采復(fù)拉?大木拉,買買提明?巴拉提,鄭文新,沙熱木,陶衛(wèi)東,呂雪峰,胡 波,馬合木提,艾合買提?卡斯木

(1.新疆維吾爾自治區(qū)種羊與羊毛羊絨質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心,烏魯木齊830000;2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院;3.新疆烏魯木齊絨山羊研究所;4.新疆新和縣畜牧獸醫(yī)局)

肉用綿羊冷凍精液技術(shù)的應(yīng)用研究對提高優(yōu)質(zhì)種公羊利用率和充分發(fā)揮優(yōu)良個體在綿羊改良工作中起到重要的作用。目前,綿羊顆粒冷凍精液仍沒有廣泛地推廣應(yīng)用。新疆是一個養(yǎng)羊大省,養(yǎng)羊業(yè)已成為農(nóng)民增收的支柱產(chǎn)業(yè),但目前羊的品種改良工作還跟不上發(fā)展需要。主要原因是優(yōu)良品種的種羊價格高,農(nóng)民買不起。利用優(yōu)良品種的冷凍精液改良土種羊是最好的途徑,可獲得顯著經(jīng)濟(jì)效益,越來越受到廣大畜牧工作者的重視和養(yǎng)羊?qū)I(yè)戶的歡迎。因此,2009年11月底我們在新和縣開展了肉用羊顆粒冷凍精液生產(chǎn)。

1 種公羊的質(zhì)量要求

1.1 種公羊選擇 近年來,新和縣畜牧獸醫(yī)局引進(jìn)純種薩福克種公羊276只(每個養(yǎng)殖戶發(fā)放1只)。用于制作冷凍精液的種公羊,是從276只種公羊里篩選出體型外貌和生產(chǎn)性能符合品種要求的特級、一級種公羊30只。對每只種公羊進(jìn)行檢疫,確認(rèn)無傳染病、體質(zhì)健壯。

1.2 種公羊管理要求 保持中上等膘情、健壯、活潑、精力充沛、性欲旺盛,過肥過瘦都不利采精。公羊必須單獨組群、飼喂,羊群不宜過大。每日應(yīng)有足夠的運(yùn)動,夏季每日4～6 h,冬季每日2～4 h。

1.3 飼料配方 對種公羊提前45 d加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。配方:玉米500 g,黃豆150 g,大麥150 g,麩皮150 g,黃蘿卜500 g,苜蓿粉 1 500 g,添加劑(預(yù)混料)2 g,魚粉5 g,雞蛋2枚。

1.4 飼喂方式 精料分早中晚3次喂,草料分2～3次喂,食鹽自由甜食,飲水分3～4次。

2 精液的稀釋

2.1 冷凍稀釋液

基礎(chǔ)液:按照確定的稀釋液配方,要求藥品純凈、稱量標(biāo)準(zhǔn)、瓶裝密封、消毒后保存。

Ⅰ液:基礎(chǔ)液加入一定量的卵黃和抗菌素配制而成,用作精液第一次稀釋。

Ⅱ液:Ⅰ液中加入甘油等抗凍劑配制而成,用作精液第2次稀釋。

在新和縣制作顆粒冷凍精液時,用的基礎(chǔ)液是葡萄糖3 g、檸檬酸鈉3 g、重蒸餾水100 mL。

Ⅰ液:取基礎(chǔ)液80 mL,加入20 mL卵黃。Ⅱ液:取I液44 mL加入甘油6 mL。

2.2 精液稀釋方法

2.2.1 精液采集后盡快在5 min內(nèi)用I液作第一次稀釋,要把稀釋液加溫到28～32℃,稀釋比例應(yīng)根據(jù)精液的品質(zhì)作1～3倍稀釋。稀釋液與精液溫度應(yīng)一致,相差不能超過1℃。

2.2.2 稀釋后的精液經(jīng)20～30 min緩慢降溫至3～4℃,平衡2～3 h,再加入等溫Ⅱ液,加入量為第1次稀釋比例的一半。

3 精液平衡

把第一次稀釋過的精液導(dǎo)入玻璃瓶中,并包上8層紗布,放到 3～4℃冰箱里,平衡2～3 h,在此期間內(nèi)溫度不得有變化。

4 精液冷凍

4.1 在3 L廣口液氮罐(或保溫桶)內(nèi)注入液氮至罐頸下沿處,將聚四氟乙烯塑料板浸入液氮中,3 min左右,待塑料板熱量全部散盡,把塑料板取出。放至把廣口液氮罐蓋上的兩層紗布上面。

4.2 將塑料板提上至液氮罐口、平置2 min,待塑料板溫度升至-90～-120℃時,用玻璃滴管吸取經(jīng)平衡后的精液,按每顆粒0.1 mL的劑量,連續(xù)滴凍塑料板上,每次滴凍不得超過100粒,在滴凍過程中注意使凍精液始終保持在3～4℃,溫度不得回升。

4.3 在冷凍灌上加蓋降溫,經(jīng)過3 min左右,充分凍結(jié)的精液顆粒色澤光亮?xí)r,將塑料板浸入液氮中取下冷凍精液顆粒,經(jīng)顯微鏡檢查精子活率達(dá)0.3以上時再行分裝,并加標(biāo)簽,即可移入貯存罐中保存。

5 解凍

5.1 解凍液 2.9%檸檬酸三鈉或人用維生素B12注射液。

5.2 解凍方法 兩種方法,第一種是半干解凍,取解凍液3滴(0.3 mL)于小試管中把小試管沖3次,取一粒冷凍精液顆粒迅速投入小試管內(nèi),在38～42℃熱水中浸泡待溶解至小綠豆大時取出小試管,在外界環(huán)境下待全部精液溶解后,取一滴精液于載波片上作精子活率顯微鏡檢查。另一種解凍方法是干解凍,取一粒冷凍精液顆粒迅速投入小試管內(nèi),在70～80℃熱水中解凍。

6 冷凍精液入庫保存管理

6.1 質(zhì)量檢測 每批制作的冷凍顆粒精液,均須經(jīng)抽樣檢測。要求每顆粒容量為0.1 mL,精子活率0.3以上,每顆粒有效精子數(shù)為1 000萬個。

6.2 分裝 顆粒精液按30～50粒分裝于1個紗布袋或一個小玻璃瓶中。

6.3 標(biāo)記 每袋顆粒精液須標(biāo)明品種、公羊號、生產(chǎn)日期、精子活率、顆粒數(shù)量,再按照公羊號將顆粒精液袋裝入液氮罐提筒內(nèi),浸入并固定在液氮罐內(nèi)貯存。

6.4 分發(fā)、取用 分發(fā)、轉(zhuǎn)移、取用冷凍精液應(yīng)在液氮罐內(nèi)的液氮中進(jìn)行。冷凍精液每次脫離液氮時間不得超過5 s。

6.5 貯存 貯存冷凍精液的液氮罐應(yīng)放置在干燥、涼爽、通風(fēng)和安全的庫房內(nèi)。由專人負(fù)責(zé),每周檢查一次罐內(nèi)的液氮容量。當(dāng)剩余液氮為液氮容量的2/3時,須及時補(bǔ)充。要經(jīng)常檢查液氮罐的狀況,如果發(fā)現(xiàn)外殼有小水珠、掛霜或者發(fā)現(xiàn)液氮消耗過快時,說明液氮罐的保溫性能差,應(yīng)及時更換。

6.6 記載

每次入庫或分發(fā),耗損報廢的冷凍精液數(shù)量及補(bǔ)充液氮的數(shù)量等,必須如實記載清楚,并做到每月結(jié)算1次。

[1]張壯志,張晉,李剛.小尾寒羊細(xì)管冷凍精液試驗[J].黑龍江動物繁殖,2009(4):5-6.

[2]趙有璋.羊生產(chǎn)學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002,149-152.

[3]淵錫藩,張一玲.布爾山羊顆粒冷凍精液制作規(guī)程[J].畜牧獸醫(yī)雜志,2000(6):40-41.