摘 要 為了探究未成年圈養(yǎng)大熊貓(Ailuropoda melanoleuca)選擇性攝食的風(fēng)味機(jī)制,根據(jù)未成年圈養(yǎng)大熊貓攝食行為特點(diǎn)、熟悉的食物香氣和喜歡的食物味道,自主研制出一種未成年圈養(yǎng)大熊貓的專用風(fēng)味劑。經(jīng)專業(yè)人員的嗅感和口感品評,該風(fēng)味劑可以改善未成年圈養(yǎng)大熊貓所食竹葉的主要?dú)馕逗臀兜馈?022年6月—2023年3月,用刺黑竹(Chimonobambusa purpurea)、斑苦竹(Pleioblastus maculatus)、金佛山方竹(Chimonobambusa utilis)和八月竹(Ch. szechuanensis)的竹葉飼喂7只(3 ,4♀)1. 5歲段(15~20月齡)圈養(yǎng)大熊貓幼仔、6只(2 ,4♀)2. 5歲段(27~30月齡)和6只(3 ,3♀)4. 0歲段(45~52月齡)圈養(yǎng)大熊貓亞成體。試驗(yàn)組竹葉噴霧風(fēng)味劑,對照組竹葉不噴。試驗(yàn)期間,每天早飼和午飼時(shí)段各進(jìn)行30 min的飼喂試驗(yàn)并相互交換兩組竹葉所放位置。通過未成年圈養(yǎng)大熊貓的自由選擇攝食試驗(yàn)及其攝食過程的錄像回放,觀測試驗(yàn)組和對照組竹葉的攝食先后順序、最長連續(xù)攝食時(shí)間、攝食總時(shí)長、攝食竹枝數(shù)量和竹葉攝食量。結(jié)果表明:(1)風(fēng)味劑可顯著提升1. 5歲段受試大熊貓幼仔最先攝食次數(shù)的占比;(2)風(fēng)味劑可顯著增加1. 5歲段和2. 5歲段受試未成年大熊貓攝食竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間,平均增加率分別為339. 32%和102. 59%;(3)風(fēng)味劑可顯著增加1. 5歲段和2. 5歲段受試未成年大熊貓攝食竹葉的總時(shí)長,平均增加率分別為310. 45%和129. 91%;(4)風(fēng)味劑可顯著提高1. 5歲段、2. 5歲段和4. 0歲段受試未成年大熊貓攝食竹枝數(shù)量,平均增食率分別為186. 20%、80. 87%和103. 12%;(5)風(fēng)味劑可顯著提高1. 5歲段、2. 5歲段和4. 0歲段受試未成年大熊貓攝食竹葉量,平均增食率分別為154. 21%、118. 02%和109. 77%。因此,專用風(fēng)味劑可以增強(qiáng)竹葉對未成年圈養(yǎng)大熊貓的誘食性,具有顯著的增食竹葉效果。
關(guān)鍵詞:大熊貓;未成年;風(fēng)味劑;竹葉;嗅感品評;口感品評;飼喂效果
中圖分類號:S864. 4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號:2310 - 1490(2024)- 02 - 0276 - 15
DOI:10.12375/ysdwxb.20240206
風(fēng)味劑或稱調(diào)味劑、誘食劑,因有調(diào)味和誘食的作用,早已在人的食品和多種家養(yǎng)動(dòng)物的飼料中廣泛應(yīng)用[1]6-7。動(dòng)物主要通過嗅覺和味覺感知飼料發(fā)出的風(fēng)味(氣味和味道)信息,以抉擇與自己風(fēng)味偏好一致或相近的飼料攝入[2]。不同種類的動(dòng)物,嗅覺和味覺的靈敏度有所不同,喜好的飼料香氣和味道都有所差異,攝食行為模式也不盡一致,風(fēng)味劑的原料組成、風(fēng)味類型、起效濃度和使用方式方法等因動(dòng)物種類不同而異[1]152-190。
大熊貓(Ailuropoda melanoleuca)屬我國特有的珍稀獸類,深受全球人民的喜愛。近些年,隨著養(yǎng)殖技術(shù)的不斷創(chuàng)新,大熊貓的人工飼養(yǎng)種群數(shù)量呈連續(xù)增長態(tài)勢,2018年底增至548只[3];2020年底達(dá)到630只,其中在我國本土有571只,以國際合作方式在其他19個(gè)國家有59只[4]。哺乳期特別是哺乳后期(0. 5~1. 5歲或斷奶)的大熊貓幼仔生長發(fā)育快,在人工飼養(yǎng)條件下流質(zhì)性母乳或奶粉還原乳不能滿足日益增長的營養(yǎng)需求,需要逐步學(xué)會(huì)攝食固態(tài)性食物,如特制窩窩頭、蘋果、胡蘿卜、竹筍、竹葉和竹稈等,其生活環(huán)境、個(gè)體生理和心理等都會(huì)發(fā)生較大變化,如何幫助大熊貓幼仔平穩(wěn)、較快地進(jìn)行食物過渡和食性轉(zhuǎn)換是此階段飼養(yǎng)管理的工作重點(diǎn)[5],也是值得探究的科研課題。
根據(jù)未成年圈養(yǎng)大熊貓攝食行為的特點(diǎn)、熟悉的食物香氣和喜歡的食物味道,在研究圈養(yǎng)大熊貓幼仔喜食的母乳和“盆盆奶”的風(fēng)味特征與香氣成分[6?9]基礎(chǔ)上,模擬未成年圈養(yǎng)大熊貓喜食食物的風(fēng)味特征,采用多種食品級單體風(fēng)味原料,經(jīng)過多次配方篩選與生產(chǎn)工藝流程的改進(jìn),在國內(nèi)外率先自主研制出未成年圈養(yǎng)大熊貓專用風(fēng)味劑,于2022年6月在中國大熊貓保護(hù)研究中心臥龍神樹坪基地(以下簡稱“臥龍神樹坪基地”)和2022年10月—2023年3月在中國大熊貓保護(hù)研究中心都江堰基地(以下簡稱“都江堰基地”)進(jìn)行了飼喂試驗(yàn),測試了未成年圈養(yǎng)大熊貓專用風(fēng)味劑的實(shí)際飼喂效果。
1 材料與方法
1. 1 供試材料
1. 1. 1 竹種及部位選取
刺黑竹(Chimonobambusa purpurea)產(chǎn)于四川省崇州市文井江鎮(zhèn),竹齡3 年,葉齡1~2 年;斑苦竹(Pleioblastus maculatus)產(chǎn)于四川省都江堰市蒲陽街道辦原向峨鄉(xiāng),竹齡3年以上,葉齡1~2年;金佛山方竹(Chimonobambusa utilis)和八月竹(Ch. szechua?nensis)均產(chǎn)于四川省汶川縣三江鎮(zhèn),竹齡2年,葉齡2個(gè)月~1年2個(gè)月。上述4種竹子均為人工栽培,竹葉新鮮,葉片舒展,呈嫩綠色至深綠色,均屬都江堰基地和臥龍神樹坪基地每次飼喂試驗(yàn)時(shí)的當(dāng)期常喂竹種。試驗(yàn)時(shí)從購回的同捆竹子中挑選出新鮮、干凈和枝繁葉茂的竹子頂部(包括竹稈、所有竹枝及其葉片和葉柄)作為試驗(yàn)用材,砍去無枝葉或枝葉較少的部分竹稈。隨機(jī)分成竹子種類和根數(shù)相同、竹稈粗細(xì)和枝葉數(shù)量大致相近的對照組和試驗(yàn)組,分別對兩組稱質(zhì)量,記錄為喂前質(zhì)量。試驗(yàn)組竹子在竹稈底部和中部竹節(jié)位置貼上口序紙作為標(biāo)記,便于觀察、識(shí)別,向試驗(yàn)組的竹葉噴霧風(fēng)味劑,而對照組竹子的竹節(jié)不貼口序紙,竹葉也不噴風(fēng)味劑。
1. 1. 2 專用風(fēng)味劑
專用風(fēng)味劑是由多種食品級呈香和呈味原料調(diào)制而成,奶香,味甜,液態(tài),噴霧使用。
1. 2 受試動(dòng)物
受試19只未成年大熊貓圈養(yǎng)于臥龍神樹坪基地和都江堰基地,臨床健康狀況良好,基本信息詳見表1。日糧以竹子為主,以特制窩窩頭(配合性精飼料)、胡蘿卜和蘋果為輔,自由采食和飲水,圈舍內(nèi)隨意活動(dòng),按照臥龍神樹坪基地和都江堰基地既定的飼養(yǎng)規(guī)程進(jìn)行日常飼喂和管理,在每次飼喂試驗(yàn)開始前先由固定的飼養(yǎng)員照常喂給一些規(guī)定的食物,并非在嚴(yán)重饑餓狀態(tài)下進(jìn)行飼喂試驗(yàn)。
1. 3 自由選擇攝食試驗(yàn)方法
清掃(洗)試驗(yàn)用大熊貓圈舍的內(nèi)舍,然后間隔擺放事先備好的對照組和試驗(yàn)組竹子,開啟攝像機(jī)錄像,放入受試大熊貓,關(guān)閉試驗(yàn)用內(nèi)舍的所有出入口,全部人員離開內(nèi)舍,鎖門,任大熊貓自由選擇攝食。試驗(yàn)歷時(shí)30 min,結(jié)束后放出受試大熊貓,從內(nèi)舍中取出受試大熊貓食后剩余的對照組和試驗(yàn)組竹子,分別稱質(zhì)量,記錄為食后質(zhì)量,然后觀測竹枝被食枝數(shù)。試驗(yàn)期間在每天的早飼時(shí)段(09:00—10:00)和午飼時(shí)段(14:00—15:00)各進(jìn)行1次試驗(yàn)。每次飼喂試驗(yàn)都要相互交換對照組和試驗(yàn)組竹子的擺放位置,以消除兩組竹子的擺放位置對受試大熊貓攝食兩組竹葉的影響。對照組或試驗(yàn)組竹子在試驗(yàn)內(nèi)舍里的擺放位置距受試大熊貓入口較遠(yuǎn)者即為下文中的“遠(yuǎn)處”,距入口較近者即為“近處”?!扒嗦丁焙汀扒嗷ā?、“茅茅”和“寶元”、“青寶”和“青仔”、“滿滿”和“南小月”、“巧月”和“皓月”多數(shù)飼喂試驗(yàn)都是2只一起進(jìn)行,但有時(shí)一只幼仔或亞成體在樹上休息等原因不能被喚回,也進(jìn)行了單只的飼喂試驗(yàn)。此外,其他幼仔或亞成體因個(gè)體較大而試驗(yàn)內(nèi)舍面積相對較小,只能進(jìn)行單只試驗(yàn)。通過現(xiàn)場記錄和錄像回放,記錄每次30 min試驗(yàn)過程中大熊貓最先攝食組別(對照組或試驗(yàn)組)的次數(shù)和連續(xù)攝食時(shí)間。專用風(fēng)味劑飼喂未成年圈養(yǎng)大熊貓?jiān)囼?yàn)的地點(diǎn)、日期、時(shí)間和供試竹種等信息見表2。
1. 4 竹葉風(fēng)味的品評方
從選好的、即將進(jìn)行飼喂試驗(yàn)的供試竹枝上隨機(jī)多點(diǎn)摘取若干整片新鮮竹葉,所采樣品可代表受試大熊貓當(dāng)次試驗(yàn)所食的竹葉。竹葉樣品在裝有冰袋的保溫箱中運(yùn)輸,在冰箱中-18 ℃保存。鑒于研究人員已對大熊貓所食的斑苦竹鮮葉[10]、刺黑竹鮮葉和八月竹鮮葉[11]進(jìn)行過氣味品評,因此,僅以金佛山方竹鮮葉為例,研究對照組和試驗(yàn)組竹葉的風(fēng)味差異情況。
將采集的金佛山方竹葉隨機(jī)分成葉片數(shù)量相同、大小相近的對照組和試驗(yàn)組,試驗(yàn)組葉片在葉柄部貼口序紙作為標(biāo)記,然后向整個(gè)葉片噴霧風(fēng)味劑,噴霧的方法和劑量同飼喂試驗(yàn)。每位專業(yè)品評小組成員單獨(dú)品評,先進(jìn)行嗅感氣味品評,后進(jìn)行口感味道品評,具體方法參見文獻(xiàn)[6,10?11]。氣味的相對強(qiáng)弱采用10分定義的標(biāo)度方法計(jì)分:“0”表示“不存在的”;“2”表示“微微的”;“4”表示“輕微的”;“6”表示“明確的”;“8”表示“顯著的”;“10”表示“非常顯著的”[10?11]。每個(gè)氣味品評指標(biāo)的最終得分結(jié)果是去掉1個(gè)最高評分和1個(gè)最低評分后的算術(shù)平均值。
1. 5 受試大熊貓攝食竹枝的計(jì)數(shù)方法
若竹枝上的竹葉被食,可肉眼觀察到葉片、葉柄和竹枝上遺留的咬切痕跡,據(jù)此可計(jì)數(shù)出受試大熊貓攝食的竹枝數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)只計(jì)從竹稈的籜環(huán)上直接長出的竹枝,不計(jì)從大竹枝上分出的小細(xì)枝。凡竹枝上有1個(gè)以上(含1個(gè))葉片留有的咬切痕跡,均計(jì)為1個(gè)攝食竹枝。
1. 6 數(shù)據(jù)處理與分析
最先攝食次數(shù)的占比=最先攝食次數(shù)/同一位置所放的總次數(shù)×100%。
最長連續(xù)攝食時(shí)間是指圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體連續(xù)攝食竹葉的最長時(shí)間,包括嗅聞、摘葉、咬切、咀嚼和吞咽等一系列完整的攝食行為鏈,如此往復(fù)循環(huán),其間沒有游走、攀爬、休息和排便等非攝食行為。動(dòng)物對某種食物不間斷地連續(xù)攝食的時(shí)間越長,可說明越喜食該食物。
品評或測試指標(biāo)的算術(shù)平均值=有效品評或每次測試指標(biāo)所得數(shù)據(jù)之和/有效品評或測試次數(shù)。
試驗(yàn)組測試指標(biāo)的增加數(shù)(量)=試驗(yàn)組測試指標(biāo)數(shù)據(jù)-對照組測試指標(biāo)數(shù)據(jù)。
試驗(yàn)組測試指標(biāo)的增加率=試驗(yàn)組測試指標(biāo)的增加數(shù)(量)/對照組測試指標(biāo)數(shù)據(jù)×100%。
竹葉攝食量=竹子的喂前質(zhì)量-竹子的食后質(zhì)量。
平均每只受試大熊貓的攝食竹葉量或攝食竹枝數(shù)=攝食竹葉量或攝食竹枝數(shù)/受試大熊貓只數(shù)。
試驗(yàn)組和對照組竹子的食后質(zhì)量均不包含竹子在30 min試驗(yàn)期間內(nèi)自然蒸發(fā)的粗水分質(zhì)量。
試驗(yàn)組和對照組的所得數(shù)據(jù)通過GraphPadPrism 8. 0. 2軟件進(jìn)行配對t 檢驗(yàn),顯著水平α=0. 05,極顯著水平α=0. 01。
2 結(jié)果
2. 1 供試金佛山方竹葉的風(fēng)味品評
2. 1. 1 嗅感品評結(jié)果
經(jīng)專業(yè)人員對金佛山方竹整片鮮葉的嗅感品評,對照組竹葉和噴有風(fēng)味劑的試驗(yàn)組竹葉的整體氣味指標(biāo)、主要香氣指標(biāo)和主要韻調(diào)指標(biāo)品評結(jié)果見表3。整體氣味指標(biāo)品評結(jié)果顯示,試驗(yàn)組竹葉氣味強(qiáng)度和透發(fā)性的品評得分均值明顯高于對照組(plt;0. 05)。香氣指標(biāo)品評結(jié)果顯示,奶香、青香分別在試驗(yàn)組和對照組竹葉中得分最高,試驗(yàn)組竹葉的奶香、甜氣(plt;0. 01)及油脂氣(plt;0. 05)均顯著高于對照組;而對照組竹葉的青香明顯強(qiáng)于試驗(yàn)組(plt;0. 05)。韻調(diào)指標(biāo)品評結(jié)果顯示,試驗(yàn)組竹葉的多汁感略強(qiáng)于對照組,但差異不顯著(pgt;0. 05),可能因噴有風(fēng)味劑所致;對照組竹葉的新鮮感和嫩感明顯強(qiáng)于試驗(yàn)組,差異分別為極顯著(plt;0. 01)和顯著(plt;0. 05)。
2. 1. 2 口感品評結(jié)果
專業(yè)人員對金佛山方竹鮮葉的咀嚼口感品評結(jié)果表明:對照組竹葉具有明顯的青葉味和木質(zhì)感,微苦,干澀;試驗(yàn)組竹葉具有明顯的甜味和木質(zhì)感,青葉味、苦味和澀味均有所減弱,略帶奶香味。
2. 2 最先攝食的觀察
通過對風(fēng)味劑飼喂試驗(yàn)中未成年圈養(yǎng)大熊貓自由選擇最先攝食對照組或試驗(yàn)組竹葉的現(xiàn)場觀察,結(jié)合飼喂試驗(yàn)錄像回放的確認(rèn),結(jié)果見表4。通過對7只1. 5歲段(15~20月齡)圈養(yǎng)大熊貓幼仔攝食4種竹葉的共計(jì)73次飼喂試驗(yàn)觀察,發(fā)現(xiàn)最先攝食噴有風(fēng)味劑的試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)計(jì)56次,而最先攝食未噴風(fēng)味劑的對照組竹葉的次數(shù)計(jì)17次,最先攝食試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)比最先攝食對照組竹葉的次數(shù)多39次。由于試驗(yàn)內(nèi)舍面積較小,大熊貓常有“就近取食”的行為習(xí)慣,并非先嗅聞、比較對照組和試驗(yàn)組竹葉氣味后再選擇性攝食,大熊貓幼仔最先攝食試驗(yàn)組或?qū)φ战M竹葉與其所放的位置可能密切相關(guān)。若以放于“遠(yuǎn)處”的試驗(yàn)組竹葉被最先攝食的頻次或占比來評價(jià)風(fēng)味劑的誘導(dǎo)攝食效果較為客觀、合理,因?yàn)榇笮茇堄鬃谢騺喅审w進(jìn)入試驗(yàn)內(nèi)舍后,首先與“近處”的對照組竹葉相遇,然后才是“遠(yuǎn)處”的試驗(yàn)組竹葉。在73次試驗(yàn)中,放于“遠(yuǎn)處”的試驗(yàn)組竹葉共計(jì)32次,其中有18次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比為56. 25%;而放于“遠(yuǎn)處”的對照組竹葉共計(jì)41次,其中僅有3次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比僅為7. 32%。試驗(yàn)組和對照組的這種占比經(jīng)配對t 檢驗(yàn)后,發(fā)現(xiàn)兩組間差異極顯著(plt;0. 01),由此可見,專用風(fēng)味劑對1. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔具有明顯的誘導(dǎo)攝食效果。
通過對6 只2. 5 歲段(27~30 月齡)圈養(yǎng)大熊貓亞成體攝食4種竹葉的共計(jì)39次單只飼喂試驗(yàn)觀察,發(fā)現(xiàn)最先攝食試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)計(jì)22次,而最先攝食對照組竹葉的次數(shù)計(jì)17次,最先攝食試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)比最先攝食對照組竹葉的次數(shù)多5次。在39 次試驗(yàn)中,放于“遠(yuǎn)處”的試驗(yàn)組竹葉共計(jì)17次,其中有3次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比為17. 65%;而放于“遠(yuǎn)處”的對照組竹葉共計(jì)22次,其中也有3 次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比為13. 64%。雖然試驗(yàn)組的這種占比高于對照組,但經(jīng)配對t 檢驗(yàn)后,發(fā)現(xiàn)兩組間的差異不顯著(pgt;0. 05),可能與就近取食的攝食行為習(xí)慣有關(guān)。
通過對6 只4. 0 歲段(45~52 月齡)圈養(yǎng)大熊貓亞成體攝食2種竹葉的共計(jì)52次飼喂試驗(yàn)觀察,發(fā)現(xiàn)最先攝食試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)計(jì)30次,而最先攝食對照組竹葉的次數(shù)計(jì)22次,最先攝食試驗(yàn)組竹葉的次數(shù)比最先攝食對照組竹葉的次數(shù)多8次。在52次試驗(yàn)中,放于“遠(yuǎn)處”的試驗(yàn)組竹葉共計(jì)24次,其中5次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比為20. 83%;而放于“遠(yuǎn)處”的對照組竹葉共計(jì)28次,其中3次是被最先攝食,在總次數(shù)中的占比僅為10. 71%。雖然試驗(yàn)組的這種占比高于對照組,但經(jīng)配對t 檢驗(yàn)后,發(fā)現(xiàn)兩組間的差異不顯著(pgt;0. 05),可能也與就近取食的攝食行為習(xí)慣有關(guān)。
2. 3 最長連續(xù)攝食時(shí)間
通過對圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體連續(xù)攝食對照組或試驗(yàn)組竹葉的最長時(shí)間觀測,可得知圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體更喜食哪個(gè)組的竹葉,這一指標(biāo)在30 min的測試歷程中具有唯一性,可作為評價(jià)風(fēng)味劑飼喂效果的一種重要指標(biāo)。通過96次飼喂試驗(yàn)全程錄像的回放觀測,所得最長連續(xù)攝食時(shí)間數(shù)據(jù)及其統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表5。
由表5可知,通過對7只1. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔共計(jì)65次的錄像回放觀測,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓連續(xù)攝食試驗(yàn)組竹葉的最長時(shí)間為900. 08 s,而連續(xù)攝食對照組竹葉的最長時(shí)間為204. 88 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間均值比對照組長695. 20 s,試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間的平均增加率達(dá)339. 32%。由此可見,專用風(fēng)味劑可大幅度增加1. 5歲段受試大熊貓對4種竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間。
通過對6只2. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體共計(jì)31次的錄像回放觀測,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓連續(xù)攝食試驗(yàn)組竹葉的最長時(shí)間為638. 42 s,而連續(xù)攝食對照組竹葉的最長時(shí)間為315. 13 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間均值比對照組長323. 29 s,試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間的平均增加率達(dá)102. 59%。由此可見,專用風(fēng)味劑可大幅度增加2. 5歲段受試大熊貓對3種竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間。
若將上述2個(gè)年齡階段共計(jì)96次的錄像回放觀測數(shù)據(jù)合并計(jì)算,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓連續(xù)攝食試驗(yàn)組竹葉的最長時(shí)間為815. 58 s,連續(xù)攝食對照組竹葉的最長時(shí)間僅為240. 48 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間均值比對照組長575. 10 s,試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間的平均增加率達(dá)239. 15%。結(jié)果表明專用風(fēng)味劑可大幅度增加1. 5歲段和2. 5歲段受試大熊貓對4種竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間。
2. 4 攝食總時(shí)長
動(dòng)物在一定時(shí)間內(nèi)有食物比選的條件下對某種食物攝食總時(shí)間越長,也可說明越喜食該食物,因此,通過對圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體攝食對照組和試驗(yàn)組竹葉總時(shí)間長短的觀測,也可得知圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體比較喜食哪個(gè)組的竹葉。在30 min的測試歷程中,除“青露”2次、“青花”1次、“茅茅”3次和“寶元”1次均只攝食試驗(yàn)組竹葉外,其余均間斷性攝食對照組或試驗(yàn)組竹葉,不時(shí)穿插非攝食行為。攝食總時(shí)長是若干完整攝食行為鏈的時(shí)間之和,其中包括最長連續(xù)攝食時(shí)間,這也是評價(jià)風(fēng)味劑飼喂效果的另一重要指標(biāo)。
通過對7只1. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔共計(jì)65次飼喂試驗(yàn)的錄像回放觀測,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉的總時(shí)長為1 236. 02 s,攝食對照組竹葉的總時(shí)長為301. 14 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長均值比對照組長934. 88 s,試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長的平均增加率達(dá)310. 45%(表5)。由此可見,專用風(fēng)味劑可大幅度增加1. 5歲段受試大熊貓對4種竹葉的攝食總時(shí)長。
通過對6只2. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體共計(jì)31次飼喂試驗(yàn)的錄像回放觀測,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉的總時(shí)長為1 065. 81 s,攝食對照組竹葉的總時(shí)長為463. 58 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長均值比對照組長602. 23 s,試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長的平均增加率達(dá)129. 91%(表5)。由此可見,專用風(fēng)味劑也可大幅度增加2. 5歲段受試大熊貓對3種竹葉的攝食總時(shí)長。
若將上述2個(gè)年齡階段共計(jì)96次飼喂試驗(yàn)的錄像回放觀測數(shù)據(jù)合并計(jì)算,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉的總時(shí)長為1 181. 05 s,攝食對照組竹葉的總時(shí)長僅為353. 59 s,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長均值比對照組長827. 46 s,試驗(yàn)組竹葉的攝食總時(shí)長的平均增加率達(dá)234. 02%。結(jié)果表明專用風(fēng)味劑也可大幅度增加1. 5歲段和2. 5歲段受試大熊貓對4種竹葉的攝食總時(shí)長。
2. 5 攝食竹枝數(shù)
圈養(yǎng)大熊貓幼仔或亞成體攝食的竹枝數(shù)可作為評價(jià)風(fēng)味劑飼喂效果的一種直觀和輔助性指標(biāo)。通過對15只未成年圈養(yǎng)大熊貓共計(jì)96次飼喂試驗(yàn)的攝食竹枝的計(jì)數(shù),所得數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析詳見表6。
由表6可知,經(jīng)7只1. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔的44次飼喂試驗(yàn)攝食竹枝的計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹枝數(shù)為78. 16枝,攝食對照組竹枝數(shù)為27. 31枝,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食量為50. 85枝,試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食率達(dá)186. 20%。由此可見,專用風(fēng)味劑可大幅度提高1. 5歲段受試大熊貓對刺黑竹、斑苦竹、金佛山方竹和八月竹的攝食竹枝數(shù)。
經(jīng)6只2. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體的39次飼喂試驗(yàn)攝食竹枝的計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹枝數(shù)為124. 62枝,攝食對照組竹枝數(shù)為68. 90枝,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食量為55. 72 枝,試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食率為80. 87%。由此可見,專用風(fēng)味劑可提高2. 5歲段受試大熊貓對斑苦竹、刺黑竹、八月竹和金佛山方竹的攝食竹枝數(shù)。
經(jīng)2只4. 0歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體的13次飼喂試驗(yàn)攝食竹枝的計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)分析,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹枝數(shù)為105. 62枝,攝食對照組竹枝數(shù)為52. 00枝,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食量為53. 62 枝,試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食率達(dá)103. 12%。由此可見,專用風(fēng)味劑也可大幅度提高4. 0歲段受試大熊貓對斑苦竹的攝食竹枝數(shù)。
若將上述3 個(gè)年齡階段的96 次飼喂試驗(yàn)觀測數(shù)據(jù)合并計(jì)算,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹枝數(shù)為100. 75 枝,攝食對照組竹枝數(shù)為47. 55枝,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食量為53. 20枝,試驗(yàn)組竹枝數(shù)的平均增食率達(dá)111. 88%。結(jié)果表明專用風(fēng)味劑可大幅度提高未成年圈養(yǎng)大熊貓對刺黑竹、斑苦竹、金佛山方竹和八月竹的攝食竹枝數(shù)。
2. 6 竹葉攝食量
竹葉攝食量是評價(jià)風(fēng)味劑飼喂效果的關(guān)鍵指標(biāo)。通過19 只未成年圈養(yǎng)大熊貓共計(jì)119 次為期30 min的飼喂試驗(yàn),所得數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析見表7。
由表7可知,經(jīng)7只1. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔攝食4種竹葉的共計(jì)47次飼喂試驗(yàn)測定,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉為269. 36 g,攝食對照組竹葉為105. 96 g,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的平均增食量為163. 40 g,試驗(yàn)組竹葉的平均增食率達(dá)154. 21%。由此可見,專用風(fēng)味劑可大幅度提高1. 5歲段受試大熊貓對刺黑竹、斑苦竹、金佛山方竹和八月竹的竹葉攝食量。
經(jīng)6只2. 5歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體攝食4種竹葉的共計(jì)39次單只飼喂試驗(yàn)測定,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉為524. 36 g,攝食對照組竹葉為240. 51 g,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的平均增食量為283. 85 g,試驗(yàn)組竹葉的平均增食率達(dá)118. 02%。由此可見,專用風(fēng)味劑也可大幅度提高2. 5歲段受試大熊貓對斑苦竹、刺黑竹、八月竹和金佛山方竹的竹葉攝食量。
經(jīng)6只4. 0歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體攝食2種竹葉的共計(jì)33次飼喂試驗(yàn)測定,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉為468. 79 g,攝食對照組竹葉為223. 48 g,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的平均增食量為245. 31 g,試驗(yàn)組竹葉的平均增食率達(dá)109. 77%。由此可見,專用風(fēng)味劑也可大幅度提高4. 0歲段受試大熊貓對八月竹、斑苦竹的竹葉攝食量。
若將上述3個(gè)年齡階段的飼喂試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)合并計(jì)算,發(fā)現(xiàn)平均每次試驗(yàn)每只受試大熊貓攝食試驗(yàn)組竹葉為408. 23 g,攝食對照組竹葉為182. 65 g,經(jīng)配對t 檢驗(yàn),兩組間差異極顯著(plt;0. 01)。試驗(yàn)組竹葉的平均增食量為225. 58 g,試驗(yàn)組竹葉的平均增食率達(dá)123. 50%。結(jié)果表明專用風(fēng)味劑可大幅度提高未成年圈養(yǎng)大熊貓對刺黑竹、斑苦竹、金佛山方竹和八月竹的竹葉攝食量。
3 討論
從上述結(jié)果可知,專用風(fēng)味劑可改變竹葉原有的一些主要?dú)馕逗臀兜?。通過對1. 5歲段、2. 5歲段和4. 0 歲段未成年圈養(yǎng)大熊貓多次短期4 種常喂竹葉自由選擇的攝食試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)專用風(fēng)味劑對1. 5 歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔具有一定的誘導(dǎo)攝食作用,可顯著增加1. 5 歲段圈養(yǎng)大熊貓幼仔和2. 5 歲段圈養(yǎng)大熊貓亞成體對竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間和攝食總時(shí)長,可顯著提高1. 5 歲段、2. 5 歲段和4. 0 歲段未成年圈養(yǎng)大熊貓的攝食竹枝數(shù)和竹葉攝食量。
3. 1 未成年圈養(yǎng)大熊貓攝食竹葉的風(fēng)味機(jī)制探討
試驗(yàn)組竹葉在噴霧風(fēng)味劑后,增強(qiáng)了竹葉氣味的強(qiáng)度和透發(fā)性,利于氣味擴(kuò)散,便于受試未成年圈養(yǎng)大熊貓嗅覺感知,還增添了顯著的奶香香氣,奶香香氣屬未成年大熊貓熟悉并喜歡的香氣類型[6],可激發(fā)未成年大熊貓攝食竹葉的欲望,誘導(dǎo)受試未成年圈養(yǎng)大熊貓前去攝食,使得“遠(yuǎn)處”試驗(yàn)組竹葉被最先攝食的次數(shù)占比高于“遠(yuǎn)處”的對照組竹葉(表4),由此可見,專用風(fēng)味劑具有一定的誘導(dǎo)攝食作用。大熊貓具有甜味受體基因[12?13],圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體喜食的母乳[6]、“盆盆奶”[7]、特制窩窩頭[14]、蘋果和胡蘿卜[15]等食物均有明顯的甜味,這是大熊貓幼仔和亞成體對食物中甜味敏感的具體例證。試驗(yàn)組竹葉在噴霧風(fēng)味劑之后滿足了受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體對甜味的味覺偏好,也減少了竹葉原有的苦味和澀味對受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體攝食的負(fù)面影響,會(huì)被受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體認(rèn)知為安全且樂意攝食,因此受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體大幅度地增加對試驗(yàn)組竹葉的最長連續(xù)攝食時(shí)間和攝食總時(shí)長(表5),大幅度地增加攝食竹枝數(shù)(表6)和竹葉攝食量(表7),而較少地選擇位置相鄰的對照組竹葉攝食。
3. 2 風(fēng)味劑飼喂效果的影響因素
從表5、表6和表7可知,有些指標(biāo)的觀測結(jié)果出現(xiàn)一定程度的差異,可能是受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體的年齡、性別、個(gè)體、供試竹種、飼喂試驗(yàn)時(shí)期和地點(diǎn)等不同所致。如表7中1. 5歲段受試圈養(yǎng)大熊貓幼仔對試驗(yàn)組竹葉的平均增食率為154. 21%,2. 5 歲段亞成體為118. 02%,4. 0 歲段亞成體為109. 77%,呈逐步下降趨勢,可能是隨著未成年圈養(yǎng)大熊貓的年齡增長,該風(fēng)味劑的誘食效應(yīng)減弱,換言之,該風(fēng)味劑對初步學(xué)習(xí)攝食竹葉的大熊貓幼仔而言,誘食效果更佳。表6中“漫漫”(♀)和“深深”(♀)為一對雌性雙胞胎,在相同環(huán)境條件下每天早飼或午飼時(shí)段輪換進(jìn)行1次單只飼喂試驗(yàn),試驗(yàn)組斑苦竹枝的平均增食率分別為130. 28%和91. 15%,相差較大,可能由個(gè)體差異引起。表5 中“青寶”(♀)和“青仔”( )為一對異性雙胞胎,在完全相同的環(huán)境條件下二者一起進(jìn)行飼喂試驗(yàn),通過攝食過程的錄像回放觀測,發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組竹葉最長連續(xù)攝食時(shí)間的平均增加率分別為160. 06% 和85. 47%,相差近1倍,可能由性別不同引起。表7 中“ 漫漫”在2022 年10月31日—2022年11月7日先后用斑苦竹和刺黑竹進(jìn)行單只飼喂試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)斑苦竹葉和刺黑竹葉的平均增食率分別為85. 71% 和181. 25%,相差1 倍多,可能由竹種不同引起。
本研究用4種常喂竹葉噴霧風(fēng)味劑的方法,對7只1. 5歲段、6只2. 5歲段和6只4. 0歲段未成年圈養(yǎng)大熊貓進(jìn)行飼喂試驗(yàn),用多項(xiàng)指標(biāo)評價(jià)了風(fēng)味劑的飼喂效果,取得了差異顯著的試驗(yàn)結(jié)果,證明了食物風(fēng)味在圈養(yǎng)大熊貓幼仔和亞成體選擇性攝食中的重要性,開啟了大熊貓攝食風(fēng)味機(jī)制的新探索,為解決大熊貓不愿攝食或攝食不足的實(shí)際問題提供了新思路和新方法,仍需詳盡和深入地試驗(yàn)探究。
致謝:在專用風(fēng)味劑的研制過程中,承蒙成都大帝漢克生物科技有限公司喻麟董事長和李小兵總經(jīng)理的大力支持;西華大學(xué)食品與生物工程學(xué)院的包清彬教授、西南科技大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院的曾凡坤教授、成都大帝漢克生物科技有限公司的李松柏高級工程師、鄧虹高級工程師、李志忠工程師及趙仁仟同志多次參加風(fēng)味品評;在專用風(fēng)味劑的飼喂試驗(yàn)中得到中國大熊貓保護(hù)研究中心魏榮平教授級高級工程師的悉心指導(dǎo),譚成彬、吳凱、徐翔、童建華、湯濤、潘超、衡科和瞿祖鳳等同仁的參與和幫助,以及吳勁旭老師核定了供試竹種的學(xué)名,在此一并深表謝意!
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