胡正宇,張浩馨,2,劉雅麗,葛 雯,汪 涵,2,金航峰,何 珂,顏菲菲,2*,趙阿勇,2*

(1. 浙江農(nóng)林大學(xué) 動物科技學(xué)院/動物醫(yī)學(xué)院,浙江 杭州311300;2. 浙江農(nóng)林大學(xué) 動物福利研究所,浙江 杭州311300; 3. 浙江省畜牧技術(shù)推廣總站, 浙江 杭州310020;4. 杭州愛咯禽業(yè)有限公司,浙江 杭州 311300)

鐵皮石斛是一種藥理作用很大的草本中藥,通常以鐵皮石斛的莖入藥。鐵皮石斛葉,是鐵皮石斛楓斗的副產(chǎn)物,與鐵皮石斛的莖類似。鐵皮石斛葉主要由多糖、黃酮、生物堿等成分構(gòu)成[1-2],其中多糖含量約為莖的三分之一[3],黃酮含量反而高于莖[4]。多項研究表明,鐵皮石斛葉在抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、改善消化系統(tǒng)和抗炎方面都有良好的效果[5-10]。黃酮類物質(zhì)具有很強的清除自由基的能力[5],而鐵皮石斛葉因為富含黃酮類物質(zhì),所以具有很強的抗氧化能力[6]。在鐵皮石斛葉的乙酸乙酯、正丁醇和水提物中都檢測到了植物黃酮類物質(zhì)[7]。6.4 g/kg劑量鐵皮石斛葉可以顯著提高大鼠NK細(xì)胞的細(xì)胞功能[8]。Yang等[9]研究表明,鐵皮石斛多糖可以提高正常肝細(xì)胞的存活率,降低乙醇誘導(dǎo)的肝損傷。但相關(guān)試驗均在細(xì)胞或小鼠上進(jìn)行,目前還沒有應(yīng)用于蛋雞生產(chǎn)的研究報告。本試驗在蛋雞日糧中添加不同劑量的鐵皮石斛葉干粉進(jìn)行試驗,研究蛋雞日糧中添加不同劑量的鐵皮石斛葉干粉對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血清生化指標(biāo)的影響,為鐵皮石斛葉在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗在位于浙江省杭州市臨安區(qū)的愛咯禽業(yè)有限公司進(jìn)行,試驗動物為“京紅1號”蛋雞,來自北京市華都峪口禽業(yè)有限責(zé)任公司。鐵皮石斛葉采摘于杭州震亨生物科技有限公司(于當(dāng)年四月份采摘),在60 ℃烘箱中烘干,再由破壁機打成細(xì)粉。

1.2 試驗設(shè)計

本試驗采用單因素試驗設(shè)計,并對劑量和周齡進(jìn)行多因素方差分析。將19周齡、體重相近、采食量正常的蛋雞共計240只隨機分為3組,每組80只蛋雞,每組10個重復(fù),每個重復(fù)8只蛋雞。對照組蛋雞只飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗組蛋雞飼喂分別添加了1 200 mg/kg和3 600 mg/kg鐵皮石斛葉干粉的日糧。日糧中其它營養(yǎng)指標(biāo)均滿足《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33-2004)對營養(yǎng)指標(biāo)的要求。采用粉料飼喂,自由飲水的方式。雞舍整體縱向負(fù)壓通風(fēng),為了刺激食欲的同時也避免飼糧的浪費,試驗期間始終保持雞的自由采食狀態(tài)。整個試驗過程中,采用8只一籠飼養(yǎng)方式,光照16L:8D,平均溫度25 ℃,平均濕度60%。

1.3 試驗日糧

杭州市愛咯禽業(yè)有限公司提供了試驗中使用的基礎(chǔ)日糧,日糧組成和營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平Table 1 Basic diet composition and nutritional level

1.4 檢測指標(biāo)與測定方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測定 飼養(yǎng)期間,每天10:00準(zhǔn)時收集雞蛋,準(zhǔn)確地記錄每個重復(fù)的產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重、軟破殼蛋數(shù)和死淘數(shù)。每周清掃剩料并稱重,并計算每個重復(fù)的實際飼料消耗量。然后根據(jù)試驗記錄,計算出每個重復(fù)的平均蛋重、產(chǎn)蛋率、料蛋比和平均日采食量。

1.4.2 蛋品質(zhì)測定 每28 d從每個處理組隨機選取雞蛋20枚,用于測定蛋品質(zhì)。用游標(biāo)卡尺測量蛋的長徑短徑,計算出蛋形指數(shù)(蛋形指數(shù)=長徑/短徑),利用蛋殼厚度測量儀/ETG-1061 (南京瑤恩儀器設(shè)備有限公司)測量出蛋殼大頭厚、中間厚、小頭厚,計算出蛋殼平均厚度,利用蛋殼強度測試儀EFG-0503(南京瑤恩儀器設(shè)備有限公司)測量蛋殼強度,利用多功能蛋品檢測儀/EMT-7300II(南京瑤恩儀器設(shè)備有限公司)測量蛋白高度和蛋黃顏色,并計算出哈氏單位。分離蛋黃與蛋清,稱量蛋黃重量并計算出蛋黃比例(蛋黃重/蛋重×100%),將蛋殼沖洗干凈后晾干稱重,計算出蛋殼比例(蛋殼/蛋重×100%)。

1.4.3 血清生化指標(biāo)和臟器指數(shù)的測定 試驗結(jié)束后,每組隨機選8只健康蛋雞,禁食12 h(不禁水),稱量出活體重后進(jìn)行翅靜脈采血。采血管室溫靜置1 h后進(jìn)行3 600 r/min,5 min離心,取上清獲得血清,-20 ℃條件下保存待測。采血后對雞進(jìn)行頸椎脫臼處死,剖開腹腔取出心臟、脾臟、肝臟并稱重,計算出臟器指數(shù)(臟器指數(shù)=器官重量/雞活體重×100%)。血清LDL(低密度脂蛋白)和HDL(高密度脂蛋白)含量用試劑盒(南京建成生物工程研究所)進(jìn)行測定[11],其余指標(biāo)使用A6半自動生化儀(北京松上技術(shù)有限公司)進(jìn)行測定,測定方法均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

用Excel整理試驗數(shù)據(jù),用SPSS 25軟件中ANOVA進(jìn)行單因素方差分析,并用Duncan's法進(jìn)行多重比較,結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤,P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 鐵皮石斛葉干粉對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

如表2所示,在日糧中添加鐵皮石斛葉干粉對京紅一號蛋雞的產(chǎn)蛋率、平均蛋重、料蛋比和死淘率均無顯著影響(P>0.05)。在31～34周齡時,3 600 mg/kg和1 200 mg/kg鐵皮石斛葉組蛋雞平均日采食量顯著低于對照組(P<0.05);在31～34周齡時,3 600 mg/kg鐵皮石斛葉組和1 200 mg/kg鐵皮石斛葉組的蛋破損率顯著低于對照組(P<0.05)。

表2 鐵皮石斛葉干粉對京紅一號蛋雞產(chǎn)蛋性能的影響Table 2 Effects of dry powder of Dendrobium officinale leaf on laying performance of Jinghong No. 1 laying hens

2.2 鐵皮石斛葉干粉對蛋品質(zhì)的影響

由表3可知,鐵皮石斛葉對蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋白高度和蛋殼比例均無顯著影響(P>0.05)。在19～22周齡和27～30周齡時,3 600 mg/kg鐵皮石斛葉組的蛋黃顏色較對照組有上升趨勢(0.05

表3 鐵皮石斛葉干粉對蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effect of dry powder of Dendrobium officinale leaf on egg quality

2.3 鐵皮石斛葉干粉對臟器指數(shù)的影響

由表4可知,鐵皮石斛葉對蛋雞心臟指數(shù)和肝臟指數(shù)無顯著影響(P>0.05);3 600 mg/kg鐵皮石斛葉組蛋雞脾臟指數(shù)顯著高于其它兩組(P<0.05)。

表4 鐵皮石斛葉對臟器指數(shù)的影響Table 4 Effect of Dendrobium officinale leaves on organ index

2.4 鐵皮石斛葉干粉對血清生化指標(biāo)的影響

由表5可知,鐵皮石斛葉對蛋雞谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶、白蛋白、葡萄糖、鈣、無機磷、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、雌二醇、卵泡刺激素和黃體生成素均無顯著差異(P>0.05)。3 600 mg/kg鐵皮石斛葉組蛋雞總蛋白和球蛋白顯著高于對照組 (P<0.05)。

表5 鐵皮石斛葉對血清生化指標(biāo)的影響 Table 5 Effects of Dendrobium officinale leaves on serum biochemical indexes

3 討 論

3.1 鐵皮石斛葉干粉對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

本試驗結(jié)果表明,鐵皮石斛葉干粉可以使蛋雞平均日采食量和蛋破損率顯著降低。蛋破損率與蛋殼質(zhì)量息息相關(guān),飼料中鈣、磷含量是影響蛋殼質(zhì)量的最重要的因素[16],蛋雞機體對鈣的消化、吸收、運輸及蛋殼腺中鈣離子的沉積是蛋殼形成的關(guān)節(jié)環(huán)節(jié)[17]。付玲珠等[18]發(fā)現(xiàn),鐵皮石斛葉、花的煎劑會降低小鼠胃排空率,鐵皮石斛葉干粉可能類似地降低蛋雞的消化速率,進(jìn)而引起蛋雞平均日采食量下降,同時飼料中的鈣、磷等營養(yǎng)物質(zhì)得到充分吸收,使蛋殼更易形成,降低雞蛋的破損率。本試驗中試驗組蛋雞采食量顯著下降,但蛋雞產(chǎn)蛋率與對照組無明顯差異,表明鐵皮石斛葉干粉可能具有促進(jìn)蛋雞消化吸收的作用。

3.2 鐵皮石斛葉干粉對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

蛋黃顏色、蛋重、蛋白高度、蛋殼和哈氏單位等指標(biāo)通常用于評價蛋品質(zhì)好壞。影響雞蛋品質(zhì)的因素有很多,如遺傳因素[19]和飼料因素[20]等。本試驗結(jié)果表明,蛋雞周齡與鐵皮石斛葉干粉劑量之間無顯著的互作效應(yīng)(P劑量×周齡>0.05),鐵皮石斛葉干粉可以顯著改善蛋黃比例和哈氏單位,對蛋黃顏色有上調(diào)趨勢。蛋雞食用飼料時,將飼料里的色素沉積在蛋黃中[21],蛋黃顏色數(shù)值越大,表示蛋的品質(zhì)越好[22]。與弓琴等[23]的研究結(jié)果一致,本試驗中鐵皮石斛葉干粉組的蛋黃顏色顯著提高,可能是因為鐵皮石斛葉干粉的黃酮促進(jìn)了飼料中色素的吸收與利用。雞蛋內(nèi)容物分為蛋清和蛋黃,其中主要的營養(yǎng)成分大部分存在于蛋黃中[21],在本試驗中鐵皮石斛葉干粉對蛋黃比例和哈氏單位都有改善。劉璐等[24]和柴明杰等[25]的研究表明,這兩項指標(biāo)與飼料中的蛋白水平和非必需氨基酸水平有關(guān),推測鐵皮石斛葉干粉可能通過提高蛋雞蛋白質(zhì)和非必需氨基酸的利用率來提高蛋黃比例和哈氏單位,具體機制有待進(jìn)一步研究。本試驗中,鐵皮石斛葉干粉對蛋黃比例、哈氏單位和蛋黃顏色的的影響在不同周齡的蛋雞上均有所體現(xiàn),可能是由于鐵皮石斛葉中的有效成分在不同蛋雞體內(nèi)的沉積過程有所不同,具體機制待后續(xù)試驗進(jìn)行探究。

3.3 鐵皮石斛葉干粉對蛋雞臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是動物試驗中一種十分重要的生物學(xué)指標(biāo),其水平能夠在一定程度上反映動物機體的器官相關(guān)功能的強弱[26]。機體的免疫器官指數(shù)是判定機體免疫功能水平的初步指標(biāo),免疫器官的發(fā)育狀況可以直接反映出機體的免疫應(yīng)答水平[27]。宋美芳[28]研究表明,鐵皮石斛提取物可以提高小鼠的脾臟指數(shù),本試驗中高劑量鐵皮石斛葉組脾臟指數(shù)也極顯著高于其它組。鐵皮石斛葉中起到免疫作用的主要成分是鐵皮石斛多糖,鐵皮石斛多糖能夠刺激脾臟淋巴細(xì)胞的增殖[29],從而提高機體的脾臟指數(shù)。同時,脾臟作為動物機體重要的免疫器官,其發(fā)育水平可以初步反映機體的免疫水平,高劑量鐵皮石斛組臟器指數(shù)的顯著升高說明鐵皮石斛葉在一定程度上也可以改善蛋雞的免疫性能。

3.4 鐵皮石斛葉干粉對蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

動物機體血清生化指標(biāo)與營養(yǎng)水平密切相關(guān),不僅能夠體現(xiàn)機體的生理代謝水平,而且可以反映機體的營養(yǎng)和疾病情況[30]。血清中的總蛋白水平通常能反映出飼料里的蛋白質(zhì)營養(yǎng)水平和機體對蛋白質(zhì)消化吸收的程度[31]。血清球蛋白水平則可以反映機體的免疫能力[32]。本試驗中3 600 mg/kg鐵皮石斛葉干粉組的蛋雞總蛋白顯著高于對照組,說明3 600 mg/kg鐵皮石斛葉能夠明顯提高蛋雞的蛋白質(zhì)消化吸收能力,與蛋品質(zhì)提高的結(jié)果相符。高劑量鐵皮石斛葉干粉組的蛋雞球蛋白水平也高于其它組,說明高劑量的鐵皮石斛葉干粉對蛋雞的免疫能力也有一定的改善作用,與脾臟指數(shù)提高的結(jié)果相符。季愛兵[33]的研究表明,鐵皮石斛水提物可以降低高血脂癥小鼠的血糖和血脂。本試驗中各組血糖、總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等糖類、脂質(zhì)代謝指標(biāo)差異不顯著,說明鐵皮石斛葉對蛋雞糖類和脂質(zhì)代謝無影響。同樣地,三組蛋雞血清中生殖相關(guān)激素?zé)o顯著差異,和產(chǎn)蛋性能無顯著差異相符,說明鐵皮石斛葉不影響蛋雞產(chǎn)蛋性能。

4 結(jié) 論

本試驗表明,飼料中添加鐵皮石斛葉干粉不影響蛋雞產(chǎn)蛋性能,但能夠降低蛋雞平均日采食量,提高雞蛋的蛋黃顏色、哈氏單位、蛋黃比例、脾臟指數(shù)、血清總蛋白和球蛋白水平,說明鐵皮石斛葉干粉能夠改善蛋雞的蛋品質(zhì)和免疫能力。