1 (C-4′′), 114.6 (C-5′′), 119.2 (C-6′′),55.0 (3′, 3′′-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[24],故鑒定化合物13 為1-hydroxy-2,6-bis-epipinoresinol。
化合物14:白色粉末(甲醇),分子式C10H8O4,ESI-MSm/z: 193 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 3.93 (3H, s, 6-OCH3), 6.22 (1H, d,J= 9.4 Hz, H-3), 6.79 (1H, s, H-8), 7.13 (1H, s, H-5), 7.87 (1H,d,J= 9.4 Hz, H-4);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ:162.8 (C-2), 111.2 (C-3), 144.8 (C-4), 108.5 (C-5),145.7 (C-6), 150.0 (C-7), 102.6 (C-8), 151.5 (C-9),111.2 (C-10), 55.4 (6-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[25],故鑒定化合物14 為東莨菪素。
化合物15:白色無定型粉末(甲醇),分子式C9H7NO,ESI-MSm/z: 144 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)δ: 7.27 (1H, m, H-5), 7.29 (1H, m, H-6), 7.50 (1H, d,J= 7.9 Hz, H-2), 8.12 (1H, s, H-4), 8.19(1H, d,J= 7.7 Hz, H-7), 9.91 (1H, s, H-8);13C-NMR(150 MHz, CD3OD)δ: 138.4 (C-2), 118.7 (C-3), 124.3(C-3a), 121.0 (C-4), 122.3 (C-5), 123.6 (C-6), 111.8 (C-7), 138.4 (C-7a), 186.1 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[26],故鑒定化合物15 為3-吲哚甲醛。
化合物16:淡黃色針狀結(jié)晶(三氯甲烷-甲醇),分子式C14H10O8,ESI-MSm/z: 305 [M-H]-。1HNMR (600 MHz, DMSO-d6)δ: 2.45 (1H, dd,J= 18.8,2.1 Hz, H-10b), 2.95 (1H, dd,J= 18.6, 7.8 Hz, H-10a),3.61 (3H, s, -OCH3), 4.36 (1H, dd,J= 7.7, 2.0 Hz, H-9),7.24 (1H, s, H-7);13C-NMR (150 MHz, DMSO-d6)δ:146.2 (C-2), 138.7 (C-3), 113.4 (C-3a), 143.9 (C-4), 140.6(C-5), 150.0 (C-6), 108.4 (C-7), 115.3 (C-7a), 160.1 (C-8), 41.0 (C-9), 37.3 (C-10), 193.4 (C-11), 173.0 (C=O),52.5 (-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[27],故鑒定化合物16 為短葉蘇木酚酸甲酯。
化合物17:白色粉末(甲醇),分子式C22H26O13,ESI-MSm/z: 497 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 3.43 (3H, m, H-3′~5′), 3.65 (6H, s, OCH3-3,5), 3.66 (3H, s, 4-OCH3), 3.78 (1H, m, H-2′), 4.40(1H, dd,J= 11.9, 6.6 Hz, H-6′b), 4.63 (1H, dd,J= 12.0,1.9 Hz, H-6′a), 4.84 (1H, d,J= 7.5 Hz, H-1′), 6.38 (2H,s, H-2, 6), 7.01 (2H, s, H-2′′, 6′′);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ: 154.5 (C-1), 94.5 (C-2, 6), 153.3 (C-3, 5),133.2 (C-4), 59.9 (3, 5-OCH3), 55.1 (4-OCH3), 101.8(C-1′), 73.5 (C-2′), 76.2 (C-3′), 70.4 (C-4′), 74.4 (C-5′),63.7 (C-6′), 119.9 (C-1′′), 108.8 (C-2′′, 6′′), 145.2 (C-3′′, 5′′), 138.6 (C-4′′), 166.9 (C-7′′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[28],故鑒定化合物17 為3,4,5-trimethoxyphenyl-(6′-O-galloyl)-O-β-D-glucopyranoside。
化合物18:白色粉末(甲醇),分子式C8H8O5,ESI-MSm/z: 185 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 3.83 (3H, s, -OCH3), 7.10 (2H, s, H-2, 6);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 51.0 (-OCH3), 120.1(C-1), 108.7 (C-2, 6), 145.1 (C-3, 5), 138.4 (C-4), 167.7(C=O)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[29],故鑒定化合物18 為沒食子酸甲酯。
化合物19:白色粉末(甲醇),分子式C7H6O4,ESI-MSm/z: 155 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ: 6.82 (1H, d,J= 8.1 Hz, H-5), 7.45 (1H, dd,J= 8.2, 1.9 Hz, H-6), 7.46 (1H, d,J= 1.9 Hz, H-2);13C-NMR (150 MHz, CD3OD)δ: 121.7 (C-1), 116.3(C-2), 144.7 (C-3), 150.1 (C-4), 114.4 (C-5), 122.5 (C-6), 169.0 (C=O)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[30],故鑒定化合物19 為原兒茶酸。
化合物20:白色粉末(甲醇),分子式C10H12O4,ESI-MSm/z: 219 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 3.12 (2H, d,J= 5.6 Hz, H-2′), 3.87 (3H, s,-OCH3), 3.92 (2H, d,J= 5.9 Hz, H-3′), 6.83 (1H, d,J=8.2 Hz, H-5), 7.52 (1H, d,J= 2.1 Hz, H-2), 7.55 (1H,d,J= 7.3 Hz, H-6);13C-NMR (150 MHz, CDCl3)δ:130.5 (C-1), 111.8 (C-2), 149.1 (C-3), 115.8 (C-5),124.7 (C-6), 199.7 (C-1′), 41.6 (C-2′), 58.9 (C-3′), 56.3(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[31],故鑒定化合物20 為β-羥基-3-甲氧基-4-羥基苯乙酮。
化合物21:無色結(jié)晶(三氯甲烷-甲醇),分子式C8H8O4,ESI-MSm/z: 167 [M-H]-。1H-NMR (600 MHz, acetone-d6)δ: 3.91 (3H, s, -OCH3), 6.92 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-5), 7.57 (1H, s, H-2), 7.61 (1H, d,J= 8.0 Hz, H-6);13C-NMR (150 MHz, acetone-d6)δ: 122.0(C-1), 112.6 (C-2), 147.2 (C-3), 151.2 (C-4), 114.6 (C-5),124.0 (C-6), 55.4 (-OCH3), 167.5 (-COOH)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致[32],故鑒定化合物21 為異香草酸。
3.2.1 扁刺峨眉薔薇化合物對(duì)B16F10 的細(xì)胞毒性選擇其中15 個(gè)化合物在濃度為40 μmol/L 的條件下進(jìn)行B16F10 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià),結(jié)果如圖1 所示,與對(duì)照組比較,在40 μmol/L 濃度下,化合物4、6、7、11、12 對(duì)B16F10 細(xì)胞有較顯著的細(xì)胞毒(P<0.05);而化合物1~3、5、8、10、13~14、16、21對(duì)B16F10 細(xì)胞未表現(xiàn)出細(xì)胞毒性,因此,后續(xù)對(duì)在40 μmol/L 濃度下無細(xì)胞毒性的化合物繼續(xù)進(jìn)行抑制酪氨酸酶活性評(píng)價(jià)。
圖1 扁刺峨眉薔薇化合物 (40 μmol·L-1) 對(duì)B16F10 細(xì)胞增殖的影響 (±s, n = 3)Fig.1 Effect of compounds from R. omeiensis f.pteracantha (40 μmol·L-1) on cell proliferation of B16F10 cells (±s, n = 3)
3.2.2 扁刺峨眉薔薇化合物對(duì)B16F10 細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性的影響 實(shí)驗(yàn)組設(shè)置為3 個(gè)不同濃度(10、20、40 μmol/L),評(píng)價(jià)上述40 μmol/L 濃度下無細(xì)胞毒化合物對(duì)B16F10 細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶的抑制活性。結(jié)果見圖2,在40 μmol/L 時(shí),化合物1~3、5、13、14、16、21 對(duì)酪氨酸酶有顯著抑制活性,其中,化合物5 活性最強(qiáng);在20 μmol/L 時(shí),化合物1、3、5、14、21 具有顯著的酪氨酸酶抑制活性;濃度降至10 μmol/L 時(shí),化合物1 依然表現(xiàn)出顯著的酪氨酸酶抑制活性。值得注意的是,以上化合物的酪氨酸酶抑制活性均高于陽性藥曲酸。
圖2 扁刺峨眉薔薇化合物對(duì)B16F10 細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性的影響 (±s, n = 3)Fig.2 Effect of compounds from R. omeiensis f. pteracantha on tyrosinase activity of B16F10 cells (±s, n = 3)
本研究從扁刺峨眉薔薇75%甲醇提取物的醋酸乙酯萃取部位中共分離得到21 個(gè)化合物,其中黃酮類4 個(gè),萜類7 個(gè),酚酸類6 個(gè),木質(zhì)素類2 個(gè),香豆素類1 個(gè),其他類型1 個(gè)。所有化合物均首次從該植物中分離得到,其中化合物2、6、12、15、17、20 為首次從薔薇屬中分離得到。本研究主要目的是為了評(píng)價(jià)扁刺峨眉薔薇中萜類及黃酮類化合物抑制酪氨酸酶活性的作用,因此選擇化合物1~8、10~14、16、21 對(duì)B16F10 中酪氨酸酶的抑制活性進(jìn)行評(píng)價(jià),結(jié)果顯示化合物1~3、5、13、14、16、21 在濃度40 μmol/L 時(shí)對(duì)酪氨酸酶活性有顯著抑制作用,其中化合物5 活性最高;化合物4、6、7 在濃度40 μmol/L 時(shí)對(duì)B16F10 細(xì)胞存在一定的細(xì)胞毒性,可能會(huì)對(duì)人體皮膚有一定損傷,因此未做酪氨酸酶抑制活性評(píng)價(jià)?;衔?~3、5 為三萜類化合物。由此推測(cè),三萜類型化合物可能是扁刺峨眉薔薇中主要的美白功效成分。說明扁刺峨眉薔薇中還未被發(fā)現(xiàn)的三萜類化合物可能同樣具有潛在美白作用,有較高深入研究?jī)r(jià)值。
相較于化學(xué)藥,中藥具有安全性更高、作用更平緩、不良反應(yīng)相對(duì)更小的優(yōu)點(diǎn),在化妝品制劑中更具有應(yīng)用優(yōu)勢(shì),早在兩千多年前,我國(guó)對(duì)美白祛斑類中藥就有鉆研,如當(dāng)歸、白芍、辛夷、丹參、甘草、白茯苓等早就作為傳統(tǒng)美白物質(zhì)被廣泛應(yīng)用。已有研究表明,茯苓總?cè)坪蛙蜍咝滤酇 具有抗氧化活性、抑制蘑菇酪氨酸酶活性及對(duì)B16F10 細(xì)胞酪氨酸酶活性均有抑制作用[33],松茸總?cè)茖?duì)B16F10 細(xì)胞雖無抑制作用,但可以通過減少黑色素合成和抑制酪氨酸酶活性途徑達(dá)到美白效果[34],同時(shí),有研究表明,刺梨RosaroxburghiiTratt.中多糖、黃酮和多酚3 種提取物均能抑制B16F10 酪氨酸酶活性,且黃酮類化合物抑制活性最佳[6],扁刺峨眉薔薇作為具有藥食同源特性的植物,果實(shí)味甘,可食用,無不良反應(yīng),因此,在作為美白化妝品原料開發(fā)發(fā)面可能具有很高的潛力。本研究首次研究了扁刺峨眉薔薇提取物的化學(xué)成分,并證實(shí)了其化合物的酪氨酸酶抑制活性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,扁刺峨眉薔薇中含有大量的黃酮類、三萜類及酚酸類化合物,且其中三萜類化合物具有顯著的酪氨酸酶抑制活性,證明了扁刺峨眉薔薇具有潛在的美白功效,為其應(yīng)用于化妝品開發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。
利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突