摘要：【目的】探究不同生物引發(fā)條件對(duì)番茄冷脅迫下種子活力和幼苗生理特性的影響，為番茄的反季節(jié)露天栽培提供可行性方案?！痉椒ā恳苑逊N子種都紅運(yùn)為試驗(yàn)材料，哈茨木霉和熒光假單胞菌作為引發(fā)劑，設(shè)5個(gè)處理：未引發(fā)處理（CK）;哈茨木霉和熒光假單胞菌的1×10?CFU/mL的孢子液（T1處理）和發(fā)酵液（T2處理），1×10?CFU/mL的發(fā)酵液（T3處理）及無(wú)菌過(guò)濾液（T4處理）引發(fā)，回干后測(cè)定種子萌發(fā)指數(shù)；幼苗設(shè)4℃低溫處理，以常溫（25℃）為對(duì)照，分別測(cè)量形態(tài)指標(biāo)和生理指標(biāo)?！窘Y(jié)果】4個(gè)引發(fā)處理不同程度促進(jìn)了番茄種子萌發(fā)及植株生長(zhǎng)，效果顯著。通過(guò)種子萌發(fā)指數(shù)發(fā)現(xiàn)，引發(fā)效果T4gt;T3gt;T 2gt;T1，就活力指數(shù)而言，分別顯著提高90.00%、67.70%、51.30%和50.00%。分析60d的幼苗形態(tài)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，T4處理的株高、莖粗和莖鮮重均達(dá)最大值，T2處理的根長(zhǎng)和莖鮮重達(dá)最大值；分析60 d幼苗的生理指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，T2處理的過(guò)氧化氫酶（CAT）含量最高。光合色素和可溶性糖含量則依次表現(xiàn)為T4gt;T3gt;T2gt;T1，T4處理的可溶性蛋白和脯氨酸（PRO）含量達(dá)最大值，分別顯著增加71.74%和46.50%，其他處理的增幅略低于T4處理。4個(gè)引發(fā)處理的相對(duì)電導(dǎo)率（REC）在低溫脅迫前后的變化相差不大，CK經(jīng)低溫脅迫后急劇升高。MDA含量在低溫脅迫后的增量依次表現(xiàn)為T3gt;T4gt;T2gt;T1。相關(guān)分析結(jié)果表明，株高、莖粗、莖鮮重與植株CAT含量呈極顯著正相關(guān)（Plt;0.01，下同），根鮮重與REC和MDA含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，與PRO含量呈極顯著正相關(guān)?！窘Y(jié)論】番茄種子經(jīng)哈茨木霉和熒光假單胞菌的無(wú)菌過(guò)濾液等體積混合引發(fā)有利于提高種子活力，促進(jìn)植株生長(zhǎng)，增加植株體內(nèi)的保護(hù)酶活性，最終提高番茄植株的低溫耐受性。

關(guān)鍵詞：番茄種子；生物引發(fā)；低溫脅迫；保護(hù)酶

中圖分類號(hào)：S641.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：2095-1191（2024）02-0531-09

Effects of different bio-priming conditons on tomato seed vigor and seedling physiology characteristics under low temperature stress

LI Ya-bo'，ZHANG Wen-jian2，HE Li-ping'\"，PING Dong'

（'Collegeof Agronomy and Biotechnology，Yunnan Agricultural University，Kunming，Yunnan 650201，China;2Seed Management Station of Yunnan，Kunming，Yunnan 650031，China）

Abstract：[Objective]To explore the effects of dfferent bio-priming conditions on seed vigor and seedling physio-logical characteristics of tomato under low temperature stress，and to provide afeasible scheme for the future out-of-season open-air cultivation oftomato.[Method]With tomato seed Zhongduhongyunwas used as material，Trichoderma harziensis and Pseudomonas fluorescens were used as seed priming agents，and five treatments were set up：which were non-primed treatment（CK），1×10?CFU/mL spore fluid（T1）and fermentation fluid（T2）of Tharziensis and P.fluore-scens，1×10*CFU/mL fermentation fluid（T3）and sterile filtrate（T4）.The germination index of seed wasmeasured after drying.4℃low temperature treatment was set for seedings，normal condition（25℃）was control，the morphology in dexes and physiological indexes were detected.【Result】The four priming treatments promoted seed germination and plant growth in different degrees，and the promotion effect was significant.According to the seed germination index，the pri-ming effect was T4gt;T3gt;T2gt;T1，significantly increased by 90.00%，67.70%，51.30%，50.00%in terms of vitality index，respectively.After 60 d of seedling morphology indexes analysis，it was found that the plant height，stem diameter and tem fresh weight of T4 reached the maximum value，while the root length and stem fresh weightof T2 reached the maxi-mum value.Analysis of physiological indexes of 60 d seedlings showed that the catalase（CAT）content of T2 was the highest.Thecontent of photosynthetic pigment and soluble sugar showed the order of T4gt;T3gt;T2gt;T1，and the contents of soluble protein and proline（PRO）in T4 reached the maximum value，significantly increasing by 71.74%and 46.50%，while the increase of other treatments was slightly lower than that of T4.The relative conductivity（REC）of T1，T2，T3 and T4 changed little before and after low temperature stress，while CK increased sharply after low temperature stress The increment of MDA content after low temperature stress was T3gt;T4gt;T2gt;T1.Correlation analysis showed that plant height，stem diameter and stem fresh weight were extremely significantly positively correlated with plant CAT content（Plt;0.01，the same below），root fresh weight was extremely significantly negatively correlated with REC and MDA con-tent，and extremely significantly positively correlated with PRO content.【Conclusion】Equal volume mixing sterile fil-trate of Tharziensisand P.fluorescens priming tomato seeds can improve seed vitality，promote plant growth，increase the protective enzymeactivity in plants，andthusimprovethe low temperature toleranceof tomatoplants.

Keywords：tomatoseed;bio-priming;low temperature stress;protective enzymes

Foundation items：National Natural Science Foundation of China（31971573）

0引言

【研究意義】番茄（Solanum lycopersicum L.）的生長(zhǎng)發(fā)育適宜溫度為18～25℃，是一種喜溫蔬菜，低于10℃的低溫會(huì)使番茄受到冷害威脅，低溫通過(guò)影響番茄植株體內(nèi)各種防御酶活性，使得活性氧平衡系統(tǒng)遭到破壞，細(xì)胞膜膜脂過(guò)氧化程度加劇，降低作物的產(chǎn)量和品質(zhì)。低溫不僅危害番茄本身的生長(zhǎng)發(fā)育，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致植株死亡（何凌仙子等，2018）。因此，在非熱區(qū)，冬春季極易受到低溫冷害脅迫，番茄種植在大棚和溫室里，限制了番茄反季節(jié)規(guī)?；兜厣a(chǎn)。相關(guān)研究指出，耐寒番茄品種苗期的超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著下降，而丙二醛（MDA）、脯氨酸（PRO）含量和過(guò)氧化物酶（POD）活性隨溫度的降低呈上升趨勢(shì)（朱文哲等，2011）。因此，研究提高植株體內(nèi)保護(hù)酶活性，對(duì)番茄提高低溫耐受性，保證其冬春季節(jié)的生長(zhǎng)有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】種子引發(fā)由Heydecker等（1973）首次提出，即在種子萌發(fā)前控制種子緩慢吸水，而胚根不突破種皮的種子促進(jìn)技術(shù)，是促進(jìn)植株生長(zhǎng)和提高植株抗逆性快捷而有效的方法，主要包括水引發(fā)、滾筒引發(fā)、滲透引發(fā)、固體基質(zhì)引發(fā)、生物引發(fā)和膜引發(fā)等。據(jù)報(bào)道，番茄種子引發(fā)處理改善了番茄種子在極低溫度下的種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)（Jain and van Staden，2007）;不同條件引發(fā)糯玉米種子均能顯著增加低溫下糯玉米的根系直徑、表面積、干重、根長(zhǎng)、根冠比及地上部干重等，最終增強(qiáng)糯玉米的低溫抗性（崔正果等，2022）;水引發(fā)能提高珠芽蓼和番茄的種子活力并促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)（孫景梅，2022）。引發(fā)過(guò)程能啟動(dòng)植物體內(nèi)的多條通路，通過(guò)上調(diào)抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）、過(guò)氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等酶的活性以降低受逆境脅迫植物中過(guò)多的H?O?含量（Alam et al.，2022）。生物引發(fā)是目前種子引發(fā)中具有創(chuàng)新性和科學(xué)性的一項(xiàng)種子改善技術(shù)，采用根際促生菌引發(fā)的種子，能提高種子活力、減緩種子老化、促進(jìn)幼苗萌發(fā)，增強(qiáng)植株長(zhǎng)勢(shì)、保證幼苗免受土傳病害侵染（Wu，2019）;引發(fā)后的種子不僅能提高植株對(duì)養(yǎng)分的吸收，還能促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)所需的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的合成，降低生物和非生物脅迫的影響（Mastouri et al.，2010）。哈茨木霉（Trichoderma harzianum）廣泛分布在自然界中，適應(yīng)性好，防病機(jī)制多樣，能促進(jìn)根系對(duì)多種礦物質(zhì)的吸收（任志超等，2023）。NBL-Z 1菌株能在植物根部定殖并促進(jìn)植株生長(zhǎng)和預(yù)防病害的發(fā)生（譚嬌嬌等，2021）;哈茨木霉生物引發(fā)對(duì)葡萄霜霉病的防治具有顯著效果（Kamble et al.，2021）。熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）是一種重要的植物病害生防菌，能在植物根部定殖，對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育起到多方面的作用，如產(chǎn)生鐵載體，提高營(yíng)養(yǎng)元素的可得性，或產(chǎn)生植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和ACC脫氨酶，促進(jìn)植株生長(zhǎng)，亦或誘導(dǎo)產(chǎn)生與抗性相關(guān)的水解酶和氧化酶類，提高植物抗逆性等（楊曉帆等，2022）。單次和混合使用哈茨木霉Th3菌株和熒光假單胞菌RRbl1引發(fā)水稻種子均顯著增加根長(zhǎng)、地上部長(zhǎng)度、發(fā)芽率和活力指數(shù)（Gangwar and Sharma，2013）。Jaiman等（2020）使用哈茨木霉和熒光假單胞菌引發(fā)番茄種子12 h后顯著提高種子活力；ZX菌株可在葡萄果實(shí)上快速定殖生長(zhǎng)，并產(chǎn)生揮發(fā)性物質(zhì)，具有較強(qiáng)的抑菌效果，且在控制葡萄采后灰霉病的發(fā)生上具有良好效果（魏雪等，2021）;2 P24菌株能提高被果斑病侵染的西瓜的抗病相關(guān)酶活性，增強(qiáng)西瓜的抗病性（汪心玉等，2023）。【本研究切入點(diǎn)】種子引發(fā)能顯著促進(jìn)種子活力及植株長(zhǎng)勢(shì)，目前關(guān)于番茄種子生物引發(fā)的研究鮮有報(bào)道，基于番茄不耐低溫的特性，分離出合適的植物根際促生菌引發(fā)種子，從而提高番茄的低溫耐受性?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以不耐低溫的番茄品種為材料，經(jīng)不同濃度的哈茨木霉和熒光假單胞菌的孢子液、發(fā)酵液及無(wú)菌過(guò)濾液進(jìn)行生物引發(fā)24h，分析番茄種子活力及植株形態(tài)指標(biāo)和生理指標(biāo)的差異，以探究生物引發(fā)提高植株抗低溫能力的生理機(jī)制，為生物引發(fā)提高番茄植株的低溫耐受性提供理論依據(jù)，也為促進(jìn)番茄的露天栽培提供可行性方案。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

供試番茄種子為種都紅運(yùn)品種，番茄種植地位于云南省昆明市云南農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)基地（25°12'N，102°75'E，海拔1944.6m）。哈茨木霉AS3.3711和熒光假單胞菌由云南農(nóng)業(yè)大學(xué)種子科學(xué)研究課題組分離鑒定。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1生物菌液培養(yǎng)試驗(yàn)于2022年10月進(jìn)行。哈茨木霉采用PDA培養(yǎng)基在28℃的條件下培養(yǎng)3～4d，哈茨木霉有菌發(fā)酵液和分生孢子懸浮液制備方法參照談韞等（2022）深綠木霉的制作方法。熒光假單胞菌采用KMB培養(yǎng)基于26℃條件下培養(yǎng)2～3d，有菌發(fā)酵液的制備參照羅鵬等（2003）種子菌的培養(yǎng)方法。哈茨木霉和熒光假單胞菌的無(wú)菌發(fā)酵液的制備參照敖靜等（2021）關(guān)于解淀粉芽孢桿菌無(wú)菌發(fā)酵液的制備方法。

1.2.2番茄種子生物引發(fā)處理哈茨木霉和熒光假單胞菌的孢子液和發(fā)酵液濃度均設(shè)置為1×10?和1×10°CFU/mL，二者按照1：1體積混合備用，按照菌液的不同濃度和方式設(shè)置4個(gè)處理：T1處理，1×10'CFU/mL的哈茨木霉和熒光假單胞菌的孢子液；T2處理，試劑同T1處理，為發(fā)酵液；T3處理，1×10°CFU/mL的哈茨木霉孢子液和熒光假單胞菌發(fā)酵液；T4處理，1×10°CFU/mL的哈茨木霉和熒光假單胞菌的無(wú)菌過(guò)濾液。番茄種子經(jīng)2%次氯酸鈉消毒處理5 min，無(wú)菌水沖洗3次后吸干水分，加入混合菌液至剛好沒(méi)過(guò)種子，20℃引發(fā)種子24h;引發(fā)結(jié)束后室溫晾干處理3d回干至原始水分。

1.2.3引發(fā)種子活力測(cè)定團(tuán)隊(duì)前期預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，種都紅運(yùn)番茄品種發(fā)芽的最低溫度為10℃，10℃以下番茄種子不發(fā)芽，且幼苗在4℃低溫脅迫下呈明顯的冷害特征，葉片中度萎蔫，故設(shè)本試驗(yàn)的種子發(fā)芽溫度為10℃，幼苗低溫脅迫溫度為4℃開展后續(xù)試驗(yàn)。將引發(fā)處理后的番茄種子放入10℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)，每處理4次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50粒，對(duì)照（CK）不做任何處理。根據(jù)GB/T 3543.1—1995《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程總則》，萌發(fā)第5d統(tǒng)計(jì)發(fā)芽勢(shì)、第14d統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率、第7d測(cè)根長(zhǎng)。用發(fā)芽率（GP）、發(fā)芽勢(shì)（GE）及發(fā)芽指數(shù)（GI）和活力指數(shù)（VI）表示種子活力。從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選出20株正常苗測(cè)量，用直尺測(cè)定其根長(zhǎng)。

GP（%）=（末次計(jì)數(shù)發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)）×100

GE（%）=（發(fā)芽高峰時(shí)正常發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù)）×100

GI=Σ（Gt/Dt）

VI=（GI×S）/GP

式中，Gt表示每天發(fā)芽種子數(shù)，Dt表示發(fā)芽日數(shù)。S表示一定時(shí)期內(nèi)正常幼苗單株根長(zhǎng)。

1.2.4供試植株移栽及低溫脅迫后生理指標(biāo)測(cè)定將引發(fā)過(guò)的種子置于穴盤中育苗，常溫（25℃）下培養(yǎng)60d后第1次測(cè)量植株體內(nèi)的生物酶活性及相對(duì)電導(dǎo)率（REC），測(cè)定后隨即放入4℃的低溫培養(yǎng)箱進(jìn)行低溫脅迫5d，每天保證12 h的正常光照。低溫脅迫之后再次測(cè)量番茄幼苗植株體內(nèi)的酶活性及REC，比較低溫脅迫下各生物引發(fā)處理后植株體內(nèi)的生物酶活性的變化?？扇苄蕴牵⊿S）含量采用蒽酮比色法測(cè)定（李曉旭和李家政，2013）;可溶性蛋白（SP）、PRO含量、CAT活性、MDA含量分別采用考馬斯亮藍(lán)染色法、茚三酮法、高錳酸鉀滴定法及硫代巴比妥酸（TBA）比色法進(jìn)行測(cè)定；細(xì)胞膜透性用REC來(lái)表示，采用電導(dǎo)儀法測(cè)定（李合生，2000）;SOD活性采用氮藍(lán)四唑（NBT）光化還原法測(cè)定（Zhou et al.，2018）。

1.3統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel 2016對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行基礎(chǔ)分析，利用SPSS 26.0進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)和方差分析。

2結(jié)果與分析

2.1生物引發(fā)對(duì)番茄種子活力的影響

由表1可知，常溫下哈茨木霉和熒光假單胞菌的發(fā)酵液和無(wú)菌液以一定濃度混合引發(fā)番茄種子，均能顯著提高番茄種子活力。T1和T4處理的發(fā)芽勢(shì)顯著高于CK（Plt;0.05，下同）;T4處理的發(fā)芽率顯著高于CK，提高17.50%;T1和T4處理的發(fā)芽指數(shù)分別比CK顯著提高21.10%和26.20%;T1、T2、T3和T4處理的活力指數(shù)分別比CK顯著提高50.0%、51.30%、67.70%和90.00%;T4處理的根長(zhǎng)顯著高于CK，提高50.00%。

2.2生物引發(fā)對(duì)番茄幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響

育苗60 d后測(cè)量番茄植株的形態(tài)指標(biāo)，由圖1可知，不同生物引發(fā)處理對(duì)番茄的生長(zhǎng)發(fā)育均有一定的促進(jìn)作用。與CK相比，T1、T2、T3和T4處理的株高分別顯著提高27.25%、74.71%、22.05%和175.14%;T2和T4處理的莖粗分別顯著提高38.00%和106.20%，T1和T3處理的莖粗差異不顯著（Pgt;0.05，下同）;T2處理的根長(zhǎng)顯著提高24.20%，T1、T3和T4處理的根長(zhǎng)差異不顯著;T1、T2、T3和T4處理的莖鮮重分別顯著提高190.69%、368.38%、141.48%和713.74%，根鮮重分別顯著提高97.99%、67.54%、38.23%和61.70%。綜上，哈茨木霉和熒光假單胞菌無(wú)菌過(guò)濾液1：1混合引發(fā)的番茄植株株高、莖粗和莖鮮重均達(dá)最大值，顯著高于其他處理，CK的值最小。

2.3生物引發(fā)對(duì)番茄生理指標(biāo)的影響

2.3.1對(duì)植株光合色素含量的影響由表2可知，育苗60d后生物引發(fā)處理過(guò)的植株光合色素含量均高于CK。與CK相比，T1、T2、T3和T4處理的葉綠素a含量分別提高39.14%、29.55%、31.70%和52.05%，葉綠素b含量分別提高38.28%、87.50%、128.90%和113.28%，總?cè)~綠素含量分別提高38.85%、41.19%、51.33%和64.59%。T1、T2和T4處理的胡蘿卜素較CK分別提高37.00%、11.00%和36.00%。其中T4處理的總光合色素和葉綠素a含量均達(dá)最大值，葉綠素b和胡蘿卜素也明顯高于CK。

2.3.2對(duì)葉片REC及MDA含量的影響由圖2可知，不同生物引發(fā)對(duì)番茄葉片REC及MDA含量有一定的影響。在常溫條件下，4個(gè)處理的REC和MDA含量均顯著低于CK;其中T2處理表現(xiàn)較良好，比CK分別降低21.5%和58.50%。番茄受低溫脅迫后，經(jīng)生物引發(fā)的番茄植株依然具有優(yōu)勢(shì)，其中生物引發(fā)處理的葉片REC及MDA含量顯著低于CK。4個(gè)生物引發(fā)處理間的REC差異在低溫脅迫前后相對(duì)比較穩(wěn)定，與CK相比效果顯著，在低溫脅迫后T1、T2、T3和T4處理分別比CK顯著降低31.2%、33.4%、34.0%和32.2%;T1、T2、T3和T4處理的MDA含量低溫脅迫后與CK相比分別顯著降低42.71%、35.78%、35.35%和38.77%，降低幅度依次為T1gt;T4gt;T2gt;T3。因此，生物引發(fā)顯著降低番茄葉片的REC及MDA含量，能減輕低溫對(duì)細(xì)胞膜的損害，對(duì)增強(qiáng)番茄的低溫耐性起到一定作用。

2.3.3對(duì)植株CAT和SOD活性的影響由圖3-A可知，生物引發(fā)對(duì)番茄植株冷脅迫前后的CAT活性產(chǎn)生一定的影響。常溫下，所有處理的CAT活性在553～1122 nmol/g，T4處理效果最佳，比CK顯著提高58.15%。低溫脅迫下，生物引發(fā)處理的CAT活性在884～2041 nmol/g，CK的CAT活性最低，平均值也低于其他處理。T2和T4處理效果顯著，分別比CK顯著提高130.7%和125.7%。綜上，哈茨木霉和熒光假單胞菌引發(fā)番茄種子后能增加植株體內(nèi)CAT活性，有效清除植株體內(nèi)過(guò)多的H?O?。由圖3-B可知，常溫下，所有引發(fā)處理SOD活性的值在35～57 nmol/g，其中T4處理效果最佳，其SOD活性顯著高于CK，提高61.20%。低溫脅迫下，種子經(jīng)引發(fā)處理過(guò)的植株體內(nèi)SOD活性明顯增加，達(dá)543～778 nmol/g，此時(shí)，T1、T2、T3和T4處理與CK相比差異不明顯，總體上看T4處理優(yōu)于其他3個(gè)生物引發(fā)處理。

2.3.4對(duì)植株SP和SS含量的影響由圖4可知，不同生物引發(fā)條件對(duì)番茄植株體內(nèi)SP和SS均產(chǎn)生一定的影響。常溫下，T2處理的SP含量顯著高于CK，提高36.11%;T4處理的SS顯著高于CK，提高71.74%。低溫脅迫下，生物引發(fā)后的植株體內(nèi)SP和SS含量明顯增長(zhǎng)。此時(shí)，T1和T4處理的SP含量顯著高于CK，分別提高20.64%和18.41%;T1、T2、T3和T4處理的SS含量均顯著高于CK，分別提高23.16%、28.83%、29.80%和33.11%?？梢?jiàn)生物引發(fā)能增加番茄植株SP和SS含量，保證植物細(xì)胞更好的維持滲透平衡，從而提高低溫耐受性。

2.3.5對(duì)植株P(guān)RO含量的影響由圖5可知，常溫下，生物引發(fā)對(duì)番茄植株體內(nèi)PRO含量影響并不顯著，但在植株受到低溫脅迫時(shí)，生物引發(fā)處理對(duì)PRO

含量影響顯著。在低溫脅迫下，T1、T2、T3和T4處理的PRO含量與CK均差異顯著，含量為110～263μg/g，分別比CK提高43.74%、20.30%、44.01%和46.50%;T4處理的效果最為顯著。綜上，低溫脅迫下，T4處理的番茄植株P(guān)RO含量積累增加，在相同的條件下更耐低溫。

2.4生物引發(fā)后番茄植株在低溫脅迫下幼苗形態(tài)指標(biāo)與生理指標(biāo)的相關(guān)分析

由表3可知，植株的幼苗形態(tài)指標(biāo)在低溫脅迫下與植株生理指標(biāo)存在一定的相關(guān)性。株高、莖粗、莖鮮重與植株CAT活性呈極顯著正相關(guān)（Plt;0.01，下同），相關(guān)性強(qiáng)弱依次為莖鮮重gt;株高gt;莖粗；根鮮重與葉片光合色素含量、REC及MDA含量呈極顯著負(fù)相關(guān)，與PRO含量呈極顯著正相關(guān)。

3討論

3.1生物引發(fā)對(duì)番茄種子活力的影響

種子作為遺傳信息的載體，其質(zhì)量的高低決定著田間植株的生長(zhǎng)發(fā)育狀況，直接影響作物的產(chǎn)量和品質(zhì)，高活力的番茄種子不僅田間出苗率高，且能提高植株在生長(zhǎng)期對(duì)逆境的適應(yīng)性（Anup et al.，2015）。種子活力下降的一個(gè)主要原因是細(xì)胞膜被破壞，造成細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)大量外滲。在種子引發(fā)的過(guò)程中，種子通過(guò)緩慢吸水促進(jìn)細(xì)胞膜的修復(fù)與重組，提高細(xì)胞膜的完整性，在一定程度上緩解了細(xì)胞內(nèi)有機(jī)物質(zhì)的外滲，在這一過(guò)程中，種子在引發(fā)階段完成細(xì)胞膜修復(fù)、DNA重新合成、酶活化及一些能量代謝，從而增強(qiáng)種子活力（常瑤和焦樂(lè)，2022）;且白菜種子經(jīng)過(guò)引發(fā)后顯著提高種子活力及幼苗的抗氧化酶活性（李劫等，2023）。本研究利用哈茨木霉和熒光假單胞菌混合引發(fā)番茄種子，促進(jìn)種子提前完成膜的修復(fù)及DNA合成等眾多復(fù)雜的代謝活動(dòng)，顯著提高了種子在逆境脅迫下的萌發(fā)活力。

3.2生物引發(fā)對(duì)番茄幼苗形態(tài)指標(biāo)的影響

生物引發(fā)利用根際促生菌作為引發(fā)劑，能定殖在植物根系周圍，通過(guò)與土壤和根系間的互作作用，改善土壤環(huán)境，促進(jìn)植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的吸收。使用熒光假單胞菌和枯草芽孢桿菌等根際促生菌生物引發(fā)處理種子后，顯著提高了葫蘆巴和番茄的株高和干鮮重（Kumar et al.，2020）。本研究中通過(guò)哈茨木霉和熒光假單胞菌混合引發(fā)番茄種子，顯著提高了番茄植株的株高、莖粗，根長(zhǎng)、莖鮮重及根鮮重。說(shuō)明哈茨木霉和熒光假單胞菌可改善植物根系土壤環(huán)境，增加植物主要養(yǎng)分的供應(yīng)或有效性促進(jìn)植物生長(zhǎng)，增加植物獲取養(yǎng)分的途徑。

3.3生物引發(fā)對(duì)番茄幼苗生理指標(biāo)的影響

SP和SS是植物重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其含量的增加和積累能提高細(xì)胞的保水能力，是個(gè)重要的生理生化指標(biāo)，在植物的逆境脅迫中起到不可替代的作用。低溫脅迫會(huì)導(dǎo)致SP和SS含量增加（王光正等，2021;謝雪曼等，2023），SP含量的積累有助于緩解低溫對(duì)植物的傷害（元春宇等，2017）;SS能增加細(xì)胞的滲透濃度，保證植物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生冰沉積。本研究中4個(gè)引發(fā)處理均顯著提高了番茄植株的SS含量，低溫脅迫前后其含量顯著高于CK，結(jié)果與馬尾松抗寒品種的SS含量高于不耐寒品種的結(jié)論具有相似性（陸晶宇，2022）。PRO是植物蛋白質(zhì)的組分之一，在低溫條件下，植物組織中PRO增加，可提高植物的抗寒性（羅丹等，2013）;本研究發(fā)現(xiàn)生物引發(fā)后PRO含量顯著高于CK，表明生物引發(fā)能提高番茄植株的耐冷性。此外，MDA是膜脂過(guò)氧化的產(chǎn)物，MDA的加劇會(huì)導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化加劇，其含量的變化顯示植物受逆境過(guò)氧化傷害的程度，從逆境脅迫開始MDA含量即表現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)，隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，植物葉片的MDA含量增加趨勢(shì)越加明顯（王仕林等，2012）。本研究中，低溫脅迫后番茄植株的MDA含量明顯上升，生物引發(fā)處理過(guò)的植株減緩了MDA含量上升的程度，說(shuō)明引發(fā)處理減輕了低溫對(duì)細(xì)胞膜的損害。電解質(zhì)滲出率是檢驗(yàn)植物受逆境脅迫后細(xì)胞膜透性的重要參數(shù)，電解質(zhì)滲出率的變化與作物逆境下的傷害程度有關(guān)。大量研究表明，隨著低溫脅迫的加劇植物的REC呈遞增趨勢(shì)，即溫度越低，REC越高，細(xì)胞受損越嚴(yán)重（王洋等，2021）。本研究發(fā)現(xiàn)低溫脅迫下番茄葉片的REC增加，但生物引發(fā)處理后的增加量明顯低于CK的增加量，即生物引發(fā)番茄種子后能降低番茄植株的REC，減少細(xì)胞膜損壞程度。

CAT和SOD普遍存在于植物組織中，是重要的保護(hù)酶之一，其作用是清除代謝中產(chǎn)生的H?O?，以避免H?O?積累對(duì)細(xì)胞的氧化破壞作用，因而其活性的高低與植物的抗逆性有關(guān)。植物在受到逆境脅迫時(shí)會(huì)產(chǎn)生活性氧和自由基，大量的活性氧和自由基積累會(huì)引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，因此，SOD在保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷過(guò)程中具有十分重要的作用，許多研究結(jié)果表明植物體內(nèi)的SOD含量隨低溫的加劇呈先上升后下降的趨勢(shì)，植株體內(nèi)的SOD含量與植株的低溫耐性息息相關(guān)；另外，CAT也是體現(xiàn)植株耐性的一個(gè)主要指標(biāo)，大量研究報(bào)道植株在低溫脅迫下CAT含量顯著上升（李進(jìn)，2014）;本研究經(jīng)生物引發(fā)番茄種子后發(fā)現(xiàn)番茄植株在4℃低溫脅迫72 h后體內(nèi)SOD含量均呈上升趨勢(shì)，CAT含量也顯著高于CK，從而表現(xiàn)出比CK更耐低溫。

4結(jié)論

番茄種子經(jīng)哈茨木霉和熒光假單胞菌的無(wú)菌過(guò)濾液等體積混合引發(fā)有利于提高種子活力、促進(jìn)植株生長(zhǎng)、增加植株體內(nèi)的保護(hù)酶活性，從而提高番茄植株的低溫耐受性。

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（責(zé)任編輯 鄧慧靈）