何晶,邱春媚,黃遠(yuǎn)英,殷光玲
廣東佰悅網(wǎng)絡(luò)科技有限公司(廣州 510663)
胃黏膜健康是胃功能的基本條件,其完整性對于維持胃腸道功能必不可少[1]。對胃黏膜損傷有輔助保護作用的藥物多為抗酸類,但這類產(chǎn)品刺激性較強,易造成不良反應(yīng)。因此,人們更傾向采用藥食兩用產(chǎn)品進行胃黏膜保護,降低刺激性,修護胃黏膜的損傷,緩解胃部不適。
猴頭菇對胃黏膜具有保護作用,能促進黏膜修復(fù),猴頭菇多糖為發(fā)揮作用的主要成分[2]。西蘭花為十字花科植物,其富含蘿卜硫苷、蘿卜硫素,可抑制胃癌和胰腺癌細(xì)胞的生長和侵襲[3]。姜黃提取物是以姜黃藥材為原料,經(jīng)粉碎、提取、包埋等工藝制備的姜黃物料。姜黃具有抗炎、清除自由基等作用[4],對胃黏膜等胃部環(huán)境改善具有一定作用,其主要成分為姜黃素。木香提取物可以刺激胃動素的生成,加速胃排空,可用于胃腸運動障礙的治療[5]。通過研究由猴頭菇、西蘭花、姜黃及木香組成的復(fù)合物對胃黏膜損傷影響,探究猴頭菇、西蘭花,姜黃及木香4種植物提取物在胃黏膜保護方面的作用,為胃部產(chǎn)品的研究與開發(fā)提供參考。
1.1.1 試驗樣品
樣品為棕黃色粉末,人體推薦劑量3.5 g/d。制備3組樣品:西蘭花組為單組分西蘭花種子水提取物,按人體推薦劑量折算含蘿卜硫苷約0.02 g/d;復(fù)合物組1為猴頭菇提取物、姜黃提取物、木香提取物,按人體推薦劑量折算含多糖約0.18 g/d;復(fù)合物組2為猴頭菇提取物、姜黃提取物、木香提取物、西蘭花種子水提取物,按人體推薦劑量折算含多糖約0.18 g/d,蘿卜硫苷約0.02 g/d。
1.1.2 試驗動物
選用SD大鼠,SPF級,雄性,171~212 g,每組12只。
1.1.3 受試人群
具有胃黏膜損傷的患者162人,損傷程度基本相同,年齡20~70歲之間,自愿參加,體質(zhì)指數(shù)BMI在18~30 kg/m2。
1.1.4 儀器與設(shè)備
BS-3000A電子天平(上海友聲衡器有限公司);數(shù)顯卡尺(桂林廣陸數(shù)字測控股份有限公司生產(chǎn));KH-BL生物組織包埋機、KH-S自動染色機(湖北孝感闊海醫(yī)療科技有限公司);Motic生物顯微鏡及成像系統(tǒng)(麥克奧迪實業(yè)集團有限公司);等。
1.2.1 動物試驗
1.2.1.1 動物急性試驗
設(shè)置空白對照組、模型對照組、試驗組(西蘭花組、復(fù)合物組1、復(fù)合物組2),給藥頻率每日1次,連續(xù)5周。大鼠灌胃給予0.58 g/(kg·bw)樣品(人體推薦10倍劑量),空白對照組和模型對照組給予相同體積的純凈水。試驗按保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范進行[6]。
1.2.1.2 動物慢性試驗
設(shè)置空白對照組、模型對照組、試驗組(西蘭花組、復(fù)合物組1、復(fù)合物組2),空白對照組和模型對照組給予純凈水,試驗組灌胃給予劑量0.58 g/(kg·bw)樣品(人體推薦10倍劑量)。每日1次,連續(xù)14 d。試驗按保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范進行[6]。
1.2.2 人體試食試驗
人體試食分為空白對照組、試驗組(復(fù)合物組1、復(fù)合物組2),頻率為每日1次,每次3.5 g,空腹服用。試食60 d,檢測所有受試者的胃蛋白酶原、胃泌素情況,同時記錄是否出現(xiàn)不良反應(yīng),若有,記錄次數(shù),主要包括惡心、口腔潰瘍、大便干結(jié)、腹脹、便秘、腹瀉、腹鳴音、大便次數(shù)增多、饑餓感和胃腸不適。
復(fù)合物對急性模型大鼠的體重變化如表1所示。經(jīng)過5周干預(yù),各組大鼠體重?zé)o顯著差異。從表2結(jié)果顯示,與空白對照組相比,模型對照組評分升高,試驗設(shè)置具有統(tǒng)計學(xué)差異。與模型對照組相比,損傷積分方面3個試驗組均具有統(tǒng)計學(xué)差異,但復(fù)合物效果優(yōu)于單一組分(復(fù)合物組1和復(fù)合物組2優(yōu)于西蘭花組),且復(fù)合物組2效果最佳。評分方面只有復(fù)合物組2具有統(tǒng)計學(xué)差異。猴頭菇、姜黃、木香及西蘭花4種成分復(fù)合具有協(xié)同作用,可降低急性模型大鼠的胃損傷情況。
表1 復(fù)合物對胃黏膜急性模型大鼠體重的影響 單位:g
表2 復(fù)合物對胃黏膜急性模型大鼠的影響
復(fù)合物對慢性模型大鼠的體重變化如表3所示。與空白對照組相比,模型對照組差異顯著,動物造模成功。與模型對照組相比,各試驗組體重?zé)o顯著差異。由表4結(jié)果顯示,與空白對照組相比,模型對照組潰瘍面積,潰瘍體積均增大,具有統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.01;與模型對照組相比,復(fù)合物組1和復(fù)合物組2使用后潰瘍面積減小,具有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05。由上述試驗結(jié)果可知,復(fù)合物組效果優(yōu)于西蘭花組,且猴頭菇、姜黃、木香及西蘭花4種成分復(fù)合效果最佳。
表3 復(fù)合物對胃黏膜慢性模型大鼠體重的影響單位:g
表4 復(fù)合物對胃黏膜慢性模型大鼠的影響
胃蛋白酶原可在電泳中被分離為7個同工酶原。pH 5時,電泳向陽極遷移最快的5個組分(胃蛋白酶原1~5)的免疫學(xué)特征類似,被稱為胃蛋白酶原PGⅠ。胃蛋白酶原6和胃蛋白酶原7,被稱為PGⅡ。PGⅠ和PGⅡ主要以外分泌方式排入胃腔,約1%的胃蛋白酶原可進入血液循環(huán),可作為評估胃黏膜功能的標(biāo)志物[7]。PGⅠ/PGⅡ比值對于判斷胃黏膜狀態(tài)和功能也有較高的臨床價值。胃泌素調(diào)節(jié)胃酸分泌和胃黏膜生長,主要形式是胃泌素34和胃泌素17(G17),其中G17是黏膜的有效組織形式。G17約占整個胃泌素的85%,胃泌素34約占整個胃泌素的5%~10%,目前常用的試劑盒只能檢測出G17[7]。
由表5和表6數(shù)據(jù)可知,與試驗前比較,復(fù)合物組2相對于復(fù)合物組1數(shù)據(jù)更具有統(tǒng)計學(xué)差異。即相對于猴頭菇、姜黃、木香3組分組合,猴頭菇、姜黃、木香及西蘭花復(fù)合物效果更佳。對比動物試驗結(jié)果,人體試食進一步確認(rèn)猴頭菇、姜黃、木香及西蘭花復(fù)合使用的效果及必要性。
表5 復(fù)合物對受試者胃黏膜的影響(0 d)
表6 復(fù)合物對受試者胃黏膜的影響(60 d)
由表7和表8數(shù)據(jù)可知,在進行樣品人體試食的第30天及第60 天,空白對照組存在不良反應(yīng),主要為胃腸不適;而受試者組不良反應(yīng)報告較少,均為輕微不良反應(yīng)。復(fù)合物組1和復(fù)合物組2均為溫和型,對人體的消化系統(tǒng)刺激性較弱,未造成嚴(yán)重的不良反應(yīng)。
表7 復(fù)合物對受試者不良反應(yīng)的影響(30 d)
表8 復(fù)合物對受試者不良反應(yīng)的影響(60 d)
胃通過蠕動作用和胃酸、胃蛋白酶初步分解消化食物,同時通過內(nèi)分泌功能調(diào)節(jié)食物攝入[8]。胃黏膜為胃的保護層也是胃進行消化的環(huán)境,胃黏膜健康是胃部保健的關(guān)鍵點[9-10]。猴頭菇、西蘭花、姜黃及木香,在胃黏膜保護方面已有多項研究,通過形成保護層,提高抗氧化能力等方面保護胃黏膜[11-13]。同時,對于幽門螺旋桿菌的抑制也有許多報道,多途徑改善慢性胃炎等胃部不適癥狀[14-16]。試驗中,通過急性及慢性動物模型,人體試食等多試驗探究猴頭菇、西蘭花、姜黃及木香的組合使用效果。研究表明,猴頭菇、西蘭花、姜黃及木香復(fù)合物效果最佳,在動物及人體試驗中均具有顯著效果。猴頭菇、姜黃、木香復(fù)合物及西蘭花單組分可以不同程度改善動物急性胃黏膜損傷,猴頭菇、姜黃、木香復(fù)合物可以改善動物慢性損傷。3組分復(fù)合物及4組分復(fù)合物的人體試食中,均無明顯不良反應(yīng),復(fù)合物效果溫和。本研究一定程度說明猴頭菇,西蘭花,姜黃及木香組合使用的必要性,也為猴頭菇,西蘭花,姜黃及木香4種植物提取物組合使用的安全性提供研究基礎(chǔ)。