摘 要 研究了肟菌酯和霜脲氰對(duì)黃瓜霜霉病的聯(lián)合毒力及最佳配比下的田間防效。采用平皿法測(cè)定了肟菌酯和霜脲氰及其不同比例復(fù)配對(duì)黃瓜霜霉病的毒力，并通過(guò)田間藥效試驗(yàn)評(píng)價(jià)了對(duì)黃瓜霜霉病的防治效果。結(jié)果表明：霜脲氰和肟菌酯配比為2∶1、4∶1和7∶1時(shí)表現(xiàn)出增效作用，增效比（SR）分別為1.54、1.55、1.60，霜脲氰和肟菌酯配比為7∶1時(shí)增效比最大。按最佳配比制成48%肟菌·霜脲氰水分散粒劑進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，在黃瓜霜霉病發(fā)病初期噴霧處理，有效成分用量129.6～216 g·hm-2，間隔7 d施藥一次，連續(xù)施藥3次，防效為80.31%～88.15%，可控制黃瓜霜霉病的為害，供試濃度下對(duì)黃瓜植株生長(zhǎng)安全。

關(guān)鍵詞 肟菌酯；霜脲氰；聯(lián)合毒力；藥效；黃瓜霜霉病

中圖分類號(hào)：S436.421；TQ450.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2024.01.035

霜霉病是黃瓜上發(fā)生最普遍、最嚴(yán)重的病害之一。我國(guó)各地均有發(fā)生，對(duì)黃瓜生產(chǎn)造成極大損失。一般流行年份減產(chǎn)20%～30%，重流行時(shí)達(dá)到50%～60%，甚至絕收[1]。肟菌酯為甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，通過(guò)抑制病菌線粒體呼吸作用而達(dá)到防治效果，其安全性較高，無(wú)致突變、致畸和致癌作用，對(duì)生殖無(wú)不良影響，在土壤、地表水等環(huán)境中迅速消解。肟菌酯殺菌譜廣，應(yīng)用作物眾多，活性高，且具有植物健康功效，能夠提高作物產(chǎn)量。同時(shí)，肟菌酯適配性強(qiáng)，擁有大量的復(fù)配產(chǎn)品，三唑類、琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類以及其他類殺菌劑均有良好的配伍性[2]。霜脲氰為氰基乙酰胺類殺菌劑，可抑制核酸、氨基酸和脂質(zhì)體的合成，也可抑制細(xì)胞線粒體中的電子轉(zhuǎn)移，是一種多作用機(jī)制的殺菌劑，殘效期相對(duì)較短。目前，國(guó)內(nèi)登記的含有肟菌酯和霜脲氰有效成分的復(fù)配產(chǎn)品僅2個(gè)[3]。

因此，本研究開(kāi)展了肟菌酯和霜脲氰對(duì)黃瓜霜霉病的聯(lián)合毒力試驗(yàn)，并按照最佳比例制成48%肟菌·霜脲氰水分散粒劑，并進(jìn)行了田間藥效試驗(yàn)，為研發(fā)防治黃瓜霜霉病新藥劑提供理論依據(jù)。

1" 材料和方法

1.1" 試驗(yàn)材料

1.1.1" 供試材料

供試菌株：黃瓜霜霉病菌（Pseudoperonospora cubensis）PCNJ-5，2019年分離自南京市江寧區(qū)黃瓜地，并在溫室中接種至新鮮黃瓜葉上擴(kuò)繁。

供試黃瓜品種：露豐，為黃瓜霜霉病的感病品種。種植于玻璃溫室中，溫度28 ℃，濕度70%，待長(zhǎng)至4～6片真葉時(shí)備用。

黃瓜霜霉病菌游動(dòng)孢子囊培養(yǎng)條件：從田間采集黃瓜霜霉病病葉，22 ℃保濕至葉片背面產(chǎn)生霉層；從單個(gè)黃瓜霜霉病菌病斑上刷取游動(dòng)孢子囊，噴霧至溫室中種植的黃瓜葉片背面，保濕12 h；待發(fā)病后剪下葉片，22 ℃保濕至背面產(chǎn)生大量游動(dòng)枸子囊，調(diào)整其濃度為1×106個(gè)·L-1，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2" 供試藥劑

97%肟菌酯原藥，江蘇耕耘化學(xué)有限公司；98%霜脲氰原藥，利民化學(xué)有限責(zé)任公司；48%肟菌·霜脲氰水分散粒劑，自備；50%肟菌酯水分散粒劑，江蘇耘農(nóng)化工有限公司；20%霜脲氰懸浮劑，青島中達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司；72%霜脲·錳鋅可濕性粉劑，陶氏益農(nóng)農(nóng)業(yè)科技（江蘇）有限公司。

1.2" 試驗(yàn)方法

1.2.1" 肟菌酯和霜脲氰對(duì)黃瓜霜霉病的室內(nèi)毒力測(cè)定

試驗(yàn)方法參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第3部分：抑制黃瓜霜霉病菌試驗(yàn)平皿葉片法》（NY/T 1156.3—2006）[4]。使用丙酮作為溶劑將霜脲氰和肟菌酯原藥配制成有效成分為1×104 mg·L-1的母液待用。設(shè)置霜脲氰和肟菌酯的配比（質(zhì)量比）為14∶1、7∶1、4∶1、2∶1、1∶1，按0、0.75、1.5、3、6、 12、24、48 mg·L-1的濃度梯度，用0.05%吐溫-80溶液配制藥液，空白對(duì)照使用0.05%吐溫-80溶液。

選取適用的黃瓜葉片（自上而下4～6片葉），葉柄用濕棉花保濕。將藥液均勻噴施于黃瓜葉片背面（40 mL·m-2），待藥液自然風(fēng)干后，將各處理葉片葉背向上，放置于保濕盒，22 ℃保持24 h，用準(zhǔn)備好的新鮮孢子囊懸浮液點(diǎn)滴10 μL接種于葉片背面。每葉片接種4滴，每處理5片葉片。接種后蓋上皿蓋，置于光照培養(yǎng)箱中 ，光照/黑暗12 h交替，溫度為22 ℃，相對(duì)濕度90%。

待空白對(duì)照發(fā)病，充分測(cè)量記錄病斑直徑。根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，按公式（1）計(jì)算防治效果（P），以百分?jǐn)?shù)（%）表示。

式中：P為防治效果（%），D0為空白對(duì)照病斑直徑（mm），D1為藥劑病斑處理直徑（mm）。

根據(jù)各藥劑濃度對(duì)數(shù)值及對(duì)應(yīng)的防效機(jī)率值作回歸分析，計(jì)算各藥劑的EC50值及其95%置信限。根據(jù)Wadley法計(jì)算混劑的增效系數(shù)（SR），評(píng)價(jià)混劑的聯(lián)合作用類型，即SR＜0.5為拮抗作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＞1.5為增效作用。按式（2）和（3）計(jì)算混劑的EC50理論值和增效系數(shù)（SR）。

式中：a、b為相應(yīng)單劑在混劑中的比例，EC50A、EC50B分別為肟菌酯和霜脲氰單劑的EC50值，EC50（Eth）為混劑EC50理論值，EC50（Eob）為混劑EC50實(shí)測(cè)值。

1.2.2" 田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：2021年度試驗(yàn)地點(diǎn)位于山東省泰安市岱岳區(qū)良莊西村。試驗(yàn)地土壤為砂土，pH值為6.84，有機(jī)質(zhì)含量17.2 g·kg-1。該地常年種植黃瓜，前茬作物為番茄。黃瓜品種為津禾1912F1。采用冬暖大棚栽培，大棚東西方向建造，黃瓜南北方向順棚種植，采用立架式栽培模式，微起壟雙行種植，壟距1.6 m，株距0.4 m，行距0.6 m，種植密度約為2 100株/667 m2。試驗(yàn)區(qū)栽培管理?xiàng)l件均勻一致，并符合當(dāng)?shù)乜茖W(xué)的農(nóng)業(yè)栽培措施。試驗(yàn)每個(gè)小區(qū)為20 m2，小區(qū)東西橫向分布，隨機(jī)區(qū)組排列，每處理重復(fù)4次，共28個(gè)小區(qū)，相鄰小區(qū)和試驗(yàn)地周圍設(shè)保護(hù)行。在黃瓜霜霉病發(fā)病初期施藥，間隔7 d施藥一次，連續(xù)施藥3次，第一次施藥時(shí)間為4月4日，施藥時(shí)黃瓜處于結(jié)瓜初期。所用藥劑及用量見(jiàn)表1。

1.2.3 調(diào)查及試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析方法

病害調(diào)查：施藥前、第1次藥后7 d、第2次藥后7 d和第3次藥后10 d，調(diào)查總?cè)~片數(shù)和各級(jí)病葉數(shù)，共計(jì)4次。每小區(qū)隨機(jī)取4點(diǎn)調(diào)查，每點(diǎn)查2株，調(diào)查全部葉片，以每葉片病斑面積占整個(gè)葉片面積百分率分級(jí)。

以葉片為單位進(jìn)行分級(jí)。0級(jí)：無(wú)病斑；1級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的5%以下；3級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的6%～10%；5級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的11%～25%；7級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的26%～50%；9級(jí)：病斑面積占整個(gè)葉面積的50%以上。

產(chǎn)量調(diào)查：整個(gè)小區(qū)實(shí)收測(cè)產(chǎn)，測(cè)產(chǎn)面積為20 m2（3.20 m×6.25 m），折算公頃產(chǎn)量，以kg·hm-2表示，計(jì)算增產(chǎn)率。

式中：CK0為空白對(duì)照區(qū)施藥前病情指數(shù)，CK1為空白對(duì)照區(qū)施藥后病情指數(shù)，PT0為藥劑處理區(qū)施藥前病情指數(shù)，PT1為藥劑處理區(qū)施藥后病情指數(shù)。

式中：A為藥劑處理區(qū)產(chǎn)量（kg），A0為空白對(duì)照區(qū)產(chǎn)量（kg）。

使用DPS進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，進(jìn)行反正弦平方根轉(zhuǎn)換后，采用鄧肯氏新復(fù)極差（DMRT）法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果

通過(guò)霜脲氰和肟菌酯各配比對(duì)黃瓜霜霉病的防效測(cè)定及增效分析。結(jié)果表明：霜脲氰和肟菌酯對(duì)黃瓜霜霉病均有較好的抑制效果，霜脲氰的EC50為13.766 0 mg·L-1，肟菌酯EC50為3.089 5 mg·L-1；霜脲氰和肟菌酯配比為2∶1、4∶1和7∶1時(shí)表現(xiàn)增效作用，增效系數(shù)（SR）分別為1.54、1.55 和1.60，霜脲氰和肟菌酯配比為7∶1時(shí)增效比最大（見(jiàn)表2）。

2.2" 田間試驗(yàn)結(jié)果

用DMRT法測(cè)定后統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示：被試物48%霜脲氰·肟菌酯水分散粒劑對(duì)黃瓜霜霉病有較好的防治效果，且隨著用藥量和用藥次數(shù)的增加，防效呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，對(duì)黃瓜有一定的增產(chǎn)作用。第一次施藥后7 d，被試物48%霜脲氰·肟菌酯水分散粒劑處理l、處理2、處理3的平均防效依次為70.89%、76.36%、77.33%，對(duì)照物50%肟菌酯水分散粒劑處理4、20%霜脲氰懸浮劑處理5、72%霜脲·錳鋅可濕性粉劑處理6的平均防效依次為68.29%、72.59%、75.70%，其中以處理3的平均防效最高。處理1與處理4、處理5有差異但不顯著，處理2與處理3、處理6差異不顯著，其余各處理間兩兩差異顯著。末次施藥后10天，被試物處理1、處理2、處理3的平均防效分別為77.16%、81.18%、84.47%，對(duì)照物處理4、處理5、處理6的平均防效分別為為76.05%、80.10%、82.41%，其中以處理3的平均防效最高。處理1與處理4差異不顯著，處理2與處理5差異不顯著，處理6與處理2、處理3、處理5有差異但不顯著，其余各處理間兩兩差異顯著（見(jiàn)表3）。

產(chǎn)量調(diào)查結(jié)果表明，被試物處理1、處理2、處理3的平均產(chǎn)量分別為5 624.75、5 826.00、6 120.63 kg·hm-2，分別較對(duì)照增產(chǎn)12.69%、16.71%、22.62%；對(duì)照物處理4、處理5和處理6的平均產(chǎn)量依次為5 580.00、5 758.00、5 834.75 kg·hm-2，較對(duì)照增產(chǎn)11.79%、15.35%、16.89%。其中以處理3的平均增產(chǎn)率最高，且與其他處理間差異顯著。處理1與處理4差異不顯著，處理2與處理6差異不顯著，其他各處理兩兩間差異顯著（見(jiàn)表4）。

試驗(yàn)中觀察表明，試驗(yàn)藥劑在試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)對(duì)黃瓜葉片顏色、結(jié)瓜及植株生長(zhǎng)狀態(tài)無(wú)明顯影響，對(duì)黃瓜安全，無(wú)藥害。

3" 結(jié)論與討論

霜霉病是黃瓜種植過(guò)程中的主要病害之一，嚴(yán)重時(shí)可造成大量減產(chǎn)。黃瓜霜霉病在中國(guó)大部分地區(qū)普遍發(fā)生，其損失程度因各地氣候條件不同而異。黃瓜霜霉病的防治方法主要是化學(xué)防治和農(nóng)業(yè)防治。登記防治黃瓜霜霉病的產(chǎn)品有1 290多個(gè)[3]，有效成分主要集中在烯酰嗎啉、代森錳鋅、吡唑醚菌酯、嘧菌酯、百菌清、福美雙等，部分產(chǎn)品已經(jīng)產(chǎn)生抗藥性。

肟菌酯（Trifloxystrobin）是一種新型的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，對(duì)14-脫甲基化酶抑制劑、苯甲酰胺類、二羧酰胺類和苯并咪唑類產(chǎn)生抗性的菌株有效，安全性較高，對(duì)大多數(shù)作物安全，混配性較好。不過(guò)易產(chǎn)生抗藥性，不宜單獨(dú)使用。霜脲氰主要是阻止病原菌孢子萌發(fā)，對(duì)侵入寄主內(nèi)病菌也有殺傷作用，具有保護(hù)、治療和內(nèi)吸作用，單獨(dú)使用霜脲氰持效期短。根據(jù)王源超[5]等研究結(jié)果，雖然某些疫霉菌可能在較短時(shí)間內(nèi)對(duì)霜脲氰產(chǎn)生抗性，但抗性在無(wú)性繁殖后代不能穩(wěn)定遺傳，只需與其他殺菌劑交替使用，可以避免疫霉菌對(duì)霜脲氰抗性的產(chǎn)生或抑制抗霜脲氰菌株群體的形成。霜脲氰的持效期短，在生產(chǎn)上不宜單獨(dú)使用，可與其他殺菌劑復(fù)配使用，避免抗性菌株的產(chǎn)生或抑制抗性菌株群體的形成，作用可能更為顯著。

因此肟菌酯和霜脲氰的復(fù)配，將不同作用機(jī)理、持效期不同的殺菌劑組合使用，降低每種農(nóng)藥對(duì)有害生物的篩選強(qiáng)度，降低單向的選擇壓，從而有效地延緩抗藥性的增長(zhǎng)。48%肟菌·霜脲氰水分散粒劑對(duì)黃瓜霜霉病有較好的防效，供試濃度下對(duì)黃瓜植株生長(zhǎng)安全。因此，該產(chǎn)品對(duì)替代高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥具有積極的意義。但要避免同一種類農(nóng)藥互相之間輪換使用，嚴(yán)格控制每個(gè)生長(zhǎng)季節(jié)的使用次數(shù)等，以降低病菌的抗性風(fēng)險(xiǎn)。

參考文獻(xiàn)：

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[2] 顧林玲. 肟菌酯的應(yīng)用與開(kāi)發(fā)進(jìn)展 [J]. 現(xiàn)代農(nóng)藥， 2019， 18（1）： 44-49.

[3] 中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng).農(nóng)藥登記數(shù)據(jù)[DB/OL]. [2023-05-11]（2023-05-21）. http：//www.chinapesticide.org.cn/zwb/data Center.

[4] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部. 農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則 殺菌劑 第3部分：抑制黃瓜霜霉菌病菌試驗(yàn) 平皿葉片法： NY/T 1156.3—2006 [S].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2006..

[5] 王源超，鄭小波，華永剛， 等.疫霉菌對(duì)霜脲氰抗性遺傳及對(duì)霜脲氰和甲霜靈的交互抗性[J].植物保護(hù)， 1997（23）：7-10.

（責(zé)任編輯：敬廷桃）

收稿日期：2023-08-05

作者簡(jiǎn)介：劉慕蘭（1976—），碩士，農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)藥登記。E-mail：freychem@126.com。

*為通信作者： E-mail：59388413@qq.com。