【摘要】 目的：探索結(jié)核特異性細(xì)胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者結(jié)核病診斷中的價(jià)值。方法：回顧性分析2022年1月—2024年3月于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬阜陽(yáng)人民醫(yī)院感染科就診的≥60歲因反復(fù)發(fā)熱住院患者127例。所有患者在進(jìn)行相關(guān)檢查后不排除結(jié)核感染，并進(jìn)行結(jié)核特異性細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)及結(jié)核分枝桿菌DNA（TB-DNA）擴(kuò)增檢測(cè)。比較結(jié)核病（TB組）與非結(jié)核發(fā)熱（NTB組）患者的IFN-γ、IL-2水平，并分析IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)診斷結(jié)核病的價(jià)值。結(jié)果：127例發(fā)熱患者中，結(jié)核病18例，占14.2%（18/127），其中肺結(jié)核14例，肺外結(jié)核4例，非結(jié)核發(fā)熱109例，以感染性發(fā)熱、慢性阻塞性肺疾病急性加重、肺癌為主。TB組IFN-γ、IL-2水平均顯著高于NTB組（Plt;0.05）。以TB-DNA為金標(biāo)準(zhǔn)，IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)的敏感度為83.3%、特異度為84.4%。受試者操作特征（ROC）曲線顯示，IFN-γ、IL-2聯(lián)合診斷結(jié)核病的AUC為0.940[95%CI（0.886，0.994）]。結(jié)論：結(jié)核特異性細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者結(jié)核病診斷中具有良好價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 老年患者 發(fā)熱 γ干擾素 白細(xì)胞介素-2 結(jié)核病

Value of Combined Detection of IFN-γ and IL-2 in the Diagnosis of Tuberculosis in Elderly Patients with Fever/LI Qianqian， HUANG Mengxin， LI Jiabin， GAO Yufeng， WANG Baogui. //Medical Innovation of China， 2025， 22（02）： -156

[Abstract] Objective： To explore the value of combined detection of tuberculosis specific cytokines interferon-γ （IFN-γ） and interleukin-2 （IL-2） in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever. Method： A retrospective analysis was performed on 127 hospitalized patients ≥60 years old with recurrent fever who were admitted to Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University from January 2022 to March 2024. Tuberculosis infection was not excluded in all patients after relevant examination， and tuberculosis specific cytokines IFN-γ， IL-2 combined detection and Mycobaterium tuberculosis DNA （TB-DNA） amplification detection were performed. The levels of IFN-γ and IL-2 in patients between tuberculosis （TB group） and non-tuberculosis fever （NTB group） were compared， and the value of combined detection of IFN-γ and IL-2 in the diagnosis of tuberculosis was analyzed. Result： Among the 127 patients with fever， 18 cases of tuberculosis， accounting for 14.2% （18/127）， including 14 cases of pulmonary tuberculosis， 4 cases of extrapulmonary tuberculosis. 109 cases of non-tuberculous fever， mainly infectious fever， acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary diseases， lung cancer. The levels of IFN-γ and IL-2 in TB group were significantly higher than those in NTB group （Plt;0.05）. Using TB-DNA as the gold standard， the sensitivity and specificity of combined detection of IFN-γ and IL-2 were 83.3% and 84.4%， respectively. Receiver operating characteristic （ROC） curve showed that the AUC of IFN-γ and IL-2 combined diagnosis of tuberculosis was 0.940 [95%CI （0.886， 0.994）]. Conclusion： The combined detection of tuberculosis specific cytokines IFN-γ and IL-2 has good value in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever.

[Key words] Elderly platients Fever IFN-γ IL-2 Tuberculosis

First-author's address： Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University， Fuyang 236000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.02.035

截至2023年末，我國(guó)60周歲及以上人口約2.97億，占總?cè)丝诘?1.1%，老年人口基數(shù)大[1]。老年患者多有基礎(chǔ)疾病及免疫力下降，部分患者接受激素或免疫抑制劑治療，免疫系統(tǒng)容易出現(xiàn)功能紊亂[2-3]。老年發(fā)熱患者的病因診斷是臨床常見(jiàn)難題之一，引起發(fā)熱的病因繁多，如感染、腫瘤、結(jié)締組織病等[4]。但有研究表明，在發(fā)熱患者中，有50%～80%是由于感染性疾病造成的，其中結(jié)核感染引發(fā)的發(fā)熱比例呈明顯上升趨勢(shì)，結(jié)核病占感染性發(fā)熱的13%～60%[5-6]。結(jié)核病的臨床表現(xiàn)多為不典型癥狀，發(fā)熱是結(jié)核病常見(jiàn)臨床表現(xiàn)之一，容易造成誤診或延誤診斷，當(dāng)無(wú)法獲取病原學(xué)證據(jù)時(shí)，對(duì)發(fā)熱患者快速診斷結(jié)核病并采取精準(zhǔn)治療和結(jié)核病防控至關(guān)重要[7]。在診斷結(jié)核感染中，除肺結(jié)核外，淋巴結(jié)結(jié)核、骨結(jié)核等肺外結(jié)核感染引發(fā)的發(fā)熱也多見(jiàn)，提示臨床醫(yī)生對(duì)老年發(fā)熱患者應(yīng)重視結(jié)核病的可能[8-9]。本研究回顧性分析了127例老年發(fā)熱患者的臨床資料，對(duì)不明確是否因結(jié)核感染造成發(fā)熱的患者進(jìn)行輔助診斷與鑒別診斷，旨在分析結(jié)核特異性細(xì)胞因子γ干擾素（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性研究，選擇2022年1月—2024年3月于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬阜陽(yáng)人民醫(yī)院感染科就診的≥60周歲反復(fù)發(fā)熱住院患者127例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≥60周歲；（2）反復(fù)發(fā)熱，進(jìn)行相關(guān)檢查后不排除結(jié)核感染；（3）行IFN-γ和IL-2檢測(cè)；（4）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并多種免疫系統(tǒng)疾??；（2）陳舊性結(jié)核。本研究已獲得安徽醫(yī)科大學(xué)附屬阜陽(yáng)人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)[批號(hào)：2021（141號(hào)）]。

1.2 方法

1.2.1 IFN-γ、IL-2檢測(cè) 肝素抗凝管采集所有患者外周血4 mL，采用結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒（廣州迪澳醫(yī)療科技有限公司），從全血中分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），在細(xì)胞培養(yǎng)板上按照每份樣本分布陰性對(duì)照孔（N）、蛋白刺激孔（T）、陽(yáng)性對(duì)照物孔（P），每孔加入的細(xì)胞數(shù)量為2.5×105個(gè)。將細(xì)胞培養(yǎng)板放入37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)16～20 h，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)分別對(duì)上清中IFN-γ和IL-2進(jìn)行濃度測(cè)定。結(jié)果判定：IFN-γ T-N≥7 pg/mL和/或IL-2 T-N≥20 pg/mL為陽(yáng)性；IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL且IFN-γ P-N≥35 pg/mL，IL-2 P-N≥130 pg/mL為陰性；若IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL而IFN-γ P-Nlt;35 pg/mL和/或IL-2 P-Nlt;130 pg/mL為不確定。

1.2.2 結(jié)核分枝桿菌DNA（TB-DNA）擴(kuò)增檢測(cè) 用結(jié)核分枝桿菌特異性引物和特異性熒光探針，配以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）反應(yīng)液、耐熱DNA聚合酶、4種核苷酸單體等成分，通過(guò)PCR體外擴(kuò)增法進(jìn)行DNA擴(kuò)增，從而檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌。

1.2.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 在樣本中檢測(cè)到結(jié)核分枝桿菌存在確診為結(jié)核病，以TB-DNA擴(kuò)增檢測(cè)作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)。非結(jié)核病按相應(yīng)疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷，并經(jīng)臨床診斷及鑒別診斷最終確診。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 26.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布計(jì)量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布計(jì)量資料用M（P25，P75）表示，組間比較用Man-Whitney U檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）描述，組間比較采用字2檢驗(yàn)。采用受試者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲線評(píng)估IFN-γ和IL-2聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者中的診斷價(jià)值。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基線資料

TB-DNA擴(kuò)增檢測(cè)確診結(jié)核病患者18例，納入TB組，非結(jié)核發(fā)熱患者109例，納入NTB組。結(jié)核病患者中，肺結(jié)核11例，肺結(jié)核合并結(jié)核性胸膜炎3例，結(jié)核性胸膜炎2例，腰椎結(jié)核1例，心包結(jié)核1例。非結(jié)核發(fā)熱患者中，感染性發(fā)熱63例、慢性阻塞性肺疾病急性加重20例、肺癌14例、非結(jié)核分枝桿菌（NTM）肺病11例、結(jié)締組織病1例。127例患者中，因感染導(dǎo)致的發(fā)熱共92例（包括結(jié)核病、感染性發(fā)熱、NTM肺病），占72.4%，其中結(jié)核病占感染導(dǎo)致的發(fā)熱的19.6%。TB組男12例（66.7%），女6例（33.3%）；年齡61～83歲，平均（73.50±6.67）歲。NTB組男60例（55.0%），女49例（45.0%）；年齡60～89歲，平均（71.38±7.31）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=0.850、P=0.357，t=1.156、P=0.845）。

2.2 IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果

IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)診斷肺結(jié)核的敏感度為83.3%，特異度為84.4%；TB組IFN-γ、IL-2水平均顯著高于NTB組（Plt;0.05）。見(jiàn)表1、表2。

2.3 IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)診斷結(jié)核病的價(jià)值

IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)診斷老年發(fā)熱患者結(jié)核病的AUC為0.940[95%CI（0.886，0.994）]，見(jiàn)圖1。

3 討論

發(fā)熱為結(jié)核病常見(jiàn)癥狀之一，與其他感染、基礎(chǔ)疾病、癌癥等造成的發(fā)熱進(jìn)行鑒別診斷非常重要，特別是在結(jié)核病發(fā)現(xiàn)的主要場(chǎng)所和前哨的綜合醫(yī)院，提高結(jié)核實(shí)驗(yàn)室診斷和鑒別診斷能力，是提高綜合醫(yī)院結(jié)核病診、治、防、控水平的首要任務(wù)[10-12]。本研究中老年發(fā)熱患者127例，因感染造成的發(fā)熱占72.4%，是引發(fā)患者發(fā)熱的主要原因，與以往文獻(xiàn)[13]研究一致，其中結(jié)核病引發(fā)的發(fā)熱占19.6%，與以往文獻(xiàn)[14]研究數(shù)據(jù)基本相符。我國(guó)作為結(jié)核病的高發(fā)地區(qū)，老年人作為結(jié)核病高危人群，及時(shí)進(jìn)行活動(dòng)性結(jié)核病的排查，是早期主動(dòng)發(fā)現(xiàn)活動(dòng)性結(jié)核病的重要措施，對(duì)未明確發(fā)熱原因懷疑結(jié)核病老年患者進(jìn)行結(jié)核病篩查，排除結(jié)核病值得關(guān)注。

結(jié)核病的診斷是以病原學(xué)（細(xì)菌學(xué)、分子生物學(xué)）、病理學(xué)作為確診依據(jù)，在樣本中找到結(jié)核分枝桿菌，可確診為結(jié)核病。但在老年人群中，由于呼吸道生理學(xué)特點(diǎn)、基礎(chǔ)疾病及普遍無(wú)力型體質(zhì)，部分患者不會(huì)咳痰或不易獲得高質(zhì)量的痰標(biāo)本，且結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、基因檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，不利于結(jié)核病的早期診斷和治療[15-16]。故找到高效、快速診斷結(jié)核病的方法，對(duì)于結(jié)核病的早發(fā)現(xiàn)、早治療十分重要。近些年IFN-γ釋放試驗(yàn)作為新建立的細(xì)胞免疫學(xué)檢測(cè)方法，廣泛應(yīng)用于結(jié)核病的輔助診斷、非結(jié)核病的鑒別診斷及高危、健康人群潛伏性結(jié)核感染的篩查，具有較好的結(jié)核病輔助診斷價(jià)值，但是無(wú)法區(qū)分潛伏性結(jié)核感染和活動(dòng)性結(jié)核病[15]。近些年發(fā)現(xiàn)結(jié)核特異性細(xì)胞因子IFN-γ和IL-2聯(lián)合檢測(cè)在提示活動(dòng)性結(jié)核病中有良好的價(jià)值[17-18]，且IL-2應(yīng)用于結(jié)核病的研究也較多[19-21]。本研究中TB組IL-2的水平顯著高于NTB組，說(shuō)明IL-2可作為結(jié)核病診斷標(biāo)志物對(duì)結(jié)核病輔助、鑒別診斷。在老年發(fā)熱患者中IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)的敏感度為83.3%，AUC為0.940，提示雙因子聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者結(jié)核病的輔助診斷中有良好的應(yīng)用價(jià)值，可更好的警示活動(dòng)性結(jié)核病。

本研究不足之處在于病例數(shù)量有限，特別是老年結(jié)核病患者數(shù)量較少，且并未考慮患者之間差異，如基礎(chǔ)疾病、合并感染等。在未來(lái)，需要更大規(guī)模的前瞻性研究來(lái)確定IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)作為結(jié)核分枝桿菌感染診斷標(biāo)志物的臨床應(yīng)用，并收集各類結(jié)核患者，以更好的分析IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)在肺結(jié)核、肺外結(jié)核診斷中的應(yīng)用效果。還有研究表明，IFN-γ、IL-2水平比值與結(jié)核病狀態(tài)、治療效果具有一定相關(guān)性，有待于進(jìn)一步研究。

綜上所述，結(jié)核特異性細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)在老年發(fā)熱患者結(jié)核病診斷中有良好的診斷價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國(guó)中央人民政府，國(guó)家統(tǒng)計(jì)局.中華人民共和國(guó)2023年國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展統(tǒng)計(jì)公報(bào)[R].2024-02-29.

[2] GAO L，LI X W，LIU J M，et al.Incidence of active tuberculosis in individuals with latent tuberculosis infection in rural China follow-up results of a population-based，multicentre，prospective cohort study[J].Lancet Infect Dis，2017，17（10）：1053-1061.

[3] YEW W W，YOSHIYAMA T，LEUNG C C，et al.Epidemiological， clinical and mechanistic perspectives of tuberculosis in older people[J].Respirology，2018，23（6）：567-575.

[4]楊秀珍，張永祥，咸建春.不明原因發(fā)熱499例臨床分析[J].江蘇醫(yī)藥，2013，11（36）：1134-1135.

[5]陳暉，張運(yùn)波.病因不明發(fā)熱患者致熱原因分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2017，28（3）：492-493.

[6]馬琴，鄭小燕，談?dòng)?，?結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)聯(lián)合炎癥指標(biāo)對(duì)不明原因發(fā)熱結(jié)核的診斷效果[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2019，29（21）：3233-3236.

[7]郭宣佐，郭春花.60例發(fā)熱患者的病因構(gòu)成分析[J].中國(guó)農(nóng)村衛(wèi)生，2014（4）：74-75.

[8]王涵，魯艷軍，許東.結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）在不明原因發(fā)熱成人患者疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值研究[J].醫(yī)學(xué)研究雜志，2017，46（1）：53-55.

[9]金羅劍.以不明原因發(fā)熱為表現(xiàn)的肺結(jié)核臨床分析[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)論壇，2022，26（34）：1-3.

[10]魯炳懷，謝軼，余方友，等.綜合醫(yī)院結(jié)核分枝桿菌感染實(shí)驗(yàn)室檢查共識(shí)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2022，45（4）：343-353.

[11]何燕超，揭志軍.綜合醫(yī)院活動(dòng)性肺結(jié)核的早期篩查策略[J].結(jié)核與肺部疾病雜志，2022，3（4）：334-337.

[12]廖藝璇，方創(chuàng)森，李燕明.加強(qiáng)結(jié)核病非定點(diǎn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)能力建設(shè)提高結(jié)核病診斷水平[J].中國(guó)防癆雜志，2023，45（5）：437-441.

[13]陳燕輝，張浩，曾文鋌.91例不明原因發(fā)熱患者的病因分布與臨床特征分析[J].廣州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，49（2）：75-79.

[14]侍效春，劉曉清，李俠，等.綜合醫(yī)院以不明原因發(fā)熱為表現(xiàn)的結(jié)核病100例臨床分析[J].中華內(nèi)科雜志，2010，49（12）：1002-1005.

[15]李?yuàn)檴?，王玉峰，舒薇，?結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研發(fā)新進(jìn)展[J].中國(guó)防癆雜志，2023，45（5）：446-453.

[16]中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病學(xué)分會(huì).老年肺結(jié)核診斷與治療專家共識(shí)（2023版）[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2023，46（11）：1068-1084.

[17] TAN Y J，TAN Y H，LI J L，et al.Combined IFN-γand IL-2 release assay for detect active pulmonary tuberculosis：a prospective multicentre diagnostic study in China[J].Journal of Translational Medicine，2021，19（1）：289-296.

[18]廖家吉，楊曉輝，蒲渝成，等.IFN-γ、IL-2聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)核病中的診斷價(jià)值[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2022，20（28）：83-86.

[19] SUZUKAWA M，AKASHI S，NAGAI H，et al.Combined analysis of IFN-γ， IL-2， IL-5， IL-10， IL-1RA and MCP-1 in QFT supernatant is useful for distinguishing active tuberculosis from latent infection[J/OL].PLoS One，2016，11（4）：e0152483（2016-04-01）[2024-04-30].https：//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27035669/.DOI：10.1371/journal.pone.0152483.

[20] DELLA BELLA C，SPINICCI M，GRASSI A，et al.Novel M.tuberculosis specific IL-2 ELISpot assay discriminates adult patients with active or latent tuberculosis[J/OL].PLoS One，2018，13（6）：e0197825（2018-06-01）[2024-04-30].https：//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29856871/.DOI：10.1371/journal.pone.0197825.

[21] ZHANG L F，CHENG X H，BIAN S N，et al.Utility of Th1-cell immune responses for distinguishing active tuberculosis from non-active tuberculosis：a case-control study[J/OL].PLoS One，2017，12（5）：e0177850（2017-05-22）[2024-04-30].https：//pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28531231/.DOI： 10.1371/journal.pone.0177850.

（收稿日期：2024-05-21） （本文編輯：陳韻）