【摘 要】 目的：建立強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌傸S酮與總酚的含量測定方法。方法：采用紫外-可見分光光度法，以芹菜素為對照品，在335 nm處對強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌傸S酮進行含量測定；以沒食子酸為對照品，在268 nm處對強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌偡舆M行含量測定。結(jié)果：芹菜素和沒食子酸分別在質(zhì)量濃度1.40～13.99 μg/mL、2.71～21.68 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率分別為94.98%、100.84%。結(jié)論：該方法操作簡便、準確、重復性好，可用于強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌傸S酮與總酚的含量測定。

【關(guān)鍵詞】 強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?；總黃酮；總酚；紫外-可見分光光度法；含量測定

【中圖分類號】R284.1

【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2024）20-0057-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.20.zgmzmjyyzz202420012

Determination of Total Flavonoids and Phenols in Qiangli Madetuli Ayate Pills by UV-VIS Spectrophotometry

MENG Wenquan1 ZHU Jie1 KANG Wenxuan1 YIN Qiang1，2* MU Dandan2 TIAN Fang2 LI Chaojie2

1. College of Pharmacy，Shihezi University，Shihezi 832003，China;

2. Xinjiang Uygur Pharmaceutical Co.，Ltd.，Urumqi 830026，China

Abstract：Objective To establish a method for the determination of total flavonoids and total phenols in Qiangli Madetuli Ayate Pills.Methods The content of total flavonoids was determined by UV-VIS spectrophotometry at a wavelength of 335 nm using apigenin as a standard substance，and the content of total phenols was determined at a wavelength of 268 nm using gallic acid as a standard substance in the Qiangli Madetuli Ayate Pills.Results The linear relationship of the concentration range was 1.40-13.99 μg/mL for apigenin and 2.71-21.68 μg/mL for gallic acid.The average recovery was 94.98% for apigenin and 100.84% for gallic acid.Conclusion This method is simple，accurate，and reproducible for the determination of total flavonoids and total phenols in the potent Marde Tulip Ayat pills.

Keywords：Qiangli Madetuli Ayate Pills; Total Flavonoids; Total Phenols; UV-VIS Spectrophotometry; Content Determination

強力瑪?shù)猛亮Π喬赝枋怯扇夤?、余甘子、毛訶子肉、洋甘菊等14味藥材組成的維吾爾藥。《藥物精華》（公元1833年，穆罕穆德·艾山）中記載：“助消化，開胃，調(diào)節(jié)異常黏液質(zhì)，填精，提高性欲，固齒；用于易忘，小便滴瀝，腰酸腿痛，關(guān)節(jié)痛?！保?］目前臨床上用于偏癱、關(guān)節(jié)骨痛、腰酸、陽痿等治療?？紤]到該制劑中多味藥材主要成分為黃酮類和酚類化合物，有助于緩解糖尿病、高血壓、高血脂等引起的炎癥反應以及預防和治療相關(guān)疾病，是強力瑪?shù)猛亮Π喬赝璧闹匾幮С煞种唬?-5］。因此，研究利用紫外分光光度法對其總黃酮和總酚含量進行測定，并進行方法學考察，可為其質(zhì)量控制提供有效依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Cary 60紫外-可見分光光度計（安捷倫科技有限公司）；SK250HP超聲波清洗器（上海科導超聲儀器有限公司）；MS205DU型電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）。

1.2 材料 強力瑪?shù)猛亮Π喬赝瑁ㄅ枺?230904、9230902、9230901、9230602、9230301、QL23011601、QL23011602、QL23011603、QL23011301、QL23011302、QL23011201、QL23011202、QL22091901、QL22082702、QL22082201，新疆維吾爾藥業(yè)有限責任公司）；芹菜素（批號：111901-202205，純度質(zhì)量分數(shù)為98.4%）、沒食子酸（批號：110831-201906，純度質(zhì)量分數(shù)為91.5%）均購自中國食品藥品檢定研究院；甲醇，分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 總黃酮含量測定

2.1.1 對照品溶液制備 精密稱取適量芹菜素對照品，加甲醇制成每1 mL含27.97 μg的對照儲備液。

2.1.2 供試品溶液制備 取強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柽m量，粉碎過2號篩，精密稱取0.5 g，加甲醇稀釋至50 mL容量瓶中，定容，超聲處理20 min（250W，53kHz），放置室溫后濾過，收集續(xù)濾液，精密量取1 mL，加甲醇稀釋至25 mL容量瓶中，定容，搖勻，即得。

2.1.3 檢測波長的選擇 取甲醇（用作空白溶劑）、芹菜素對照品溶液和供試品溶液，在200～800 nm波長下掃描。結(jié)果顯示在335 nm左右，對照品溶液和供試品溶液有吸收峰，因此選擇檢測波長為335 nm。

2.1.4 線性關(guān)系考察 取質(zhì)量濃度為27.97 μg/mL的芹菜素對照品溶液，精密吸取0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋得質(zhì)量濃度為1.40 μg/mL、2.80 μg/mL、5.59 μg/mL、8.39 μg/mL、11.19 μg/mL、13.99 μg/mL的芹菜素對照品溶液，照紫外-可見分光光度法在335 nm波長處，以甲醇為空白溶劑測定吸光度。以吸光度為縱坐標，對照品濃度為橫坐標繪制標準曲線。結(jié)果表明，芹菜素回歸方程為Y=0.083X+0.0168（r=0.9990），在1.40～13.99 μg/mL范圍內(nèi)芹菜素線性關(guān)系良好。

2.1.5 精密度試驗 取供試品溶液1份，在335 nm波長處以甲醇為空白溶劑，連續(xù)6次測定吸光度。結(jié)果吸光度RSD值為0.05%（n=6），表明該儀器精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，在335 nm波長處分別于0 h、4 h、5 h、6 h、8 h、10 h、24 h測定，吸光度分別為0.4015、0.3962、0.3972、0.4000、0.4038、0.4096、0.4108，其吸光度RSD值為1.42%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.1.7 重復性試驗 取同一批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?份，按“2.1.2”項下方法制備，在335 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算其含量。結(jié)果測得6份強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌傸S酮平均含量為1.23%，RSD值為1.99%，表明此方法重復性良好。

2.1.8 中間精密度試驗 不同分析人員在不同時間取同一批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?份，按“2.1.2”項下方法制備，在335 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算其含量。結(jié)果測得6份強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌傸S酮平均含量為1.18%，RSD值為3.04%（n=12），表明該方法符合精密度要求。

2.1.9 加樣回收率試驗 取同一批已知含量的強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?組，每組3份，每份約0.25 g，分別精密加入對照品適量，按“2.1.2”項下方法制備共9份，在335 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算回收率。結(jié)果見表1，表明該方法準確度良好。

2.1.10 含量測定 按“2.1.2”項下方法對15批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柽M行總黃酮含量測定。結(jié)果見表2，15批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝杩傸S酮含量在1.16%～1.43%之間，平均值為1.29%，RSD值為5.79%。

2.2 總酚含量測定

2.2.1 對照品溶液的制備 精密稱取適量沒食子酸對照品，加甲醇制成每1 mL含54.20 μg的對照儲備液。

2.2.2 供試品溶液的制備 取強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柽m量，粉碎過2號篩，精密稱取0.1 g，加甲醇稀釋至50 mL容量瓶中，定容，超聲處理30 min（250 W，53 kHz），放置室溫后濾過，收集續(xù)濾液，精密量取2 mL，加甲醇稀釋至10 mL容量瓶中，定容，搖勻，即得。

2.2.3 檢測波長的選擇 取甲醇（用作空白溶劑）、沒食子酸對照品溶液和供試品溶液，在200～800 nm波長下掃描。結(jié)果顯示在268 nm左右，對照品溶液和供試品溶液均有吸收峰，因此選擇檢測波長為268 nm。

2.2.4 線性關(guān)系考察 取質(zhì)量濃度為54.20 μg/mL的沒食子酸對照品溶液，精密吸取0.5 mL、1.5 mL、2.0 mL、3.0 mL、3.5 mL、4.0 mL，分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇稀釋得質(zhì)量濃度為2.71 mL、8.13 mL、10.84 mL、16.26 mL、18.97 mL、21.68 μg/mL的沒食子酸對照品溶液，照紫外-可見分光光度法在268 nm波長處，以甲醇為空白溶劑測定吸光度，以吸光度為縱坐標，對照品濃度為橫坐標繪制標準曲線。結(jié)果表明，沒食子酸回歸方程為Y=0.0534X+0.006（r=0.9998）。在2.71～21.68 μg/mL范圍內(nèi)沒食子酸線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度試驗 取供試品溶液1份，在268 nm波長處以甲醇為空白溶劑，連續(xù)6次測定吸光度，結(jié)果吸光度RSD值為0.04%（n=6），表明該儀器精密度良好。

2.2.6 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，在268 nm波長處分別于0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、18 h、20 h、22 h、24 h測定，吸光度分別為0.5930、0.5961、0.5980、0.5996、0.5998、0.5988、0.6003、0.6015、0.6022、0.6091，其吸光度RSD值為0.71%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.7 重復性試驗 取同一批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?份，按“2.2.2”項下方法制備，在268 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算其含量。結(jié)果測得6份強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌偡悠骄繛?.86%，RSD值為0.41%，表明此方法重復性良好。

2.2.8 中間精密度試驗 不同分析人員在不同時間取同一批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?份，按“2.2.2”項下方法制備，在268 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算其含量。結(jié)果測得6份強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚锌偡悠骄繛?.85%，RSD值為0.57%（n=12），表明該方法符合精密度要求。

2.2.9 加樣回收率試驗 取同一批已知含量的強力瑪?shù)猛亮Π喬赝?組，每組3份，每份約0.05 g，分別精密加入對照品適量，按“2.2.2”項下方法制備共9份，在268 nm波長處以甲醇為空白溶劑，測定吸光度并計算回收率。結(jié)果見表3，表明該方法準確度良好。

2.2.10 含量測定 按“2.2.2”項下方法對15批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柽M行總酚含量測定。結(jié)果見表4，15批強力瑪?shù)猛亮Π喬赝杩偡雍吭?.55%～3.38%之間，平均值為2.98%，RSD值為7.29%。

3 討論

目前暫無強力瑪?shù)猛亮Π喬赝栀|(zhì)量研究相關(guān)內(nèi)容的報道，本研究首次采用紫外-可見分光光度法對其黃酮類和酚類成分進行含量測定，結(jié)果顯示，總黃酮和總酚含量較高，15批樣品總黃酮、總酚平均含量分別為1.29%、2.98%，RSD值分別為5.79%、7.29%，表明各批次之間具有一定的差異，可能與所用14味藥材產(chǎn)地、采收時間等因素有關(guān)。此外，相關(guān)研究報道，動脈粥樣硬化［6］是導致偏癱的重要原因，而高脂血癥是引起動脈硬化的主要原因之一，其他引起偏癱的原因有高血壓［7］、腦血管?。?］、糖尿?。?］等。而黃酮類［10-11］與酚類［12-13］化合物具有抗動脈粥樣硬化、降低血脂、抗高血壓、保護缺血性心肌損傷、抗糖尿病等多種藥理活性，對強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚委熎c具有重要作用。因此，總黃酮和總酚可作為強力瑪?shù)猛亮Π喬赝栀|(zhì)量控制的檢測指標。

本試驗采用紫外-可見分光光度法，對提取溶劑（甲醇、無水乙醇、水）、提取方式（加熱回流、超聲）、稱樣量（0.01 g、0.05 g、0.1 g、0.5 g、1.0 g）及提取時間（10 min、20 min、30 min、40 min）進行了考察，并確定最佳提取條件。經(jīng)過方法學考察，確定總黃酮和總酚含量測定方法的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性及準確性良好。本研究首次對強力瑪?shù)猛亮Π喬赝柚写箢惓煞诌M行定量分析，可為其質(zhì)量控制及標準建立提供理論參考。

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（收稿日期：2024-02-02 編輯：陶希睿）

基金項目：新疆維吾爾自治區(qū)重點研發(fā)專項（2022B03007-3）。

作者簡介：孟文全（1996—），女，漢族，碩士，研究方向為新疆特色植物藥、民族藥制備新技術(shù)及質(zhì)量控制。E-mail：2877731402@qq.com

通信作者：尹強（1981—），男，漢族，博士，正高級工程師，正高級經(jīng)濟師，博士生導師，研究方向為民族藥。E-mail：yinqing@renfu.com.cn