朱振洪　葛立軍　劉文洪　趙偉春　萬海同

摘要：為了獲得重組人生長激素在畢赤酵母中高表達(dá)的菌株，按畢赤酵母基因密碼子偏愛性，人工合成hGH的全基因序列，該基因被克隆到穿梭質(zhì)粒pPIC9K中，PEG1000介導(dǎo)轉(zhuǎn)入畢赤酵母GS115細(xì)胞，通過G418篩選獲得高拷貝轉(zhuǎn)化子。在甲醇的誘導(dǎo)下，實現(xiàn)了hGH在畢赤酵母中的成功表達(dá)。通過發(fā)酵條件的優(yōu)化，發(fā)酵上清中的表達(dá)量達(dá)1537mg/L經(jīng)過超濾和兩步層析。重組蛋白的得率達(dá)35％，純度為97％。相對分子質(zhì)量測定表明重組蛋白的相對分子質(zhì)量與理論值相近，N-端氨基酸測序證實hGH基因在畢赤酵母中獲得正確的表達(dá)。

關(guān)鍵詞：重組人生長激素；畢赤酵母；表達(dá)；純化

中圖分類號：Q78文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1007－7847(2009)01－0020－05