攔生發(fā)

甘肅省臨夏中學(xué)生物教研組 甘肅臨夏 731100

淺談學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)基本技術(shù)實(shí)驗(yàn)的幾點(diǎn)思考

攔生發(fā)

甘肅省臨夏中學(xué)生物教研組 甘肅臨夏 731100

本文以實(shí)驗(yàn)教學(xué)中培養(yǎng)學(xué)生責(zé)任感為基礎(chǔ)，提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)素養(yǎng),為高中生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)提供參考。

實(shí)驗(yàn)教學(xué) 無菌操作 科學(xué)性 安全性

開展高中生物選修教材“實(shí)驗(yàn)二：學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)”實(shí)驗(yàn)，旨在培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作能力和探索科學(xué)知識(shí)的方法與技巧。作為一名實(shí)驗(yàn)教師，做到“課內(nèi)得法，課外得意，得法于內(nèi)、受益于外，立足課內(nèi)、輻射課外”，既是責(zé)任和義務(wù)，也是時(shí)代發(fā)展的需要。開展此實(shí)驗(yàn)的過程中，筆者認(rèn)為除了明確目的、理解原理、掌握實(shí)驗(yàn)程序外，還應(yīng)該注重以下幾個(gè)方面：

一、建立“微生物無所不在”的概念

微生物是指用肉眼看不見或看不清楚的微小生物，如細(xì)菌、病毒等。由于肉眼看不見，所以學(xué)生常常不太清楚外界環(huán)境和所有與環(huán)境接觸的身體各部位均有微生物的存在。實(shí)際上，它們廣泛分布于室內(nèi)外的空氣，水、土壤、桌、凳及身體表面的皮膚、黏膜、溫泉、海底等處。可以說微生物無所不在，無孔不入。因此，在學(xué)生第一次進(jìn)入微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室時(shí)，建立起“微生物無所不在，無孔不入”的概念，這樣才能真正體會(huì)到消毒、滅菌，無菌操作技術(shù)的必要性和防止外界微生物對(duì)培養(yǎng)物污染的重要性。

二、正確理解無菌操作內(nèi)容

教材中只提到操作者用肥皂將雙手洗凈，擦干，再用酒精(體積分?jǐn)?shù)75%)棉球擦手這一點(diǎn)內(nèi)容，主要強(qiáng)調(diào)接種的程序。筆者認(rèn)為這些內(nèi)容不夠全面，也引不起學(xué)生足夠的重視，甚至?xí)`導(dǎo)學(xué)生認(rèn)為這些就是無菌操作的全部?jī)?nèi)容，只要按部就班，就會(huì)防止外界微生物對(duì)培養(yǎng)物污染了。對(duì)此，實(shí)驗(yàn)前對(duì)學(xué)生要進(jìn)行必要的補(bǔ)充和說明：(1)一切用具和培養(yǎng)基要嚴(yán)格滅菌；(2)操作環(huán)境要無菌，最好在無菌室或接種箱中進(jìn)行；(3)時(shí)刻要注意用火焰封口；(4)接種操作的同學(xué)要穿實(shí)驗(yàn)服、帶口罩。因?yàn)橐环矫?，周圍環(huán)境和體表都不同程度存在大量的微生物，雖然大多數(shù)屬于正常菌群(非致病菌群)，但少數(shù)致病性菌進(jìn)入破損的皮膚或傳入口內(nèi)或眼睛等處，會(huì)引起感染；另一方面，有些微生物在一定的部位是非致病菌，當(dāng)條件改變時(shí)也可能是條件性致病菌。還有非致病菌性向致病性突變的可能。因此，嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作是實(shí)驗(yàn)成功的保障，也是提高環(huán)境意識(shí)的有效措施。

三、注重實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性

微生物培養(yǎng)的過程，對(duì)于學(xué)生而言，也是觀察的過程，教材僅提到將接種后的試管放入恒溫箱內(nèi)，在25℃下培養(yǎng)5～7天，或在37℃下培養(yǎng)24小時(shí)。對(duì)于如何觀察，觀察中應(yīng)注意哪些事項(xiàng)，沒有具體強(qiáng)調(diào)和說明。我認(rèn)為，教學(xué)過程中教師引導(dǎo)學(xué)生對(duì)微生物培養(yǎng)的科學(xué)性進(jìn)行必要的討論，在實(shí)驗(yàn)課上發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)小組在稱量中有隨意性，天平、量筒使用不規(guī)范，增大了誤差。制備培養(yǎng)基的過程中，忽視滅菌環(huán)節(jié)的重要性，滅菌后的培養(yǎng)基出于好奇，隨意接蓋、取棉塞，忽略了滅菌是否徹底的進(jìn)一步檢驗(yàn)。接種過程中，不嚴(yán)格遵循接種程序，手忙腳亂、增加了一定的危險(xiǎn)性，污染率較高。培養(yǎng)和觀察的過程中,由于出于好奇，隨意接蓋，為了提高培養(yǎng)溫度,甚至放到太陽底下曬,等到觀察、記錄菌落數(shù)時(shí)才發(fā)現(xiàn)部分培養(yǎng)基忘貼標(biāo)簽等等。這樣會(huì)影響實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論的形成。筆者認(rèn)為,以“學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)”實(shí)驗(yàn)為突破口,引導(dǎo)學(xué)生討論微生物培養(yǎng)的科學(xué)性,如除了溫度外,在具體的培養(yǎng)環(huán)境中還應(yīng)注意哪些因素影響？觀察過程中能否隨便接蓋后習(xí)慣性用手去摸或者用口去吹,或者用鼻子去聞？實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,為什么要洗手？培養(yǎng)物、培養(yǎng)基、棉塞、試管及培養(yǎng)皿如何處理、洗滌等,進(jìn)一步培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)態(tài)度和實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。

四、注重實(shí)驗(yàn)的安全性

實(shí)驗(yàn)操作過程中如高壓蒸汽滅菌過程、接種過程、酒精消毒、試管和培養(yǎng)皿的洗滌、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后培養(yǎng)基的分類處理等等，對(duì)于第一次進(jìn)微生物實(shí)驗(yàn)室的同學(xué)們來說都有一定的危險(xiǎn)性，為此，實(shí)驗(yàn)前讓同學(xué)們了解實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度、微生物安全手冊(cè)等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的安全性教育就顯得十分重要了。

2009-11-16

攔生發(fā)，本科，中教一級(jí)。