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膀胱移行細(xì)胞癌中環(huán)氧化酶-2的表達(dá)研究

2009-12-17 09:57陸浩源白先忠
華夏醫(yī)學(xué) 2009年5期
關(guān)鍵詞:氧化酶膀胱癌免疫組化

陸浩源 白先忠

摘要: 目的:檢測(cè)環(huán)氧化酶-2(COX-2)在膀胱癌組織中的表達(dá),探討COX-2表達(dá)與膀胱癌臨 床病理的關(guān)系。方法:采用免疫組化方法檢測(cè)56例膀胱癌組織中COX-2的表達(dá)。結(jié)果:膀胱癌 組織中COX-2的陽性表達(dá)率為57.1%。COX-2的表達(dá)與腫瘤的病理分級(jí)和臨床分期相關(guān)。結(jié) 論:COX-2的異常表達(dá)可能在膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中起一定的作用。

關(guān)鍵詞:膀胱移行細(xì)胞癌;環(huán)氧化酶-2;免疫組化

中圖分類號(hào): R737.14 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào): 1008-2409(2009)05-0805-03

Expression of cyclooxygenase-2 in human transitional cell carcinoma of t he bladder/LU Hao-yuan, BAI Xian-zhong∥The Affiliated Tumor Hospital of Guang xi Medical University, Nanning 530027, China

Abstract:Objective:To study the expression of cyclooxygenase-2(COX-2) in human transiti onal cel l carcinoma of the bladder(BTCC)and their relationship with clinical pathologic al characteristics. Methods: S-P immunohistochemistry staining was performed t o e valuate the positivity of COX-2 in fifty-six cases of transitional cell carcin om a of the bladder and 10 cases of normal bladder mucosa. Results: The positive e xp ression of COX-2 were 57.1%(32/56), the expression of COX-2 was related tocl inic stage and the tumor grade(P<0.05). Conclusion: The abnormal expressio n of C OX-2 might play a certain role in course of the occurrence, development of tra nsitional cell carcinoma of the bladder.

Key words: transitional cell carcinoma of the bladder; COX-2; imm unohistochemistry

膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生?發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的病理過程,常與多種癌基因和抑癌基因的表達(dá)及 調(diào)控相關(guān)。環(huán)氧化酶(COX)是合成前列腺素的限速酶,其在體內(nèi)有兩種亞型:COX-1 和 C O X-2。近年研究發(fā)現(xiàn)許多癌前病變和惡性腫瘤中均有COX-2基因的擴(kuò)增及其蛋白的高表達(dá), 但 其與膀胱移行細(xì)胞癌病理分化程度?臨床分期的相關(guān)性,研究結(jié)果并不一致。本研究檢測(cè)CO X-2在膀胱癌中的表達(dá),探討COX-2表達(dá)與膀胱癌臨床病理關(guān)系,揭示COX-2在膀胱癌發(fā)生 ?發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本收集

膀胱癌組織取自廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科2003~2005年間部分膀胱癌患者。入選 患者均診斷明確,資料完整,共56例,其中男47例,女9例;年齡24~85歲,平 均(62.43±12.08)歲,所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)為膀胱移行細(xì)胞癌。56例標(biāo)本病理分級(jí)按 WHO標(biāo)準(zhǔn)分為:G1 23例,G2 20例,G3 13例。臨床分期按UICC-TNM標(biāo)準(zhǔn)分為:Tis- T1期33例,T2~T4期23例。另取10例正常膀胱黏膜標(biāo)本做對(duì)照。

1.2 方法

使用鏈霉素抗生物素蛋白質(zhì)-過氧化酶(SP)法行免疫組化檢驗(yàn),試劑及試劑盒均購自福建邁 新生物技術(shù)開發(fā)公司,一抗為兔抗人COX-2單克隆抗體工作液 RMA-0549(克隆號(hào)SP21); 二抗為即用型第二代免疫組化ElivisionTMplus廣譜試劑盒(KIT-9901);用EDTA修復(fù)法修復(fù) 抗原;DAB法顯色。采用已經(jīng)研究證實(shí)為COX-2蛋白陽性表達(dá)的肺癌標(biāo)本作為陽性對(duì)照,以P BS替代一抗為空白對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷

參照文獻(xiàn)報(bào)道[1],顯微鏡下觀察細(xì)胞染色情況,COX-2陽性細(xì)胞的標(biāo)志為細(xì)胞漿 內(nèi)或胞膜 上呈棕黃色,分4個(gè)級(jí)別。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為∶-,細(xì)胞無著色;+,細(xì)胞胞漿內(nèi)微弱且彌漫染色 (可以包括<10%的細(xì)胞胞漿內(nèi)強(qiáng)染色);,10%~90%的細(xì)胞胞漿內(nèi)中度或強(qiáng)染色;—,>90%的細(xì)胞胞漿內(nèi)強(qiáng)染色;-,判定為陰性表達(dá),+~肺陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 10.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,α值取0.05作為顯著性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 COX-2在膀胱癌細(xì)胞的表達(dá)

COX-2陽性表達(dá)產(chǎn)物呈黃色顆粒狀,表達(dá)較強(qiáng)時(shí)呈棕黃色,定位于癌細(xì)胞漿中。COX- 2在膀胱癌細(xì)胞中陽性表達(dá)率為57.14%(32/56),其中弱陽性11例,中等陽性15例,強(qiáng)陽性 6例,但在正常膀胱細(xì)胞中為陰性表達(dá),見表1。

COX-2的陽性表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的生物學(xué)行為密切相關(guān),與膀胱移行細(xì)胞癌病理分級(jí)? 臨床分期密切相關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P<0.01,P<0.05),見表2。3者 的陽性率均隨腫瘤分化強(qiáng)度的降低,惡性程度的增加其陽性率逐漸上升(分別為P<0.01,P <0.05),見表3。

3 討論

COX-2基因在正常情況下絕大多數(shù)不表達(dá),只有在細(xì)胞受到細(xì)胞內(nèi)外各種因素(如細(xì)胞因子 ? 生長因子?癌基因?促癌劑?一氧化氮等)刺激后才表達(dá)。近年的研究表明腫瘤組織中COX- 2過度表達(dá)是一種普遍現(xiàn)象[2,3]。COX-2主要通過抑制細(xì)胞凋亡?抑制機(jī)體免疫 功能?促進(jìn) 血管形成?增加腫瘤細(xì)胞的侵襲能力和促進(jìn)癌前病變向腫瘤轉(zhuǎn)化而參與癌的形成;通過影響 細(xì)胞粘附?免疫監(jiān)視?凋亡及血管生成從而促進(jìn)腫瘤的生長和蔓延[4,5]。因此認(rèn) 為COX-2的表達(dá)與兩項(xiàng)主要反映腫瘤惡性表現(xiàn)的指標(biāo)即病理分級(jí)和臨床分期有關(guān)。

本研究中COX-2在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)率為57.1%,而在正常膀胱黏膜中不表達(dá),預(yù)示C OX-2可能可以作為膀胱移行細(xì)胞癌化學(xué)預(yù)防和治療的靶點(diǎn)。非甾體類抗炎藥如阿司匹林等 是 臨床上應(yīng)用已久的前列腺合成酶抑制劑,它們非選擇地抑制COX-1和COX-2。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn) 用 非選擇性COX抑制劑NSAI-D或選擇性抑制劑均可降低嚙齒動(dòng)物化學(xué)致癌模型中膀胱移行細(xì)胞 癌的發(fā)生率[6,7]。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明COX-2的表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌的病理分級(jí)和臨床分期關(guān)系密切,且隨著膀胱 移行細(xì)胞癌分級(jí)分期的增高,COX-2的表達(dá)逐漸增高。筆者推測(cè)COX-2可能在膀胱移行細(xì)胞 癌 發(fā)生發(fā)展的各個(gè)階段都起作用。COX-2的表達(dá)伴隨膀胱移行細(xì)胞癌從低分級(jí)到高分級(jí)?淺表 性到浸潤性的惡性過程。這與Yoshimura[8]等的研究結(jié)果相符,與Wulfing等[6]的研究相矛 盾。造成上述結(jié)果相矛盾的原因,除可能與樣本選擇?研究所選用的抗體?實(shí)驗(yàn)條件等因素 有關(guān)之外,膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜,COX-2與其他癌基因或因子可能有相互作用也 是造成研究結(jié)果不一致的原因。因此對(duì)于COX-2在膀胱癌發(fā)生?發(fā)展中的作用及其與其他因 子的相互作用值得進(jìn)一步探討。

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