摘要：為探究飼料中添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fulvidraco）抗氧化能力和非特異性免疫的影響，以飼喂商品飼料的黃顙魚(yú)為空白對(duì)照組，以飼喂含有1%和5%牡丹籽油的再制商品飼料的黃顙魚(yú)為陽(yáng)性對(duì)照組，以飼喂含有1%和5%牡丹籽殼的再制商品飼料的黃顙魚(yú)為試驗(yàn)組，養(yǎng)殖時(shí)間21 d。測(cè)定黃顙魚(yú)血清和肝臟抗氧化酶活性、血清溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量，并在光學(xué)顯微鏡下觀察黃顙魚(yú)肝臟組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，飼料添加1%牡丹籽殼顯著提高黃顙魚(yú)血清中超氧化物歧化酶活性（P<0.001）和補(bǔ)體C3（P<0.05）含量，黃顙魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性顯著升高（P<0.001），指示肝臟氧化損傷程度的丙二醛含量顯著降低（P<0.001），黃顙魚(yú)肝臟形態(tài)結(jié)構(gòu)完好，與對(duì)照組無(wú)明顯差異。牡丹籽殼提高黃顙魚(yú)抗氧化能力和非特異性免疫的效果在5%劑量添加組更加顯著，與空白對(duì)照組相比，血清超氧化物歧化酶、肝臟超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性分別提高了100%（P<0.001）、245%（P<0.001）和176%（P<0.001），血清溶菌酶活性和補(bǔ)體C3含量分別提高了36%（P<0.001）和33%（P<0.01）。與牡丹籽油相比，飼料添加牡丹籽殼能達(dá)到與其相同的保健效果。飼料添加牡丹籽殼能有效提高黃顙魚(yú)抗氧化能力和非特異性免疫，適宜添加量為1%～5%。

關(guān)鍵詞：牡丹籽殼；牡丹籽油；飼料添加劑；抗氧化；非特異性免疫；黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fulvidraco）

中圖分類號(hào)：S963.73 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2024）10-0124-07

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.10.023 開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Abstract： To investigate the effects of dietary peony seed shell on fish oxidation resistance and nonspecific immunity， yellow catfish were fed with 1% or 5% peony seed shell （commercial feed containing 1% or 5% peony seed shell） for 3 weeks. Meanwhile， fish fed with commercial feed only were used as the blank control group， and fish fed with 1% or 5% peony seed oil were used as positive control group. The results showed that， compared with blank control group， the activity of superoxide dismutase （P<0.001） and the content of complement C3 （P<0.05） in serum of fish fed with 1% peony seed shell increased significantly. Liver superoxide dismutase and catalase activities were higher than those of the blank control group （P<0.001）， and liver malondialdehyde content decreased significantly （P<0.001）. Liver histomorphology of yellow catfish was normal and intact in both the blank control group and 1% peony seed shell group， and there was no obvious difference between the two groups. Peony seed shell had a dose-dependent positive effect on promoting the antioxidant capacity and nonspecific immunity in yellow catfish， all the test indexes in the 5% peony seed shell group showed a remarkably better change. Compared with blank control group， serum superoxide dismutase， liver superoxide dismutase and catalase activities in 5% peony seed shell group increased by 100% （P<0.001）， 245% （P<0.001） and 176% （P<0.001）， respectively. Serum lysozyme activity and complement C3 content increased by 36% （P<0.001） and 33% （P<0.01）， respectively. In both dose groups， peony seed shell showed similar positive effects on yellow catfish compared to peony seed oil， the suitable addition amount was 1%～5%.

Key words： peony seed shell； peony seed oil； feed additive； antioxidation； nonspecific immunity； Pelteobagrus fulvidraco

油用牡丹是一種新興的木本油料作物。牡丹籽油含有豐富的不飽和脂肪酸［1-3］，具有抗氧化［4-7］、保護(hù)肝臟［8，9］和增強(qiáng)免疫力［10-15］等功效。牡丹籽殼是牡丹籽榨油前脫殼過(guò)程產(chǎn)生的副產(chǎn)物。隨著牡丹籽油產(chǎn)量增加，數(shù)以萬(wàn)噸計(jì)的牡丹籽殼缺乏合理開(kāi)發(fā)和利用，造成環(huán)境污染，牡丹籽殼的資源化利用刻不容緩。研究表明，牡丹籽殼含有豐富的低聚芪類化合物——白藜蘆醇［16，17］，是一種高生物活性的植物抗毒素，具有抗氧化、抗炎性、防止神經(jīng)退化、抗癌及預(yù)防衰老等多種保健功效［18］。在藥物引起動(dòng)物疾病模型中，白藜蘆醇能顯著提高受試動(dòng)物抗氧化酶基因mRNA水平，提高抗氧化酶活性和谷胱甘肽含量，降低活性氧、丙二醛和促炎性細(xì)胞因子水平［19，20］。與哺乳動(dòng)物類似，白藜蘆醇能提高魚(yú)類抗氧化能力，抑制促炎性基因表達(dá)，同時(shí)促進(jìn)魚(yú)類生長(zhǎng)，提高魚(yú)類天然和適應(yīng)性免疫力［21-23］。以富含白藜蘆醇的牡丹籽殼作為飼料添加劑具有廣闊的市場(chǎng)前景，是提高油用牡丹資源利用率的有效途徑。

黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fulvidraco）屬于鲇形目鲿科，是中國(guó)重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。據(jù)《2023中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》統(tǒng)計(jì)，2022年全國(guó)黃顙魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)60.0萬(wàn)t［24］。隨著黃顙魚(yú)養(yǎng)殖規(guī)模日益擴(kuò)大，細(xì)菌性疾病頻繁暴發(fā)，傳統(tǒng)的抗生素治療存在殘留和耐藥風(fēng)險(xiǎn)，而疫苗預(yù)防存在操作復(fù)雜和特異性強(qiáng)的缺點(diǎn)。2020年中國(guó)推出飼料中全面禁止添加抗生素政策，“綠色無(wú)抗養(yǎng)殖”已成為行業(yè)大趨勢(shì)，研究和使用有效的“替抗”飼料添加劑是養(yǎng)殖行業(yè)關(guān)注的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)。采用營(yíng)養(yǎng)調(diào)控方式，在飼料中添加有利于黃顙魚(yú)免疫力的成分，提高魚(yú)體抗氧化能力，增強(qiáng)抗病力，是預(yù)防黃顙魚(yú)病害發(fā)生的有效措施。例如，飼料添加烏拉爾甘草提取物［25］或其他復(fù)方中藥［26］，可以有效提高柱狀黃桿菌和嗜水氣單胞菌感染后黃顙魚(yú)的存活率，增加血清抗氧化酶和溶菌酶活性、IgM含量，抑制促炎因子的表達(dá)。飼料添加維生素D3能提高黃顙魚(yú)對(duì)鯰愛(ài)德華氏菌的抵抗力，改善細(xì)菌感染引起的腎臟損傷，抑制NF-κB激活和促炎性基因的表達(dá)［27，28］。飼料中同時(shí)添加蝦青素和大黃素時(shí)，黃顙魚(yú)的抗氧化能力和抗逆性顯著增強(qiáng)，在奇異變形桿菌感染后死亡率也明顯降低［29］。隨著牡丹籽油產(chǎn)業(yè)興起，牡丹籽殼的產(chǎn)量不斷增加，又因其含有豐富的生物活性物質(zhì)白藜蘆醇，牡丹籽殼作為經(jīng)濟(jì)、綠色、高效的飼料添加劑具有巨大的市場(chǎng)潛力。

黃顙f04c685b3973ec02c34afa577d458ffb魚(yú)肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，是中國(guó)重要的淡水名特優(yōu)經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。在養(yǎng)殖過(guò)程中，黃顙魚(yú)易受多種水產(chǎn)病原細(xì)菌感染，發(fā)病快、死亡率高，給養(yǎng)殖業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失，尋找提高黃顙魚(yú)免疫力和抗病力的有效方法迫在眉睫。本研究以黃顙魚(yú)為對(duì)象，在飼料中添加不同比例的牡丹籽殼超微粉，研究牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)肝臟組織結(jié)構(gòu)，血清、肝臟抗氧化酶活性和非特異性免疫的影響，以期為牡丹籽殼作為“替抗”添加劑在水產(chǎn)飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。同時(shí)，牡丹籽油富含不飽和脂肪酸，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高，但牡丹籽油提取和純化步驟復(fù)雜，價(jià)格昂貴，限制了其作為飼料添加劑的可能性。同時(shí)以添加牡丹籽油作為對(duì)照，比較牡丹籽油和牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)影響的差異，為評(píng)估牡丹籽殼作為飼料添加劑提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黃顙魚(yú)商品飼料購(gòu)自武漢大北農(nóng)飼料科技有限公司。超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、溶菌酶、補(bǔ)體C3和丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

黃顙魚(yú)商品飼料經(jīng)粉碎機(jī)（DF-35，溫嶺市林大機(jī)械有限公司）粉碎后，過(guò)20目篩網(wǎng)，選取顆粒均勻、無(wú)結(jié)塊的粒質(zhì)飼料與不同添加劑逐級(jí)混合，利用雙螺桿制粒機(jī)（SLR-45，中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院漁業(yè)機(jī)械研究所）擠壓成粒徑2.0 mm的顆粒飼料，60 ℃烘干2 h，冷卻后置于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

牡丹籽油和牡丹籽殼均由武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院林業(yè)果樹(shù)研究所王湛昌高級(jí)工程師提供。牡丹籽殼由武漢中博水產(chǎn)生物技術(shù)有限公司粉碎為200目超微粉。牡丹籽油和牡丹籽殼超微粉室溫儲(chǔ)存于陰涼、干燥、通風(fēng)處。

1.2 試驗(yàn)魚(yú)

黃顙魚(yú)來(lái)自湖北黃優(yōu)源漁業(yè)發(fā)展有限公司，試驗(yàn)前將魚(yú)在1×103 L塑料魚(yú)缸里馴養(yǎng)兩周，每日用商品飼料投喂兩次（9：00和17：00定時(shí)投喂），使魚(yú)適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境和飼料。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)將試驗(yàn)魚(yú)饑餓處理24 h。隨機(jī)選取100尾規(guī)格均勻、健康活潑的魚(yú)，放入各個(gè)魚(yú)缸（體積1×102 L），共計(jì)5組，分別為對(duì)照組、1%牡丹籽油組、1%牡丹籽殼組、5%牡丹籽油組和5%牡丹籽殼組，每組20尾魚(yú)。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院水產(chǎn)研究所中心實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行。周期設(shè)置為21 d，每7 d換水1次，采取自然光照，水溫14～16 ℃。每日投喂兩次飼料（9：00和17：00），采用飽食投喂策略。試驗(yàn)結(jié)束后，試驗(yàn)魚(yú)禁食12 h后采樣。

1.4 血清抗氧化和非特異性免疫指標(biāo)測(cè)定

每組隨機(jī)選取3尾黃顙魚(yú)，采用1 mL注射器進(jìn)行尾靜脈取血。血液在室溫靜置2 h后，4 ℃靜置過(guò)夜。第二天，4 ℃下3 500 r/min離心10 min，收集上清作為血清樣品，樣品凍存于-80 ℃。采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定血清總超氧化物酶活性，采用比濁法測(cè)定血清溶菌酶活性，采用免疫濁度法測(cè)定血清補(bǔ)體C3含量。

1.5 肝臟組織結(jié)構(gòu)觀察

每組隨機(jī)選取5尾黃顙魚(yú)，從體側(cè)線處解剖魚(yú)體，取小塊肝臟組織立即置入1.5 mL 4%多聚甲醛溶液，室溫固定24 h以上。在通風(fēng)櫥內(nèi)將固定好的組織修切平整，放于脫水盒內(nèi)。組織塊經(jīng)梯度乙醇-二甲苯脫水、石蠟包埋，切成4 μm薄片，60 ℃烘箱烘干。切片經(jīng)二甲苯-梯度乙醇-水洗滌后，蘇木素染細(xì)胞核、伊紅染細(xì)胞質(zhì)，最后將切片經(jīng)梯度乙醇-二甲苯脫水和透明，中性樹(shù)膠封片。使用Pannoramic midi型全自動(dòng)數(shù)字切片掃描系統(tǒng)拍攝肝臟組織。

1.6 肝臟抗氧化指標(biāo)測(cè)定

肝臟切片樣品取樣結(jié)束后，剩余肝臟組織立即置于1.5 mL離心管液氮中速凍，2 h后轉(zhuǎn)入-80 ℃保存。采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定肝臟總超氧化物酶活性，采用鉬酸銨法測(cè)定肝臟過(guò)氧化氫酶活性，采用TBA（硫代巴比妥酸）法測(cè)定肝臟MDA含量。

1.7 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。所有數(shù)值均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P<0.05代表具有顯著性差異，P<0.01代表具有極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)血清抗氧化和非特異性免疫指標(biāo)的影響

含有牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料飼喂黃顙魚(yú)21 d后，采用尾靜脈取血并收集血清，檢測(cè)血清超氧化物歧化酶和溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量。結(jié)果表明，當(dāng)添加量為1%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的1.83倍和1.46倍（圖1A，P<0.001）。牡丹籽油和牡丹籽殼以劑量依賴方式促進(jìn)超氧化物歧化酶活性（圖1A，P<0.01），當(dāng)添加量為5%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組黃顙魚(yú)血清超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的2.70倍和2.02倍（圖1A，P<0.001）。在1%和5%添加劑量下，牡丹籽油提高血清超氧化物歧化酶活性的效果優(yōu)于牡丹籽殼（圖1A，P<0.01）。

圖1B展示了飼喂含有牡丹籽油或牡丹籽殼飼料后黃顙魚(yú)血清溶菌酶活性的變化趨勢(shì)。1%劑量添加組，牡丹籽油和牡丹籽殼略微提高了溶菌酶活性，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。當(dāng)添加劑量為5%時(shí)，與對(duì)照組相比，牡丹籽油組和牡丹籽殼組的黃顙魚(yú)血清溶菌酶活性顯著增加，分別為對(duì)照組的1.24倍（P<0.01）和1.36倍（P<0.001），牡丹籽殼促進(jìn)溶菌酶活性的效果優(yōu)于牡丹籽油（P<0.05）。

飼料中添加牡丹籽油或牡丹籽殼也能有效提高黃顙魚(yú)血清補(bǔ)體C3的含量。如圖1C所示，當(dāng)添加比例為1%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組黃顙魚(yú)血清補(bǔ)體C3含量分別為對(duì)照組的1.11倍和1.15倍（P<0.05）；當(dāng)添加比例為5%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組補(bǔ)體C3含量分別為對(duì)照組的1.27倍和1.33倍（P<0.01）。牡丹籽油和牡丹籽殼顯著提高血清補(bǔ)體C3含量的效果與添加量呈正比，當(dāng)添加量一致時(shí)，兩者提高補(bǔ)體C3含量的效果沒(méi)有顯著性差異（P>0.05）。

2.2 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響

飼喂對(duì)照組飼料21 d后，光學(xué)顯微鏡下觀察黃顙魚(yú)肝臟組織致密緊實(shí)，肝細(xì)胞沿肝索排列整齊、結(jié)構(gòu)清晰，偶見(jiàn)肝細(xì)胞空泡化（圖2A，空心箭頭所示）和少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)（圖2A，黑色箭頭所示）。

與對(duì)照組相比，飼喂各組添加劑的黃顙魚(yú)肝臟組織整體情況良好，偶見(jiàn)個(gè)別魚(yú)體肝臟的異常變化。1%牡丹籽油組黃顙魚(yú)也出現(xiàn)了炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（圖2B）和肝細(xì)胞空泡化（圖2C）現(xiàn)象。1%牡丹籽殼組黃顙魚(yú)肝臟出現(xiàn)黑色素沉積（圖2D，空心三角所示）和空泡化現(xiàn)象（圖2D，空心箭頭所示），偶見(jiàn)紅細(xì)胞浸潤(rùn)（圖2E，黑色三角所示）。5%牡丹籽油組黃顙魚(yú)肝臟組織整體情況與對(duì)照組和1%牡丹籽油組類似，肝細(xì)胞輕度空泡化（圖2F，空心箭頭所示），偶見(jiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)（圖2F和2G，黑色箭頭所示）和黑色素沉積（圖2G，空心三角所示）。5%牡丹籽殼組黃顙魚(yú)肝臟組織結(jié)構(gòu)良好，肝細(xì)胞有少量空泡化（圖2H）和蛋白液浸潤(rùn)（圖2I，黑色星形所示）現(xiàn)象。

本研究中黃顙魚(yú)攝食含有1%和5%牡丹籽殼或牡丹籽油的飼料21 d后，其肝臟組織結(jié)構(gòu)完好，未見(jiàn)明顯的異常變化，表明在該范圍內(nèi)牡丹籽殼和牡丹籽油具有安全的可食用性。

2.3 飼料添加牡丹籽殼對(duì)黃顙魚(yú)肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由圖3A可知，飼喂含有1%和5%牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料21 d，黃顙魚(yú)肝臟超氧化物歧化酶活性顯著升高。當(dāng)添加比例為1%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的1.86倍和1.77倍（P<0.001），此時(shí)兩者提高酶活的效果相當(dāng)（P>0.05）。當(dāng)添加比例為5%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組超氧化物歧化酶活性分別為對(duì)照組的2.91倍和3.45倍（P<0.001），牡丹籽殼提高超氧化物歧化酶活性的效果顯著優(yōu)于牡丹籽油（P<0.05）。

與超氧化物歧化酶類似，飼料中添加不同濃度的牡丹籽油或牡丹籽殼亦能顯著提高黃顙魚(yú)肝臟過(guò)氧化氫酶活性（圖3B，P<0.001），提高效果在高劑量組更加顯著（圖3B，P<0.001）。與對(duì)照組相比，1%牡丹籽油組和1%牡丹籽殼組的過(guò)氧化氫酶活性分別提高了96%和85%。5%牡丹籽油組和5%牡丹籽殼組過(guò)氧化氫酶活性分別為對(duì)照組的2.96倍和2.76倍。牡丹籽油促進(jìn)溶菌酶活性的效果略優(yōu)于牡丹籽殼。

超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性增加，指示肝臟細(xì)胞氧化損傷程度的丙二醛含量在牡丹籽油組和牡丹籽殼組顯著降低，表明牡丹籽油和牡丹籽殼能有效增強(qiáng)黃顙魚(yú)肝臟抗氧化能力。當(dāng)添加量為1%時(shí)，牡丹籽油組和牡丹籽殼組肝臟MDA含量都為對(duì)照組的68%（圖3C，P<0.001），MDA含量在兩個(gè)添加劑組之間沒(méi)有差異（圖3C，P>0.05）。當(dāng)添加量為5%時(shí)，黃顙魚(yú)肝臟MDA含量在兩個(gè)添加劑組進(jìn)一步降低，分別為對(duì)照組的60%和50%，牡丹籽殼改善肝臟氧化水平的效果顯著優(yōu)于牡丹籽油（圖3C，P<0.05）。

3 討論

3.1 飼料添加牡丹籽殼顯著提高黃顙魚(yú)血清超氧化物歧化酶和溶菌酶活性及補(bǔ)體C3含量

血清超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶在機(jī)體抵御活性氧引起的氧化損傷過(guò)程中發(fā)揮重要作用［30，31］，是衡量機(jī)體健康的重要指標(biāo)之一。溶菌酶和補(bǔ)體系統(tǒng)在魚(yú)類識(shí)別病原細(xì)菌和抵抗感染過(guò)程中具有重要作用［32，33］，其中C3是補(bǔ)體系統(tǒng)的關(guān)鍵核心分子［33］。本研究表明飼料添加1%或5%的牡丹籽殼能有效提高黃顙魚(yú)血清超氧化物酶和溶菌酶活性，提高血清補(bǔ)體C3含量，表明牡丹籽殼能增強(qiáng)黃顙魚(yú)清除氧自由基和抵抗病原細(xì)菌的能力，維持黃顙魚(yú)機(jī)體健康。牡丹籽殼富含白藜蘆醇，研究表明白藜蘆醇能顯著提高大菱鲆超氧化物歧化酶mRNA水平［22］，這可能是飼喂牡丹籽殼黃顙魚(yú)超氧化物歧化酶活性增加的原因之一。攝食含有螺旋藻的飼料可提高虹鱒溶菌酶和補(bǔ)體C3的轉(zhuǎn)錄水平［34］，銅藻提取物［35］和巖藻多糖［36］可增加黃顙魚(yú)血清溶酶體活性和補(bǔ)體C3含量。飼料添加牡丹籽殼可同時(shí)增強(qiáng)黃顙魚(yú)血清抗氧化能力和非特異性免疫，具有免疫增強(qiáng)劑的功效。牡丹籽油含有豐富的不飽和脂肪酸，能顯著提高齊口裂腹魚(yú)血清超氧化物酶和溶菌酶活性，增加血清補(bǔ)體C3含量［11］。

3.2 飼料添加牡丹籽殼不影響黃顙魚(yú)肝臟組織結(jié)構(gòu)

肝臟是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的重要器官，肝臟的組織學(xué)變化是評(píng)估動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)的可靠指標(biāo)之一［37］。已有研究證實(shí)牡丹籽油不影響大鼠臟器質(zhì)量及臟體比，各臟器未見(jiàn)明顯的病理?yè)p害改變［38，39］，表明牡丹籽油具有較高的食用安全性。本研究中飼喂含有牡丹籽油或牡丹籽殼的飼料不影響黃顙魚(yú)的存活率和行為能力，也未造成黃顙魚(yú)肝臟結(jié)構(gòu)明顯的變化，表明牡丹籽油和牡丹籽殼安全、無(wú)毒，可作為飼料添加劑的備選物質(zhì)。研究表明，合理使用添加劑有助于改善受試動(dòng)物肝臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，例如攝食含有蒲公英［40，41］、銀杏葉［42］或枸杞［43］提取物飼料的雜交石斑魚(yú)肝血竇和肝細(xì)胞形態(tài)完好，邊界清晰，油紅染色表明肝臟脂質(zhì)化程度明顯低于對(duì)照組。牡丹籽殼能否改善黃顙魚(yú)肝臟組織形態(tài)進(jìn)而促進(jìn)肝臟代謝解毒功能有待進(jìn)一步探索。

3.3 飼料添加牡丹籽殼顯著提高黃顙魚(yú)肝臟抗氧化能力

肝臟是動(dòng)物體內(nèi)重要的代謝和解毒器官，肝臟的氧化損傷直接影響機(jī)體的健康［44］。研究表明，牡丹籽油能干預(yù)四氯化碳［8］和環(huán)磷酰胺［9］誘導(dǎo)的小鼠肝損傷，顯著提高肝臟超氧化物酶水平，降低丙二醛含量和肝損傷程度，與本研究中牡丹籽油促進(jìn)黃顙魚(yú)肝臟抗氧化酶活性是一致的。牡丹籽殼含有豐富的白藜蘆醇，是一種高效的天然抗氧化劑［45］，其作為飼料添加劑能顯著提高攝食動(dòng)物抵抗氧化損傷的能力［19-23］。此外，牡丹籽殼還含有黃酮［46，47］、黑色素［48］和多酚化合物［49，50］，天然產(chǎn)物也具有清除自由基和抗氧化的功效［51］。本研究中牡丹籽殼飼喂組的黃顙魚(yú)肝臟超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性顯著增加，肝臟丙二醛含量顯著降低，表明牡丹籽殼能調(diào)節(jié)黃顙魚(yú)肝臟抗氧化狀態(tài)，降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)對(duì)肝細(xì)胞的毒害作用，具有促進(jìn)肝臟健康的保健功效。

4 結(jié)論

飼料添加1%和5%牡丹籽殼能顯著提高黃顙魚(yú)抗氧化酶活性，增強(qiáng)黃顙魚(yú)非特異性免疫，對(duì)黃顙魚(yú)肝臟組織結(jié)構(gòu)沒(méi)有損傷作用。本研究中牡丹籽殼的保健功效與牡丹籽油相當(dāng)，具有經(jīng)濟(jì)、安全、高效的優(yōu)點(diǎn)，其作為飼料添加劑亦可解決粗獷堆放造成的環(huán)境污染問(wèn)題，達(dá)到變廢為寶的環(huán)保效果。牡丹籽殼可作為黃顙魚(yú)飼料添加劑使用。

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收稿日期：2023-04-18

基金項(xiàng)目：武漢知識(shí)創(chuàng)新專項(xiàng)-基礎(chǔ)研究項(xiàng)目（2022020801010414）； 武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新項(xiàng)目（XTCX202204）

作者簡(jiǎn)介：劉鹿憶（1987-），女，黑龍江雞西人，農(nóng)藝師，博士，主要從事水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌病與免疫防控工作，（電話）13657274094（電子信箱）luyi_1009@126.com；通信作者，張立強(qiáng)（1979-），男，江西金溪人，高級(jí)工程師，博士，主要從事水產(chǎn)病害防控工作，（電話）15926219392（電子信箱）zhangliqiang@wuhanagri.com。