曾軼暉

[摘要] 胰腺癌的基因治療是繼手術(shù)、放療和化療等傳統(tǒng)療法之后腫瘤治療的新模式，本文從自殺基因療法和免疫基因治療這兩種主要治療方法方面對(duì)近年來(lái)胰腺癌基因治療現(xiàn)狀作簡(jiǎn)要綜述。

[關(guān)鍵詞] 胰腺癌；基因治療；研究

[中圖分類號(hào)]R735.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-7210（2009）03（a）-156-02

胰腺癌是消化系統(tǒng)惡性腫瘤，占癌癥死亡的第4位。由于胰腺位置隱蔽，臨床癥狀多不典型， 不易被早期發(fā)現(xiàn)，同時(shí)其浸潤(rùn)性強(qiáng)并易發(fā)生轉(zhuǎn)移，所以切除率低、預(yù)后差。近年來(lái)，胰腺癌的遠(yuǎn)期療效和預(yù)后并未帶來(lái)突破性進(jìn)展，研究表明胰腺癌的發(fā)生發(fā)展為多基因參與、多步驟發(fā)生的復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程，因此基因治療被認(rèn)為是繼手術(shù)、放療和化療等傳統(tǒng)療法之后腫瘤治療的最有前景治療方案之一，基因治療中又以自殺基因體系和免疫基因體系方式最為引人關(guān)注，本文主要從這兩種治療方法方面論述近年來(lái)胰腺癌基因治療狀況。

1自殺基因治療

自殺基因療法又稱基因定向酶藥物前體療法，是利用轉(zhuǎn)基因的方法將藥敏基因?qū)肽[瘤細(xì)胞，從而增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性，使無(wú)毒的藥物前體通過(guò)該基因表達(dá)的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為對(duì)細(xì)胞有毒性作用的藥物，干擾腫瘤細(xì)胞DNA的合成，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而殺死腫瘤細(xì)胞，這種使腫瘤細(xì)胞自殺的基因稱“自殺基因”。目前腫瘤基因治療研究中常用的自殺基因主要為單純皰疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因，其治療系統(tǒng)為HSV-TK/GCV，在體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中均可抑制胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此在治療研究中備受關(guān)注。

由于單純皰疹病毒（HSV）1型或2型胸苷激酶（TK）基因編碼的胸苷激酶能特異性地將核苷類似物等如羥甲基無(wú)環(huán)鳥苷（GCV）磷酸化，在胞內(nèi)進(jìn)一步代謝生成三磷酸GCV，可抑制細(xì)胞DNA聚合酶和作為DNA合成的終結(jié)者，使腫瘤細(xì)胞對(duì)GCV敏感性大大增高，從而明顯提高對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷率[1]。

Ritz等[2]在HSV-TK基因治療腫瘤的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，觀察到人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶啟動(dòng)子調(diào)控的復(fù)制缺陷型腺病毒Ad-hTERT-TK具有良好的腫瘤細(xì)胞內(nèi)特異性表達(dá)能力，它可以選擇性在端粒酶陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞中復(fù)制。Rosenfeld等[3]以腺病毒為載體介導(dǎo)HSV-TK在體外成功轉(zhuǎn)染四株胰腺癌細(xì)胞系，觀察到顯著的原藥轉(zhuǎn)換作用和旁觀者效應(yīng)；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明轉(zhuǎn)導(dǎo)TK基因的胰腺癌細(xì)胞成瘤時(shí)間延遲，給予原藥GCV后腫瘤消退；給裸鼠腹腔內(nèi)注入胰癌細(xì)胞誘發(fā)腫瘤形成，再注入表達(dá)HSV-TK基因的腺病毒載體，在注射GCV后，腫瘤明顯退縮，伴有強(qiáng)大BSE出現(xiàn)。Block等[4]同樣以腺病毒作為載體轉(zhuǎn)導(dǎo)TK基因，在胰腺癌肝轉(zhuǎn)移模型觀察到HSV-TK/GCV有效抑制胰腺癌的肝轉(zhuǎn)移，并利用重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染CD基因進(jìn)入BALB-C小鼠和MC38肝轉(zhuǎn)移模型小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞中目的基因的表達(dá)水平比其他器官中的表達(dá)水平高上千倍。Yang等[5]將BxPC-3胰腺癌細(xì)胞注射到裸鼠胰尾，然后濃縮HSV-TK載體和GCV，結(jié)果HSV-TK治療組轉(zhuǎn)移性腹腔腫瘤明顯低于對(duì)照組；在培養(yǎng)劑或是腹腔積液中轉(zhuǎn)染HSV-TK載體，并用GCV處理所得結(jié)果無(wú)明顯差別，提示浸浴腹水環(huán)境中載體能有效轉(zhuǎn)導(dǎo)腫瘤細(xì)胞，腹腔內(nèi)注射濃縮逆轉(zhuǎn)錄病毒HSV-TK載體是胰腺癌腹腔轉(zhuǎn)移的有效治療方法。在體內(nèi)研究表明HSV-TK基因轉(zhuǎn)化后繼以GCV治療的腫瘤逆轉(zhuǎn)效應(yīng)與腫瘤體積大小有關(guān)，在大腫瘤中，依賴于注射的病毒類型，因而聯(lián)合應(yīng)用ADV-TK+VPC-Rv-TK（VPC）繼以4dGCV治療可取得最佳效果。

2 免疫基因治療

免疫基因治療是將各類細(xì)胞因子基因轉(zhuǎn)導(dǎo)入腫瘤或其他免疫效應(yīng)細(xì)胞，使其在機(jī)體表達(dá)并分泌細(xì)胞因子，或利用其他基因增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的免疫原性和（或）免疫系統(tǒng)功能，加速腫瘤消退。如將細(xì)胞因子基因?qū)肽切┛啥ㄎ挥谀[瘤的細(xì)胞，可在局部持續(xù)產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，高效低毒地抗癌功能。或利用DNA重組技術(shù)，增強(qiáng)瘤細(xì)胞的免疫原性，使機(jī)體的免疫系統(tǒng)更好地發(fā)揮抗腫瘤作用。

GM-CSF基因是目前激活免疫系統(tǒng)的最有效基因之一，它能吸引免疫細(xì)胞聚集到表面存在抗原體的腫瘤細(xì)胞處。這些抗原體可以引導(dǎo)免疫系統(tǒng)找出并破壞殘留在病人體內(nèi)其他位置的癌細(xì)胞。

Jaffee等[6]使用分泌GM-CSF（粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子）的同種異體腫瘤細(xì)胞疫苗用于術(shù)后胰腺癌患者，患者平均生存期為13個(gè)月，較化療放療組（6～9個(gè)月）明顯延長(zhǎng)，證實(shí)這種疫苗對(duì)于胰腺腺癌患者是安全有效的。Yamaguchi[7]研究顯示將鼠GM-CSF基因轉(zhuǎn)導(dǎo)人胰腺癌細(xì)胞，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GM-CSF基因表達(dá)產(chǎn)生顯著的抑癌效應(yīng)。

3 小結(jié)

胰腺癌的基因治療目前仍處于試驗(yàn)研究階段，尚無(wú)一項(xiàng)臨床治療方案獲得批準(zhǔn)。但基因治療被認(rèn)為是腫瘤治療的最終方法，由于單一的自殺基因體系只能限制腫瘤的進(jìn)一步生長(zhǎng)和一定程度的腫瘤體積的減少，很難從根本上清除瘤塊。要根除腫瘤，必須在限制腫瘤生長(zhǎng)的基礎(chǔ)上，依靠其他機(jī)制，如增強(qiáng)機(jī)體免疫能力來(lái)殺傷腫瘤細(xì)胞。因此可考慮從聯(lián)合自殺基因和免疫基因治療胰腺癌的思路入手，通過(guò)聯(lián)合兩者作用胰腺癌細(xì)胞，建立起單獨(dú)和聯(lián)合作用的動(dòng)物模型，并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來(lái)獲得聯(lián)合HSV-TK/GCV和GM-CSF進(jìn)行胰腺癌治療的一手資料，并對(duì)其療效進(jìn)行評(píng)估，為臨床上應(yīng)用聯(lián)合基因療法治療胰腺癌提供實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Springer CJ,Niculescu-Duvaz I. Prodrug-activating systems in suicide gene therapy[J].J Clin Investi,2000,105(9):1161-1167.

[2]Ritz JM,Kuhle O,Riethdorf S,et al. A novel transgenic mouse model reveals humanlike regulation of an 8-kbp human TERT gene promoter fragment in normal and tumor tissues[J]. Cancer Res,2005,65(4):1187-1196.

[3]Rosenfeld ME,Vicker SM, Raben D, et al. Pancreatic carcinoma cell killing via adenoviral mediated delivery of the herpes simplex virus thymidine kinase gene[J].Ann Surg,1997,22(5):609-618.

[4]Block A,Freund CT,Chen SH,et al. Gene therapy of metastatic colon carcinoma:regression of mutiple hepatic metastases by adenoviral expression of bacterial cytosine deaminase[J].Cancer Gene Ther,2000,7(3):438-445.

[5]Yang L,Chiang Y,Lenz HJ,et al.Intercellular communication mediates the bystander effect during herpes simplex thymidine kinase/ganciclovir-based gene therapy of human gastrointestinal tumor cells[J]. Hum Gene Ther,1998,9:719-728.

[6]Jaffee EM，Dranoff G，Cohen LK，Hauda KM，Clift S，Marshall FF，Mullig an RC，Pardoll DM. High efficiency gene transfer into primary human tumor explan ts without cell selection.Cancer Res 1993；53（10 Suppl）：2221-2226

[7]Yamaguchi T，Saisho H，Sakiysms S. Impaired in vivo tumor growth of human pancreatic carcinoma cells retrovirally transduced with GM-CSF gene. Anticanc er Res 1998；18：A165-A170

（收稿日期：2008-11-25）