閆艷華，谷守國，劉會(huì)會(huì)，周彥成，王磊，湯思凝

1.唐山市食品藥品綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心（唐山 063000）；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)評(píng)價(jià)與營養(yǎng)健康重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（唐山 063000）；3.河北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)創(chuàng)新中心（唐山 063000）；4.唐山市功能性農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院（唐山 063000）

韭菜是百合科蔥屬多年生宿根植物，是我國特有的蔬菜品種[1]。據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)和國家特色蔬菜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系調(diào)研匯總，韭菜在我國種植面積常年約40萬 hm2（600萬畝），是所有蔬菜中分布最廣的種類[2]。其營養(yǎng)豐富且有一定的藥用價(jià)值，富含維生素、纖維素、碳水化合物等，利于潤腸通便、行氣理血，深受消費(fèi)者喜愛[3]。在韭菜的生產(chǎn)、流通、貯藏過程中，常見病害有灰霉病、疫病、枯萎病、銹病、白粉病、黃葉病、干尖、白絹病、莖枯病、軟腐病等真菌病害，會(huì)嚴(yán)重降低產(chǎn)量和質(zhì)量，常使用有機(jī)殺菌劑，即通過使用化學(xué)物質(zhì)來抑制或殺滅細(xì)菌、真菌等微生物來保證其產(chǎn)量和品質(zhì)[4]。有機(jī)殺菌劑活性范圍廣、作用位點(diǎn)多，是減少韭菜腐爛、病害的有效手段，也是流通貯藏期間廣泛使用的保鮮措施[5]。殺菌劑在保護(hù)韭菜生長(zhǎng)、提高產(chǎn)量和保障儲(chǔ)存質(zhì)量等方面發(fā)揮至關(guān)重要的作用，但殺菌劑殘留不可避免地會(huì)對(duì)韭菜造成污染，從而對(duì)動(dòng)物體及人體健康產(chǎn)生不良影響。近年來，我國食品安全抽檢結(jié)果社會(huì)公示中頻繁曝光韭菜中以殺菌劑腐霉利超標(biāo)為主的農(nóng)藥污染問題[6-7]，造成消費(fèi)者產(chǎn)生“毒韭菜”的認(rèn)識(shí)。

殺菌劑類農(nóng)藥殘留問題社會(huì)關(guān)注度高[8]，各個(gè)國家和地區(qū)分別發(fā)布并執(zhí)行的涉及農(nóng)藥安全和限量標(biāo)準(zhǔn)有千余項(xiàng)。我國亦有一系列的法律法規(guī)的實(shí)施增強(qiáng)農(nóng)藥的監(jiān)管力度，如《中華人民共和國食品安全法》《中華人民共和國農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法》《中華人民共和國農(nóng)藥管理?xiàng)l例》等?，F(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對(duì)近160種殺菌劑的最大殘留限量（MRL）進(jìn)行規(guī)定[9]。

1 韭菜中常用殺菌劑概況

殺菌劑通常是指能夠有效防治和殺死病原微生物的化學(xué)藥劑，按作用方式不同可分為內(nèi)吸性殺菌劑和保護(hù)性殺菌劑等。殺菌劑類型見表1。內(nèi)吸性殺菌劑能被植物葉、莖、根、種子吸收進(jìn)入植物體內(nèi)，具有治療和保護(hù)作用，如多菌靈、甲霜靈等；保護(hù)性殺菌劑不能被植物內(nèi)吸并傳導(dǎo)、存留，不能用來防治深入植物體內(nèi)的病害，只具有保護(hù)作用，如代森錳鋅、福美雙、百菌清等[10]。韭菜中常用的殺菌劑按防治病害種類分類主要有腐霉利、嘧霉胺、烯酰嗎啉、異菌脲等，見表2。

表1 殺菌劑類型

表2 韭菜中常用殺菌劑

2 韭菜中常用殺菌劑前處理技術(shù)

韭菜的基質(zhì)十分復(fù)雜，對(duì)于韭菜的殺菌劑農(nóng)藥殘留檢測(cè)而言，樣品的前處理技術(shù)尤其關(guān)鍵，傳統(tǒng)的樣品前處理技術(shù)不易實(shí)現(xiàn)基質(zhì)成分的有效凈化，對(duì)農(nóng)藥檢測(cè)容易產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，對(duì)分析儀器的靈敏度造成很大影響，進(jìn)而影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性[11]?，F(xiàn)階段，前處理技術(shù)在朝著省時(shí)省力、高效、試劑消耗少、環(huán)境影響小等方面發(fā)展。常用的前處理方法有固相萃取、固相微萃取、分散固相萃取、液液萃取、凝膠滲透色譜及QuEChERS法等[12]。

2.1 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)（solid phase extraction，SPE）是近些年發(fā)展的前處理技術(shù)，其原理是利用液相色譜法的分離原理。先使用固體吸附劑選擇性吸附農(nóng)藥成分，除去樣品基質(zhì)和干擾化合物，再使用洗脫劑將農(nóng)藥洗脫下來的方法[13]。該技術(shù)減少樣品預(yù)處理過程，操作簡(jiǎn)單、回收率高、重現(xiàn)性好，可與其他儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，越來越廣泛地應(yīng)用于殺菌劑類農(nóng)殘檢測(cè)中，但固相萃取柱大多是一次性的，雖然凈化效果好，但樣品用量較大時(shí)成本較高，濃縮過程耗時(shí)久[14]。

張群等[15]將韭菜樣品的乙腈提取物經(jīng)石墨化炭黑/氨基混合型固相萃取柱凈化、洗脫及濃縮定容后進(jìn)行檢測(cè)，氯氟氰菊酯的回收率在81.7%～99.1%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差在2.5%～8.7%之間，該方法的檢出限為0.001 mg/kg，定量限為0.01 mg/kg，能滿足韭菜中氯氟氰菊酯殘留檢測(cè)的要求。Xia等[16]應(yīng)用Oasis MCX固相萃取柱進(jìn)行樣品的提取和凈化，結(jié)合超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)樣品中的13種殺菌劑，回收率為80%～101%，檢測(cè)限為0.1～1.0 g/L。徐秋生等[17]選用乙腈均質(zhì)法提取，固相萃取柱凈化對(duì)蔬菜樣品進(jìn)行處理，敵菌靈和苯甲酰脲類殺菌劑殘留的平均回收率在83.5%～105.6%之間，適用于蔬菜中上述2類殺菌劑農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。周瑤等[18]采用氨基固相萃取柱前處理凈化技術(shù)，建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定6種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑殘留的方法，該方法操作簡(jiǎn)單，能滿足果蔬中6種甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑殘留量的檢測(cè)要求，重復(fù)性好。

2.2 固相微萃取技術(shù)

固相微萃取技術(shù)（solid phase microextraction，SPME）是20世紀(jì)90年代初期在固相萃取技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的集萃取、濃縮和進(jìn)樣于一體的新型樣品前處理技術(shù)。根據(jù)萃取方式以及萃取裝置不同分為多種萃取方法，可與多種檢測(cè)技術(shù)聯(lián)用，具有操作簡(jiǎn)單、省時(shí)安全、靈敏度高、選擇性好、無需溶劑等顯著優(yōu)點(diǎn)。SPME依靠萃取纖維取代填料實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物的分離，萃取纖維可以重復(fù)利用，不再是一次性消耗品。但由于SPME需要使用特殊裝置，僅可針對(duì)少數(shù)部分農(nóng)藥殘留使用，而且雖然材料可以重復(fù)利用，但所需裝置價(jià)格比較昂貴，成本依然較高，導(dǎo)致目前在農(nóng)殘檢測(cè)分析上并沒有SPE使用普遍[19]。劉苗等[20]使用固相微萃取技術(shù)進(jìn)行前處理后，測(cè)出蔬菜中有機(jī)磷類和擬除蟲菊酯類共23種農(nóng)藥殘留。Munitz等[21]采用固相微萃取前處理方法，研究嘧菌酯和唑菌胺酯在藍(lán)莓中的殘留檢測(cè)，該方法選擇性好、準(zhǔn)確度和靈敏度高。崔宗巖等[22]用優(yōu)化后的固相微萃取方法對(duì)161種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，將固相微萃取裝置加入內(nèi)標(biāo)樣品的頂空瓶，加入SPME纖維并伸出萃取頭，對(duì)萃取纖維進(jìn)行檢測(cè)，平均回收率為60.0%～110.0%，該方法的重復(fù)性較好，說明固相微萃取方法具有較好的處理效果。

2.3 液-液萃取技術(shù)

液-液萃?。╨iquid liquid extraction，LLE）是早期農(nóng)產(chǎn)品傳統(tǒng)的前處理技術(shù)，常被用于殺菌劑殘留的檢測(cè)，主要利用各農(nóng)藥在不同溶劑中溶解度的不同進(jìn)行提取，具有簡(jiǎn)便、提取效率比較高的優(yōu)勢(shì)。該方法操作過程使用的提取溶劑包含乙酸乙酯、二氯甲烷、甲酸、甲醇、乙腈、丙酮等。全國多數(shù)檢測(cè)機(jī)構(gòu)目前仍舊選用食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》中有機(jī)磷類和有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留的檢測(cè)前處理方法，采用乙腈提取韭菜中的農(nóng)藥及其代謝物以確證韭菜中殺菌劑等農(nóng)藥殘留[23]。該處理方法萃取效率較高，處理時(shí)間較短，但前處理方法的凈化方式稍有不足，特別是提取液的鹽分含量過高、色素殘留多、基質(zhì)復(fù)雜等缺點(diǎn)易影響儀器的檢測(cè)。液-液萃取如果有針對(duì)性地配合其他條件或技術(shù)可以更好完成農(nóng)殘?zhí)崛艋?。有研究利用低溫富集液液萃取結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)樣品中15種農(nóng)藥殘留，結(jié)果也達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求[24]，充分證明液-液萃取搭配低溫等條件時(shí)可以更有效滿足農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)要求。

2.4 凝膠滲透色譜技術(shù)

凝膠滲透色譜（gel permeation chromatography，GPC）分離是一種物理過程，普遍用于有機(jī)污染物的分析上，能夠很好分離有機(jī)大分子物質(zhì)，技術(shù)使用范圍廣、重現(xiàn)性好、柱子重復(fù)利用和自動(dòng)化程度高。但對(duì)于基質(zhì)比較復(fù)雜的樣本，凝膠滲透色譜對(duì)分子大小相近的雜質(zhì)難以去除；采用大內(nèi)徑GPC柱檢測(cè)時(shí)需要大量有機(jī)溶劑，操作難度大。凝膠滲透色譜在韭菜類色素含量高的樣品具有良好的凈化效果，有效降低基質(zhì)干擾，提高殺菌劑類農(nóng)藥殘留前處理效率。

劉國平等[25]將韭菜樣品經(jīng)過乙腈均質(zhì)提取，經(jīng)凝膠滲透色譜法凈化后，進(jìn)樣口選用超高惰性襯管，能顯著降低甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、水胺硫磷等強(qiáng)極性農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)。封利會(huì)等[26]使用凝膠滲透色譜結(jié)合氣相色譜質(zhì)譜儀檢測(cè)蔬果中41種農(nóng)藥殘留，樣品用乙腈-乙酸鈉緩沖液提取，平均回收率范圍為71.0%～125.4%，該方法凈化效果和準(zhǔn)確度都符合檢測(cè)要求。

2.5 QuEChERS 技術(shù)

QuEChERS（quick easy cheap effective rugged safe）是2002年首次被美國科學(xué)家Lehotay等提出的一種基于分散固相萃取技術(shù)而形成的樣品前處理技術(shù)，技術(shù)原理與固相萃取相似，都是利用吸附劑填料與基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，吸附雜質(zhì)從而達(dá)到除雜凈化的目的。GB 23200.113—2018《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》的發(fā)布標(biāo)志著QuEChERS技術(shù)為標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法在國內(nèi)得到應(yīng)用。該標(biāo)準(zhǔn)采用QuEChERS前處理方法，可以一針同時(shí)檢測(cè)208種農(nóng)藥殘留，前處理過程簡(jiǎn)單高效，且回收率較好，基本在80%以上[16]。與SPE相比，QuEChERS更符合當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)形勢(shì)。QuEChERS的出現(xiàn)對(duì)前處理過程起到很重要影響，也出現(xiàn)很多基于QuEChERS技術(shù)而優(yōu)化的方法，包括改變pH、更換配鹽、改變?nèi)軇┑取＿@些方法具有簡(jiǎn)單、高效、快速、安全、價(jià)格低廉等顯著優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于韭菜農(nóng)藥多殘留的檢測(cè)分析與快速篩查工作中[27-28]。

羅璇[29]應(yīng)用液氮深冷破碎樣品，通過添加分析物保護(hù)劑建立基于QuEChERS-GC-MS/MS檢測(cè)韭菜中60種農(nóng)藥殘留的方法。新方法基質(zhì)效應(yīng)更低，免去處理空白基質(zhì)的操作，方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度及標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍等指標(biāo)均符合分析要求，在制備樣品，高通量檢測(cè)，準(zhǔn)確定量方面有優(yōu)勢(shì)。仲光鳳等[30]使用QuEChERS法對(duì)韭菜樣品進(jìn)行前處理，結(jié)合GC-MS/MS進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法進(jìn)行定量。結(jié)果顯示，甲拌磷、腐霉利等6種農(nóng)藥在相應(yīng)的范圍內(nèi)線性關(guān)系均良好，相關(guān)系數(shù)均在0.99以上，6種農(nóng)藥的回收率為87.3%～112.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為7.6%～16.8%，說明該方法靈敏、高效、準(zhǔn)確度高，適合韭菜中多數(shù)農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)。

3 韭菜中常用殺菌劑殘留檢測(cè)分析方法

隨著現(xiàn)代分析化學(xué)技術(shù)的提高，隨著質(zhì)譜技術(shù)的普及和其他預(yù)處理技術(shù)的快速發(fā)展，質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)被廣泛用于農(nóng)藥殘留的檢測(cè)中。韭菜中殺菌劑殘留檢測(cè)主要采用氣相色譜法、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和免疫分析技術(shù)等。

3.1 氣相色譜法

氣相色譜法（gas chromatography，GC）是以氣體為流動(dòng)相，通過裝有填充劑的色譜柱對(duì)樣品進(jìn)行分離測(cè)定，具有操作簡(jiǎn)便、選擇性高、分離效能好、靈敏度高、檢測(cè)限低等特點(diǎn)。對(duì)于易揮發(fā)且不會(huì)發(fā)生分解的殺菌劑均可采用氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，可以實(shí)現(xiàn)一次進(jìn)樣、待測(cè)組分得到完全分離的效果，是目前最常用的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法之一。但也存在缺陷，如對(duì)熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥組分難以分析以及在復(fù)雜基質(zhì)中受干擾使結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性等。

王曉春等[31]采用QuEChERS前處理技術(shù)與氣相色譜相結(jié)合，建立4種蔬果中16種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。通過對(duì)色素含量高、基質(zhì)復(fù)雜樣品的方法學(xué)評(píng)價(jià)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組分在2.0～100 μg/L范圍內(nèi)線性良好，樣品平均加標(biāo)回收率為70.1%～119.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.23%～5.2%。該方法具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、高效的特點(diǎn)，可用于蔬菜及水果樣品中有機(jī)氯殘留的快速篩查和定量檢測(cè)。洪澤淳等[32]利用氣相色譜法建立韭菜中16種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，該方法回收率在77.0%～107.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3%～3.2%。該方法具有溶劑用量少、操作簡(jiǎn)單、效率高等特點(diǎn)。

3.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS），是將氣相色譜儀與質(zhì)譜儀串聯(lián)起來，將氣相色譜儀的高效分離能力與質(zhì)譜儀獨(dú)特的選擇性、靈敏度、相對(duì)分子質(zhì)量和分子結(jié)構(gòu)鑒定能力相結(jié)合，以達(dá)到待測(cè)物的檢測(cè)具有定性定量等目的。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，特別是在農(nóng)藥代謝物、降解物的檢測(cè)和多農(nóng)藥殘留檢測(cè)等方面具有顯著優(yōu)勢(shì)。

張權(quán)等[33]將韭菜試樣經(jīng)乙腈提取，采用石墨化炭黑/氨基柱（PC/NH2）凈化后，用GC-MS/MS選擇離子監(jiān)測(cè)掃描模式（SIM）進(jìn)行檢測(cè)，基質(zhì)匹配溶液外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，目標(biāo)物在65.2～1 043.0 ng/mL范圍內(nèi)呈良好的線性相關(guān)。He等[34]采用QuEChERS前處理技術(shù)與氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法結(jié)合檢測(cè)韭菜中213種農(nóng)藥殘留，采用商業(yè)提取鹽包，分散固相萃取吸附劑包簡(jiǎn)化提取程序。大部分農(nóng)藥的檢出限為2 μg/kg，相關(guān)系數(shù)R2＞0.99，平均回收率為70.0%～120.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜20%，該方法的準(zhǔn)確度與靈敏度符合韭菜中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。朱作為等[35]采用QuEChERS快速前處理方法凈化，GC-MS/MS測(cè)定，建立測(cè)定韭菜中百菌清等共51種農(nóng)藥殘留的三重串聯(lián)四極桿氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法，運(yùn)用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行定性確證和定量分析，提高方法靈敏度，獲得較低的檢出限。

3.3 液相色譜法

由于氣相色譜技術(shù)的一些局限，20世紀(jì)70年代液相色譜法（liquid chromatography，LC）逐步發(fā)展起來，尤其適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、強(qiáng)極性、離子型及大分子化合物的檢測(cè)分析，在樣品的分析中具有載液流速快，重復(fù)使用色譜柱，不破壞樣品，易于回收等特點(diǎn)。已成為有機(jī)殺菌劑殘留檢測(cè)不可缺少的重要方法。

王潔蓮等[36]建立同時(shí)測(cè)定韭菜、大蔥中多菌靈、吡蟲啉等7種農(nóng)藥殘留的液相色譜分析方法。樣品經(jīng)乙腈提取，氨基固相萃取小柱凈化，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，在0.03～4.0 mg/L的范圍內(nèi)，7種農(nóng)藥的線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，檢出限為0.006～0.05 mg/kg。禹雪薇[41]提出高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定果蔬中10種防腐殺菌劑的方法，這10種防腐殺菌劑的方法檢出限在0.02～0.05 mg/L。研究為食品風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)領(lǐng)域?qū)κ卟酥修r(nóng)藥殘留的篩查和確證、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、定量仲裁等研究提供參考依據(jù)。

3.4 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（liquid chromatographytandem mass spectrometry，LC-MS/MS），是將液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)接起來用液相色譜將待測(cè)物質(zhì)相繼分離，通過質(zhì)譜儀對(duì)檢測(cè)物質(zhì)的分離離子的質(zhì)量片段進(jìn)行分析檢測(cè)的方法，用于分析熱穩(wěn)定性差、分子量較大、濃度低、難以用氣相色譜分析的化合物，具備明顯的多殘留檢測(cè)分析優(yōu)勢(shì)。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法是一種很有利用價(jià)值的高效率、高可靠性的農(nóng)藥殘留分析技術(shù)，具有檢測(cè)靈敏度高、選擇性好、可同時(shí)進(jìn)行定性定量、能夠提供待測(cè)組分相對(duì)分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)信息等優(yōu)點(diǎn)。

孫潔等[37]建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合QuEChERS前處理技術(shù)同時(shí)測(cè)定韭菜樣品中100種農(nóng)藥殘留的方法。方法平均回收率為71.1%～115.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.6%～17.0%，該方法高效且穩(wěn)定，適用于韭菜農(nóng)殘的快速檢測(cè)和篩查。黃和勇等[38]利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立韭菜中12種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，樣品經(jīng)乙腈提取，固相萃取柱凈化，C18色譜柱分離，電噴霧正離子源（ESI+）掃描，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）進(jìn)行測(cè)定，其檢出限為0.02～0.6 μg/kg，滿足檢測(cè)要求。

3.5 免疫分析法

免疫分析法是以抗原抗體可特異性結(jié)合原理為基礎(chǔ)的分析方法，通過對(duì)半抗原或抗體的標(biāo)記，利用標(biāo)記物的生物、物理或化學(xué)放大作用，對(duì)樣品中特定的農(nóng)藥殘留物進(jìn)行定性定量檢測(cè)。免疫分析具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、高通量測(cè)定等優(yōu)勢(shì)，且不需要貴重儀器，可簡(jiǎn)化前處理過程，目前多用于農(nóng)藥殘留的快速定性篩查中。

柳雙等[39]基于多菌靈多克隆抗體建立直接競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法檢測(cè)果蔬中的多菌靈殘留，該方法校正曲線的檢測(cè)限為0.30±0.15 μg/L，靈敏度為2.70±0.30 μg/L。倪萍[40]利用單克隆抗體建立腐霉利在韭菜中殘留的檢測(cè)方法，該方法線性好，并制備膠體金免疫層析試紙條，該試紙條檢測(cè)韭菜中腐霉利的最低限為1 μg/kg，具有較高的靈敏度。

4 結(jié)語

作為分析工作中非常重要的一環(huán)，有機(jī)殺菌劑前處理技術(shù)不斷發(fā)展，其中固相萃取和QuEChERS方法以其優(yōu)越的重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性和高效性被越來越廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)的樣品前處理步驟。固相萃取技術(shù)凈化效果好，但有材料成本較高、操作復(fù)雜、效率較低的劣勢(shì)。QuEChERS技術(shù)優(yōu)勢(shì)有回收率高、通用性廣、溶劑使用量少、環(huán)保、高通量，但也存在凈化效果較固相萃取差、基質(zhì)效應(yīng)明顯、靈敏度不高等問題。后續(xù)應(yīng)繼續(xù)朝著快速簡(jiǎn)便、節(jié)能環(huán)保、準(zhǔn)確度高、高通量方向開展研究。在殺菌劑的檢測(cè)分析方面，色譜法與質(zhì)譜法聯(lián)用技術(shù)已成為當(dāng)下農(nóng)殘檢測(cè)的重要方法，這種檢測(cè)方法檢測(cè)靈敏度高、選擇性好、定性定量準(zhǔn)確，盡管對(duì)儀器設(shè)備要求較高、不適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等，但仍是應(yīng)用廣泛、高效可靠的農(nóng)藥殘留分析技術(shù)。

韭菜屬鱗莖類蔬菜，含有含硫化合物且色素含量高。其硫化物性質(zhì)與農(nóng)藥的性質(zhì)相似，容易與農(nóng)藥一起被提取出來干擾分析測(cè)定。在建立檢測(cè)方法時(shí)，不僅應(yīng)該考慮目標(biāo)物的性質(zhì)，還要兼顧樣品的特點(diǎn)?，F(xiàn)有的農(nóng)殘檢測(cè)前處理技術(shù)不成熟或者受有效材料等問題局限，在實(shí)際應(yīng)用中存在不足。為提高韭菜中農(nóng)殘?zhí)崛⌒剩瑴p小基質(zhì)效應(yīng)，樣品前處理應(yīng)從2個(gè)方向發(fā)展：一是開拓前處理材料的功能化研究，提高萃取能力和選擇性；二是增加萃取形式，提高前處理效率。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，科研人員也在積極探討各種高效、先進(jìn)的前處理方法，不斷開發(fā)新的檢測(cè)技術(shù)，以滿足當(dāng)前農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)殘檢測(cè)及生產(chǎn)安全的迫切需求。