摘 要：金耳液體菌種制備及袋料栽培技術(shù)是實(shí)現(xiàn)金耳標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、周年化生產(chǎn)的重要技術(shù)，而金耳有效液體菌種的制備是金耳栽培能否成功的關(guān)鍵。通過(guò)對(duì)金耳栽培的最新研究成果和多年來(lái)的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié)，探索出一套操作簡(jiǎn)便、重復(fù)率高、出耳率高的高效液體菌種制備及配套的袋料栽培技術(shù)，以期為金耳產(chǎn)業(yè)的健康、高效發(fā)展提供技術(shù)支持。

關(guān)鍵詞：金耳；液體菌種；袋料栽培技術(shù)

中圖分類號(hào)：S567.34 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號(hào)：1674-7909（2024）9-69-3

DOI：10.19345/j.cnki.1674-7909.2024.09.015

0 引言

金耳又名橙黃銀耳、黃金銀耳、腦耳、膠耳等［1］，屬擔(dān)子菌門，是20世紀(jì)80年代中期才開(kāi)始大批量栽培的一種食藥兼用膠質(zhì)食用菌。金耳子實(shí)體氣味清香、食味鮮美；富含粗蛋白、粗纖維、礦質(zhì)元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)［2-4］，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高；性溫中帶寒，味甘，能化痰止咳、平肝陽(yáng)、降血糖，能治療心腦血管疾病，是一種理想的保健食品。

金耳子實(shí)體是一種由金耳菌絲和毛韌革菌菌絲扭結(jié)形成的異質(zhì)復(fù)合體，因受特定生物因子（伴生毛韌革菌）的制約，其營(yíng)養(yǎng)需求、生長(zhǎng)條件較為復(fù)雜，從而限制金耳的大規(guī)模栽培生產(chǎn)。

目前，對(duì)金耳的生理需求、生長(zhǎng)環(huán)境條件、營(yíng)養(yǎng)成分及栽培管理技術(shù)等方面的研究相繼取得進(jìn)展。但在金耳栽培過(guò)程中，制備和毛韌革菌配比合理的有效菌種仍是其栽培成功與否的關(guān)鍵與難點(diǎn)?，F(xiàn)有的金耳制種方法有直接投耳法、直接接種金耳與毛韌革菌液體混合培養(yǎng)法。直接投耳法要用到大量菌種，會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)成本增加，且菌種培養(yǎng)周期長(zhǎng)、工藝復(fù)雜；在直接接種金耳和毛韌革菌液體混合物培養(yǎng)法中，2種菌絲的配比不易人為調(diào)控，且重復(fù)率不高，易因此造成經(jīng)濟(jì)損失。金耳液體菌種制備及袋料栽培技術(shù)是實(shí)現(xiàn)金耳大規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、周年化的栽培關(guān)鍵技術(shù)［5］。筆者對(duì)金耳栽培的最新研究成果和多年來(lái)的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié)，探索出一套金耳液體菌種制備及配套的袋料栽培技術(shù)，以期為金耳產(chǎn)業(yè)實(shí)現(xiàn)健康、高效發(fā)展提供技術(shù)支持。

1 生物學(xué)特征

1.1 形態(tài)特征

金耳有菌絲體和子實(shí)體兩種形態(tài)。金耳菌絲體是由金耳菌絲和粗毛韌革菌菌絲按一定比例扭結(jié)而成的，在母種培養(yǎng)基上，扭結(jié)的菌絲呈白色，中間部位略帶淡黃色，氣生菌絲旺盛；子實(shí)體為半球形或腦狀，直徑為4～12 cm，高為3～7 cm［6］；金耳曬干后，體積收縮，呈黃褐色，近角質(zhì)，泡水后可恢復(fù)鮮耳形態(tài)。

1.2 生長(zhǎng)條件

1.2.1 溫度

溫度是影響金耳菌絲生長(zhǎng)、原基形成及幼菇生長(zhǎng)的重要因素之一。金耳屬中溫型食用菌，在8～33 ℃均可生長(zhǎng)，且最適宜菌絲生長(zhǎng)的溫度為22～25 ℃。當(dāng)溫度低于10 ℃時(shí)，菌絲生長(zhǎng)緩慢；高于33 ℃時(shí)，菌絲停止生長(zhǎng)［7］。最適宜金耳原基分化和子實(shí)體生長(zhǎng)的溫度為18～22 ℃［8］。

1.2.2 濕度

濕度對(duì)金耳子實(shí)體的分化、膨大及品質(zhì)的影響較大。最適宜的金耳培養(yǎng)料含水量為60%左右，菌絲生長(zhǎng)階段的最適宜空氣濕度為70%，子實(shí)體生長(zhǎng)階段的最適宜空氣濕度為80%～90%。當(dāng)空氣濕度低于80%時(shí)，子實(shí)體會(huì)因缺水而變干，最終停止生長(zhǎng)；高于95%時(shí)，易引起雜菌污染［9］。

1.2.3 pH值

金耳適宜在弱酸性環(huán)境中生長(zhǎng)，最適宜金耳生長(zhǎng)的pH值為5.5～6.5，此時(shí)金耳菌絲長(zhǎng)勢(shì)最好［10］。

1.2.4 空氣

金耳為好氧型真菌，從原基形成到子實(shí)體長(zhǎng)成都要供應(yīng)充足的氧氣。出耳期要注意經(jīng)常通風(fēng)換氣，CO2含量過(guò)高會(huì)導(dǎo)致金耳子實(shí)體生長(zhǎng)緩慢，甚至?xí)霈F(xiàn)“吐黃水”的現(xiàn)象［11］。

1.2.5 光照

金耳菌絲的生長(zhǎng)對(duì)光照要求不高，可避光培養(yǎng)，但在子實(shí)體分化和生長(zhǎng)階段，要提供散射光，最適宜光照強(qiáng)度為600～700 lx［12］。

2. 菌種制備

2.1 有效母種制備

一般用3%麥粒煎汁-馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基來(lái)制備母種。培養(yǎng)基制作過(guò)程如下：將30 g麥粒、200 g馬鈴薯（去皮后切成1 cm3大?。┘舆m量水后煮沸20～30 min，用4層紗布過(guò)濾殘?jiān)?，并?0 g葡萄糖、20 g瓊脂加入過(guò)濾液中，繼續(xù)煮沸，待瓊脂全部溶化后，用蒸餾水定容至1 000 mL，于121 ℃高溫滅菌20 min，冷卻后備用，分裝至三角瓶?jī)?nèi)，每瓶50 mL。用子實(shí)體組織分離培養(yǎng)法來(lái)制備母種的過(guò)程如下。取1 cm3子實(shí)體組織塊置于3%麥粒煎汁-PDA培養(yǎng)基上，并于22℃培養(yǎng)至菌絲長(zhǎng)滿整個(gè)平板?！坝行阜N”為無(wú)雜菌污染，菌絲長(zhǎng)勢(shì)均勻，菌絲體為稀疏白色或淺黃色，組織塊膨大。

2.2 有效原種制備

原種培養(yǎng)料配方為木屑（30.0%）、棉籽殼（50.0%）、麩皮（17.8%）、蔗糖（1.0%）、生石膏（1.0%）、KH2PO4（0.2%），含水量為60%，pH值為5.5～6.5。以750 mL的透明玻璃瓶為制種容器。裝料至瓶子的1/2處或距離瓶口5～6 cm處，并適當(dāng)壓實(shí)，常壓滅菌18～24 h或高壓滅菌2～3 h。用子實(shí)體塊加少量混合菌絲的接種法來(lái)制備原種，即將母種膨大的子實(shí)體塊和菌絲體一同接入原種瓶培養(yǎng)料中央坑穴內(nèi)。采取變溫法進(jìn)行培養(yǎng)，即先在22 ℃的環(huán)境中培養(yǎng)至菌絲滿瓶或組織塊開(kāi)始膨大，再轉(zhuǎn)為18 ℃的環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)至長(zhǎng)成子實(shí)體。

2.3 液體菌種制備

液體發(fā)酵培養(yǎng)基為改良的PDB培養(yǎng)基，將200 g馬鈴薯（去皮后切成1 cm3大?。舆m量蒸餾水后煮沸 20～30 min，用4層紗布過(guò)濾，棄殘?jiān)?，在過(guò)濾液中加入20 g 葡萄糖、3 g磷酸二氫鉀、1.5 g硫酸鎂、2 mg維生素B1，攪拌完全溶解后，用蒸餾水定容至1 000 mL，并分裝至250 mL錐形瓶中，每瓶100 mL，于121 ℃高溫滅菌20 min，冷卻后備用。取有效原種瓶?jī)?nèi)的1 cm3子實(shí)體組織塊，并將其在經(jīng)過(guò)滅菌處理的研缽中研磨成泥，加入適量的PDB培養(yǎng)基后混合成混懸液后，并裝入有PDB培養(yǎng)基（100 mL）的錐形瓶中，于22 ℃搖床（大于200 r/min）后培養(yǎng)7～10 d。

2.4 栽培種制備

栽培種培養(yǎng)料的配方為棉籽殼（80.0%）、麩皮（17.8%）、蔗糖（1.0%）、生石膏（1.0%）、KH2PO4（0.2%），基質(zhì)pH值為5.5～6.5。用15 cm×30 cm規(guī)格的聚丙烯塑料袋裝料，裝滿后適當(dāng)壓實(shí)，袋口用4.0～4.5 cm套環(huán)套好后加蓋或插棒。常壓滅菌18～24 h或高壓滅菌2～3 h，冷卻后再使用。

可采用針管注射法接種，即在超凈工作臺(tái)或殺菌后的接種室內(nèi)，用無(wú)菌注射器（帶刻度，針頭直徑為1.2 mm）吸取適量發(fā)酵好的金耳液體菌種，用75%酒精棉球?qū)υ耘喾N菌棒兩側(cè)適當(dāng)位置進(jìn)行消毒，并迅速將注射器針頭扎入消毒部位表層（不宜深入袋料深處），注射1 mL金耳液體菌種。當(dāng)培養(yǎng)環(huán)境較清潔，且注射口較小時(shí)，可不做處理，也可在注射口處貼上食用菌專用透氣貼。

3 栽培技術(shù)

3.1 場(chǎng)地選擇

一般在具有溫度和濕度控制裝置、通風(fēng)良好、采光較好的標(biāo)準(zhǔn)廠房、培養(yǎng)間、菇房等進(jìn)行金耳袋料栽培，也可在地勢(shì)較高、遠(yuǎn)離污染源、背風(fēng)向陽(yáng)、水源充足的地方搭建溫室大棚進(jìn)行栽培［13］。

3.2 栽培時(shí)間

金耳栽培時(shí)間一般為9月至次年5月，且可安排2個(gè)生產(chǎn)周期，即春季（3—5月）和秋季（9—11月），每個(gè)生產(chǎn)周期為50～80 d。此外，應(yīng)根據(jù)栽培地氣候及金耳的生理特性來(lái)選擇栽培時(shí)間。

3.3 栽培管理

3.3.1 發(fā)菌管理

金耳母種、原種、栽培種菌絲的最適生長(zhǎng)溫度為22～25 ℃，要避光培養(yǎng)；原基分化和子實(shí)體生長(zhǎng)的最適溫度為18～22 ℃。由于金耳為2種菌絲的混合體，適宜生長(zhǎng)的條件較為復(fù)雜?？紤]到金耳屬伴生菌，在原基分化期、幼耳生長(zhǎng)發(fā)育期，菌絲過(guò)于旺盛會(huì)影響原基發(fā)育和子實(shí)體膨大，還會(huì)出現(xiàn)“黃水”“自溶”等不良現(xiàn)象［14］。因此，在原種、栽培種接種后，可采用變溫培養(yǎng)方式來(lái)提高成耳率，即接種后先在22 ℃環(huán)境中培養(yǎng)7～10 d，再將溫度調(diào)整到18 ℃繼續(xù)培養(yǎng)。

3.3.2 出耳管理

菌絲長(zhǎng)滿袋、生理成熟后，基質(zhì)表面開(kāi)始分化出子實(shí)體。此時(shí)，應(yīng)撕下透氣貼，在接種處劃開(kāi)適當(dāng)大小的出耳口進(jìn)行透氣培養(yǎng)，并適當(dāng)提高空氣濕度；待子實(shí)體對(duì)環(huán)境變化逐漸適應(yīng)后，將空氣濕度調(diào)整為80%～90%、溫度控制在18 ℃左右。此期，可適當(dāng)增加光照強(qiáng)度，但不能讓太陽(yáng)光直射。

3.4 病蟲(chóng)害防治

3.4.1 害蟲(chóng)及防治措施

金耳栽培過(guò)程中常見(jiàn)的害蟲(chóng)有跳蟲(chóng)、線蟲(chóng)、螨類、蠅類、蛞蝓、鼠害等，以預(yù)防為主，一般不使用農(nóng)藥。栽培前，對(duì)培養(yǎng)室或栽培大棚進(jìn)行清理消毒，減少害蟲(chóng)數(shù)量。當(dāng)發(fā)現(xiàn)害蟲(chóng)時(shí)，可用粘蟲(chóng)板、捕蠅燈等對(duì)其進(jìn)行誘殺。

3.4.2 真菌性病害及防治措施

常見(jiàn)的真菌性病害有鏈孢霉、綠霉、木霉、曲霉、毛霉等。防治其菌性病害的措施：栽培前，對(duì)栽培環(huán)境進(jìn)行消毒；采用菌齡不超過(guò)45 d的“有效原種”來(lái)制備栽培種，或制備菌種時(shí)用75%酒精、0.1%升汞對(duì)子實(shí)體表面進(jìn)行消毒；對(duì)袋料進(jìn)行常壓或高壓滅菌；出耳時(shí)規(guī)范溫度、濕度管理。

若出耳后發(fā)現(xiàn)雜菌，要及時(shí)采摘，將生石灰粉撒在雜菌感染處，并進(jìn)行掩埋，防止病菌繼續(xù)生長(zhǎng)擴(kuò)散，同時(shí)加速棚內(nèi)空氣流通，降低環(huán)境溫濕度，以控制雜菌的發(fā)生和蔓延。

3.5 采收、干制與儲(chǔ)藏

3.5.1 采收

當(dāng)金耳子實(shí)體長(zhǎng)到成熟初期，充分開(kāi)瓣、轉(zhuǎn)色后，要及時(shí)采收。采收時(shí)，用快刀貼近其基部切下。采收后停止噴水1～2 d，既保證金耳品質(zhì)，也有利于菌絲體休養(yǎng)生息，更有利于再次出耳。在通風(fēng)保濕及采收方式得當(dāng)?shù)那疤嵯?，每袋可連續(xù)出耳2～3次。

3.5.2 干制

可通過(guò)自然風(fēng)干、曬干或烘干來(lái)完成干制。烘干時(shí)，先在30～40 ℃低溫下烘至半干，再逐漸升高溫度烘至全干。

3.5.3 儲(chǔ)藏

金耳的干制品要用無(wú)毒塑料袋進(jìn)行密封儲(chǔ)存，袋內(nèi)放置食品級(jí)干燥劑，于陰涼、干燥、潔凈、無(wú)蟲(chóng)害、無(wú)污染處單獨(dú)存放。

參考文獻(xiàn)：

［1］張光亞.中國(guó)常見(jiàn)食用菌圖鑒［M］.昆明：云南科技出版社，1999.

［2］ZHOU S，TANG Q J，ZHANG Z，et al.Nutritional composition of three domesticated culinary-medicinal mushrooms：oudemansiella sudmusida，lentinus squarrosulus，and tremella aurantialba［J］.International Journal of Medicinal Mushrooms，2015，17（1）：43-49.

［3］李元偉.金耳子實(shí)體化學(xué)成分及其體外抗氧化活性研究［D］.長(zhǎng)春：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

［4］杜秀菊，張勁松，賈薇.金耳子實(shí)體體外抗腫瘤和免疫活性部位的篩選研究［J］.天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2011，23（2）：351-355.

［5］楊學(xué)英.金耳液體制種及袋料栽培技術(shù)研究［D］.漢中：陜西理工大學(xué)，2021.

［6］劉正南，鄭淑芳.金耳子實(shí)體結(jié)構(gòu)特性的初步訂正［J］.食用菌，1994（5）：12-13.

［7］張林.金耳栽培技術(shù)［J］.農(nóng)村實(shí)用技術(shù)，2005（11）：37-38.

［8］何容，羅曉莉，李建英，等.金耳研究現(xiàn)狀與展望［J］.食藥用菌，2019，27（1）：41-47.

［9］鐘冬季，鐘秀媚.金耳栽培技術(shù)［J］.食用菌，2008（4）：50-51.

［10］孟麗君，劉芰華，李榮兒.金耳段木高產(chǎn)栽培技術(shù)［J］.食用菌，1999（4）：23-24.

［11］高昱昕.金耳袋料栽培關(guān)鍵技術(shù)研究［D］.楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2021.

［12］劉欣，劉虹，趙照林，等.金耳栽培條件的初步研究［J］.中國(guó)食用菌，2019，38（5）：15-17.

［13］吳錫鵬.金耳袋栽技術(shù)要點(diǎn).浙江食用菌［J］.1994（1）：17-19.

［14］劉書(shū)暢，李榮春，馬布平，等.金耳菌種生產(chǎn)技術(shù)研究［J］.中國(guó)食用菌2019，38（9）：94-99.

作者簡(jiǎn)介：金麗（1990—），女，碩士，研究實(shí)習(xí)員，研究方向：食用菌新品種選育及栽培技術(shù)等。

通信作者：李賓（1984—），男，本科，助理研究員，研究方向：食用菌新品種選育及栽培技術(shù)等。