摘要 ［目的］探索典型抗菌藥物在不同品種肉雞羽毛和皮脂中的殘留規(guī)律，評價羽毛在肉雞獸藥殘留監(jiān)控中的意義。［方法］選擇雪山雞和AA肉雞于出欄前21 d投喂氟苯尼考和恩諾沙星，測定停藥后不同時間羽毛和皮脂中的藥物殘留量。［結(jié)果］停藥后第1天2個品種肉雞羽毛中氟苯尼考及其代謝物（氟苯尼考胺）的殘留總量達到最高水平，且含量相當。停藥后第1天雪山雞羽毛中恩諾沙星及其代謝物（環(huán)丙沙星）殘留總量達到峰值，AA肉雞于停藥后第3天達到峰值，且雪山雞羽毛中藥物殘留總量峰值遠高于AA肉雞。此后，羽毛中藥物殘留總量逐漸下降，停藥后第14天氟苯尼考及其代謝物在AA肉雞和雪山雞羽毛中的殘留總量分別為281.37和424.30 μg/kg，恩諾沙星及其代謝物殘留總量分別為16.03和26.21 μg/kg。皮脂中2種藥物的殘留規(guī)律與羽毛中2種藥物的殘留規(guī)律類似，提示通過監(jiān)測羽毛中的藥物殘留量可以間接推斷可食用組織的藥物殘留情況。［結(jié)論］同種藥物在不同品種肉雞羽毛中的代謝規(guī)律存在差異，羽毛中藥物殘留量可作為監(jiān)測肉雞產(chǎn)品中藥物殘留水平的參考。

關(guān)鍵詞 氟苯尼考；恩諾沙星；羽毛；皮脂；殘留規(guī)律

中圖分類號 TS 251.7 文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2024）22-0085-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.22.016

開放科學(xué)（資源服務(wù)）標識碼（OSID）：

Study on the Residual Laws of Typical Antibacterial Drugs in the Feather and Sebum of Different Broiler Breeds

CHEN Da-wei ZHANG Jing LIU Yin-yin^1，2 et al

（1.Jiangsu Institute of Poultry Science，Yangzhou，Jiangsu 225125;2.Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Poultry Products（Yangzhou），Ministry of Agriculture and Rural Affairs，Yangzhou，Jiangsu 225125）

Abstract ［Objective］ To explore the residual laws of typical antibacterial drugs in the feather and sebum of different broiler breeds，and evaluate the significance of feathers in monitoring the veterinary drug residues of broilers.［Method］ Xueshan Chicken and AA broilers were fed with flufenicol or enrofloxacin for 21 days before slaughter，and drug residues in the feather and sebum at different time after withdrawal were determined.［Result］The residues of flufenicol and its metabolites（flufenicolamide） in the feathers of the two broiler breeds reached the highest level on the first day after drug withdrawal，and the contents were close.The total residue of enrofloxacin and its metabolites（ciprofloxacin） in the feathers of Xueshan Chicken reached its peak on the first day after withdrawal，and that in AA chicken reached its peak on the third day after withdrawal.The peak residual amount of drugs in the feather of Xueshan Chicken was greatly higher than that in AA broilers.Then the drug residual amount in the feather gradually decreased.On the 14^th day after withdrawal，the residues of flufenicol and its metabolites in the the feathers of AA broilers and Xueshan Chicken were 281.37 and 424.30 μg/kg respectively， the content of enrofloxacin and its metabolites were 16.03 and 26.21 μg/kg，respectively.The residual laws of the two drug es in the sebum were similar to those in the feathers，suggesting that monitoring drug residues in the feathers could indirectly infer drug residues in edible tissues.［Conclusion］There were differences in the metabolism of the same drug in the feathers of different breeds of broilers， and the drug residues in the feathers could be used as the reference for monitoring the drug residues in broiler products.

Key words Flufenicol;Enrofloxacin;Feather;Sebum;Residue laws

恩諾沙星和氟苯尼考是2種常見獸用抗菌藥，在臨床上應(yīng)用非常廣泛^［1-4］。近年來，恩諾沙星和氟苯尼考在禽產(chǎn)品中常有檢出，是影響禽肉質(zhì)量安全的重要風(fēng)險因子^［5］。抗菌藥物的使用不僅會導(dǎo)致禽肉等可食用組織中產(chǎn)生獸藥殘留，非食用組織（如羽毛等）中同樣會產(chǎn)生獸藥殘留^［6］。羽毛作為養(yǎng)禽業(yè)的副產(chǎn)品，可以制作羽毛粉用作飼料。羽毛粉可廣泛用于畜禽、水產(chǎn)等高蛋白質(zhì)飼料，蛋白質(zhì)含量高達80%，氨基酸組分比較齊全，除賴氨酸、組氨酸、色氨酸、蛋氨酸含量低于進口魚粉外，其余氨基酸含量均高于進口魚粉，胱氨酸的含量居所有天然飼料之首，是很好的蛋白質(zhì)飼料來源^［7-9］。

肉雞羽毛是制備羽毛粉的重要原料，羽毛中的抗菌藥物殘留對畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全產(chǎn)生潛在威脅。目前羽毛粉的衛(wèi)生指標主要參考GB 13078—2017《飼料衛(wèi)生標準》^［10］，但該標準中并沒有規(guī)定羽毛中相關(guān)獸藥殘留的限量。按照現(xiàn)行抗菌藥物的休藥期規(guī)定，肉雞按氟苯尼考休藥期8 d、恩諾沙星休藥期5 d執(zhí)行后^［11］，目前羽毛中藥物殘留水平尚無相關(guān)報道。不同品種肉雞羽毛中藥物殘留量是否存在差異有待研究。筆者選擇雪山雞和AA肉雞2個肉雞品種，監(jiān)測了典型抗菌藥物氟苯尼考和恩諾沙星在肉雞羽毛和皮脂中的殘留量，研究抗菌藥物在肉雞羽毛中的殘留代謝規(guī)律，旨在為羽毛粉的安全使用提供技術(shù)支撐，同時也為科學(xué)監(jiān)測雞群藥物殘留水平提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品與試劑 。

氟苯尼考粉（含量20%，廣東大華農(nóng)動物保健品股份有限公司）；恩諾沙星可溶性粉（含量10%，合肥中龍神力動物藥業(yè)有限公司）；氟苯尼考、恩諾沙星、環(huán)丙沙星標準品，均購自德國 Dr.Ehrenstorfer公司；氟苯尼考胺標準品、氟苯尼考胺氘代物標準品、恩諾沙星D5標準品、氟苯尼考氘代物標準品均購自德國Witega公司。色譜純級甲醇、乙腈、乙酸乙酯、正己烷均購自德國默克公司；氨水（分析純，上海阿拉丁生物科技股份有限公司）；試驗用超純水（電阻率18.2 MΩ·cm）。

1.1.2 試驗動物。1日齡AA肉雞和雪山雞各50只，由國家家禽生產(chǎn)性能測定站提供。

1.1.3 儀器與設(shè)備。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（TSQ QUANTUM ACCESS MAX，美國Thermo Fisher）；高速冷凍離心機（3-30K，德國Sigma）；氮吹儀（N-EVAP，美國Organomation公司）；超純水儀（型號Milli-Q Academic，美國Millipore公司）。

1.2 方法

1.2.1 動物分組與處理。

試驗前對雞舍全面殺菌消毒，并空置7 d；各種器具設(shè)備（如飼料桶和拌料設(shè)備等）使用前，清潔消毒。除該試驗給藥外，不使用任何藥物。飼養(yǎng)管理按照標準程序進行。于出欄日齡（AA肉雞和雪山雞的出欄日齡分別為42、120 d）前21 d飲水給藥，氟苯尼考給藥劑量為25 mg/kg，恩諾沙星給藥劑量為10 mg/kg，連用5 d。

1.2.2 樣品采集。

分別于停藥后第1、3、5、7、10、14天采樣，每個品種每個時間點隨機選擇6只進行屠宰，采集背部和翅膀羽毛以及背部和胸部皮膚，皮膚樣品經(jīng)充分均質(zhì)后作為皮脂樣品，-20 ℃下冷凍保存待測。

1.2.3 樣品檢測。

羽毛經(jīng)蒸餾水充分清洗后于60 ℃下烘干至恒重，用粉碎機充分粉碎。羽毛中氟苯尼考及其代謝物（氟苯尼考胺）殘留量檢測參考國家標準方法^［12］，恩諾沙星及其代謝物（環(huán)丙沙星）殘留量檢測參考文獻［6］方法。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理。試驗結(jié)果均以“平均值±標準差”表示。采用Excel軟件進行數(shù)據(jù)制圖，使用WT 1.4軟件計算皮脂休藥期。

2 結(jié)果與分析

2.1 羽毛中氟苯尼考和氟苯尼考胺的殘留消除規(guī)律

從圖1可以看出，停藥后第1天AA肉雞和雪山雞羽毛中氟苯尼考及其代謝物（氟苯尼考胺）的殘留量達到最高水平，且含量相當。此后，AA肉雞和雪山雞羽毛中氟苯尼考和氟苯尼考胺殘留總量逐漸下降，停藥后第7天較第1天分別下降了49.02%和42.03%，停藥后第14天AA肉雞和雪山雞羽毛中的藥物殘留總量分別為281.37和424.30 μg/kg。

2.2 羽毛中恩諾沙星和環(huán)丙沙星的殘留消除規(guī)律

從圖2可以看出，停藥后第1天雪山雞羽毛中恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留總量達到峰值，AA肉雞于停藥后第3天達到峰值。雪山雞羽毛中藥物殘留總量峰值遠高于AA肉雞。此后逐漸下降，停藥后第7天AA肉雞和雪山雞羽毛中藥物殘留量較第1天分別下降了23.32%和49.32%，停藥后第14天恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留總量分別為16.03和26.21 μg/kg。

2.3 皮脂中氟苯尼考和氟苯尼考胺的殘留規(guī)律

由表1可知，停藥后第1天雪山雞和AA肉雞皮脂中氟苯尼考及氟苯尼考胺殘留總量達到峰值，雪山雞皮脂中藥物殘留總量峰值明顯高于AA肉雞，此后快速下降，至停藥后第7天分別降至殘留總量峰值的4.69%和3.67%；停藥后第14天雪山雞皮脂中氟苯尼考及氟苯尼考胺殘留總量為2.15 μg/kg，而AA肉雞皮脂中未檢出。通過休藥期軟件計算出氟苯尼考和氟苯尼考胺的休藥期分別為1.98和2.87 d。

2.4 皮脂中恩諾沙星和環(huán)丙沙星的殘留規(guī)律

由表2可知，停藥后第1天雪山雞和AA肉雞皮脂中恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留總量達到峰值，雪山雞皮脂中藥物殘留總量峰值明顯高于AA肉雞，此后快速下降，至停藥后第7天分別降至藥物殘留總量峰值的6.57%和2.81%。停藥后第10天雪山雞皮脂中恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留總量為20.67 μg/kg，而AA肉雞皮脂中未檢出。通過休藥期軟件計算出恩諾沙星和環(huán)丙沙星的休藥期分別為1.67和10.29 d。

3 討論

羽毛（毛發(fā)）采樣對動物具有非侵入性和非損傷性的特點。此外，毛發(fā)分析具有收集操作簡單，穩(wěn)定性好，儲存和運輸時不用專門預(yù)防處理（如pH控制、冷藏、使用抗菌試劑）等優(yōu)點^［6］。研究表明，羽毛是家禽抗生素殘留很有前途的檢測樣品，是監(jiān)測家禽養(yǎng)殖中抗生素使用情況的良好材料。其原因在于家禽羽毛空管狀的結(jié)構(gòu)使得代謝變得緩慢，導(dǎo)致其中獸藥殘留容易形成累積效應(yīng)。因此，將家禽羽毛作為檢測抗生素殘留的靶組織具有較大的優(yōu)勢；此外，羽毛采樣安全便捷，更適合進行活體檢驗，在雞養(yǎng)殖環(huán)節(jié)、用藥期及休藥期等安全檢驗方面的意義尤為突出。該研究發(fā)現(xiàn)2個肉雞品種羽毛中氟苯尼考的起始殘留量相當，下降規(guī)律類似，后期雪山雞羽毛中藥物降解速度略慢于AA肉雞。2個品種羽毛中恩諾沙星和環(huán)丙沙星的起始殘留量差異較大，停藥后第14天2個肉雞品種羽毛中恩諾沙星及其代謝物殘留水平相當。同時，筆者也發(fā)現(xiàn)2個品種肉雞皮脂中藥物代謝時間存在較大差異，雪山雞皮脂中氟苯尼考和恩諾沙星相同時間點的殘留量均高于AA肉雞，因而藥物消除速率比AA肉雞慢。因此，由于不同品種肉雞藥物代謝規(guī)律存在差異，通過監(jiān)測羽毛中藥物殘留水平推斷可食用組織的藥物殘留量必須針對不同品種進行反復(fù)驗證。

AA肉雞屬于國外引進的快大型白羽肉雞，特點是生長速度快，一般40日齡出欄，飼養(yǎng)量大，市場占有率高^［13］。雪山雞屬于慢速型黃羽肉雞，100日齡以上出欄^［14］。羽毛的迅速生長發(fā)育期為3～6周齡^［15］，AA肉雞給藥后正處于該時期，迅速生長發(fā)育期代謝速度快可能是其羽毛中停藥后第14天藥物殘留量均低于雪山雞的原因。雪山雞給藥后已超出羽毛的迅速生長發(fā)育期，代謝速度下降，導(dǎo)致其羽毛中藥物殘留量較高。羽毛的毛囊分布在皮膚下。家禽從雛鳥長成成鳥后，會發(fā)生羽毛蛻變等變化，但羽毛會固定下來，羽柄開始變硬。在整個發(fā)育過程中，毛囊的數(shù)量是固定的，是胚胎發(fā)育過程形成的，這也是藥物進入羽毛的重要途徑。研究發(fā)現(xiàn)，白羽肉雞的毛囊密度要低于黃羽肉雞^［16］，這可能導(dǎo)致單位面積皮脂中藥物轉(zhuǎn)移進入羽毛的量存在差異。該研究發(fā)現(xiàn)，與恩諾沙星相比，氟苯尼考更容易在羽毛中蓄積。黃羽肉雞轉(zhuǎn)移進入羽毛中的藥物殘留量比AA肉雞多。Gratacós-Cubarsí等^［17］認為藥物一旦進入到毛發(fā)中，它將退出代謝和排泄過程。該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論氟苯尼考還是恩諾沙星進入羽毛后殘留量整體隨著時間的延長而逐漸下降。該研究結(jié)果與宋占騰^［18］在北京油雞上的研究結(jié)果較為接近。該研究羽毛中藥物殘留總量下降的原因可能有以下方面：一是該研究中采集的羽毛沒有區(qū)分不同類型的羽毛，為混合采集。絨羽和正羽的更新導(dǎo)致部分高殘留量的羽毛被新羽毛代替，逐漸降低了羽毛中的藥物殘留量。二是總羽毛量增加導(dǎo)致藥物殘留量降低。如果按照規(guī)定的休藥期執(zhí)行，根據(jù)該研究結(jié)果中最鄰近的時間點推斷，雪山雞檢測時羽毛中氟苯尼考及其代謝物殘留總量可能高達571.68 μg/kg，恩諾沙星及其代謝物殘留總量可能為41.84 μg/kg；AA肉雞羽毛中氟苯尼考及其代謝物殘留總量為516.57 μg/kg，恩諾沙星及其代謝物殘留總量為21.89 μg/kg。由此可見，投喂氟苯尼考且按規(guī)定休藥期進行休藥后，將雪山雞羽毛添加在飼料中可能存在一定的衛(wèi)生和環(huán)境污染風(fēng)險。

綜上所述，同種藥物在不同品種肉雞羽毛中代謝規(guī)律存在差異，羽毛中藥物殘留量可作為監(jiān)測肉雞用藥的參考。

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