李輝敏,劉頻健
(九江學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,江西九江 332000)
復(fù)葉耳蕨為鱗毛蕨科復(fù)葉耳蕨屬植物,具有清熱利濕,抗菌消炎,鎮(zhèn)靜作用,民間用于急性黃疸型肝炎、關(guān)節(jié)炎、腰腿疼、痢疾、燙火傷、抗癌等。酚類化合物是藥用活性成分之一。如何提取尚不明確。2009年 5~6月,我們分別采用乙醇—三氯乙酸、水、乙醇三種介質(zhì)提取復(fù)葉耳蕨中的酚類化合物,并對(duì)其效果進(jìn)行了比較?,F(xiàn)報(bào)告如下。
復(fù)葉耳蕨根中酚類化合物的提取方法:取九江市星子縣產(chǎn)復(fù)葉耳蕨根樣品洗凈,切碎,80℃烘干,粉碎,過 80目篩,作為待測樣品備用。①乙醇—三氯乙酸提取法:稱取樣品
0.25 g,加入 10ml 95%乙醇和 1 ml 10%三氯乙酸液體于研缽中勻漿,再用 10%三氯乙酸定容至 25 ml,靜置 0.5 h后,過濾,待測。②乙醇提取法:稱取 5 g樣品,置于回流裝置中,加 85%乙醇 110ml,80℃水浴中回流 3 h,冷卻后過濾,濾液定容至 100 ml待測。③水提取法:稱取 5 g樣品,置于具塞錐形瓶中,加蒸餾水 100 ml,置于 80℃水浴中 3h,冷卻后過濾,濾液定容至 100 ml待測。
提取液液總酚含量測定方法:精確吸取濾液 0.2 ml,用溶液(乙醇∶三氯乙酸 =2∶3配制)定容至 10ml,取 1ml加入5 ml Folin-酚Ⅰ試劑,在 25℃水浴中放置 10 min,再加入0.5 ml Folin-酚Ⅱ試劑,在 25℃水浴中放置 30 min,每一樣液做兩管。另取一管加 1 ml定容液做對(duì)照管,依同樣步驟加入 FolinⅠ、FolinⅡ試劑,用對(duì)照管調(diào)零,測樣液的吸光度,從回歸方程中(Y=1.6×10-3X+2.53×10-3)求得樣液中酚類的含量(μg)。樣液中酚類物質(zhì)含量較高時(shí),應(yīng)適當(dāng)稀釋倍數(shù),使 A值 0.15~0.80。然后進(jìn)一步計(jì)算出 1 g樣品中酚類物質(zhì)的含量(%)。
結(jié)果:乙醇—三氯乙酸提取法所得樣品總酚含量為20.45 mg/g,乙醇提取法所得樣品總酚含量為 4.52 mg/g,水提取法所得樣品總酚含量為 12.45mg/g。
討論:本研究結(jié)果顯示復(fù)葉耳蕨根中酚類化合物的含量較高。用 3種溶劑提取復(fù)葉耳蕨根部的酚類物質(zhì),提取液中總酚含量由高到低依次為乙醇—三氯乙酸、水、乙醇。由此可見,用乙醇—三氯乙酸法提取復(fù)葉耳蕨根中總酚較為合適,而其他兩種提取方法僅能提取其中部分的酚類物質(zhì)。