高 詠，孫征剛，許 珊

(遼寧省沈陽市藥品快速檢驗(yàn)所，遼寧 沈陽 110013)

乳癖安消片由功勞木、三叉苦、益母草、雞血藤、土茯苓、連翹6味中藥制成。功勞木為方中君藥，鹽酸小檗堿是功勞木的主要成分[1]。筆者采用反相高效液相色譜(RP－HPLC)法測(cè)定鹽酸小檗堿含量，效果滿意，該法可用于控制制劑的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

Shimadzu LC－10ATvp型液相色譜儀。鹽酸小檗堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為713－200208);乙腈(色譜純)，其他試劑(分析純);樣品(遼寧恒生制藥有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:依利特 C18柱(200 mm ×4.6 mm，5μm);流動(dòng)相:70 ∶30的乙腈－0.05 mol/L磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0);柱溫:30 ℃;流速:1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):270 nm;進(jìn)樣量:10 μL。

2.2 溶液制備

取在105℃下干燥至恒重的鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成40.5 μg/mL的溶液，搖勻即得對(duì)照品溶液。取本品20片，除去薄膜衣，研細(xì)，取2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入鹽酸－甲醇(1∶100)混合溶液20 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理30 min，冷至室溫，再稱定質(zhì)量，用鹽酸－甲醇(1∶100)混合溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 mL，通過已處理好的中性氧化鋁柱(120目，5 g，內(nèi)徑1 cm)用甲醇80 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙夂笠浦?0 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得供試品溶液。取除功勞木外的其他處方量藥材，按制備工藝制備缺功勞木的陰性樣品，再按供試品溶液制備方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn):陰性對(duì)照品溶液測(cè)定結(jié)果表明，在與鹽酸小檗堿保留時(shí)間相應(yīng)位置上無吸收，表明其他成分對(duì)本品的鹽酸小檗堿含量測(cè)定無干擾，方法專屬性良好(見圖 1)。

線性關(guān)系考察:精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品10.13 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻即得對(duì)照品溶液(40.5 μg/mL)。分別精密吸取 對(duì) 照 品 溶 液 2.0，6.0，10.0，14.0，18.0 μL，進(jìn)樣分析。回歸方程 Y=1845625.31 X+4559.95，r=0.9998(n=5)。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿進(jìn)樣量在0.081 ～ 0.729 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 高效液相色譜圖

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，精密吸取 10 μL，按 0，2，4，6，8 h的間隔進(jìn)樣分析。結(jié)果峰面積的 RSD=0.91%，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

精密度試驗(yàn):精密吸取質(zhì)量濃度為40.5 μg/mL的對(duì)照品溶液10 μL，重復(fù)進(jìn)樣 6 次。結(jié)果峰面積的 RSD=1.11%(n=6)。

重復(fù)性試驗(yàn):取本品60片，研勻，分取6份，依法制備供試品溶液并測(cè)定含量。結(jié)果的 RSD=1.64(n=6)。

回收率試驗(yàn):取本品(平均片重0.4189 g，鹽酸小檗堿含量158 μg/片)60片，研勻，分取 6份，每份1 g，精密稱定，精密加入對(duì)照品溶液(366.2 μg/mL)1 mL，依法測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 鹽酸小檗堿加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

2.4 樣品含量測(cè)定

取樣品3批，測(cè)定其含量。結(jié)果批號(hào)為20081001，20081002，20081003的 3批樣品中鹽酸小檗堿含量分別為 127 μg/片、138 μg/片、133 μg/片。根據(jù)上述結(jié)果，考慮到實(shí)際生產(chǎn)過程可能產(chǎn)生的波動(dòng)，確定本品每片中含功勞木以鹽酸小檗堿計(jì)不得少于100 μg。

3 討論

參照文獻(xiàn)[2－3]考察了供試品溶液制備方法，比較了超聲處理30 min和放置過夜后超聲處理30 min對(duì)本品鹽酸小檗堿含量的影響。結(jié)果表明，二者含量相近，故選擇前者。

[1]WS－10433(ZD－04337)－2002，國(guó)家藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)(試行)[S].

[2]陳 進(jìn)，王國(guó)凱，劉勁松.HPLC法測(cè)定炎可寧片中鹽酸小檗堿的含量[J].安徽醫(yī)藥，2007，11(9):790－791.

[3]鄧朝暉，陸國(guó)忠，徐雪峰.HPLC法測(cè)定胃痛寧片中鹽酸小檗堿的含量[J].中藥材，2008，31(6):927 －928.