赫曉燕，劉丹丹，曹 靖，郝歡慶，邢海權(quán)

（山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，太谷 030801）

哺乳動物的胎盤是胎兒和母體之間進行物質(zhì)交換的臨時性器官，因其特殊的屏障功能與內(nèi)分泌功能，自古以來就為人們所重視，中醫(yī)將經(jīng)過簡單加工和炮制后的人胎盤稱為“紫河車”，被認為有養(yǎng)血、益氣、補精、滋腎、助孕之功效，具有藥用價值。近年來，人們對胎盤的研究逐步深入，已由過去單一的人胎盤研究擴展到羊、鹿、牛、豬等動物的胎盤［1］，研究各種動物的胎盤在畜牧業(yè)生產(chǎn)中具有重要意義。羊駝是我國近年來新引進的一種經(jīng)濟和生態(tài)價值很高的經(jīng)濟動物，它們對不良環(huán)境和疾病有強大的抵抗力，羊駝胎盤中所含的有益成分值得關(guān)注，到目前為止，國外僅部分學(xué)者對羊駝胎盤的結(jié)構(gòu)有過研究［2-4］，但其中有很多問題未涉及到。本實驗擬對羊駝胎盤的大體結(jié)構(gòu)和組織結(jié)構(gòu)進行系統(tǒng)研究，旨在為研究羊駝胎盤的功能和再利用提供形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料 來自山西農(nóng)業(yè)大學(xué)中華羊駝養(yǎng)殖基地的足月正常分娩、產(chǎn)后自然排出的胎盤，共4只。

1.2 方法 羊駝生產(chǎn)后，一方面觀察產(chǎn)下的胎盤的顏色、厚度、質(zhì)地，同時立即取小塊組織固定于10%甲醛溶液中，按常規(guī)方法制成石蠟切片，片厚5 μm，HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果

2.1 羊駝胎盤外觀 肉眼觀察，羊駝胎盤呈彎曲的鉤狀囊，絨毛散布于胎盤表面，排出的尿囊中充滿尿液，羊膜隨胎盤排出，為白色的薄膜，卵黃囊退化，只留少量痕跡，除此之外，剛產(chǎn)下的新生兒羊駝的軀干、頭部、頸部和四肢表面覆蓋著一種不透明的白色膜，稱表皮膜或上皮膜（epidermal membrane，EM），厚度為1～2 mm。表皮膜緊貼于新生兒羊駝皮膚與黏膜交界處，如嘴唇、鼻孔、肛門、陰門、陰莖、包皮等處，也緊貼于皮膚與足墊連接處、蹄冠及臍帶等處，并且在這些部位EM明顯增厚。新生兒羊駝產(chǎn)出后，迅速從胎兒表面將EM剝離，足月胎兒的EM是纖維性的，很容易從新生兒表面脫落，甚至輕輕地動作或摩擦，EM會很快干燥并且脫落。

2.2 羊駝胎盤的顯微結(jié)構(gòu)

2.2.1 表皮膜（EM） 光鏡下可見，EM屬復(fù)層扁平上皮，表層和中間層細胞均呈扁平鱗片狀。正面觀，上皮細胞為多邊形，體積較大，細胞界限清晰，邊緣為鋸齒狀，很多細胞中央有核，核為圓形，淡染，有些核中央可見到明顯的核仁，細胞質(zhì)淡染，呈空網(wǎng)狀（圖1）。側(cè)面觀，表皮膜由多層扁平細胞構(gòu)成，很多細胞中央可見扁平的核。

2.2.2 羊膜和尿囊 光鏡下觀察，羊駝羊膜為一很薄的膜，表層有一層排列較緊密的扁平細胞，深層為結(jié)締組織，淺層為較薄的致密結(jié)締組織，可見長梭形的成纖維細胞，深層為疏松的結(jié)締組織膜（圖2）。

圖1 羊駝表皮膜正面觀（HE）40×

圖2 羊駝羊膜光鏡結(jié)構(gòu)（HE）400×

羊駝的羊膜和尿囊膜的結(jié)構(gòu)類似于其他哺乳動物。沒有“自由”的膜，整個胎盤被絨毛和滋養(yǎng)層覆蓋著。通常在尿囊會發(fā)現(xiàn)尿囊小體。

2.2.3 絨毛膜 光鏡下可見許多大小不等、形態(tài)不一的絨毛斷面，有些部位的絨毛呈塊狀，絨毛表面的滋養(yǎng)層細胞大部分呈柱狀或立方形，但有些部位為扁平細胞，大量的毛細血管侵入滋養(yǎng)層上皮（圖3A、B、C）。在一些絨毛的頂端可見體積較大的、多核的巨大細胞，這些細胞形態(tài)不規(guī)則，內(nèi)有3～5個大細胞核（圖4A、B）。

圖3 羊駝絨毛膜的絨毛及滋養(yǎng)層上皮細胞

圖4 羊駝絨毛頂端的巨大細胞

3 討論

3.1 羊駝胎盤的結(jié)構(gòu)特征 經(jīng)學(xué)者對單峰駝、雙峰駝、美洲駝（llama）和羊駝等的研究認為，駱駝科動物的胎盤與豬和馬相似，屬上皮絨毛膜胎盤，胎膜包括絨毛膜、卵黃囊、尿囊、羊膜及特有的表皮膜［2－5］，我們對羊駝胎盤的肉眼和組織學(xué)觀察結(jié)果與此相符。

羊駝所特有的胎膜是上皮膜，它由鱗狀上皮構(gòu)成，這種膜被認為是來自于胎兒表皮，其功能不清［6］。表皮膜（epidermal membrane，EM）是駱駝科動物所特有的，一般易與羊膜混淆［7－8］。因為EM沒有覆蓋鼻孔或嘴，所以即使出生后沒有立即移走新生兒的EM，也很少造成新生兒的產(chǎn)后窒息，這與羊膜形成對照。在大多數(shù)哺乳動物羊膜可能完全覆蓋住鼻子和嘴，使其窒息幾乎不能掙扎。Steven等（1980）描述羊駝羊膜上皮由成層的鱗狀上皮組成，有6～8層［2］。Fowler觀察到EM由很厚的一層復(fù)層鱗狀上皮細胞構(gòu)成，外層為角化層，細胞界限清晰，但沒有細胞核，膜上沒有彈性纖維，組織化學(xué)技術(shù)顯示，二硫化物和巰基是很豐富的［3］，但本實驗所觀察的EM切片中的很多細胞有細胞核，這些有核細胞與無核細胞在功能上是否有別還有待于研究。

神經(jīng)胚形成之后，覆蓋胚胎表面的細胞構(gòu)成預(yù)定表皮。開始，表皮只由一層細胞組成，但在多數(shù)脊椎動物中，表皮很快成為兩層結(jié)構(gòu)，外面一層形成胚皮（periderm），胚皮是臨時性結(jié)構(gòu)，一旦底層細胞分化成表皮，胚皮便脫落［8］，羊駝的EM是否是未脫落的胚皮及其功能有待于進一步研究。

絨毛膜滋養(yǎng)層細胞大部分是單核細胞，它們可能參與母—胎物質(zhì)交換的大部分過程，另外從妊娠后2個月直到分娩可見許多形狀不規(guī)則的多核滋養(yǎng)層細胞［4－5］。我們的研究顯示在娩出的羊駝胎盤的絨毛頂端也有許多滋養(yǎng)層多核巨大細胞。Gorkhovskii等認為這些巨大細胞是由于核內(nèi)有絲分裂形成的多倍體，并推測它們有內(nèi)分泌功能［9］。Skidmore等發(fā)現(xiàn)在小的、著床的樣本中，這些巨大細胞位于腺體的頂部，但認為其功能不清［5］。Wooding等則認為這些巨大細胞可表達類固醇生成酶［10］。Klisch等用光鏡、電鏡觀察和Feulgen染色等方法研究了妊娠150 d、264 d、347 d和足月的羊駝胎盤的滋養(yǎng)層多核巨大細胞，認為羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細胞有絲分裂時DNA含量的增加是由于染色體多倍體化而不是核內(nèi)復(fù)制，羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細胞中的染色體增殖具有高水平的多倍體化性質(zhì)而不同于其他物種的動物，但他并沒有研究這種細胞的功能［11］。本實驗中我們只觀察了這種多核巨大細胞，在以TGF－β1、GH、PRL作為一抗，以胎盤為組織進行免疫組織化學(xué)染色時，這種多核巨大細胞沒有陽性細胞出現(xiàn)，提示了與其他滋養(yǎng)層細胞相比，這種細胞內(nèi)分泌功能的有限性。但有關(guān)羊駝滋養(yǎng)層多核巨大細胞的功能有待于進一步研究。

羊駝絨毛膜滋養(yǎng)層的另一個特點是滋養(yǎng)層上皮有豐富的毛細血管，血管深陷在兩層上皮之間。據(jù)Steven等的觀察、測量，兩個血管之間的距離降至2 μm［2］。有學(xué)者評論這種現(xiàn)象并且推測這對于高海拔地區(qū)胎兒的發(fā)育是很有益的。然而，這種情況也發(fā)生在海平面或單、雙峰駝，因此推測這種情況并不是由于低氧壓所引起的。

4 結(jié)論

利用肉眼、光學(xué)顯微鏡觀察羊駝胎盤，羊駝胎盤的類型同其他駱駝科動物的胎盤，屬上皮絨毛膜胎盤，胎膜包括絨毛膜、卵黃囊、尿囊、羊膜及特有的表皮膜。絨毛膜細胞的頂端也有巨型多核細胞；表皮膜由多層扁平細胞構(gòu)成，與其他學(xué)者研究不同的是，我們發(fā)現(xiàn)很多外層細胞中央有扁平的細胞核，但其功能不清。

［1］張淑二，陶勇，張運海，等.胎盤的有效成分及其應(yīng)用［J］.動物醫(yī)學(xué)進展，2007，28（9）.

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［3］Fowler M E，Harvey J Olander. Fetal membranes and ancillary structure of llamas（Lama glama）［J］.Am J Vet Res，1990，51（9）：1495－1500.

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［5］Skidmore J A，F(xiàn) B Wooding，W R Allen.Implantation and early placentation in the one－h(huán)umped camel（Camelus dromedarius）［J］.Placenta，1996，17：253－262.

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