摘要：目的 研究反復(fù)輕度創(chuàng)傷性腦損傷（rmTBI）對(duì)延髓神經(jīng)元形態(tài)和突觸可塑性的影響。方法 32只雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組（SHAM組，n=8）和rmTBI 組（n=24）。使用自由落體打擊裝置建立rmTBI 模型，打擊后存活小鼠為rmTBI 存活組（rmTBI-S），打擊后死亡小鼠為rmTBI死亡組（rmTBI-D）。使用神經(jīng)損傷評(píng)分、翻正反射和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠神經(jīng)功能障礙，使用蘇木素-伊紅及尼氏染色觀察神經(jīng)細(xì)胞病理形態(tài)改變，使用免疫印跡及免疫熒光染色檢測(cè)神經(jīng)連接蛋白1（NLG-1）和突觸后致密蛋白95（PSD-95）表達(dá)水平。結(jié)果 SHAM組小鼠無(wú)死亡，rmTBI 組死亡率41.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）；和SHAM組相比，rmTBI-S 組小鼠神經(jīng)損傷評(píng)分降低（Plt;0.001）、翻正反射恢復(fù)時(shí)間（Plt;0.001）和強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間（Plt;0.05）增加，神經(jīng)元尼氏小體消失、腫脹壞死；延髓NLG-1（Plt;0.05）和PSD-95（Plt;0.05）表達(dá)水平降低；和rmTBI-S 組相比，rmTBI-D組NLG-1（Plt;0.01）和PSD-95（Plt;0.01）表達(dá)水平降低。rmTBI-D組小鼠延髓神經(jīng)纖維扭曲水腫，神經(jīng)元密度降低。結(jié)論 延髓突觸結(jié)構(gòu)異常和功能障礙可能與rmTBI導(dǎo)致的死亡及神經(jīng)功能損害相關(guān)。

關(guān)鍵詞：反復(fù)輕度創(chuàng)傷性腦損傷；延髓；神經(jīng)連接蛋白-1；突觸后致密蛋白-95；突觸可塑性

創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）是法醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)重要的研究?jī)?nèi)容［1］，尤其是反復(fù)輕度創(chuàng)傷性腦損傷（rmTBI），其發(fā)生率和死亡率較高［2］。rmTBI多見(jiàn)于軍人、運(yùn)動(dòng)員和青少年，雖不伴有嚴(yán)重的腦挫裂傷和腦水腫等致死性形態(tài)學(xué)改變，但可造成腦組織基因轉(zhuǎn)錄水平和個(gè)體行為改變［3］。臨床研究證實(shí)，rmTBI可導(dǎo)致一些傷者罹患慢性創(chuàng)傷性腦?。–TE）［4， 5］。然而，CTE的特異性診斷指標(biāo)及其與rmTBI 之間的確切關(guān)聯(lián)尚不明確［6］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)亦發(fā)現(xiàn)，rmTBI引起白質(zhì)神經(jīng)元缺損、慢性神經(jīng)炎癥、氧化應(yīng)激等累積性損傷［7］，導(dǎo)致認(rèn)知缺陷、執(zhí)行和運(yùn)動(dòng)功能障礙以及神經(jīng)退行性病變［8］。法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，部分死者生前外傷史并不明確。如何通過(guò)具有診斷價(jià)值的形態(tài)、代謝和功能指標(biāo)證實(shí)rmTBI及CTE的存在并確定其在死亡中的作用已成為法醫(yī)學(xué)顱腦損傷研究的重要內(nèi)容之一［9］。

一項(xiàng)回顧性研究發(fā)現(xiàn)，輕度TBI可引起傷者遠(yuǎn)期致死率升高，其中死亡原因主要為心血管和呼吸系統(tǒng)疾?。?0］?？紤]到延髓分布調(diào)控呼吸循環(huán)功能的神經(jīng)核團(tuán)（生命中樞），如孤束核腹外側(cè)的背側(cè)呼吸組，接受來(lái)自呼吸系統(tǒng)的傳入神經(jīng)纖維；腹尾側(cè)平面的前包欽格復(fù)合體是呼吸節(jié)律發(fā)起部位；頭端腹外側(cè)（RVLM）和尾端腹外側(cè)（CVLM）分別和血壓升高、降低相關(guān)；RVLM區(qū)C1神經(jīng)元參與的交感縮血管緊張，在麻醉和缺氧情況下對(duì)于維持正常血壓有重要意義［11］。因此，本研究以延髓作為目標(biāo)腦區(qū)，通過(guò)研究延髓形態(tài)和功能異常，探究rmTBI導(dǎo)致死亡和神經(jīng)損傷的潛在分子機(jī)制。