李曉天，杜 斌，王素軍，王廣基

(1.中國藥科大學(xué)藥物代謝動(dòng)力學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 南京 210009;2.鄭州大學(xué)藥學(xué)院，河南 鄭州 450001;3.廣東藥學(xué)院，廣東 廣州 510000)

關(guān)附甲素(guanfu base A，GFA)為抗心律失常一類新藥［1-3］，目前正在進(jìn)行Ⅳ期臨床研究。GFA在大鼠及人體內(nèi)可代謝產(chǎn)生關(guān)附胺醇(guanfu alcohol-amine，AA)［4-5］，為了進(jìn)一步了解關(guān)附甲素的體內(nèi)代謝規(guī)律，有必要對(duì)其代謝產(chǎn)物AA的體內(nèi)代謝過程作進(jìn)一步的研究，由于iv給藥AA后大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)已有文獻(xiàn)報(bào)道［6］，因此，本文采用文獻(xiàn)報(bào)道［6］的方法，研究大鼠口服關(guān)附胺醇后的藥代動(dòng)力學(xué)，以了解該藥不同途徑給藥后的藥動(dòng)學(xué)特點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 LC-MS2010型液相-質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng) 包括雙高壓泵，在線真空脫氣機(jī)，自動(dòng)進(jìn)樣器，柱溫箱，LCMS solution version 2.04 Sul-H3工作站;AA由中國藥科大學(xué)植化教研室提供;鹽酸菲洛普(內(nèi)標(biāo)，DDPH)由中國藥科大學(xué)藥化教研室提供;乙腈為色譜純，美國 Fisher公司產(chǎn)品;其余試劑均為分析純。

1.2 色譜條件及質(zhì)譜檢測條件 與文獻(xiàn)報(bào)道的方法［6］相同。

1.3 血漿樣品處理方法 與文獻(xiàn)報(bào)道的方法［6］相同。

1.4 實(shí)驗(yàn)方案 Sprague-Dawley(SD)大鼠6只，體質(zhì)量(200±20)g，♀♂各半，實(shí)驗(yàn)前12 h禁食不禁水。分別口服關(guān)附胺醇 20 mg·kg-1，于給藥前 0 min 及給藥后 5、15、30、45、60、90、120、240、360 min，采血約 0.25 ml，按“血漿樣品處理方法”項(xiàng)下提取測定。

2 結(jié)果

2.1 色譜行為 采用選擇性離子檢測方式，AA和DDPH的保留時(shí)間分別為2.24 min和4.46 min，方法的專屬性強(qiáng)，靈敏度高，血漿中雜質(zhì)不干擾樣品的測定。

2.2 關(guān)附胺醇在大鼠血漿中的標(biāo)準(zhǔn)曲線 取大鼠空白血漿0.1 ml，精密加入不同量的關(guān)附胺醇標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成含關(guān)附胺醇濃度分別為 0.05、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 mg·L-1的系列溶液，按文獻(xiàn)報(bào)道中“血漿樣品處理方法”項(xiàng)下操作，分別記錄峰面積，以關(guān)附胺醇峰面積(AS)對(duì)內(nèi)標(biāo)的峰面積(AIS)比值為縱坐標(biāo)(f)，以關(guān)附胺醇血漿濃度為橫坐標(biāo)(C)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:f=1.8246C-0.2293(r=0.9989)。

2.3 方法回收率 配制含關(guān)附胺醇濃度為0.05、1.0、20.0 mg·L-1的血漿樣品，加人內(nèi)標(biāo)，按“血漿樣品處理方法”項(xiàng)下操作。另配制0.05、1.0、20.0 mg·L-1濃度的純品水溶液，加入內(nèi)標(biāo)，同法操作，計(jì)算絕對(duì)回收率，結(jié)果表明低、中、高3種濃度的絕對(duì)回收率(n=5)分別為(82.4±8.5)%，(89.7±4.9)%和(88.4±6.1)%。

2.4 日內(nèi)及日間RSD 配制含關(guān)附胺醇濃度為0.05、1.0、20.0 mg·L-1的血漿樣品，按“血漿樣品處理方法”項(xiàng)下操作，測定日內(nèi)的 RSD分別為9.3%，7.1%，4.4%。連續(xù)5 d的RSD分別為14.7%，10.9%，6.5%。符合生物樣品測定要求。

2.5 大鼠口服給藥后藥代動(dòng)力學(xué) 6只大鼠單劑量口服關(guān)附胺醇20 mg·kg-1后，測定不同時(shí)間的血藥濃度，將數(shù)據(jù)用3P87藥代動(dòng)力學(xué)程序處理，求算出各主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見Tab 1。

Tab 1 Main pharmacokinetical parameters of AA after oral administration of 20 mg·kg-1in rats(±s，n=6)

Tab 1 Main pharmacokinetical parameters of AA after oral administration of 20 mg·kg-1in rats(±s，n=6)

Parameter ±s Cmax 5.11±1.79 Tmax 0.60±0.26 Vc/L·kg-1 1.24±0.18 T 12/h 2.07±0.46 AUC/mg·h·L-1 4.85 ±1.63 CLs/L·kg-1·h-1 3.94 ±1.19 MRT/h 1.92±0.24

3 討論

大鼠口服關(guān)附胺醇20 mg·kg-1后血藥濃度-時(shí)間曲線下的面積(AUC)與iv關(guān)附胺醇20 mg·kg-1后AUC［6］之比為86.8%，即該藥物的生物利用度為86.8%，說明該藥物口服后的生物利用度較高;關(guān)附甲素的另一個(gè)活性代謝物關(guān)附壬素口服后的生物利用度為71.3%［7］，大鼠口服關(guān)附胺醇后的生物利用度比大鼠口服關(guān)附壬素后的生物利用度高約15.5%，由此提示，關(guān)附胺醇在大鼠體內(nèi)較少被代謝，可能與關(guān)附胺醇化學(xué)結(jié)構(gòu)中沒有乙酰基，而關(guān)附壬素相化學(xué)結(jié)構(gòu)中有一個(gè)乙?；幸欢ǖ年P(guān)系，藥物結(jié)構(gòu)中的乙?；菀妆谎獫{或其他組織中的酶水解，具體原因正在進(jìn)行進(jìn)一步的研究。

大鼠口服關(guān)附胺醇后的主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)與iv關(guān)附胺醇后的主要藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)［6］相似，大鼠口服后消除半衰期約2 h，表明口服給藥后藥物在大鼠體內(nèi)消除較快，口服給藥后達(dá)峰時(shí)間約0.6 h，說明該藥口服后吸收較迅速，與關(guān)附壬素吸收達(dá)峰時(shí)間0.5 h［7］相比吸收稍慢，可能與該藥的脂溶性比關(guān)附壬素小有關(guān)，因?yàn)樵撍幵诮Y(jié)構(gòu)上比關(guān)附壬素少一個(gè)乙?；?，因此水溶性增加，脂溶性減少，導(dǎo)致吸收減慢。

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