祝麗雙,王浩

(1.河南中醫(yī)藥大學第五臨床醫(yī)學院/鄭州人民醫(yī)院 輸血科,河南 鄭州 450000;2.河南省人民醫(yī)院 眼科,河南 鄭州 450000)

谷丙轉氨酶(alanine transaminase,ALT)主要存在于肝細胞中[1],也存在于腎、心、胰腺等組織細胞中,其在肝細胞中的水平是血清中的1 000～3 000倍,當肝細胞受損時,其血清水平迅速上升[2],可作為反映肝功能的重要指標之一[3]。由于很多因素可引起ALT升高,因此ALT只能作為肝功能檢測的非特異性指標[4]。ALT可從側面反映肝細胞受損的情況,間接提示部分“窗口期”的病毒性肝炎;同時,有助于鑒別輸血相關肝炎病毒攜帶者,可有效預防肝炎傳播[5],因此ALT成為獻血前的常規(guī)檢測指標之一。在未開展ALT初篩前,單一ALT升高是各采供血機構無償獻血者血液報廢率居高不下的主要原因之一[6]。隨著ALT初篩的開展,血液報廢率顯著下降[7]。降低血液報廢率固然重要,但同時也增加了因ALT初篩不合格而導致的無償獻血者流失。面對當今血液資源供不應求的緊張局勢,如能在保證用血安全的前提下采取有效措施提高ALT初篩合格率而不增加血液報廢率將一定程度上緩解這一局面。本研究通過對2022年1—6月所有ALT初篩結果>45 U·L-1且乙肝和血紅蛋白初篩合格的無償獻血者制定相應補救策略,探討其在提高獻血合格率,緩解臨床用血緊張中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集河南省某血站2022年1—6月份11 913名獻血者的ALT初篩結果,獻血者年齡為18～55歲。所有獻血者均為自愿無償獻血,且符合2012年7月1日實施的國家標準《獻血者健康檢查要求》的相關規(guī)定。本研究已通過醫(yī)院醫(yī)學倫理審查批準。

1.2 主要試劑與儀器

1.2.1主要試劑

谷丙轉氨酶測試劑條(艾康生物技術杭州有限公司,批號201809280),丙氨酸氨基轉移酶測定試劑盒(上海榮盛生物藥業(yè)有限公司,批號20181104109)。

1.2.2主要儀器

C-300小型干式生化分析儀(艾康生物技術杭州有限公司),CB178半自動生化儀(上海合意檢驗設備有限公司)。

1.3 方法

1.3.1獻血前初篩ALT

在無償獻血者獻血前,采用干化學法對其進行ALT初篩。該方法操作簡便、檢測速度快。詳細操作步驟如下:分析儀開機預熱后,將隨試劑條攜帶的調碼卡插到儀器上,核對調碼卡的編號與測試條筒上的編號是否相符;從試劑筒內取出測試條,用移液槍或玻璃毛細管吸取30 μL樣本滴加到測試條加樣區(qū)的中央(注意:吸取樣本時應避免氣泡,滴加樣本時毛細管應垂直不應接觸到加樣區(qū))。將待測測試條置于測試槽內,立即關上檢測艙蓋,此時進入120 s倒計時,120 s結束測試,屏幕上即顯示ALT的測定值。結果判讀:0～45 U·L-1為合格,>45 U·L-1為不合格。

1.3.2獻血后復檢ALT

在獻血完成后,采用速率法檢測獻血者ALT。具體操作如下:取初篩合格的無償獻血者EDTA抗凝血20 μL加入反應小室,在對應小室側室加入400 μL緩沖液,將測試盤裝入半自動生化儀進行檢測,檢測前儀器自動混勻。結果判斷:0～50 U·L-1為合格,>50 U·L-1為不合格。

1.3.3實驗設計及分組方法

本研究納入2022年1—6月份11 913名獻血者的初篩ALT結果作為研究對象,對ALT >45 U·L-1且乙肝和血紅蛋白初篩合格的獻血者,應用獻血補救策略:囑其靜坐休息30 min,進行第1次ALT復測;對復測后ALT仍> 45 U·L-1的獻血者囑其注意休息、清淡飲食、避免飲酒和熬夜5～7 d后,進行第2次ALT初篩檢測。

在實驗設計上為了減少隨機誤差的干擾,選取實驗樣本量較大,初篩ALT檢測時對每位獻血員平行進行3次檢測,取平均值,另外實驗全程要求同一位操作人員、同一臺儀器,并定期對初篩ALT儀進行校準。

對2022年1—6月份所有參加無償獻血的人員進行ALT初篩,根據第1次ALT初篩結果將獻血者分為:正常組(ALT ≤ 45 U·L-1)、ALT輕度偏高組(<45～50 U·L-1)、中度偏高組(<50～60 U·L-1)、重度偏高組(> 60 U·L-1)。

1.3.4干式化學法參考區(qū)間

通過每種樣本類型各至少200例臨床樣本的驗證,得出以下參考區(qū)間:<45 U·L-1或者<0.68 μkat·L-1(37 ℃)(1 μkat·L-1=1/60 IU·L-1)。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0軟件進行統(tǒng)計分析,率和構成比的比較采用χ2檢驗,P<0.05說明差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2022年1—6月份無償獻血者ALT初篩結果

2022年1—6月份參加血站無償獻血人員共11 913名,對此期間所有無償獻血人員進行ALT初步篩查檢測,其中7 942名初篩ALT合格,追蹤復檢ALT合格率為99.6%。對ALT>45 U·L-1并且初篩乙肝和血紅蛋白合格的獻血者給予相應的補救措施后有3 868名參與第1次初篩ALT復測,其中340名初篩ALT合格,追蹤復檢ALT合格率為99.9%;有1 250名獻血者參與第2次初篩ALT復測,經一般體格檢查后有1 170名進行ALT初篩檢測,其中430名初篩ALT合格,追蹤復檢ALT合格率為99.7%。檢測統(tǒng)計結果見表1。

表1 2022年1—6月份無償獻血者ALT初篩結果 區(qū)間分布情況表

2.2 復測ALT合格率

對ALT輕度偏高組實施獻血補救策略后復測其水平,初篩ALT為<45～46 U·L-1的獻血者囑其靜坐休息30 min后復測ALT,約65%的獻血者結果恢復正常;同樣的<46～47 U·L-1組約50%恢復正常;<47～48 U·L-1組約15%恢復正常;<48～49 U·L-1組約7%恢復正常;<49～50 U·L-1組約1%恢復正常。復測ALT合格率的比較采用SPSS軟件交叉表χ2檢驗法比較各組之間合格率有無差異。見圖1。

ALT為谷丙轉氨酶。

2.3 2020—2022年1—6月份同期復檢ALT不合格血液報廢率比較

2021年1—6月因復檢ALT不合格導致血液報廢率較2020年1—6月份升高0.31%。而2022年1—6月份對初篩ALT不合格獻血者施行補救措施后,復檢ALT不合格導致血液報廢率比2021年同期下降0.13%。見圖2。

ALT為谷丙轉氨酶。

3 討論

ALT是肝細胞損傷的指標之一,在評價肝細胞損傷方面有較好的靈敏度[8],也是目前獻血者健康篩查的必檢指標之一[9]。雖然目前世界范圍內,很多國家已經不再檢測ALT,有些國家的ALT上限標準也遠遠高于我國目前的50 U·L-1。但基于我國是肝炎大國的國情,目前我國仍保留獻血員ALT檢測項目。ALT檢測也許對隱匿性肝炎或其他輸血傳播性肝炎有一定意義,但也有研究認為ALT檢測目前在其他肝炎病毒及隱匿性肝炎感染方面意義不大。就目前現(xiàn)狀看,結合我國國情,為保障采供血安全,保留獻血員ALT檢測有一定意義。

在未開展初篩ALT檢測前,單一ALT升高是各采供血機構血液報廢的主要原因[6]。開展初篩ALT檢測雖然降低了因ALT復檢不合格導致的血液報廢率,但也增加了獻血員流失的風險[10]。初篩ALT升高的原因有很多,分為病理性和非病理性因素,情緒激動、肥胖、疲勞、劇烈運動、飲酒以及某些藥物影響等非病理性因素[11],在獻血員經適當休整、停藥一定時間后往往可降至正常水平,因此單純按照1次或者連續(xù)2次的初篩ALT結果來判斷能否獻血并不完全合理。為既能適應當前國情又能最大程度挽救合格獻血員,本研究提出獻血補救策略,即對初篩ALT不合格而乙肝和血紅蛋白合格的獻血者采取安靜休息30 min及以上或清淡飲食、避免飲酒、熬夜5～7 d,可通過動員肥胖獻血者增加增加運動改善體重指數(shù)的方式[12]再次參與獻血等宣教措施,鼓勵回歸獻血,并在回歸獻血后對復測ALT合格率及ALT報廢率做了相關研究。

研究結果表明,2022年1—6月共成功挽救合格獻血員770名,其中第1次初篩復測ALT有340人降至正常水平,復測仍偏高的獻血員采取進一步獻血補救措施后有430名ALT降至正常水平,占總回歸獻血人數(shù)的19.9%。就該血站而言,2022年1—6月采取補救策略后,可挽救19.9%合格獻血員,這對保障匱乏的血液資源意義重大。

在對第1次初篩ALT為45～50 U·L-1的獻血者采取補救措施后獻血合格率的研究中發(fā)現(xiàn),這部分獻血員在安靜休息30 min后,初篩ALT檢測值越低,復測ALT合格率越高,經統(tǒng)計學分析,<45～46 U·L-1組、<46～47 U·L-1組比<47～48 U·L-1組復測ALT合格率高,差異有統(tǒng)計學意義;<47～48 U·L-1組、<48～49 U·L-1組比<49～50 U·L-1組復測ALT合格率高,差異有統(tǒng)計學意義。對比2020—2022年1—6月份血液報廢率情況發(fā)現(xiàn),2022年1—6月份第1次初篩ALT偏高獻血者采取補救措施后,因ALT不合格導致血液報廢的比率并沒有隨之升高,反而較2021年同期有所下降,雖然跟2020年和2021年同期相比差異并無統(tǒng)計學意義,但也足以說明采取獻血補救策略并不會導致血液報廢率上升。因此,在保障采供血安全的前提下,是否也可以將獻血初篩ALT的上限標準適當提高,盡最大可能保留合格獻血員,還有待進一步探討。

另外,初篩獻血員ALT合格后復檢不合格導致血液報廢的原因可能是由于獻血前精神過度緊張[11]、ALT初復檢方法靈敏度不同、操作過程中隨機誤差的存在等等。

4 結論

雖然ALT初篩降低了血液采集后報廢率,但是增加了潛在的獻血員流失,除定期校正儀器和維護保養(yǎng)、加強檢測人員技術水平外,制定相應的獻血補救策略既有利于提高獻血積極性,減少獻血員的流失,并且不會增加ALT復檢不合格的血液報廢率,有著較高的社會意義和臨床價值。