羅艷菊 謝林艷 劉涵 劉魯峰 何麗蓮 李富生

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2024.10.037

摘要：K5菌株和ZM菌株是在30% PEG-6000脅迫下具有較強(qiáng)活性的2株甘蔗內(nèi)生菌，對其溶無機(jī)磷、分泌嗜鐵素、羧甲基纖維素酶、ACC脫氨酶、胞外多糖（EPS）的能力進(jìn)行探究，并通過發(fā)芽試驗(yàn)評價(jià)2株菌株對玉米種子萌發(fā)和幼苗生長的促進(jìn)作用。結(jié)果表明，2株甘蔗內(nèi)生菌均具備上述測定的多種功能特性。其中K5菌株具有較強(qiáng)的分泌嗜鐵素和ACC脫氨酶的能力，其嗜鐵素相對含量為0.209（培養(yǎng)3 d），ACC脫氨酶活性為3.302 U/mg；ZM菌株具有較強(qiáng)的分泌胞外多糖和溶無機(jī)磷能力，其胞外多糖分泌量為0.157 mg/mL，溶無機(jī)磷量為407.454 mg/L。此外，與清水處理的對照相比，2株菌株均能提高玉米種子的發(fā)芽勢，并且表現(xiàn)出一定的促生長效果，其中K5菌株的促生效果較好。表明2株甘蔗內(nèi)生菌均是具有促生、抗旱和產(chǎn)羧甲基纖維素酶潛力的多功能菌株，有良好的開發(fā)潛力，可為植物抗旱性的研究及生物菌肥的研制提供一定的理論依據(jù)及菌株資源。

關(guān)鍵詞：甘蔗；內(nèi)生菌；功能特性；定性；定量；發(fā)芽試驗(yàn)

中圖分類號：S566.101；S182? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）10-0268-06

收稿日期：2023-07-06

基金項(xiàng)目：云南省重大科技專項(xiàng)（編號：202202AE090021）；云南省教育廳科學(xué)研究基金（編號：2022J0286）；云南省作物生產(chǎn)與智慧農(nóng)業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室專項(xiàng)（編號：202105AG070007）。

作者簡介：羅艷菊（1998—），女，云南硯山人，碩士研究生，研究方向?yàn)楦收岱N質(zhì)資源評價(jià)與利用。E-mail：1833912990@qq.com。

通信作者：李富生，博士，教授，主要從事甘蔗資源研究與利用工作。E-mail：Lfs810@sina.com。

甘蔗（Saccharum officinarum L.）屬于禾本科甘蔗屬多年生的無性繁殖作物［1］，是世界上重要的糖料和能源作物。我國是重要的甘蔗種植國，蔗糖產(chǎn)量占食糖總產(chǎn)量的90%以上［2］。目前，有130多個(gè)國家進(jìn)行甘蔗的種植，占地約2 600萬hm2［3］。近年來，我國甘蔗種植的大部分區(qū)域逐漸向土地貧瘠、灌溉條件差、養(yǎng)分水分保持能力弱的旱坡地發(fā)展，旱地甘蔗種植面積約占甘蔗種植總面積的80%［4-5］。在這樣的條件下甘蔗種植受養(yǎng)分不足及干旱脅迫就更為嚴(yán)重，而甘蔗在其生育期內(nèi)對水肥需求大，但過多的水肥投入會使產(chǎn)投比降低，不利于甘蔗產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。如何提高甘蔗對土壤養(yǎng)分的利用率和增強(qiáng)甘蔗作物自身抗逆性來增加產(chǎn)投比以實(shí)現(xiàn)甘蔗產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，目前已成為甘蔗栽培研究領(lǐng)域急需解決的問題。

眾多研究表明，植物內(nèi)生菌能夠促進(jìn)植物的生長并提高植物的抗旱性［6-7］，而且一些菌株還能產(chǎn)羧甲基纖維素酶，具有重要的工業(yè)應(yīng)用價(jià)值［8］。植物內(nèi)生菌能通過溶磷、分泌生長素、嗜鐵素等促生長特性來促進(jìn)植物的營養(yǎng)吸收和健康生長，提高植物適應(yīng)外界不利的條件，從而提高植物的抗逆性［9-10］。Arshad等認(rèn)為，含ACC脫氨酶的微生物有助于平衡非生物脅迫下植物中產(chǎn)生的乙烯水平，從而有利于植物的生長和發(fā)育［11］。有學(xué)者認(rèn)為，接種分泌ACC脫氨酶的菌株有助于植物對N、P、K的吸收，有助于消除外界脅迫對植物生長的抑制作用［12］。谷書杰等接種分泌ACC脫氨酶的內(nèi)生菌，提高了甘蔗的抗旱性［13］。此外，楊苗研究發(fā)現(xiàn)，胞外多糖（EPS）具有獨(dú)特的保水性，具有保持土壤團(tuán)聚體穩(wěn)定性的功能，接種分泌EPS和ACC脫氨酶的促生菌能提高植物的抗旱性［14］；魏宏宇等也認(rèn)為，分泌EPS的微生物可以用來提高逆境脅迫下農(nóng)作物的抗逆能力［15］。目前國內(nèi)外對甘蔗多功能內(nèi)生菌的報(bào)道較少，篩選具有促生和抗旱潛力等多功能的內(nèi)生菌對甘蔗內(nèi)生菌的研究及甘蔗產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。

本研究以前期在30% PEG-6000處理下具有較強(qiáng)活性的2株甘蔗內(nèi)生菌為目標(biāo)菌株，探究菌株溶無機(jī)磷，分泌嗜鐵素、羧甲基纖維素酶、ACC脫氨酶、EPS，促發(fā)芽和促生長等能力，以期挖掘甘蔗內(nèi)生菌潛在的功能特性，豐富甘蔗的內(nèi)生菌資源，為后期大田試驗(yàn)的研究及生物菌肥的開發(fā)利用提供一定的理論基礎(chǔ)。

1? 材料與方法

1.1? 試驗(yàn)材料

供試菌株：由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)甘蔗研究所前期分離保存的甘蔗內(nèi)生菌，其中編號為K5的菌株是從甘蔗栽培種崖城89的根部分離所得，經(jīng)前期鑒定為考克氏菌（Kocuria），菌株登錄號為OP737815；編號為ZM的菌株是從甘蔗野生種蔗茅的根部分離所得，前期鑒定為芽孢桿菌（Bacillus），菌株登錄號為OP740361。

植物材料：玉米種子（師單8號），由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院提供。

培養(yǎng)基：LB培養(yǎng)基，NBRIP培養(yǎng)基［16］，CAS培養(yǎng)基，MKB培養(yǎng)基［17］，TSB液體培養(yǎng)基，DF液體培養(yǎng)［18］，基礎(chǔ)培養(yǎng)基［19］，羧甲基纖維素酶鑒別培養(yǎng)基［20］。

1.2? 試驗(yàn)時(shí)間和地點(diǎn)

試驗(yàn)于2023年2—6月在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院作物生產(chǎn)與智慧農(nóng)業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.3? 試驗(yàn)方法

1.3.1? 菌株溶無機(jī)磷能力的測定

定性測定：采用平板透明圈法對菌株的溶磷能力進(jìn)行測定。將 50 μL 菌株種子液接種于用打孔器打好孔（打孔器直徑0.3 cm）的NBRIP固體培養(yǎng)基中，每株菌株3個(gè)重復(fù)，于28 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10 d后根據(jù)培養(yǎng)基中透明圈的大小及可溶性指數(shù)D/d（D為透明圈大小，d為菌落直徑）來初步確定菌株的溶磷能力［21］。

定量測定：首先建立磷標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后將菌株接種于NBRIP無機(jī)磷液體培養(yǎng)基中，于搖床30 ℃、160 r/min培養(yǎng)12 d后采用鉬銻抗比色法于波長700 nm處進(jìn)行吸光度的測定，并計(jì)算菌株的溶磷量K（mg/L）=（c×V×T）/V0［22-23］。其中：c表示通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的磷濃度，mg/L；V表示定容體積，此處為50 mL；T為分取倍數(shù)，為10倍；V0表示加入發(fā)酵液的體積，為5 mL。

1.3.2? 菌株分泌嗜鐵素能力的測定

定性測定：菌株分泌嗜鐵素的定性測定參照陳佳亮等的方法［17，24］，將50 μL菌株種子液接種于打好孔（打孔器直徑0.6 cm）的CAS固體培養(yǎng)基上，于 28 ℃ 的恒溫培養(yǎng)中培養(yǎng)10 d后觀察培養(yǎng)基中菌落周圍若有橘黃色透明圈產(chǎn)生，即該菌株能分泌嗜鐵素。測定橘黃色透明圈直徑（D）和菌落直徑（d），計(jì)算可溶性指數(shù)（D/d），根據(jù)可溶性指數(shù)的大小判斷菌株分泌嗜鐵素的能力。

定量測定：采用CAS檢測法進(jìn)行菌株分泌嗜鐵素的定量測定，將菌株以1%的接種量接種于MKB液體培養(yǎng)基中，于30 ℃、160 r/min的搖床中分別培養(yǎng)2、3 d，參照趙微等的方法［25-26］于630 nm的分光光度計(jì)下測定其吸光度。用去離子水調(diào)零；菌株的光密度值記為Ds，對照記為Dr，最后計(jì)算嗜鐵素的相對含量（Ds/Dr）。

1.3.3? 菌株產(chǎn)羧甲基纖維素酶能力的測定

將菌株接種于羧甲基纖維素酶鑒別培養(yǎng)基中，28 ℃恒溫培養(yǎng)7 d后，1 mg/mL剛果紅染色60 min，1 mol/L氯化鈉溶液脫色2 min，根據(jù)透明圈的大小及可溶性指數(shù)判斷菌株產(chǎn)羧甲基纖維素酶能力的強(qiáng)弱［8，20］。

1.3.4? 菌株分泌ACC脫氨酶能力的測定

菌株接種于TSB液體培養(yǎng)基中，于28 ℃、160 r/min搖床培養(yǎng)12 h后，4 ℃，8 000 r/min離心10 min，收集菌體重懸于7.5 mL的DF液體培養(yǎng)基中，加入0.5 mol/L的ACC，28 ℃、160 r/min培養(yǎng)24 h后參照張國壯等的方法［18，27］進(jìn)行ACC脫氨酶的測定和計(jì)算。

1.3.5? 菌株產(chǎn)EPS能力的測定

利用苯酚-硫酸法和DNS法繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，將菌株種子液以4%的接種量接種于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，于30 ℃、140 r/min 搖床培養(yǎng)48 h后參照王琪的方法［19］測定菌株分泌總糖和還原糖的量，然后根據(jù)EPS含量=總糖含量-還原糖含量，計(jì)算出菌株分泌EPS的量。

1.3.6? 菌株對玉米發(fā)芽和幼苗生長的影響

選擇粒大飽滿的玉米種子，先用75%的乙醇浸泡1 min，再用2%的次氯酸鈉溶液浸泡10 min對種子進(jìn)行表面消毒［28］，后用無菌水沖洗3次，最后用吸水紙將種子表面的水分吸干備用。將目標(biāo)菌株于搖床 28 ℃、160 r/min，培養(yǎng)48 h后離心去除上清，將菌體用無菌水進(jìn)行重懸后并稀釋成濃度為1.0×107 CFU/mL 的菌液用于浸種處理，其中CK為清水浸種。對玉米種子采用不同菌液和清水分別浸種 4 h 后，放于鋪有濕潤濾紙的培養(yǎng)皿中，并于28 ℃恒溫箱中培養(yǎng)，期間每天觀察種子發(fā)芽情況，并適當(dāng)補(bǔ)充水分。第3天計(jì)算種子發(fā)芽勢，第7天計(jì)算其發(fā)芽率，第10天對玉米幼苗的株高、莖粗和主根長等農(nóng)藝性狀進(jìn)行測定。

種子發(fā)芽勢=（3 d內(nèi)種子萌發(fā)數(shù)/供試種子數(shù)）×100%；種子發(fā)芽率=（7 d內(nèi)種子萌發(fā)數(shù)/供試種子數(shù)）×100%。

1.4? 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2019和SPSS 25.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及圖表繪制。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 菌株的溶磷能力

2.1.1? 定性測定

從圖1可見，2株菌株在溶無機(jī)磷固體培養(yǎng)基上均能產(chǎn)生明顯的透明圈，說明2株菌株均具備一定的溶無機(jī)磷能力。根據(jù)表1中可溶性指數(shù)的大小判斷菌株溶無機(jī)磷的能力，其中ZM菌株的可溶性指數(shù)為3.75±0.32，大于K5的可溶性指數(shù)（3.58±0.17），可初步判斷ZM菌株溶無機(jī)磷的能力強(qiáng)于K5菌株。

2.1.2? 定量測定

圖2為菌株溶無機(jī)磷能力的定量分析（其中磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為 y=0.048 4x-0.000 4，r2=0.999 5），K5、ZM菌株有效溶無機(jī)磷的量分別為398.383、407.454 mg/L，其中ZM菌株溶無機(jī)磷能力強(qiáng)于K5菌株，與定性測定結(jié)果一致。

2.2? 菌株分泌嗜鐵素的能力

2.2.1? 定性測定

CAS固體檢測培養(yǎng)基上2株甘蔗內(nèi)生菌周圍均存在橘黃色暈圈，可初步認(rèn)為其均具備嗜鐵素合成的能力（圖3）。在相同培養(yǎng)條件和時(shí)間下，可溶性指數(shù)的值越大則說明該試驗(yàn)菌株分泌嗜鐵素的能力越強(qiáng)，可以用來初步分析菌株分泌嗜鐵素能力的強(qiáng)弱。根據(jù)表2可知，K5菌株的可溶性指數(shù)顯著大于ZM菌株，初步判斷K5菌株分泌嗜鐵素的能力強(qiáng)于ZM菌株。

2.2.2? 定量測定

采用紫外分光光度法，以分光光度計(jì)波長630 nm下的顏色反應(yīng)對2株菌株分泌嗜鐵素的能力進(jìn)行定量測定。根據(jù)As/Ar的大小來判斷菌株分泌嗜鐵素的能力，As/Ar越小，表明菌株產(chǎn)嗜鐵素量越多。從圖4可知，菌株培養(yǎng)2 d和 3 d 后嗜鐵素的相對含量（As/Ar）均為K5＜ZM且差異顯著，表明K5菌株分泌嗜鐵素的能力強(qiáng)于ZM，測定結(jié)果與定性測定結(jié)果一致。此外，在一定的時(shí)間范圍內(nèi)菌株隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，其嗜鐵素的分泌量增加。培養(yǎng)3 d后嗜鐵素相對含量為0.209。

2.3? 菌株產(chǎn)羧甲基纖維素酶的能力

圖5為菌株產(chǎn)纖維素酶的定性測定結(jié)果。經(jīng)過計(jì)算菌株可溶性指數(shù)可知，ZM菌株產(chǎn)羧甲基纖維素酶的能力微強(qiáng)于K5菌株，但差異不顯著（表3）。

2.4? 菌株分泌ACC脫氨酶的能力

2株菌株測得的ACC脫氨酶活性如圖6所示，K5、ZM菌株的ACC脫氨酶活性分別為3.302、1.520 U/mg，K5菌株的ACC脫氨酶活性顯著高于ZM菌株。

2.5? 菌株分泌EPS的能力

根據(jù)總糖和還原糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程（總糖 y=0.441 1x-0.002 3，r2=0.996；還原糖y= 0.009 8x +0.006 4，r2=0.992），計(jì)算得菌株產(chǎn)總糖、還原糖及EPS的含量。從表4可知，ZM菌株分泌EPS的能力較強(qiáng)，為0.157±0.002 mg/mL，而K5菌株EPS的分泌量僅為0.086±0.002 mg/mL，2株菌株分泌EPS的能力為ZM菌株顯著強(qiáng)于K5菌株。

2.6? 菌株對玉米種子萌發(fā)及幼苗生長的影響

由表5可知，相比于CK，K5菌株處理顯著提高了玉米種子的發(fā)芽勢、株高和主根長，ZM菌株處理也提高了玉米種子發(fā)芽勢和株高，但效果不顯著；CK、K5、ZM這3個(gè)處理對玉米的發(fā)芽率、莖粗、根冠比和鮮重?zé)o顯著影響。綜上可知，K5、ZM菌株相比于CK具有促進(jìn)玉米種子發(fā)芽勢的提高和玉米植株生長的作用，且K5菌株的促進(jìn)作用強(qiáng)于ZM菌株。圖7為玉米種子恒溫培養(yǎng)10 d后的植株生長情況，從中可以看出，經(jīng)過ZM、K5菌株處理的玉米株高明顯高于CK處理，且根系也較CK更為發(fā)達(dá)。因此認(rèn)為K5、ZM菌株具有促進(jìn)玉米種子早發(fā)芽和促進(jìn)玉米植株生長的作用。

3? 討論與結(jié)論

本研究對2株菌株溶無機(jī)磷能力進(jìn)行了定性和定量分析，結(jié)果表明，2株菌株均具有溶無機(jī)磷的能力，菌株培養(yǎng)12 d后其溶無機(jī)磷量分別為398.383、473.905 mg/L；低于尚曉靜等藍(lán)莓溶磷菌搖瓶培養(yǎng)5 d的最大溶磷量（587.31 mg/L）［22］；高于李云海等搖瓶培養(yǎng)12 d后溶磷菌的最大溶磷量（362.60 mg/L）［16］；遠(yuǎn)高于普鳳雅等的薏苡溶磷菌搖瓶培養(yǎng)5 d的最大溶磷量（62.93 mg/L）［29］。推測菌株溶磷能力的強(qiáng)弱與菌株培養(yǎng)時(shí)間的長短、 宿主植物及菌株類型等因素均有一定的關(guān)系。呂嬌嬌對菌株溶磷機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)的研究［30］，但菌株的溶磷機(jī)理較為復(fù)雜，本試驗(yàn)未進(jìn)行深入研究。此外，本研究中菌株溶磷能力的定量測定結(jié)果與定性測定結(jié)果具有一致性，但在定性測定中會因培養(yǎng)基厚度不同而影響菌株溶磷速度及效率，從而影響其透明圈的大小和溶磷能力的定性測定結(jié)果。

鐵在植物生長發(fā)育中起著重要的作用，地殼中有豐富的鐵，但可被植物利用的可溶性游離鐵離子較少，植物需要從自身或微生物合成的嗜鐵素中攝取鐵離子［31］。通常認(rèn)為Ds/Dr低于0.5的菌株分泌嗜鐵素的能力較強(qiáng)［32］，本研究的2株甘蔗內(nèi)生菌培養(yǎng)3 d的Ds/Dr分別為0.21和0.23，因此認(rèn)為本研究的2株甘蔗內(nèi)生菌具有較強(qiáng)的分泌嗜鐵素能力。此外，K5、ZM菌株培養(yǎng)2 d的Ds/Dr分別為0.29和0.37，高于培養(yǎng)3 d的Ds/Dr，表明在一定的時(shí)間范圍內(nèi)菌株分泌嗜鐵素的能力隨培養(yǎng)時(shí)間的延長而增強(qiáng)。狄義寧等從甘蔗內(nèi)生菌中篩選得到12株功能菌可分泌異羥肟酸類、兒茶酚類、有羧酸類的嗜鐵素［23］，而本研究中2株甘蔗內(nèi)生菌分泌嗜鐵素的類型還有待進(jìn)一步研究和驗(yàn)證。

ACC脫氨酶在微生物促進(jìn)植物生長及提高植物抗旱性方面有重要的作用。張丹對細(xì)菌菌株中AcdS基因進(jìn)行敲除發(fā)現(xiàn)，ACC與脫氨酶直接負(fù)責(zé)脅迫條件下的植物生長，細(xì)菌中存在高含量的ACC脫氨酶，能夠保護(hù)作物免受多種脅迫的傷害［26］。研究表明，當(dāng)ACC脫氨酶活性高于0.020 U/mg時(shí)，即可促進(jìn)植物的生長［33］。本研究的2株菌株分泌ACC脫氨酶的活性分別為1.520、3.302 U/mg，低于辛樹權(quán)等從燕麥根際菌株中發(fā)現(xiàn)ACC脫氨酶的活性（8.893 U/mg）［34］，又高于黃天姿等從大豆根際土壤中分離的菌株分泌，ACC脫氨酶的最高活性 （0.097 8 U/mg）［35］，推測酶活性的強(qiáng)弱可能與菌株的種類及其宿主植物的類型等因素有關(guān)。此外，Arshad等認(rèn)為，產(chǎn)ACC脫氨酶的微生物可以有效地部分或完全消除干旱脅迫對豌豆生長、產(chǎn)量和成熟的影響［11］。而且有學(xué)者認(rèn)為，ACC脫氨酶活性的大小可作為抗逆能力強(qiáng)弱的標(biāo)準(zhǔn)［36］。所以菌株分泌ACC脫氨酶的能力強(qiáng)弱可以作為該菌株是否能提高植物抗旱性的參考。

此外，分泌EPS的微生物在提高植物抗旱性方面也具有重要的作用。魏宏宇等認(rèn)為，產(chǎn)EPS的微生物提高植物抗旱性的原因是EPS具有獨(dú)特的保水性，一方面能夠穩(wěn)定土壤團(tuán)聚體結(jié)構(gòu)，另一方面能夠調(diào)節(jié)植物根系的水分［15］。Sandhya等研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)EPS的內(nèi)生有益菌，可以通過改善土壤結(jié)構(gòu)和促進(jìn)植物生長來減輕向日葵植物的干旱脅迫［37］。據(jù)Ghosh等報(bào)道，細(xì)菌分泌EPS更有助于它們定殖于根部并形成生物膜，保護(hù)它們在滲透脅迫下免于干燥［38］。Naseem等用產(chǎn)EPS的細(xì)菌對玉米種子進(jìn)行浸種處理，發(fā)現(xiàn)改善了土壤的水分含量及植物生物量，并提高了玉米的抗旱性［39］。不難發(fā)現(xiàn)，提高植物抗旱性的基礎(chǔ)是改善土壤環(huán)境并促進(jìn)植物的健康生長。此外，有學(xué)者認(rèn)為菌株功能的多樣性與其宿主植物生活的環(huán)境及其生態(tài)競爭力具有相關(guān)性［24］。所以，功能菌株的尋求可以選擇生態(tài)競爭力強(qiáng)的宿主植物進(jìn)行探究。

綜上可知，本研究中K5菌株的促生作用略強(qiáng)于ZM菌株，可能是由于K5菌株分泌嗜鐵素、ACC脫氨酶的能力顯著高于ZM菌株。菌株的作用機(jī)制較為復(fù)雜，后期有待結(jié)合分子層面及多組學(xué)分析、溫室試驗(yàn)等進(jìn)行探究。

參考文獻(xiàn)：

［1］張躍彬，鄧? 軍，楊紹林，等. 國際上甘蔗栽培的研究進(jìn)展［J］. 甘蔗糖業(yè)，2021，50（2）：1-5，140.

［2］Li Y R，Yang L T. Sugarcane agriculture and sugar industry in China［J］. Sugar Tech，2015，17（1）：1-8.

［3］de Abreu L G F，Grassi M C B，de Carvalho L M，et al. Energy cane vs sugarcane：watching the race in plant development［J］. Industrial Crops and Products，2020，156：112868.

［4］羅晟昇，廖韋衛(wèi)，韋海球，等. 干旱脅迫對甘蔗生長研究進(jìn)展［J］. 中國熱帶農(nóng)業(yè)，2020（5）：70-73.

［5］李曉君，羅正清，陸昌強(qiáng)，等. 20個(gè)甘蔗品種（系）的抗旱性比較［J］. 熱帶作物學(xué)報(bào)，2020，41（12）：2482-2491.

［6］王? 震. 甘蔗根際放線菌資源篩選及促生機(jī)制研究［D］. 南寧：廣西大學(xué)，2020.

［7］Zhou X R，Dai L，Xu G F，et al. A strain of Phoma species improves drought tolerance of Pinus tabulaeformis［J］. Scientific Reports，2021，11：7637.

［8］徐海燕，辛國芹，陳梅楠，等. 一株產(chǎn)纖維素酶枸杞內(nèi)生菌的分離鑒定［J］. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2013，25（4）：38-42.

［9］曹? 凱，李遠(yuǎn)婷，安登第，等. 內(nèi)生菌對植物抗干旱脅迫能力的影響研究進(jìn)展［J］. 生物技術(shù)通報(bào)，2015（9）：23-29.

［10］劉? 璐. 豌豆成熟期內(nèi)生菌多樣性及固氮菌促生長的研究［D］. 青島：青島科技大學(xué)，2020.

［11］Arshad M，Shaharoona B，Mahmood T. Inoculation with Pseudomonas spp.containing ACC-deaminase partially eliminates the effects of drought stress on growth，yield，and ripening of pea （Pisum sativum L.）［J］. Pedosphere，2008，18（5）：611-620.

［12］Nadeem S M，Zahir Z A，Naveed M，et al. Rhizobacteria containing ACC-deaminase confer salt tolerance in maize grown on salt-affected fields［J］. Canadian Journal of Microbiology，2009，55（11）：1302-1309.

［13］谷書杰，錢禛鋒，婁永明，等. 接種內(nèi)生菌對干旱脅迫下甘蔗的生理影響［J］. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2022，38（6）：42-47.

［14］楊? 苗. 具有ACC脫氨酶活性促生細(xì)菌的篩選、鑒定及其接種效應(yīng)研究［D］. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2018.

［15］魏宏宇，李? 怡，彭帥英，等. 胞外多糖促進(jìn)脅迫條件下農(nóng)作物生長的研究與展望［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2022，38（4）：1123-1134.

［16］李海云，蔣永梅，姚? 拓，等. 蔬菜作物根際促生菌分離篩選、鑒定及促生特性測定［J］. 植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2018，45（4）：836-845.

［17］陳佳亮. 煙草根際促生菌Sm-1的分離及其外泌鐵載體的純化與鑒定［D］. 長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

［18］張國壯. 產(chǎn)ACC脫氨酶根際促生菌的分離鑒定及其接種對小麥乙烯代謝和生長的效應(yīng)［D］. 楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2014.

［19］王? 琪. 羅漢果內(nèi)生菌產(chǎn)胞外多糖菌株的篩選及其抗氧化與降糖活性研究［D］. 桂林：廣西師范大學(xué)，2021.

［20］穆春雷，武曉森，李術(shù)娜，等. 低溫產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選、鑒定及纖維素酶學(xué)性質(zhì)［J］. 微生物學(xué)通報(bào)，2013，40（7）：1193-1201.

［21］狄義寧，謝林艷，谷書杰，等. 甘蔗及甘蔗近緣屬內(nèi)生菌的篩選、鑒定與功能研究［J］. 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，26（11）：70-83.

［22］尚曉靜，侯? 瑞，徐芳玲，等. 2株藍(lán)莓溶磷內(nèi)生真菌的篩選、鑒定及溶磷效果評價(jià)［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（20）：246-252.

［23］狄義寧，劉魯峰，謝林艷，等. 一株甘蔗內(nèi)生菌鑒定及其溶磷能力的研究［J］. 作物雜志，2018（6）：68-75.

［24］陳艷彬，韓燕燕，王? 斐，等. 吡咯伯克霍爾德氏菌JK-SH007產(chǎn)嗜鐵素的相關(guān)基因克隆及條件優(yōu)化［J］. 中國生物防治學(xué)報(bào)，2019，35（4）：630-641.

［25］趙? 微，崔? 璇，趙? 蕾. 磷、鐵脅迫對棘孢木霉根際定殖的影響［J］. 西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2022，31（1）：72-78.

［26］張? 丹. 紫花苜蓿內(nèi)生菌的分離鑒定及特性分析［D］. 哈爾濱：哈爾濱師范大學(xué)，2016.

［27］冀玉良，李? 丹，羅嘉凡. ACC脫氨酶活性菌的分離及其對桔梗的促生作用［J］. 商洛學(xué)院學(xué)報(bào)，2021，35（2）：33-40.

［28］普鳳雅，谷書杰，何永宏，等. 2株薏苡內(nèi)生菌促生特性及其對種子萌發(fā)的影響［J］. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（14）：115-122.

［29］普鳳雅，谷書杰，何永宏，等. 溶磷內(nèi)生菌的篩選鑒定及其對薏苡生長發(fā)育的影響［J］. 福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2022，37（7）：946-953.

［30］呂嬌嬌. 甘肅省13種藥用植物根際和內(nèi)生菌的分離及5株功能菌株鑒定和抑菌促生功能測定［D］. 蘭州：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，2022.

［31］殷奧杰，王? 齊，葛淼淼，等. 微生物鐵載體的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］. 環(huán)境保護(hù)與循環(huán)經(jīng)濟(jì)，2021，41（7）：20-24，69.

［32］林天興，唐? 梅，黃明遠(yuǎn)，等. 高產(chǎn)鐵載體棉田土壤細(xì)菌SS05的篩選與鑒定［J］. 微生物學(xué)通報(bào)，2012，39（5）：668-676.

［33］廉法欽. 具有ACC脫氨酶活性橡膠樹根際促生菌（PGPR）的篩選及其促生作用研究［D］. 海口：海南大學(xué)，2016.

［34］辛樹權(quán)，高? 揚(yáng)，趙驥民.含ACC脫氨酶PGPR菌株的分離及其對燕麥耐鹽性的影響［J］. 長春師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，30（8）：58-62.

［35］黃天姿，李同祥，湯? 薇，等. 大豆根際土壤產(chǎn)ACC脫氨酶細(xì)菌的分離與鑒定［J］. 南方農(nóng)業(yè)，2022，16（6）：1-3.

［36］劉冠一，劉艷玲，劉博文，等. 含ACC脫氨酶活性的復(fù)合菌株提高苜?？果}堿能力研究［J］. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2017，31（5）：1022-1028.

［37］Sandhya V D，Shaik Z A，Grover M，et al. Alleviation of drought stress effects in sunflower seedlings by the exopolysaccharides producing Pseudomonas putida strain GAP-P45［J］. Biology and Fertility of Soils，2009，46（1）：17-26.

［38］Ghosh D，Gupta A，Mohapatra S. A comparative analysis of exopolysaccharide and phytohormone secretions by four drought-tolerant rhizobacterial strains and their impact on osmotic-stress mitigation in Arabidopsis thaliana［J］. World Journal of Microbiology and Biotechnology，2019，35（6）：90.

［39］Naseem H，Bano A. Role of plant growth-promoting rhizobacteria and their exopolysaccharide in drought tolerance of maize［J］. Journal of Plant Interactions，2014，9（1）：689-701.