摘要： 【目的】建立極小種群野生植物波葉杜鵑 （Rhododendron hemsleyanum） 的組培快繁體系，探究其種子萌發(fā)、增殖壯苗、生根誘導(dǎo)、移栽基質(zhì)等不同環(huán)節(jié)的最佳條件?！痉椒ā窟x擇顆粒飽滿、大小基本一致的種子作為萌發(fā)材料，探究光暗條件以及不同滅菌預(yù)處理對(duì)種子萌發(fā)的影響。在增殖壯苗和誘導(dǎo)生根試驗(yàn)中，以種苗培養(yǎng)的繼代苗為外植體，以WPM 為基本培養(yǎng)基，分別采用L9（33） 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)和Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)響應(yīng)面法，研究增殖壯苗和生根誘導(dǎo)的最適條件。在煉苗及移栽試驗(yàn)中，以成功誘導(dǎo)生根的組培苗為材料，煉苗9 d 后移栽至5 種不同的基質(zhì)中，分析波葉杜鵑在不同移栽基質(zhì)中的成活率?！窘Y(jié)果】75% 乙醇處理1 min+1% NaClO 溶液處理10 min 的種子萌發(fā)效果最好，萌發(fā)率為66.67%。種苗生長(zhǎng)的最佳培養(yǎng)基為WPM+1.0 mg/L 6-BA；增殖壯苗的最佳培養(yǎng)基為 WPM+0.5 mg/L NAA+1.5 mg/L ZT，pH 4.5，增殖系數(shù)為3.13。在生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，橫置于培養(yǎng)基表面的莖尖生根良好，植入培養(yǎng)基的莖尖均無(wú)不定根形成，且培養(yǎng)40 d 時(shí)，植入培養(yǎng)基的外植體基部均腐化變黑；最佳生根培養(yǎng)基為1/2 WPM+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L IBA，生根率達(dá)88.00%。移栽基質(zhì)V腐殖土∶V珍珠巖∶V蛭石 = 2∶1∶1 最適合組培苗移栽， 成活率達(dá) 80.00%?！窘Y(jié)論】本研究成功構(gòu)建了波葉杜鵑的組培快繁體系，為其他杜鵑花科木本植物的組織培養(yǎng)提供了參考，也為今后開(kāi)展回歸引種、復(fù)壯野生種群和合理開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞： 波葉杜鵑；極小種群野生植物；Box-Behnken；組織培養(yǎng)；快速繁殖

中圖分類號(hào)： S685.210.43 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)： 1004–390X （2024） 04?0099?11

杜鵑花是杜鵑花科 （Ericaceae） 杜鵑屬 （Rhododendron）植物的總稱，是世界三大園藝植物之一，素有“木本花卉之王”的美稱，也被譽(yù)為“花中西施”[1]。全世界約有1 000 種，主要分布于亞洲、歐洲和北美洲[2]。中國(guó)有7 個(gè)亞屬約720 種，包括114 個(gè)變種、45 個(gè)亞種和2 個(gè)變型，其中特有種約450 種[3]。中國(guó)杜鵑花花色絢麗多彩、花形各異、株型秀雅，具有很高的觀賞價(jià)值，且不乏兼有藥用、食用和保健等應(yīng)用前景的種類[4-7]。波葉杜鵑 （R. hemsleyanum） 為杜鵑屬常綠杜鵑亞屬 （Subgen. Hymenanthes） 常綠杜鵑組 （Sect. Ponticum）云錦杜鵑亞組（Subsect. Fortunea） 常綠植物，是中國(guó)特有種，其花為大型白色鐘狀花冠簇生于枝頂，葉片長(zhǎng)橢圓形，先端純尖，基部耳狀心形，邊緣波狀，故名波葉杜鵑[8]。課題組多次實(shí)地調(diào)查確認(rèn)：波葉杜鵑目前僅于四川峨眉山殘存163 株，種群內(nèi)的實(shí)生苗罕見(jiàn)，自然更新能力孱弱，加之波葉杜鵑的生境條件惡劣、分布區(qū)單一和人為活動(dòng)等因素影響，隨時(shí)有滅絕的風(fēng)險(xiǎn)?！吨袊?guó)高等植物受威脅物種名錄》[9]和The RedList of Rhododendrons[10]將波葉杜鵑評(píng)為極度瀕危物種，是典型的極小種群野生物種 （plant specieswith extremely small populations， PSESP）， 對(duì)其開(kāi)展保護(hù)生物學(xué)研究工作已迫在眉睫。