陳德權(quán)　鄧樹勛　彭峰林

摘要：通過比較間歇運(yùn)動(dòng)中不同類型骨骼肌中氧自由基，線粒體Ca2+含量代謝情況，Bax，Bcl－2凋亡基因表達(dá)的差異，來探討間歇運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致骨骼肌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。24只SD大鼠，隨機(jī)分為安靜對(duì)照組（8只），一次間歇運(yùn)動(dòng)組（8只），長期間歇訓(xùn)練組（8只）。運(yùn)動(dòng)后24 h取比目魚肌和脛骨前肌，采用RT－PCR方法檢測(cè)Bax，Bcl－2基因表達(dá)情況，并測(cè)定組織中SOD活性、MDA含量和線粒體鈣含量。結(jié)果表明：1） 一次間歇運(yùn)動(dòng)組脛骨前肌中Bax/Bcl－2比值顯著升高（P＜0．05），且Bcl－2表達(dá)顯著低于長期間歇訓(xùn)練組（P＜0．05）。2） 運(yùn)動(dòng)后，脛骨前肌和比目魚肌中SOD活性均升高了，但僅一次間歇運(yùn)動(dòng)后脛骨前肌SOD活性較安靜時(shí)增加具有顯著性（增加48％，P＜0．05）。3） 一次間歇運(yùn)動(dòng)和長期間歇訓(xùn)練后脛骨前肌中MDA含量均非常顯著性高于安靜對(duì)照組（P＜0．01）。4） 一次間歇運(yùn)動(dòng)后，脛骨前肌線粒體Ca2+含量較安靜時(shí)增加100％，差異非常顯著（P＜0．01），同時(shí)也顯著性高于比目魚肌中線粒體Ca2+含量（P＜0．05）。結(jié)論：1） 一次高強(qiáng)度的間歇運(yùn)動(dòng)可能主要通過快肌中Bax表達(dá)增強(qiáng)，Bcl－2表達(dá)減弱，氧自由基的升高，粒體內(nèi)鈣超載，共同致運(yùn)動(dòng)能力下降。2） 長期間歇訓(xùn)練可能通過增強(qiáng)抗氧化能力，增強(qiáng)抗凋亡基因表達(dá)來增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力。間歇訓(xùn)練后，快慢肌應(yīng)對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高的能力增強(qiáng)，這可能是間歇訓(xùn)練增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力的另一細(xì)胞內(nèi)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。

關(guān)鍵詞：間歇運(yùn)動(dòng)；Bax，Bcl－2；氧自由基；線粒體鈣

中圖分類號(hào)：G804.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1007-3612(2008)07-0922-04

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞死亡的一種形式，研究細(xì)胞凋亡具有重要的生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)價(jià)值。Bcl-2作為一種抑制細(xì)胞凋亡的基因，它的表達(dá)可以抑制細(xì)胞凋亡；Bax是Bcl-2家族的另外一種促進(jìn)細(xì)胞凋亡的基因，它的過表達(dá)可以拮抗Bcl-2的保護(hù)效應(yīng)而使細(xì)胞趨于凋亡。Bax/Bcl-2的比值決定了細(xì)胞是否凋亡的命運(yùn)［1］。線粒體途徑是介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的一個(gè)重要途徑。線粒體中可產(chǎn)生大量的氧自由基，攻擊細(xì)胞膜造成脂質(zhì)過氧化，引發(fā)細(xì)胞凋亡；也可以由于線粒體內(nèi)鈣超載或線粒體膜電位的改變引發(fā)細(xì)胞凋亡。本研究以間歇運(yùn)動(dòng)為運(yùn)動(dòng)模型，通過檢測(cè)骨骼肌中Bax和Bcl-2的表達(dá)情況，同時(shí)測(cè)定反映骨骼肌組織內(nèi)氧化損傷的SOD活性和自由基水平的MDA含量，以及線粒體鈣含量來反映組織內(nèi)氧化損傷，線粒體鈣超載與細(xì)胞凋亡基因表達(dá)的關(guān)系，期望揭示高強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的機(jī)制，為運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1研究對(duì)象與方法

1．1研究對(duì)象與運(yùn)動(dòng)模型

1．1．1研究對(duì)象與分組三月齡清潔級(jí)雌性SD大鼠24只，購自中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。體重(180．5±19．7)g。分籠飼養(yǎng)。將24只大鼠隨機(jī)分為3組：安靜對(duì)照組（n=8）；一次間歇運(yùn)動(dòng)組（n=8）；長期間歇運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組（n=8）。

1．1．2運(yùn)動(dòng)方式（改良于Bowles,D．K等［2］）安靜對(duì)照組：平時(shí)不進(jìn)行訓(xùn)練，籠內(nèi)自由飲食，自由活動(dòng)，最后同運(yùn)動(dòng)組一起處死并取材。

一次間歇運(yùn)動(dòng)組：訓(xùn)練前進(jìn)行一周適應(yīng)跑臺(tái)訓(xùn)練，速度逐漸遞增，但是到一周末時(shí)速度不能超過20 m/min。正式運(yùn)動(dòng)時(shí)采用16 m/min 和50 m/min各2 min。 5%grade的間歇運(yùn)動(dòng)，重復(fù)10次，45 min/d(包括5 min熱身運(yùn)動(dòng))，運(yùn)動(dòng)一次。

長期間歇訓(xùn)練組：在進(jìn)行一周適應(yīng)訓(xùn)練后，進(jìn)行運(yùn)動(dòng)方式同一次間歇運(yùn)動(dòng)組的訓(xùn)練方式相同，每周訓(xùn)練5 d，周三和周日休息，正式訓(xùn)練共7周。

1．2動(dòng)物取材與標(biāo)本制備

1．2．1動(dòng)物取材兩運(yùn)動(dòng)組大鼠在末次運(yùn)動(dòng)后24 h，同安靜組大鼠一起稱重，麻醉后，取后肢兩側(cè)比目魚肌和右側(cè)脛骨前肌，于生理鹽水中洗凈后，用吸水紙吸干水分。將脛骨前肌分成兩塊，一塊用于生化指標(biāo)的檢測(cè)，一塊用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)；左側(cè)比目魚肌用于生化指標(biāo)的檢測(cè)，右側(cè)比目魚肌用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。所有的骨骼肌組織在分裝好后迅速置于液氮中冷凍保存。

1．3主要實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

1）智能型熱循環(huán)儀：PTC-200，美國；2）水平電泳儀（APOLLO），美國；3）全自動(dòng)凝膠數(shù)碼成像系統(tǒng)及分析系統(tǒng)（SynGene GeneGenius ），美國；4）RT-PCR試劑盒，購于寶生物工程（TaKaRa）（大連）有限公司。5）瓊脂糖，西班牙。6）SOD活性檢測(cè)試劑盒，MDA含量檢測(cè)試劑盒，鈣測(cè)定試劑盒，考馬斯亮藍(lán)蛋白定量檢測(cè)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1．4指標(biāo)檢測(cè)

1．4．1Bax、Bcl-2基因表達(dá)情況的檢測(cè)（RT-PCR方法）

1．4．1．1引物設(shè)計(jì)由Invitrogen（上海分部）設(shè)計(jì)與合成，設(shè)計(jì)的引物序列為：Bax引物序列(331bp)：引物上游5'-GGCG AATT GGAG ATGA ACTG-3' 引物下游 5'-GTCA CTGT CTGC CATG TGGG-3'；Bcl-2引物序列(550bp)：引物上游 5'-GTGG GATA CTGG AGAT GAAG ACT -3' ，引物下游5'- CAGC CAGG AGAA ATCA AACA G-3'；內(nèi)參照GAPDH引物序列(453bp)：引物上游5'-ACCA CAGT CCAT GCCA TCAC-3'，引物下游5'-TCCA CCAC CCTG TTGC TGTA-3'

1．4．1．2RNA的提取與目的基因的擴(kuò)增取100 mg左右的骨骼肌組織采用Trizol 法抽提總RNA，在鑒定RNA的質(zhì)量后再按照RT－PCR試劑盒說明書上進(jìn)行cDNA的合成和目的基因的擴(kuò)增，其中Bax基因退火溫度為55℃，Bcl-2的退火溫度為53℃，GAPDH的退火溫度為57℃。采用1％的瓊脂糖凝膠電泳后，拍照并保存待日后分析。

1．4．2SOD活性，MDA含量測(cè)定骨骼肌中SOD活性，MDA含量，線粒體鈣含量測(cè)定均按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1．5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS14．0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。數(shù)據(jù)的組間差異采用單因素方差分析，并用Tukey（圖凱法）進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)組內(nèi)差異采用配對(duì)樣本T檢驗(yàn)，顯著性水平為P＜0．05，非常顯著為P＜0．01。

2實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2．1運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌中Bax和Bcl-2基因表達(dá)的影響

一次間歇運(yùn)動(dòng)后，脛骨前肌和比目魚肌Bax表達(dá)均較安靜時(shí)升高，而Bcl-2表達(dá)低于安靜對(duì)照組，兩者均無顯著性差異；同時(shí)，脛骨前肌中Bax表達(dá)的增幅和Bcl-2降低的幅度較比目魚肌大，且Bax/Bcl-2的比值顯著性高于安靜對(duì)照組。長期間歇訓(xùn)練后，脛骨前肌中Bax表達(dá)增幅較比目魚肌中大，而比目魚肌中Bax中表達(dá)增幅較?。籅cl-2的表達(dá)于脛骨前肌和比目魚肌中較安靜時(shí)均有升高，但同樣均無顯著性；Bax/Bcl-2比值在長期間歇訓(xùn)練后于脛骨前肌和比目魚肌均有所升高，但均無顯著性差異。兩運(yùn)動(dòng)組之間相比較，僅發(fā)現(xiàn)一次間歇運(yùn)動(dòng)后脛骨前肌中Bcl-2表達(dá)顯著低于長期間歇訓(xùn)練后的值（P＜0．05）。

2．2運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌組織中SOD活性和MDA含量的影響安靜狀態(tài)下，大鼠比目魚肌中SOD活性高于脛骨前肌，差異顯著（P＜0．05）；而脛骨前肌中MDA含量又顯著性高于比目魚肌（P＜0．05）。經(jīng)過運(yùn)動(dòng)后，比目魚肌和脛骨前肌中SOD活性均升高了，比目魚肌中SOD活性增幅較?。幻劰乔凹≈蠸OD活性增幅則較大，其中一次間歇運(yùn)動(dòng)組增加48％（P＜0．05）,長期間歇訓(xùn)練組增加24％（P＞0．05）。而經(jīng)過兩種方式的運(yùn)動(dòng)后，比目魚肌中MDA含量基本無變化，而脛骨前肌中MDA含量均較運(yùn)動(dòng)前大幅增加：一次間歇運(yùn)動(dòng)增加66％（P＜0．01）；長期間歇訓(xùn)練組增加43％（P＜0．01），差異均非常顯著。經(jīng)過兩種方式的運(yùn)動(dòng)后，脛骨前肌與比目魚肌中MDA含量的差異比安靜時(shí)更大了，差異非常顯著（P＜0．01）。

2．3運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌線粒體內(nèi)Ca2+含量的影響一次間歇運(yùn)動(dòng)后，脛骨前肌線粒體中Ca2+濃度較安靜時(shí)增加了100％，差異非常顯著（P＜0．01），并且高于比目魚肌中Ca2+含量，差異顯著（P＜0．05）。長期間歇訓(xùn)練后，快肌和慢肌中Ca2+含量與安靜時(shí)相持平，差異不顯著。兩運(yùn)動(dòng)組之間比較，脛骨前肌中Ca2+含量在一次間歇運(yùn)動(dòng)后非常顯著性高于長期間歇訓(xùn)練組（P＜0．01）。

3討論

3．1運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌細(xì)胞凋亡基因的影響B(tài)ax和Bcl-2是細(xì)胞凋亡過程中兩個(gè)重要的調(diào)控基因。Bax的過度表達(dá)會(huì)促進(jìn)細(xì)胞凋亡，而Bcl-2的表達(dá)增強(qiáng)則會(huì)抑制細(xì)胞凋亡。Bax/Bcl-2比值決定了細(xì)胞的命運(yùn)，當(dāng)比值大于正常值時(shí)，細(xì)胞則趨于凋亡，當(dāng)比值小于正常值時(shí)，凋亡則受到抑制。國內(nèi)外的許多研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在衰老，骨骼肌營養(yǎng)不良，去神經(jīng)肌萎縮等過程中，骨骼肌細(xì)胞發(fā)生凋亡的同時(shí)，Bax，Bcl-2的表達(dá)發(fā)生了重要變化，并且兩者的變化趨勢(shì)相反［3-10］。

在本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)結(jié)束后24 h，一次間歇運(yùn)動(dòng)組大鼠快慢肌中Bax表達(dá)都較安靜對(duì)照組升高了，Bcl-2的表達(dá)則都下降了，但是各組間及組內(nèi)都沒有顯著性差異。上述變化的趨勢(shì)在快肌中表現(xiàn)得更明顯，這也就構(gòu)成了Bax/Bcl-2比值在一次間歇運(yùn)動(dòng)后顯著性高于安靜對(duì)照組。這樣的研究結(jié)果與Podhorska-Okolow M等（1998）的研究結(jié)果很相似，其在研究結(jié)果中也發(fā)現(xiàn)，小鼠在進(jìn)行一夜的自發(fā)轉(zhuǎn)輪跑后出現(xiàn)骨骼肌細(xì)胞凋亡，同時(shí)Bcl-2表達(dá)下降，Bax表達(dá)增強(qiáng)，并且Bax的表達(dá)程度與細(xì)胞凋亡的程度高度相關(guān)［11］，說明Bax的表達(dá)在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡方面起重要作用。本實(shí)驗(yàn)再次證實(shí)了過強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致Bax表達(dá)增強(qiáng)，而Bcl-2表達(dá)下降，并且由于運(yùn)動(dòng)方式的原因，間歇運(yùn)動(dòng)中起主要作用的快肌中Bax,Bcl-2表達(dá)的這種趨勢(shì)體現(xiàn)的更明顯，這也提示一次高強(qiáng)度的間歇運(yùn)動(dòng)對(duì)快肌的刺激作用更大，會(huì)導(dǎo)致快肌細(xì)胞凋亡發(fā)生的可能性更大，這可能是一次間歇運(yùn)動(dòng)中通過凋亡相關(guān)基因調(diào)控引起骨骼肌細(xì)胞凋亡增加導(dǎo)致疲勞的一種基因機(jī)制。

同時(shí)，本研究結(jié)果也顯示，經(jīng)過長期的間歇訓(xùn)練后，快慢肌中Bax表達(dá)較安靜時(shí)升高，但略低于一次間歇運(yùn)動(dòng)后的值，Bcl-2的表達(dá)在訓(xùn)練后升高，且顯著高于一次間歇運(yùn)動(dòng)組。同時(shí)Bax/Bcl-2比值雖高于安靜對(duì)照組，但與一次間歇運(yùn)動(dòng)組相比卻下降了，同樣上述變化于快肌中體現(xiàn)得更明顯。而在Song W等（2006）和Siu PM（2004）等的研究中則發(fā)現(xiàn)經(jīng)過長期的耐力訓(xùn)練或者中等強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練后，Bcl-2表達(dá)相比對(duì)照組大鼠顯著增加，而Bax，Bax/Bcl-2比值都降低了［10，12］。同時(shí)Song W等檢測(cè)到DNA碎片梯形條帶減少，而Siu PM等檢測(cè)到運(yùn)動(dòng)組骨骼肌中DNA碎片較對(duì)照組增加，但無顯著性差異。他們的研究結(jié)果存在些差異可能主要與訓(xùn)練的時(shí)間長短有關(guān)。本研究結(jié)果中Bax表達(dá)與上述研究結(jié)果有不同之處，可能也主要是訓(xùn)練時(shí)間較他們的短的緣故。而本研究結(jié)果也在一定程度上顯示了長期間歇訓(xùn)練后骨骼肌細(xì)胞凋亡程度的降低。同時(shí)，本研究結(jié)果中一次間歇運(yùn)動(dòng)引起B(yǎng)ax/Bcl-2的比值升高，而長期間歇訓(xùn)練后Bax/Bcl-2比值又下降了，這樣的基因表達(dá)趨勢(shì)可能與黃穎峰，鄭師陵和王長青長期運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練過程中骨骼肌細(xì)胞凋亡率先增加后降低的趨勢(shì)存在因果關(guān)系［13-16］。這也可能是長期間歇訓(xùn)練過程中通過降低促凋亡基因的表達(dá)，而增強(qiáng)抗凋亡基因的表達(dá)以增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力的一種基因機(jī)制。

3．2運(yùn)動(dòng)后氧自由基代謝與Bax及Bcl-2表達(dá)人體或動(dòng)物機(jī)體在劇烈的運(yùn)動(dòng)后會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），如H2O2，NO，超氧陰離子(O2-)等。這些活性氧分子是氧自由基的來源，它們可以通過一系列的途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，如氧自由基引起的DNA損傷可激活P53基因引起細(xì)胞凋亡，氧自由基形成的氧化應(yīng)激可活化核轉(zhuǎn)錄因子NF－КB和AP－1，可加速細(xì)胞凋亡相關(guān)的一些基因的表達(dá)，誘發(fā)細(xì)胞凋亡［17］。另外，當(dāng)ROS在線粒體內(nèi)大量釋放后，可引起B(yǎng)ax和Ced-4與Bcl-2的分離，使Ced-4與Bax參與隨后的細(xì)胞凋亡發(fā)生［1］。

本研究發(fā)現(xiàn)，安靜狀態(tài)下比目魚肌中SOD活性顯著高于脛骨前肌，與周婕的研究結(jié)果具有一致性［18］。比目魚肌中MDA含量較脛骨前肌中低，可能是由于慢肌中線粒體含量多，對(duì)自由基的抵抗和清除能力都較快肌強(qiáng)。經(jīng)過一次間歇運(yùn)動(dòng)后，比目魚肌和脛骨前肌中SOD活性以及MDA含量均升高了，但是只有脛骨前肌中SOD活性和MDA含量比安靜對(duì)照組增加具有顯著性，這樣的研究結(jié)果與先前的諸多研究結(jié)果存在相似之處［18-21］，同時(shí)本研究結(jié)果中也發(fā)現(xiàn)，Bax表達(dá)在一次間歇運(yùn)動(dòng)后增加與SOD活性和MDA含量的變化存在一致性，而Bcl-2表達(dá)的變化則與SOD活性和MDA含量的變化相反，并且這種趨勢(shì)在快肌中體現(xiàn)得更明顯，提示間歇運(yùn)動(dòng)后，快肌中活性氧產(chǎn)生增多，脂質(zhì)過氧化程度增大，引起與加速了Bax與Bcl-2的分離，使骨骼肌趨向凋亡，運(yùn)動(dòng)能力下降。而慢肌纖維中由于SOD活性，MDA含量在間歇運(yùn)動(dòng)后與安靜對(duì)照組相比均無顯著性差異，說明間歇運(yùn)動(dòng)后氧自由基損傷在慢肌纖維中促凋亡的作用不大。

經(jīng)過長期間歇訓(xùn)練后，快肌中SOD活性，MDA含量均較安靜時(shí)升高了，而只有MDA的增幅具有顯著性差異。而慢肌中這三項(xiàng)指標(biāo)均無顯著性差異。同時(shí)研究結(jié)果也顯示，間歇訓(xùn)練后，脛骨前肌和比目魚肌中Bax和Bcl-2表達(dá)均較安靜對(duì)照組增加，而Bax表達(dá)則相對(duì)一次運(yùn)動(dòng)組下降，Bcl-2的表達(dá)相對(duì)一次運(yùn)動(dòng)組增加。這樣的研究結(jié)果，一方面再次證實(shí)了前人關(guān)于長期進(jìn)行中等強(qiáng)度或者有氧運(yùn)動(dòng)后，機(jī)體的抗氧化能力會(huì)增強(qiáng)［22-26］。

3．3運(yùn)動(dòng)后線粒體內(nèi)Ca2+含量與Bax及Bcl-2表達(dá)激烈運(yùn)動(dòng)會(huì)對(duì)骨骼肌產(chǎn)生較大的刺激，在急性運(yùn)動(dòng)后，骨骼肌肌漿網(wǎng)(SR) Ca2+－Mg2+－ATP酶以及SR Ca2+-ATP酶水解活性均會(huì)降低，同時(shí)肌漿網(wǎng)對(duì)Ca2+轉(zhuǎn)運(yùn)能力也會(huì)明顯下降［27-28］,引起細(xì)胞質(zhì)中的Ca2+濃度短暫升高，對(duì)Ca2+極度敏感的線粒體則會(huì)加大對(duì)Ca2+的攝取速率，線粒體攝取Ca2+曲線左移，這樣細(xì)胞質(zhì)中的Ca2+濃度則會(huì)降低，而線粒體內(nèi)Ca2+則會(huì)升高［29-30］。而Ca2+則能結(jié)合線粒體通透性孔（MPTP）上的金屬結(jié)合位點(diǎn)，開放MPTP，從而導(dǎo)致滲透壓的改變，ATP的耗竭，細(xì)胞色素C釋放，活化Caspase-9和Caspase-3，從而誘發(fā)細(xì)胞凋亡［31］。Bcl-2作為抑制凋亡的基因，它可以通過阻止細(xì)胞色素C從線粒體釋放出來而抑制細(xì)胞凋亡；而Bax則通過與線粒體上的膜通道結(jié)合來促使細(xì)胞色素C的釋放而促進(jìn)細(xì)胞凋亡［32］。

本研究中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過一次間歇運(yùn)動(dòng)后，快肌線粒體內(nèi)Ca2+含量較安靜對(duì)照組非常顯著性升高，而慢肌線粒體中Ca2+濃度雖然升高，但無顯著性。造成這種差異的原因可能是高強(qiáng)度的間歇運(yùn)動(dòng)后快肌肌漿網(wǎng)攝取Ca2+的能力和Ca2+－ATP酶活性下降比慢肌更多［33］，進(jìn)而引起快肌線粒體中Ca2+含量較慢肌中高。一次間歇運(yùn)動(dòng)后，快肌中線粒體內(nèi)Ca2+濃度升高，Bax表達(dá)增強(qiáng),Bcl-2表達(dá)減弱，造成運(yùn)動(dòng)能力下降，這可能是一次間歇運(yùn)動(dòng)一方面造成線粒體鈣超載，造成MPTP的開放，引起線粒體跨膜電位的降低而誘發(fā)細(xì)胞凋亡，或者導(dǎo)致誘發(fā)細(xì)胞凋亡的因素如細(xì)胞色素c等進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡；另一方面，Bax表達(dá)增高，而Bcl-2表達(dá)降低，促進(jìn)細(xì)胞色素C等促凋亡因子得以釋放，兩方面因素共同促進(jìn)細(xì)胞凋亡，致使運(yùn)動(dòng)能力下降。

長期間歇訓(xùn)練后，快肌和慢肌線粒體中Ca2+含量差異不顯著。而兩運(yùn)動(dòng)組間比較，則發(fā)現(xiàn)長期間歇訓(xùn)練后，快肌線粒體Ca2+含量明顯低于一次間歇運(yùn)動(dòng)組，而慢肌線粒體Ca2+含量雖低于一次間歇運(yùn)動(dòng)組，但是不能發(fā)現(xiàn)顯著性差異。這可能與大鼠對(duì)運(yùn)動(dòng)的適應(yīng)引起Ca2+－ATPase活性以及肌漿網(wǎng)攝取Ca2+能力均增強(qiáng)有關(guān)［34］，并且長期間歇訓(xùn)練可能使快肌中Ca2+－ATPase活性升高更多。提示長期間歇訓(xùn)練后，骨骼肌細(xì)胞應(yīng)對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加的能力增強(qiáng)，這可能是骨骼肌運(yùn)動(dòng)能力增強(qiáng)的關(guān)鍵因素。

4結(jié)論

1) 一次高強(qiáng)度的間歇運(yùn)動(dòng)可能主要通過快肌中Bax表達(dá)增強(qiáng)，Bcl-2表達(dá)減弱，氧自由基的升高，粒體內(nèi)鈣超載，共同致運(yùn)動(dòng)能力下降。

2) 長期間歇訓(xùn)練可能通過增強(qiáng)抗氧化能力，增強(qiáng)抗凋亡基因表達(dá)來增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力。間歇訓(xùn)練后，快慢肌應(yīng)對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高的能力增強(qiáng)，這可能是間歇訓(xùn)練增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)能力的另一細(xì)胞內(nèi)信息轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。

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