郭偉聰 劉德桓 陳國(guó)英 陳文鑫

(福建中醫(yī)學(xué)院附屬泉州市中醫(yī)院，福建省泉州市溫陵南路 215號(hào)，362000)

目前我國(guó)高血壓病患者已超過 1.6億，該病不僅患病率高，而且可以引起嚴(yán)重的心、腦、腎并發(fā)癥，是腦卒中、冠心病的主要危險(xiǎn)因素。西藥治療高血壓副作用較大，依從性差，真正獲血壓理想控制的只有 5%左右[1]。本實(shí)驗(yàn)研究觀察了以化瘀濁益肝腎法為治療原則組方的瘀濁清顆粒對(duì)腎型高血壓大鼠的降壓作用的影響及其機(jī)制。

1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康雄性 SD大鼠 40只，體重 200～250g，購(gòu)自福建醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)儀器:大鼠尾動(dòng)脈血壓測(cè)定儀，RM6240B型多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，LG-20型血液黏度測(cè)試儀;LCJ-190型血液流變儀，電熱恒溫箱。實(shí)驗(yàn)藥物:瘀濁清顆粒，由泉州中醫(yī)院委托深圳三九現(xiàn)代中藥公司制備、提供:卡托普利片(汕頭金石制藥總廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模 腎血管型高血壓大鼠模型采用經(jīng)典造模方法，大鼠經(jīng) 3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔注射麻醉，腹部切口，于左右腎近腎門處小心分離腎動(dòng)脈后，于其下橫穿一條線，并根據(jù)腎動(dòng)脈的粗細(xì)程度，選用0.3mm的針灸針，依血管循環(huán)方向放于其上，然后將橫線打結(jié)，結(jié)扎后將針灸針抽出，縫合腹部切口，碘酒消毒。

2.2 血壓測(cè)定 血壓值測(cè)定采用無創(chuàng)測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈血壓法(收縮壓)，大鼠放在 37℃的恒溫箱內(nèi)烘 15～20min，以保持溫度使尾動(dòng)脈擴(kuò)張，實(shí)驗(yàn)方法和步驟按大鼠尾動(dòng)脈血壓測(cè)定儀的操作說明進(jìn)行，每次連續(xù)測(cè)3個(gè)數(shù)據(jù)，取其平均值作為血壓測(cè)定值。造模前先測(cè)定正常大鼠的血壓。

表1 不同劑量組對(duì)造模大鼠血壓的影響(ˉx±sd，mm Hg)

2.3 血液黏稠度測(cè)定方法 取肝素抗凝靜脈全血800uL，根據(jù)錐板式測(cè)量方法測(cè)定。

2.4 紅細(xì)胞聚集率方法 肝素抗凝管頸靜脈插管采血 2mL，根據(jù)血液的透光率與紅細(xì)胞聚集程度相關(guān)原理，取肝素抗凝趨脈全血 400uL。按儀器操作說明書，光密度法測(cè)定。

2.5 紅細(xì)胞變形性測(cè)定方法 根據(jù)紅細(xì)胞受切幣力后形態(tài)變化的原理，采用變形指數(shù)(DI)測(cè)定。取肝素抗凝靜脈全血 40uL，與 15%的PVD懸浮液 1mL搖勻。取混合后的樣品 440uL，按儀器操作說明書，激光衍射法測(cè)定。

2.6 給藥分組 造模前正常大鼠的血壓均值為 98.0±5.8mm Hg。造模后所有大鼠均給予常規(guī)固體飼料及飲水，造模 4周后測(cè)血壓，凡血壓比術(shù)前增高 25mm Hg以上，且高于 125mm Hg者確定為高血壓造模成功。選擇造模成功的大鼠隨機(jī)分成 3組，即對(duì)照組，每天給予蒸餾水，20mL/kg;瘀濁清顆粒高劑量組(高劑量組)，每天給予 0.5包/kg的瘀濁清顆粒;瘀濁清顆粒低劑量組(低劑量組)，每天給予 0.25包 /kg的瘀濁清顆粒。連續(xù)給藥 28天，前后測(cè)血壓 4次。休息 4天后，3組大鼠繼續(xù)給藥。其中對(duì)照組(A組)和低劑量組(C組)均加用卡托普利 50mg/kg，高劑量組(B組)用藥不變;即 A組每天給予蒸餾水 20mL/kg+卡托普利 50mg/kg，B組瘀濁清顆粒組(0.5包 /kg)，C組則用瘀濁清顆粒 0.25包/kg+卡托普利 50mg/kg，再連續(xù)給藥 100天，前后測(cè)血壓 4次。治療結(jié)束后麻醉所有大鼠，經(jīng)頸靜脈取血作血液黏稠度、紅細(xì)胞聚集率和紅細(xì)胞變形性檢側(cè)。

3 結(jié)果

3.1 不同劑量對(duì)造模大鼠血壓的影響 見表 1。

3.2 聯(lián)合用藥對(duì)造模大鼠血壓的影響 見表 2。

3.3 不同劑量對(duì)造模大鼠血液黏度的影響 見表 3。

3.4 不同劑量對(duì)造模大鼠紅細(xì)胞聚集率和紅細(xì)胞變形性的影響 見表 4。

4 討論

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 用藥前模型組與藥物組大鼠的血壓水平相似，2組比較無差異(P＞0.05);給藥第 28天后，低劑量組和高劑量組大鼠血壓與同組造模后比較，差異均具有顯著性(P＜0.05，P＜0.01);低劑量組與對(duì)照組比較差異具有顯著性(P＜0.05)，高劑量組與對(duì)照組比較，差異非常顯著性(P＜0.01)。說明瘀濁清顆粒對(duì)高血壓大鼠有顯著降壓作用，這與臨床觀察結(jié)果相符合。

表2 聯(lián)合用藥對(duì)造模大鼠血壓的影響(ˉx±sd mm Hg)

表3 不同劑量對(duì)造模大鼠血液黏度的影響

表4 不同劑量對(duì)造模大鼠紅細(xì)胞聚集率和紅細(xì)胞變形性的影響

4.2 聯(lián)合用藥對(duì)造模大鼠血壓的影響 從表 2可知，瘀濁清顆粒高劑量組(B組)與低劑量組聯(lián)合卡托普利(C組)及與單用卡托普利組(A組)3組用藥前后自身比較均有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，說明瘀濁清顆粒和卡托普利均能有效地降壓;用藥第 12天，B組、C組與對(duì)照組比較，降壓幅度均無顯著性差異(P＞0.05);用藥第 46天，C組與對(duì)照組比較差異具有顯著(P＜0.05，P＜0.01)，B組與對(duì)照組比較無顯著性差異(P＞0.05);用藥第 100天，C組與對(duì)照組比較，差異非常顯著(P＜0.01)，而 B組與對(duì)照組比較差異無顯著性(P＞0.05)。說明隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，瘀濁清顆粒加用卡托普利的臨床療效好于單用中藥或西藥。

4.3 高血壓病的發(fā)生是多因素綜合作用的結(jié)果 其病理過程中的血液流變學(xué)異常是心、腦、腎等靶器官損害的直接或間接致病原因。本實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí)，治療前高血壓大鼠紅細(xì)胞聚集指數(shù)和聚集面積指數(shù)顯著增加，紅細(xì)胞變形性顯著降低，血漿黏度明顯升高[1]。不同劑量的瘀濁清顆粒均能顯著降低造模大鼠血液黏度的作用，在降低全血高切黏度方面高劑量組顯著優(yōu)于低劑童組。瘀濁清顆粒也能明顯抑制紅細(xì)胞聚集，改善紅細(xì)胞變形性，同樣也是高劑量組優(yōu)于低劑量組。推測(cè)其作用機(jī)制主要是清除自由基，促進(jìn)血液循環(huán)，預(yù)防和逆轉(zhuǎn)靶器官的不良重塑，這是降低心腦血管并發(fā)癥發(fā)生和病死率的關(guān)鍵。

4.4 在研究中我們發(fā)現(xiàn)[2]高血壓病的發(fā)生主要是由于高血脂、高血糖、高鹽飲食引起的脂質(zhì)代謝紊亂，過氧化物質(zhì)過多，血流變學(xué)異常，以及自我調(diào)節(jié)功能失調(diào)，導(dǎo)致氣血津液代謝紊亂，津停為痰，血留為瘀，痰瘀互結(jié)，損傷絡(luò)脈，逐漸影響血管系統(tǒng)，使絡(luò)脈系統(tǒng)受到損害而發(fā)生病變。而其發(fā)病年齡大多數(shù)是在中年以后，正處在肝腎逐漸虧虛的階段，而此時(shí)性腺機(jī)能也開始衰退。因此，可以認(rèn)為痰瘀阻絡(luò)、肝腎不足是高血壓病發(fā)生的核心病機(jī)。瘀濁清顆粒的組方就是以化瘀濁、益肝腎法為主，從根本上抓住了治療高血壓病的病機(jī)，因此有很好的降壓作用;同時(shí)對(duì)血液流變學(xué)指征有改善作用。方中水蛭咸、苦，平，破血逐瘀，除了抗凝血，抗血栓作用外，還有保腎作用，故為君藥;遠(yuǎn)志苦、辛，溫，能祛痰化濁，又可通腎氣上達(dá)于心，藥理證實(shí)有降壓作用;巴戟天甘、辛，微溫，人肝腎經(jīng)，能強(qiáng)陰益精，陰陽(yáng)雙補(bǔ)，二者共為臣藥;決明子甘、苦、咸，微寒，入肝經(jīng)除風(fēng)熱，益腎精，起降血壓及降血脂作用;澤瀉甘，寒，入腎經(jīng)，能利小便，瀉腎經(jīng)火邪，又能養(yǎng)五臟，益氣力，起陰氣，補(bǔ)虛損而止頭旋，與決明子同為佐藥;葛根甘、辛，涼，可升陽(yáng)止頭痛項(xiàng)強(qiáng)，有抗血小板聚集，擴(kuò)張外周血管，降低血壓的作用為使藥。諸藥合用則攻補(bǔ)兼施，寒熱并用，升降有序。由于中藥降壓復(fù)方制劑的降壓機(jī)制在于多靶點(diǎn)的綜合效應(yīng)，可同時(shí)作用于多個(gè)血壓調(diào)節(jié)機(jī)制，具有調(diào)節(jié)多個(gè)降壓機(jī)制的優(yōu)勢(shì)，從而為高血壓病的綜合防治提供了基礎(chǔ)[3]。

[1]孫寧玲，徐成斌.今日高血壓[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2000:588-95.

[2]劉德桓.高血壓病中西醫(yī)結(jié)合診治研究[M].廈門:廈門大學(xué)出版社，2003:12.

[3]劉德桓，林惠琴，王秀寶，等.化瘀濁益肝腎法對(duì)原發(fā)性高血壓患者生活質(zhì)量的影響.隨機(jī)雙盲對(duì)照觀察，2006，10(23):9-12.