楊啟超 遲健 李宏剛 尹海富

(1.黑龍江省甘南縣畜牧水產(chǎn)局 甘南 162100;2.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)養(yǎng)殖系 哈爾濱 150030)

1.研究水產(chǎn)動(dòng)物誘食劑的意義

近年來,隨著魚、蝦、蟹類等水產(chǎn)動(dòng)物集約化養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展,人工飼料在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的地位已越來越重要。魚粉是飼料工業(yè)中最重要的蛋白源,然而,由于資源衰竭及受不良?xì)夂虻挠绊?世界魚粉總產(chǎn)量正逐漸下降,導(dǎo)致供需不平衡,使魚粉價(jià)格不斷上揚(yáng)、養(yǎng)殖成本升高,從而嚴(yán)重制約了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。開發(fā)新型飼料蛋白源是節(jié)約魚粉使用量的技術(shù)途徑之一(艾慶輝等 2005)。然而,大量的替代蛋白源應(yīng)用于飼料生產(chǎn)中,引起適口性差、攝食率低、生長受阻等一系列問題;以及在魚類養(yǎng)殖過程中,大量未利用的配合飼料進(jìn)入水體后造成嚴(yán)重的水體污染。因此,在水產(chǎn)動(dòng)物飼料中添加促攝食物質(zhì)以提高飼料的誘食性,是當(dāng)前水產(chǎn)飼料生產(chǎn)中面臨的重要問題之一。提高攝食率不但能夠節(jié)約飼料,降低養(yǎng)殖成本,在環(huán)保方面也有重要的意義。中草藥對(duì)魚類不但具有誘食和提高適口性的作用,而且大多數(shù)中草藥是魚類生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì),并具有抗病作用。在飼料中添加中草藥,改善配合飼料的口味,能刺激水產(chǎn)動(dòng)物的嗅覺、味覺和視覺等,從而提高動(dòng)物的食欲,促進(jìn)攝食行為,有效地提高飼料效率。因此,研究水產(chǎn)飼料誘食劑的應(yīng)用技術(shù)和產(chǎn)品開發(fā),促進(jìn)和改善魚、蝦攝食行為,在規(guī)?；曫B(yǎng)中減少污染和流行病,推廣生態(tài)養(yǎng)殖,對(duì)提高經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益具有現(xiàn)實(shí)意義。

中草藥來源于動(dòng)物、植物、礦物質(zhì)及其產(chǎn)品,其具有成本低廉、天然、高效、毒副作用小、抗藥性不顯著、容易大量獲得等優(yōu)點(diǎn)。此外部分中草藥還具有抗病毒、殺菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)整機(jī)體新陳代謝、誘食等作用。近年來中草藥在畜牧、水產(chǎn)和飼料行業(yè)中得到廣泛關(guān)注,它作為一種綠色飼料添加劑具有重要的研究意義和廣泛的應(yīng)用前景。

2.材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

2.1.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器

水族箱(1.0 m×0.5 m ×0.5 m)、過濾泵、充氧泵、加熱棒、計(jì)數(shù)器、溫度計(jì)、脫脂棉、紗布、電子稱等。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)用魚

鯽魚(Carassius auratus)購自中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所,平均體重為(45.8±8.2)g。運(yùn)回用 8mg/L的高錳酸鉀溶液浸洗消毒 10～15min后,暫養(yǎng)于室內(nèi)玻璃水族箱(1.0 m×0.5 m×0.5 m)內(nèi),投喂基礎(chǔ)配合飼料(表 2-1),日投飼率為 2%～3%,飼喂 15 d后選擇體質(zhì)健壯、無傷、大小整齊的鯽魚進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。水族箱安裝水循環(huán)過濾器和加熱裝置,其有效水體積為 200 L。實(shí)驗(yàn)期間以經(jīng)過充分曝氣的自來水作為水源,水溫控制在(19±1)℃,持續(xù)充氧,每 3 d換水1/3。

2.1.3 基礎(chǔ)飼料

實(shí)驗(yàn)用基礎(chǔ)飼料配方及其營養(yǎng)成分見表 2-1,飼料粒徑為 2.0mm。

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2.1.4 中草藥

試驗(yàn)采用大茴香、蘇葉、植物肽、木香和公丁 5種中草藥及復(fù)合氨基酸,均購自哈爾濱道外中藥材市場,其化學(xué)成份與氣味見表 2-2。

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2.2 試劑和試劑球制備

分別根據(jù)每種中草藥設(shè)定的濃度稱取一定量的各種中草藥,裝入預(yù)先量好 100mL蒸餾水的小燒杯中,浸泡 60min,制成不同的濃度梯度的溶液備用。

用量筒量取 10mL濾液倒入 50mL的小燒杯中,將試球(半徑約 1.5cm的外層包有紗布的醫(yī)用脫脂棉球)放入其中浸泡 60min,系上棉線,即為實(shí)驗(yàn)組試劑球,對(duì)照組試球以蒸餾水代替濾液做同樣處理。

2.3 實(shí)驗(yàn)方法

本實(shí)驗(yàn)采用咬球和攝食生長相結(jié)合的方法,通過咬球次數(shù)、攝食率和增長率等指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)中草藥的誘食效果。

2.3.1 最適濃度的篩選

按試劑類型設(shè)置30個(gè)水族箱,每個(gè)水族箱放入 15尾鯽魚,并把預(yù)先做好的試劑球懸掛到水族箱里,試劑球位于水族箱的正中間且在水下15cm處,投入試球3min后開始連續(xù)記錄每5min鯽魚啄食試球的總次數(shù),共記錄20min。另設(shè)一組作為對(duì)照組,每個(gè)水族箱的鯽魚每天實(shí)驗(yàn)一次,每次實(shí)驗(yàn)后清洗水族箱并換水,實(shí)驗(yàn)期間水溫為(19±1)℃,pH為 6.5～7.3。保持對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組每次實(shí)驗(yàn)條件都一致。同時(shí)每個(gè)濃度做三個(gè)平行組。

2.3.2 攝食率實(shí)驗(yàn)

共設(shè)30個(gè)水族箱,每個(gè)水族箱鯽魚 15尾,空腹 24 h后稱重,每種飼料設(shè)置三個(gè)平行組。把按篩選出的中草藥的最適濃度計(jì)算出質(zhì)量,添加到基礎(chǔ)飼料里進(jìn)行投喂,實(shí)驗(yàn)期間水溫在(19±1)℃之間,溶解氧為 4.5mg/L。采用飽食量投喂法,每日投喂兩次,時(shí)間為 9:00和 15:00,第二次投喂完畢后 30min用虹吸法吸底,同時(shí)換水 1/3,15 d實(shí)驗(yàn)結(jié)束后魚空腹 24 h逐箱稱重。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)計(jì)算方法如下:

增重率(WGR)=100%×(Wt-W0)/W0

飼料系數(shù)(FCR)=攝食飼料量/魚體增重量

日攝食率(%)=攝食量/[(Wt-W0)/2×t]×100%

式中:WGR為增重率(%);W0為實(shí)驗(yàn)前魚的體重(g);Wt為實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚的體重(g);t為飼養(yǎng)天數(shù)。

2.3.3 誘食效果評(píng)價(jià)方法

以5min為單位,取實(shí)驗(yàn)魚啄咬試球的總次數(shù)為觀察值,每次測試的數(shù)據(jù)以 3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(M±S D)表示。以實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的數(shù)值之差的大小來判斷誘食劑對(duì)鯽魚的誘食效果,負(fù)值表示抑制攝食,正值表示誘導(dǎo)攝食。

2.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件包分析,采用平均數(shù)用方差分析后進(jìn)行組間差異的多重比較。

3.結(jié)果與分析

3.1 中草藥濃度的篩選結(jié)果與分析

通過對(duì)大茴香、蘇葉、植物肽、木香、公丁 5種中草藥和復(fù)合氨基酸的攝食行為學(xué)反應(yīng),以及在不同的濃度下得出了以下各表中的數(shù)據(jù)。

3.1.1 大茴香

不同濃度的大茴香(0.05%～0.95%)對(duì)鯽魚的誘食效果見表3-1。

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由表 3-1可以看出,0.05%大茴香和0.25%大茴香之間差異不顯著(P＞0.05)而與其它各組之間差異均顯著(P＜0.05),且 0.05%大茴香咬球次數(shù)明顯高于其它組,表現(xiàn)出很好的誘食效果。

3.1.2 蘇葉

不同濃度的蘇葉(0.15%～1.50%)對(duì)鯽魚的誘食效果見表3-2.

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從表 3-2可以看出,0.75%蘇葉和 1.05%蘇葉與對(duì)照組及其它各組差異均顯著(P＜0.05),其它各組與對(duì)照組相比差異也顯著(P＜0.05)。

3.1.3 植物肽

不同濃度的植物肽(0.05%～0.50%)對(duì)鯽魚的誘食效果見表 3-3

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從表3-3可以看出,0.25%植物肽達(dá)到了最高值,除了與0.30%植物肽之間差異不顯著(P＞0.05)外,與其它各組之間差異均表現(xiàn)為顯著(P＜0.05),且與對(duì)照組之間差異極顯著;0.05%植物肽、0.10%植物肽和0.15%植物肽之間差異均不顯著(P＞0.05),0.05%植物肽與 0.10%植物肽和對(duì)照組之間差異均不顯著(P＞0.05)。

3.1.4 木香

不同濃度的木香(0.05%～0.95%)對(duì)鯽魚的誘食效果見表3-4。

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從表 3-4可以看出,0.05%木香、0.15%木香、0.25%木香、0.85%木香與對(duì)照組之間均差異顯著(P＜0.01),其它各組與對(duì)照組之間差異都不顯著(P＞0.05);另外,0.05%木香與 0.85%木香差異均顯著(P＜0.05),所以 0.05%木香對(duì)鯽魚的誘食效果更好。

3.1.5 復(fù)合氨基酸

不同濃度(0.25%～0.50%)的復(fù)合氨基酸對(duì)鯽的誘食效果見表3-5。

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從表 3-5可以看出,0.35%復(fù)合氨基酸達(dá)到了最高值,除了與 0.40%和 0.45%復(fù)合氨基酸之間差異不顯著(P＞0.05)外,與其它各組之間差異均表現(xiàn)為顯著(P＜0.05),且與對(duì)照組之間差異顯著(P＜0.05)。

3.1.6 公丁

不同濃度的公丁(0.05%～0.95%)對(duì)鯽魚的誘食效果見表3-6。

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從表 3-6可以看出,0.05%公丁和0.15%公丁咬球次數(shù)高于對(duì)照組及其它各組,與對(duì)照組及其它各組之間差異均顯著(P＜0.05);又因?yàn)?0.05%公丁和0.15%公丁之間差異顯著,所以 0.15%公丁誘食效果要好于其它各濃度。

3.2 5種中草藥及復(fù)合氨基酸攝食率實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與分析

經(jīng)過 15d的攝食率實(shí)驗(yàn),各組魚成活率均為 100%,其它項(xiàng)結(jié)果見下表 3-7。

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從表3-7可以看出,在同一基礎(chǔ)飼料中加入不同的中草藥及氨基酸飼喂鯽魚,0.35%復(fù)合氨基酸和0.05%木香對(duì)鯽魚的誘食效果最好,0.05%大茴香和 0.25%植物肽對(duì)鯽魚誘食效果次之,而 0.75%蘇葉和 0.15%公丁誘食效果最差。0.35%復(fù)合氨基酸和 0.05%木香的增重率明顯高于其它組,分別為 41.96%和 36.08%,分別比對(duì)照組(10.97%)高 282.50%和 228.90%,與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05);飼料中添加 0.35%復(fù)合氨基酸比 0.05%木香高 16.30%,與對(duì)照組差異顯著(P＜0.05),表現(xiàn)出明顯的增重作用。0.35%復(fù)合氨基酸和 0.05%木香的飼料系數(shù)分別為 0.92和 0.89,比對(duì)照組(1.95)低 52.82%和 54.36%,且與對(duì)照組之間差異顯著(P＜0.05)。

4.討論

4.1 中草藥對(duì)鯽魚的誘食效果

由表 3-1至表 3-6得知,5種中草藥和復(fù)合氨基酸都對(duì)鯽魚有不同程度的誘食作用,這可能與它們本身呈現(xiàn)的特殊氣味有關(guān),因?yàn)樗麄兒袚]發(fā)性低分子有機(jī)物而且有特殊氣味,其強(qiáng)烈的芳香氣味對(duì)多數(shù)魚類的嗅覺有刺激作用,能吸引魚類攝食;而且在實(shí)驗(yàn)中觀察到,剛放入實(shí)驗(yàn)水族箱內(nèi),魚類就呈興奮和探尋狀態(tài)并一一游過來,也可能與它們所含的化學(xué)成分(如氨基酸、有機(jī)酸、酯、小肽等)有關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:5種單體中草藥和復(fù)合氨基酸對(duì)鯽魚的最適誘食濃度分別為:復(fù)合氨基酸為 0.35%、大茴香為 0.05%、公丁為 0.15%、蘇葉為 0.75%、木香為 0.05%、植物肽為 0.25%,這與周燕俠、韋加滕、梁增林的研究結(jié)果相似。在中草藥(最適誘食濃度)的攝食率實(shí)驗(yàn)中,各組鯽魚的成活率均為 100%。但各種中草藥誘食效果有一定的差異性,0.35%復(fù)合氨基酸和 0.05%木香對(duì)鯽魚的誘食效果最好,0.05%大茴香和 0.25%植物肽對(duì)鯽魚誘食效果次之,而0.75%蘇葉和0.15%公丁誘食效果最差。

復(fù)合氨基酸比較 5種中草藥誘食效果最強(qiáng),可能與它所含的成分中的顯味基質(zhì)有關(guān),在設(shè)定的濃度范圍(0.25%～0.50%)內(nèi),復(fù)合氨基酸在 0.25%～0.35%時(shí),隨著濃度的增加鯽魚咬球次數(shù)逐漸增加,誘食效果明顯增強(qiáng),而復(fù)合氨基酸在 0.35%～0.50%時(shí),隨著濃度的增加鯽魚咬球次數(shù)逐漸減少,誘食效果明顯減弱,甚至表現(xiàn)為抑制作用,在 0.35%時(shí)達(dá)到最大,這與李志紅研究結(jié)果一致;與許國煥等報(bào)道以復(fù)合氨基酸為顯味基質(zhì)試制的魚用香味劑,添加鯉飼料,明顯促進(jìn)鯉攝食配合飼料,復(fù)合氨基酸對(duì)大口鯰的誘食作用更強(qiáng)相類似。

4.2 中草藥的促生長效果

實(shí)驗(yàn)表明鯽魚在攝入添加不同中草藥和氨基酸的飼料后,在生長速度上都比對(duì)照組有了不同程度的提高,0.35%復(fù)合氨基酸、0.05%木香、1.25%植物肽、0.05%大茴香和 0.75%蘇葉的綜合指標(biāo)明顯優(yōu)于對(duì)照組;在飼料中添加 0.35%復(fù)合氨基酸效果最好,其次是木香。表明鯽魚通過添加不同的中草藥的飼料組,能夠提高生長速度,并且這些較高的生長速度不是通過攝食量的顯著增加來獲得的。

4.3 影響誘食效果的因素

誘食劑促攝食效果的好壞取決于動(dòng)物對(duì)其氣味與味道的嗜好,一方面體現(xiàn)在其組成的誘食活性成分上,另一方面還與其濃度有一定的關(guān)系。中草藥對(duì)鯽魚具有誘食作用的原因可能有以下兩個(gè):

(1)富含氨基酸、生物堿和核昔酸等對(duì)魚類有強(qiáng)烈引誘作用的促攝食物質(zhì);

(2)中草藥獨(dú)特的味道,可能對(duì)鯽魚的味覺與嗅覺具有顯著的刺激作用。實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生抑制作用的中草藥實(shí)驗(yàn)鯽魚強(qiáng)烈排斥,可能是因?yàn)檫@幾種物質(zhì)適口性差,或其有效成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)不能被鯽魚的味覺感受到(韓研研2003)。我國中草藥資源豐富,且有開發(fā)利用的優(yōu)勢條件。凡是有消食健胃,除滯止酵,殺蟲,解毒,興奮腸胃蠕動(dòng),補(bǔ)充營養(yǎng)等功效的中草藥均能促進(jìn)魚類攝食與增強(qiáng)抗病。