徐森富，汪恩鋒，王普形，柯 勝

(1.臺州科技職業(yè)學院，浙江臺州 318020;2.浙江省玉環(huán)縣綠野農(nóng)業(yè)科技有限公司，浙江 玉環(huán) 317600)

玉環(huán)柚原名楚門文旦、文旦，產(chǎn)地浙江玉環(huán)，是中國四大名柚之首，連續(xù)8次奪得全國柚類評比冠軍，是浙江省的特色優(yōu)勢農(nóng)產(chǎn)品，也是玉環(huán)縣對外宣傳的一張金名片。同時玉環(huán)柚營養(yǎng)價值高，全身是寶，果皮可制蜜餞、果皮糖和提取芳香油，果中富含檸檬苦素和類黃酮等多種活性成分，柚中黃酮含量高純度大極具開發(fā)競爭力。“九五”時期玉環(huán)縣有玉環(huán)柚0.305萬 hm2，產(chǎn)量6萬 t，從業(yè)人員3萬余人，產(chǎn)值超億元，占農(nóng)業(yè)總收入的1/3以上。2006年由于受柑橘黃龍病的影響，玉環(huán)縣砍了大批文旦樹，文旦種植面積下降到0.183萬hm2，而真正有一定產(chǎn)量的只有0.1萬 hm2左右，文旦產(chǎn)量也降到1.5萬 t。玉環(huán)柚種植面積逐年減少，文旦販銷、文旦飲品、文旦深加工等相關產(chǎn)業(yè)面臨嚴重威脅，部分農(nóng)民收入明顯減少，形勢十分嚴峻。據(jù)統(tǒng)計目前全縣有效結果面積已不足667 hm2，總產(chǎn)量只有近 1萬 t，一些產(chǎn)區(qū)此病仍以15%～20%速度蔓延，玉環(huán)柚產(chǎn)業(yè)面臨生存危機，鑒于黃龍病感染力強，老區(qū)難以繼續(xù)種植，給玉環(huán)柚的發(fā)展帶來了威脅，故進行了玉環(huán)柚脫毒苗關鍵技術的探討。

1 選址

選址要符合浙江省有關特色農(nóng)產(chǎn)品種子種苗工程發(fā)展規(guī)劃。繁殖區(qū)為黃龍病隔離區(qū)，利于脫毒苗安全繁育。我們選在產(chǎn)地生態(tài)環(huán)境條件良好，遠離污染源，并有可持續(xù)生產(chǎn)能力的農(nóng)保區(qū)作為實施區(qū)，也是玉環(huán)柚唯一柑橘黃龍病隔離區(qū)，水、電、路配套，園路與76省道相通，交通方便。

2 危險性病害脫除與病毒檢測

首先對玉環(huán)柚優(yōu)選良種進行脫毒，采用莖尖嫁接、試管胚胎培育等脫毒手段培育的玉環(huán)柚優(yōu)選良種脫毒純種，經(jīng)過指示植物與系統(tǒng)檢測手段檢測后，確認為無衰退病、裂皮病、碎葉病與黃龍病等病毒后，置于鋼架大棚40目網(wǎng)室內(nèi)培植，3道以上隔離門、專人負責，并經(jīng)數(shù)年培育，每年秋冬多次用OTBIA檢測，確認該種苗培育安全。

3 大棚網(wǎng)室隔離技術

脫毒苗快繁選址遠離玉環(huán)柚大田產(chǎn)區(qū)2～3 km，傳毒昆蟲較難遷飛，有利育苗安全。

鋼架大棚牢固，垮度5.5 m，抗風抗壓能力強。

育苗場地區(qū)塊隔離，網(wǎng)室設計中設立3道緩沖門隔離，避免傳毒昆蟲潛入育苗室。3道緩沖門僅能進入育苗室外通道，經(jīng)第4道門才可進入采穗圃、育苗室、練苗室，并分別用40目避蟲網(wǎng)隔離，母本園經(jīng)過第5道門，層層隔離，在一定程度上提高了脫毒苗繁育過程中的安全性。

制訂脫毒苗安全生產(chǎn)操作技術規(guī)程。生產(chǎn)操作人員經(jīng)清潔消毒后方可進入避蟲網(wǎng)室，未清潔消毒者與閑人一律免入。用于生產(chǎn)的基質要經(jīng)溴甲烷滅菌消毒，并在安全期內(nèi)運入，病蟲活動期不得開門運入。種子與植物活體 (樹枝、草把、蔬菜及瓜苗)等一律不得帶入避蟲網(wǎng)室。刀、剪等工具用前要經(jīng)1%次氯酸消毒，或高溫沸水中燒煮5～10 min。專業(yè)工具專項生產(chǎn)，鋤頭等工具一律采用5%漂白粉液處理3 min后使用。遇臺風雨，如有避蟲網(wǎng)破損，要立即更換新網(wǎng)，待風靜雨止后立即全面噴藥，藥劑選用2%菌克毒克200倍，加20%甲氰菊酯1 000倍或加48%樂斯本800倍，每7 d 1次，連續(xù)2次。

4 建立母本園和采穗圃

優(yōu)選良種脫毒苗工廠化繁育工作的前提是建立上規(guī)模的良種母本園。在網(wǎng)室大棚進行母本園和采穗圃的分離，并對母本園進行隔離，同時對采穗圃首批采自非黃龍病區(qū)作砧木用的香拋種子經(jīng)過熱處理消毒后，播于網(wǎng)室內(nèi)預先以溴甲烷消滅病菌后的基質中，并當年秋季經(jīng)OTBIA檢測確認為無危險性病害砧木后，從玉環(huán)柚脫毒1號與3號母本上分別剪取接穗，分株、分區(qū)嫁接，培育玉環(huán)柚一代純種。

5 砧木種子采集與熱處理

培育無病毒砧木苗的種子必須來自非黃龍病區(qū)，用的香拋種子選于浙西健康母樹，至12月中下旬果實充分成熟后采摘，采后后熟10～15 d取出種子，先在清水中漂洗種皮上果膠、酸液后置0.1%高錳酸鉀液清洗3～5 min，再用清水漂洗后蔭干至種皮發(fā)白，立即熱處理后摧芽播種，經(jīng)熱處理后的種子發(fā)芽率高達95%以上，根系發(fā)達，發(fā)根量幾乎是常規(guī)苗的50倍，也是脫毒苗表現(xiàn)速生、早產(chǎn)的保證。

6 基質滅菌消毒

溴甲烷是一種常用的熏蒸殺蟲劑，具有殺蟲、殺線蟲、殺螨滅菌、除草、滅鼠、防病等多種功效，應用極廣泛。脫毒苗培育與土壤環(huán)境滅菌消毒少不了溴甲烷，但它又是一種高毒化學品，滲透性極強，要嚴格按照溴甲烷應用技術操作規(guī)程進行。

7 網(wǎng)室小氣候調(diào)節(jié)

玉環(huán)柚為蕓香科柑橘屬柚類果樹，該樹種性喜溫濕環(huán)境，又是一種半耐蔭果樹，在網(wǎng)室內(nèi)栽培育苗，冬季蓋膜，平均氣溫達11～13℃，加上種子經(jīng)熱處理刺激，根系生長旺盛，表現(xiàn)速生。入春后膜內(nèi)氣溫回升快，春分前后午間膜內(nèi)氣溫常超過35℃，過高氣溫又在一定程度上抑制了脫毒苗的安全生產(chǎn)，因此，網(wǎng)內(nèi)加蓋黑色或銀灰色遮陽網(wǎng)(遮光率達50% ～60%)。4月至10月上旬遮光，可有效控制高溫對脫毒苗的危害。3月下旬開始分步揭膜，先揭頂膜，至4月下旬再揭圍膜，結合午間遮陽網(wǎng)的應用，保持網(wǎng)室內(nèi)氣溫穩(wěn)定在20～30℃，十分有利脫毒苗快速生長對溫度的需求。至10月下旬氣溫逐漸下降至10℃左右時，要及時圍膜保溫，防止脫毒苗過早停止生長。至11月下旬，氣溫降至5～8℃時要適時蓋上網(wǎng)室頂膜保溫防凍。脫毒苗基質含水量狀況不僅影響著肥液分解供苗木吸收，而且基質中足夠的含水量，高溫時因水分蒸發(fā)帶走熱量，可維護網(wǎng)室內(nèi)正常的氣溫，防止高溫傷苗;為此，夏季高溫采用噴水散熱法，結合遮陽網(wǎng)的應用，創(chuàng)造網(wǎng)室內(nèi)良好的小氣候環(huán)境條件，是脫毒苗繁育中一項必不可少技術措施。冬季保持室內(nèi)基質60%～80%的含水量，又可維護脫毒苗正常生理活動對水分和肥液的需求，穩(wěn)定網(wǎng)室內(nèi)正常氣溫，創(chuàng)造良好的小氣候環(huán)境條件，使水與光熱的調(diào)節(jié)同步進行。

8 脫毒苗肥水調(diào)控

玉環(huán)柚脫毒苗培育由于基質疏松得體，保肥持水力強，網(wǎng)室內(nèi)氣溫相對穩(wěn)定，成為幼苗到嫁接大苗快速生長的重要條件，因此基質的干濕度大小成為控制脫毒苗生長的主要因素。幼苗定值后澆施0.3%尿素水溶液定根，不僅有利成活，供給速效肥可防止緩苗促進生長。此后每隔15 d追施0.3%～0.5%復合肥、尿素水溶液，以薄肥勤施，既保持基質60%～80%的含水量，促進基質中的有機養(yǎng)分水解供給種苗吸收，有利于快速生長。進入盛夏高溫季節(jié)，充分供水，以增加蒸發(fā)量散熱，可維持室內(nèi)脫毒苗生長適宜溫度，避免苗木因高溫造成危害。9－10月份停止施肥，適當控水，可防止肥水過多而抽發(fā)冬梢造成空耗養(yǎng)份降低苗木抗寒力。冬季充分供給肥水，又縮短了脫毒苗的半休眠狀態(tài)，延長生長期，并充分吸收肥水，使早春提前進入生長活動期，對提高苗木質量，縮短種苗扶育周期，提前進入樹冠造型搭架，促進早產(chǎn)等均具現(xiàn)實意義。

9 生產(chǎn)流程

良種種子熱處理→玉環(huán)柚良種→莖尖嫁接(砧木種子熱處理)→嫁接苗→生物分子檢測→無病毒苗木→供大田種植、建立無病毒柚園新區(qū)。每一生產(chǎn)流程都要嚴格遵循規(guī)程，確保任何環(huán)節(jié)無病毒侵入的機會。

10 小結和討論

綜觀國際柑橘生產(chǎn)，先進國家均對柑橘 (含柚類)病毒病十分重視，美國、西班牙、土耳其、南非、以色列均已推行“株系保護計劃”，并實行苗木注冊制度，采取法規(guī)保護從而使生產(chǎn)上了新臺階。我國的廣東、廣西、福建等省原是黃龍病區(qū)，由于重視病毒病控制工作，加大了無毒化種苗生產(chǎn)管理力度，從而使病毒病得到了有效控制，生產(chǎn)取得快速發(fā)展。因此控制病毒病是促進生產(chǎn)發(fā)展的重要措施，特別是無病毒苗的培育尤為關鍵。玉環(huán)縣政府近幾年連續(xù)出臺政策，同時確定了玉環(huán)柚的發(fā)展目標，那就是近期采取玉環(huán)柚種植面積穩(wěn)定在0.2萬 hm2左右，其中重點基地面積確保0.1萬hm2，產(chǎn)量確保2萬t;新區(qū)發(fā)展和老區(qū)改造0.1萬hm2，將在現(xiàn)有一定規(guī)模的苔山塘、楚北塘、紅沙塘等建立10個玉環(huán)柚重點基地。近期需要大量的無病毒苗木，按600株·hm－2計，至少需80萬株無病毒苗，市場前景廣闊，經(jīng)濟和社會效益巨大，開展對脫毒苗產(chǎn)業(yè)化關鍵技術研究是重在發(fā)揮品種土地等資源優(yōu)勢，保護玉環(huán)柚種質資源，促進特色產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展必然選擇，同時為同類柑橘黃龍病的防治提供較好的探索與示范。

［1］裘維蕃.植物病理學 ［ M］.北京:科學出版社，1985.

［2］張?zhí)烀?柑橘病毒病 ［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.