李韶英,許 智
(廣東省茂名市藥品檢驗(yàn)所,廣東 茂名 525000)
金絲草為外感平安茶(WS3-B-27941526-93)成藥組方藥材之一,多數(shù)文獻(xiàn)只有性狀描述[1-3],且現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)和地方藥材標(biāo)準(zhǔn)中均沒有收載該品種。因此,筆者采用顯微觀察及薄層色譜(TLC)法對(duì)金絲草藥材的鑒別方法進(jìn)行了研究,報(bào)道如下。
CH30型生物顯微鏡(日本奧林巴斯);YH140-1型電熱恒溫水浴鍋(北京東方紅儀器有限公司)。硅膠G(青島海洋化工廠,批號(hào)為060316);自制板規(guī)格為10 cm×20 cm,厚0.3 mm;預(yù)制板(青島海洋化工廠分廠,規(guī)格為 10 cm×20 cm,厚 0.20~0.25 mm)。10 批金絲草藥材(產(chǎn)地分別為廣東、廣西、云南)由廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司提供,均經(jīng)中國科學(xué)院華南植物研究所葉華谷研究員鑒定。其他所用試劑均為分析純。本試驗(yàn)采用樣品自身作為對(duì)照。
本品為黃褐色粉末。氣孔裂縫狀,保衛(wèi)細(xì)胞啞鈴形,副衛(wèi)細(xì)胞半圓形,氣孔平行式。非腺毛大多為單細(xì)胞,先端急尖,底部鈍圓,短小如“逗號(hào)”狀。導(dǎo)管主為螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管和梯紋導(dǎo)管,直徑7~44μm。莖纖維梭形或段狀,壁較薄,紋孔斜點(diǎn)狀,孔溝明顯而疏。莖厚壁細(xì)胞類長方形,邊緣稍彎曲,壁較厚,紋孔斜點(diǎn)狀,孔溝細(xì)密。根被細(xì)胞梭形,兩端稍彎曲如蟲,壁薄,排列緊密。根薄壁細(xì)胞類多角形。見圖1。
圖1 金絲草顯微鑒別圖(×400)
2.2.1 方法
取本品粉末1 g,加甲醇10 mL,加熱回流20 min,濾過,濾液作為供試品溶液。另取金絲草對(duì)照藥材粉末 1 g,加甲醇 10 mL,加熱回流20 min,濾過,濾液作為對(duì)照藥材溶液。照TLC法[2005年版《中國藥典(一部)》附錄ⅥB]試驗(yàn),吸取上述2種溶液各5 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以環(huán)己烷-甲酸乙酯(5∶3)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品溶液色譜中,在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)(圖2)。
2.2.2 方法學(xué)驗(yàn)證
專屬性考察:吸取供試品溶液、對(duì)照藥材溶液各5 μL,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,按擬訂的方法試驗(yàn)。結(jié)果色譜圖中各斑點(diǎn)分離效果比較好。
耐用性考察:取手鋪硅膠G薄層板與預(yù)制硅膠G薄層板,分別按擬訂的方法試驗(yàn),結(jié)果手鋪硅膠G薄層板與預(yù)制硅膠G薄層板分離效果基本一致。取點(diǎn)樣后的薄層板,分別在4℃和30℃中展開,顯色,檢視,結(jié)果表明在4~30℃范圍內(nèi)試驗(yàn)對(duì)鑒別無明顯的影響。取點(diǎn)樣后的薄層板,分別在用硫酸調(diào)節(jié)相對(duì)濕度32%和75%的層析缸中展開,顯色,檢視,結(jié)果表明在相對(duì)濕度32%~75%之間試驗(yàn)對(duì)鑒別無明顯的影響。上述方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明,薄層板方面手鋪板分離效果與預(yù)制板一致,而溫濕度變化對(duì)展開效果影響不大,因此認(rèn)為本法的耐用性良好。
圖2 金絲草薄層色譜圖
經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn),共觀察了10批次金絲草樣品,發(fā)現(xiàn)有10個(gè)顯微特征,包括氣孔、非腺毛、導(dǎo)管、莖纖維、莖厚壁細(xì)胞、根被細(xì)胞碎片、根薄壁細(xì)胞、根纖維、莖內(nèi)皮層細(xì)胞和木化薄壁細(xì)胞,因后者出現(xiàn)的幾率極少或特征專屬性不強(qiáng),考慮到由此可能給檢驗(yàn)工作造成困難,故決定取前述7個(gè)為主要特征。
根據(jù)《廣東中藥志(第一卷)》“金絲草”藥材成分[3]描述,本品含有黃酮苷、酚類、氨基酸、有機(jī)酸和糖類,而化橘紅也含有黃酮類成分,故參考2005年版《中國藥典(一部)》“化橘紅”的TLC鑒別項(xiàng)下的方法[4]。但用該方法所用的展開劑展開效果不理想,改用環(huán)己烷-甲酸乙酯(5∶3)為展開劑,獲得了理想的薄層色譜條件,結(jié)果 R f適宜,斑點(diǎn)清晰,分離效果好,不同的溫度和濕度對(duì)鑒別無明顯影響。
[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊)[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1986:1387.
[2]《全國中草藥匯編》編寫組.全國中草藥匯編(上冊)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1986:531.
[3]《廣東中藥志》編輯委員會(huì).廣東中藥志(第二卷)[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,1994:139.
[4]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:51.