彭永德 宋懷東 曲 建 張 新 韓澤廣 陳家倫
摘要:為探討甲狀腺素受體相互作用蛋白(hTRIP15)是否與其他核蛋白發(fā)生相互作用,以hTRIP15作為“誘餌”,用酵母雙雜交技術(shù)篩選人肝cDNA文庫(kù),在高嚴(yán)格度選擇培養(yǎng)基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上長(zhǎng)出的克隆773個(gè),再經(jīng)β-gal表達(dá)和PCR等技術(shù)進(jìn)一步縮小范圍,經(jīng)Blastn搜尋最終顯示2個(gè)重復(fù)克隆編碼一種共調(diào)節(jié)輔因子—Y盒結(jié)合蛋白-1(YB-1)。將插入序列與全長(zhǎng)YB-1比較發(fā)現(xiàn)進(jìn)入ORF內(nèi)320bp,插入序列編碼82aa,該蛋白稱為YB-1-p,經(jīng)蛋白體外翻譯及GST-pulldown試驗(yàn)證實(shí)YB-1-p與hTRIP15可通過與YB-1相互作用,參與調(diào)控MHCⅡ及TSH受體等甲狀腺細(xì)胞重要基因表達(dá)。
關(guān)鍵詞:Y盒結(jié)合蛋白-1(YB-1);hTRIP15;酵母雙雜交文庫(kù)篩選;GST pulldown 試驗(yàn)
中圖分類號(hào):Q758
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A
文章編號(hào):1007-7847(2005)01-0015-04