(獻縣人民醫(yī)院,河北獻縣 062250)
黃桿菌屬包括腦膜炎敗血癥黃桿菌、產吲哚黃桿菌和芳香黃桿菌,可引起多種人類侵入性感染,采用有效抗生素進行及時有效的抗菌治療非常必要。2006年 9月 ~2008年 6月,我們對Etest法與標準瓊脂稀釋法測定黃桿菌藥敏試驗的結果進行了比較?,F(xiàn)報告如下。
材料:100株黃桿菌,其中 39株腦膜炎敗血癥黃桿菌,56株產吲哚黃桿菌,5株芳香黃桿菌;哌拉西林、米諾環(huán)素、頭孢噻肟、頭孢他啶、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、氨曲南、亞胺配能、阿米卡星共 9種抗菌藥物的標準粉劑;Etest試紙條購自AB生物試劑公司;質控菌株由河北省臨床檢驗中心提供,包括金黃色葡萄球菌,美囯標準菌株收藏中心 ATCC 29213,大腸埃希氏菌 ATCC 25922,綠膿假單胞菌 ATCC 27853。
方法:根據(jù)國際臨床實驗室標準化委員會制定的規(guī)則,以抑制微生物可見生長的最低濃度確定為最小抑菌濃度,用瓊脂稀釋法測定。Etest法操作按照說明書進行,9種 Etest試紙條抗菌濃度范圍:哌拉西林、頭孢噻肟、頭孢他啶、氨曲南、阿米卡星、米諾環(huán)素為 0.016~256μg/m l;亞胺配能、氧氟沙星、環(huán)丙沙星為 0.002~32μg/ml。 Etest法測定的最小抑菌濃度在 2倍稀釋度之間的,均歸結于下一個 2倍稀釋度值;瓊脂稀釋法測定的最小抑菌濃度大于 128μg/m l和 Etest法測定的最小抑菌濃度大于 256μg/ml者,均認為最小抑菌濃度為 256μg/ml。Etest法所測結果必須與瓊脂稀釋法測得的最小抑菌濃度符合率大于 90%;Etest法和瓊脂稀釋法測得的抗生素的最小抑菌濃度必須在 3種質控菌株參考范圍內,且這 2種方法測得的最小抑菌濃度差異必須在上下兩個稀釋度之間。
結果:Etest法和瓊脂稀釋法測得各抗菌藥物的最小抑菌濃度見表 1。顯示 2種方法測定哌拉西林的最小抑菌濃度值有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。除米諾環(huán)素外,其他抗菌藥物抑制黃桿菌的能力都有限。對于頭孢噻肟、頭孢他啶、阿米卡星、米諾環(huán)素、氧氟沙星、環(huán)丙沙星,用這 2種方法測得的最小抑菌濃度一致性可以接受。所有藥物用這 2種方法測得的最小抑菌濃度的符合率為 93%。
表1 2種方法測定各抗生素對黃桿菌的最小抑菌濃度比較(μg/m l)
討論:測定抗菌藥物的敏感試驗方法很多,其中紙片擴散法最常用,但其測定結果與標準瓊脂稀釋法存在顯著差異。標準稀釋敏感試驗用來測定治療黃桿菌感染的藥物最小抑菌濃度,既費力又費時;肉湯微生物稀釋藥敏法在大多數(shù)基層醫(yī)院因缺少相應的設備目前還無法普及。Etest法在20世紀末已被證明可以代替標準瓊脂稀釋法測定抗菌藥物的最小抑菌濃度。本研究結果顯示,哌拉西林、氧氟沙星和環(huán)丙沙星可作為治療黃桿菌感染的首選藥物。據(jù)報道,Etest法測定哌拉西林的最小抑菌濃度值,56%的菌株比瓊脂稀釋法高;氧氟沙星和環(huán)丙沙星的最小抑菌濃度值,26%的菌株比標準瓊脂稀釋法低。提示Etest法的測定結果可能存在種類差異。本研究 9種用于測定大腸桿菌最小抑菌濃度轉化點的菌株被用來測定黃桿菌時,除哌拉西林外,其他任何藥物用這 2種方法測定的最小抑菌濃度值無統(tǒng)計學差異。因此,我們建議除哌拉西林外,Etest法用于測定抗菌藥物對黃桿菌的敏感性是可以接受的首選方法。在測定哌拉西林的敏感性時,如果 Etest法測得的最小抑菌濃度為 <128μg/m l時,應換用另外一種方法重新檢測。