王建坤劉曉超劉鑫姜莉李隆旭邱占奎王澤鴻馮黎霞付海濱

(1.沈陽海關(guān)，遼寧 沈陽 110179；2.大連海關(guān)，遼寧 大連 116001；3.廣州海關(guān)技術(shù)中心，廣東 廣州 5106236；4.沈陽海關(guān)技術(shù)中心，遼寧 沈陽 110016)

番茄褐色皺果病毒Tomato brown rugose fruit virus(ToBRFV)主要為害番茄、辣椒等茄科作物[1]，2014年在約旦第1次鑒定出來[2]，目前全世界53個國家和地區(qū)已有報道[3]。本文對番茄褐色皺果病毒的發(fā)生和危害、主要種子貿(mào)易國家番茄褐色皺果病毒檢疫措施進行綜述，并提出防治和脫毒處理建議。

1 發(fā)生與危害

番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)分類學上歸于帚狀病毒科(Virgaviridae)、煙草花葉病毒屬(Tobamovirus)，主要寄主為番茄和辣椒，還可侵染茄子、龍葵、煙草、藜麥等。目前已報道病毒發(fā)生的國家和地區(qū)包括墨西哥、美國、比利時、法國、荷蘭、以色列、德國、土耳其、約旦、希臘、英國、巴勒斯坦、意大利、西班牙、中國(已根除)等[3，4]。

番茄褐色皺果病毒主要為害寄主植物的葉片、莖稈、花萼和果實等部位。病毒入侵后，嫩葉、頂芽會出現(xiàn)花葉的癥狀；葉片會出現(xiàn)變窄、畸形的癥狀；莖稈和萼片會顯露壞死條斑；花萼早期會產(chǎn)生著色、褐變，后期極易出現(xiàn)干枯癥狀；果實會出現(xiàn)黃色斑點、斑塊，后期變成褐色，果實可變形，直至壞死，對果實的品質(zhì)和產(chǎn)量有極大影響，該病毒能夠隨植物種子進行遠距離傳播[5]，已被列入我國的進境植物檢疫性有害生物名錄[6]。

注：圖片來源于CABI，2024。

注：圖片來源于CABI，2022。

2 主要種子貿(mào)易國家和地區(qū)檢疫措施

番茄褐色皺果病毒擴散迅速，已經(jīng)引起國際間的高度重視，包括我國在內(nèi)的歐盟、美國、日本、韓國、澳大利亞、新西蘭、土耳其、俄羅斯等多個國家和地區(qū)都相繼采取緊急措施，防止其傳入。

2.1 國際檢疫措施

《國際植物保護公約》要求，國家官方植物保護組織必須監(jiān)測植株生長情況，準確了解當?shù)刂仓晟L各個階段的疫情情況，強化疫情監(jiān)測調(diào)查，發(fā)現(xiàn)可疑情況的，及時采樣鑒定。同時，國家官方植物保護組織要及時報告有害生物的發(fā)生以及擴散情況，對出口的植物、植物產(chǎn)品進行檢疫，發(fā)放符合目的地國家或者地區(qū)要求的植物檢疫證書，以防止其通過國際間的運輸進行傳播。為防止有害生物傳入和擴散，各國可按照適用的法律、法規(guī)及其他相關(guān)規(guī)定，對植物、植物產(chǎn)品及其他檢疫物的輸入指定和采取植物檢疫措施，如檢查、檢疫處理或者禁止入境?！斗N子的國際運輸》(國際植物檢疫措施標準第38號)指出，種子與其他的植物繁殖材料一樣，存在傳帶有害生物的風險，當種子被引進到一個新的環(huán)境中，其傳帶有害生物，并導致有害生物定殖和擴散可能性很高。國家官方植物保護組織應當施行與有害生物風險結(jié)果相符合的植物檢疫措施，以防止檢疫性有害生物隨種子進行傳播和擴散。要按照國際植物檢疫措施標準《有害生物風險分析框架》(ISPM 2)、《檢疫性有害生物風險分析》(ISPM 11)和《限定的非檢疫性有害生物風險分析》(ISPM 21)，針對性地開展進出境種子攜帶有害生物的風險分析，以及確定后續(xù)要采取的植物檢疫措施。植物檢疫措施可以施用于作物生長及種子生產(chǎn)、加工過程中的各個時期。各項植物檢疫措施可以單獨或聯(lián)合施行，以降低有害生物風險傳播風險[7]。

2.2 我國檢疫措施

《中華人民共和國進出境動植物檢疫法》要求防止植物病毒等有害生物傳入、傳出國境[8]。海關(guān)總署于2021年發(fā)布了《關(guān)于防止番茄褐色皺果病毒隨番茄和辣椒屬種子傳入的公告》，要求從種植期間就要加強對番茄、辣椒種子的管理控制。入境種子需符合以下3種情況，并在植物檢疫證書上予以注明：種子輸出國家或地區(qū)沒有該有害生物發(fā)生；種子輸出國家或地區(qū)部分地區(qū)雖然發(fā)生植物疫情，但按照第4號國際植物檢疫措施標準《建立非疫區(qū)的要求》建立了該有害生物的非疫區(qū)，且出口的種子產(chǎn)自非疫區(qū)；輸出國家或地區(qū)發(fā)生植物疫情，并且也沒有按要求建立非疫區(qū)，國家植物保護組織在種植期間實施田間監(jiān)測，確認在種植期間沒有疫情發(fā)生，并在出口前對該批種子抽樣，使用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應方法或?qū)崟r熒光逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應方法進行檢測，確認不帶番茄褐色皺果病毒[1]。

2.3 歐盟檢疫措施

歐盟委員會對該有害生物高度重視，其下屬的衛(wèi)生與食品安全總司分別于2020年、2021年、2023年下達了“EU第2020/1191”“EU第2021/74”和“EU第2023/1032”共3個歐盟指令，發(fā)布并2次修訂了防止疫情傳入并擴散的檢疫措施，主要涉及進口要求和檢疫措施，將番茄褐色皺果病毒列入歐洲和地中海國家植物保護組織A2類檢疫性有害生物名錄，進行嚴格管控，要求對從歐盟成員國以外的國家或地區(qū)入境的番茄和辣椒種子，應由主管部門或主管部門正式監(jiān)督下的專業(yè)機構(gòu)對種子進行取樣，并檢測是否攜帶番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)。取樣按照《貨物抽樣方法》(國際植物檢疫措施標準第31號)執(zhí)行，≤1000粒種子取樣量為28粒種子、1001～3000粒種子取樣量為58粒種子、3001～30000粒種子取樣量為284粒種子、>30000粒種子取樣量為1000粒種子，針對種子樣品，歐盟認可的檢測方法只有實時熒光RT-PCR方法，酶聯(lián)免疫吸附測定法和常規(guī)RT-PCR不允許用于種子中番茄褐色皺果病毒的檢測。同時，要求在植物檢疫證書上附加聲明：種子的母本植株是在根據(jù)適當時間進行的番茄褐色皺果病毒官方檢查確認已知未發(fā)生番茄褐色皺果病毒的生產(chǎn)基地生產(chǎn)，種子或母本植株按照(EU)2023/1032要求，進行官方取樣和檢測，不攜帶番茄褐色皺果病毒，并注明母本植株生產(chǎn)基地、注冊號。對于源自第三國的對番茄褐色皺果病毒具有抗性的番茄種子、辣椒種子，在植物檢疫證書中要進行聲明。

2.4 美國檢疫措施

美國農(nóng)業(yè)部動植物檢疫局(APHIS)于2019年發(fā)布了控制番茄和辣椒2種植物進口措施的聯(lián)邦法令，認為番茄和辣椒是ToBRFV的2種主要寄主，以上2種作物的種子是番茄褐色皺果病毒傳入的高風險途徑，鑒于種子生產(chǎn)的全球性和種子的跨國運輸，其分布范圍可能比報道的還要大，有必要采取措施限制番茄褐色皺紋果病毒(ToBRFV)的主要寄主植物番茄和辣椒的種子進口。根據(jù)美國農(nóng)業(yè)部動植物檢疫局(APHIS)的要求，輸往美國的種子不能帶有該有害生物，要求種植輸往美國的番茄、辣椒種子的地區(qū)不能發(fā)生疫情，對于輸往美國的種子，要求在植物檢疫證書上附加聲明：該批番茄種子和/或辣椒種子的具體產(chǎn)地，該地區(qū)經(jīng)過國家植物保護機構(gòu)認定沒有番茄褐色皺紋果病毒；或該批番茄和/或辣椒種子的代表性樣品經(jīng)過官方檢測，不攜帶番茄褐色皺果病毒[10]。

2.5 日本檢疫措施

日本農(nóng)林水產(chǎn)省(MAFF)對《植物保護法實施條例》附表2-2第36項規(guī)定的現(xiàn)行措施進行修改，對于來自所有國家和地區(qū)的辣椒和番茄種子，包括一般貿(mào)易、寄遞和個人攜帶渠道，都要進行番茄褐色皺果病毒檢測，并將結(jié)果體現(xiàn)到植物檢疫證書中。檢測方法：在收獲期，隨機從番茄或辣椒植株中抽取樣本，重點為有疑似癥狀的植株，通過常規(guī)逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應等方法進行檢測，證明不帶有番茄褐色皺果病毒；在出口前，采用國際種子聯(lián)盟協(xié)議建議的方法，采取實時熒光逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應方法進行檢測，證明不帶有番茄褐色皺果病毒。取樣數(shù)量：根據(jù)國際種子檢測協(xié)會(ISTA)的要求，隨機從批次中抽取樣品，種子粒數(shù)≥46000粒時，取樣4600粒進行病毒檢測，種子數(shù)量<46000粒，抽采10%的種子進行檢測。經(jīng)檢測證明不帶有番茄褐色皺果病毒，輸出國國家植物保護組織需要在植物檢疫證書上附加聲明：該批種子符合《植物保護法實施條例》(MAFF第73/1950號法令)附表2-2第36項(親本植物適用的檢測方法)或(種子實時熒光RT-PCR檢測方法)[11]。

2.6 韓國檢疫措施

韓國農(nóng)林、畜產(chǎn)、食品部(MAFRA)對進出境種子攜帶番茄褐色皺紋果病毒(ToBRFV)進行了有害生物風險分析，增補修訂了檢疫措施。對來自中國、土耳其、法國、德國、荷蘭等35個國家和地區(qū)的辣椒屬和番茄種子，要求進行RT-PCR檢測，具體要求為種子出口前進行檢測。檢測樣品量為4600粒以上，子樣品不得少于400粒。對于總量在46000粒以下的小批量種子，抽檢的樣品應不得低于總量的10%。同時在植物檢疫證書上附加聲明：出口前通過PCR檢測證明該種子未感染番茄褐色皺果病毒。后期又在重點關(guān)注國家名單中增加阿根廷、俄羅斯等6個國家和地區(qū)[12]。

2.7 其他主要種子貿(mào)易國家檢疫措施

澳大利亞要求每批次入境的番茄和辣椒種子采用逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應方法檢測種子是否攜帶番茄褐色皺果病毒，相關(guān)情況需要植物檢疫證書上予以明確，以降低番茄褐色皺果病毒有可能造成的生物安全風險。新西蘭要求進境番茄和辣椒種子都要自番茄褐色皺果病毒的非疫區(qū)或非疫產(chǎn)地，或最少抽取3000粒樣品采用官方認可的方法進行檢測，不得檢出發(fā)現(xiàn)該病毒。土耳其對德國、墨西哥、約旦、以色列、意大利等國家和地區(qū)輸土耳其的番茄與辣椒種子提出了明確的檢疫措施，要求不得攜帶番茄褐色皺果病毒，相關(guān)種子必須經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈反應方法檢測，番茄褐色皺果病毒不得檢出，植物檢疫證書中必須注明以上情況，方可入境。俄羅斯對所有入境番茄和辣椒的果實和種子進行植物病毒檢測，重點為番茄褐色皺果病毒。阿根廷鑒于番茄褐色皺果病毒(ToBRFV)極有可能隨種子國際貿(mào)易傳入，將該病毒列入監(jiān)管有害生物名錄，并將該病毒的發(fā)生國家列為重點關(guān)注國家，提出具體的植物檢疫要求，要求進境番茄和辣椒種子不得帶有番茄褐色皺果病毒[13]。

3 對策建議

我國是番茄、辣椒等農(nóng)作物種子制種大國，也是番茄和辣椒的主要生產(chǎn)國，每年番茄、辣椒種子進出口量極大，作物播種面積廣泛，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)安全面臨嚴重威脅。鑒于機械傳播是番茄褐色皺果病毒最主要的傳播方式[14]，因此，建議防控病毒的首要任務是加強檢疫與田間管理，加強進出境檢疫，切斷傳播途徑，并配合脫毒技術(shù)研究。

3.1 加強田間管理

番茄褐色皺紋果病毒可通過汁液摩擦、移栽、修剪、噴藥等農(nóng)事操作傳播，加強田間管理舉措尤為重要。確保使用的種子無毒，進行定期土壤消毒，發(fā)現(xiàn)受感染或疑似感染植株時，建議及時清除。在農(nóng)事操作前應洗手并消毒，佩戴一次性手套，操作過程中定時對人員和工具進行消毒。污染的設備可用家用漂白劑(0.5%次氯酸鈉)、2%的過硫酸氫鉀三鹽復合物、10%磷酸三鈉或者20%脫脂奶粉進行消毒[14]。

3.2 加強進出境檢疫

對進境種子及其證書進行嚴格檢疫和審核，檢出番茄褐色皺果病毒或發(fā)現(xiàn)證書不符合要求的，依據(jù)中華人民共和國動植物檢疫法做退運或銷毀處理[1]。

3.3 加強疫情和信息監(jiān)測

加強外繁制種等種子基地的疫情監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)問題，及早根除。通過國外官方植物保護組織網(wǎng)站、學術(shù)期刊等渠道，搜集國外番茄褐色皺紋果病發(fā)生信息和檢疫政策變化，

3.4 加強脫毒處理技術(shù)的研究

脫毒技術(shù)的研究，有助于防止番茄褐色皺果病毒隨進出口種子傳入、傳出，促進我國種子的出口和優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源的引入，保護我國生態(tài)安全。相關(guān)國外研究發(fā)現(xiàn)，使用磷酸三鈉和鹽酸處理帶毒種子，能夠有效殺滅其攜帶的病毒，經(jīng)過特定濃度和時長的處理后，經(jīng)生物學和血清學檢測，有效率達100%，且有助于種子的萌發(fā)[15]。目前，國內(nèi)尚無番茄褐色皺果病毒脫毒處理技術(shù)的研究，有必要進行加強。