段紅梅 吳志遠 江黎明

增生性瘢痕的形成是由于皮膚創(chuàng)傷后的愈合過程中，成纖維細胞過量增殖和膠原纖維過度增生的結(jié)果。增生性瘢痕的防治是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的難題之一，尋找治療和預(yù)防瘢痕增生和藥物具有重要的意義。Morris證實兔耳腹面皮膚全層缺損后產(chǎn)生瘢痕組織類似人皮膚增生性瘢痕［1］。國內(nèi)李薈元等［2］建立了兔耳瘢痕模型，為瘢痕研究提供了一種很好的實驗工具。隱丹參酮是從中藥丹參中提取的重要活性成分，具有抗氧化，抗動脈粥樣硬化、抗腫瘤作用。本研究旨在探討紫杉醇對兔耳瘢痕組織的影響，為瘢痕防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 紫杉醇購于云南柯菲平醫(yī)藥有限公司。

1.2 動物 新西蘭大白兔24只，體重2.3～2.8 kg，雌雄兼用，購自廣東醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。

1.3 實驗方法 兔適應(yīng)性喂養(yǎng)24 h，用氯胺酮肌注麻醉，用量為1 mg/kg。在兔雙側(cè)腹側(cè)分別做2個邊長為1 cm的正方形切口，完整切除全層皮膚，直至軟骨膜表面。用灼熱鐵絲燒灼創(chuàng)緣四周皮膚，創(chuàng)面貼敷創(chuàng)可貼。觀察疤痕形成情況，21 d時將兔耳疤痕隨機分為4組，每組n=12。分別于疤痕內(nèi)基底部及疤痕灶內(nèi)注射不同濃度的藥物或生理鹽水，注射用量為40 ml。A組:注射生理鹽水;B組:注射濃度為9 mg/L的紫杉醇;C組:注射濃度為27 mg/L的紫杉醇;D組:注射濃度為81 mg/L的紫杉醇。繼續(xù)喂養(yǎng)，28 d時，同樣在麻醉條件下切取瘢痕組織標(biāo)本，測定瘢痕增生情況。

1.4 觀察指標(biāo) 28 d時，將收取瘢痕組織及周圍正常組織標(biāo)本于低倍鏡下用測微尺測出耳腹側(cè)正常皮膚厚度(a)、耳軟骨厚度(b)、耳背皮膚厚度(c)、耳增生塊全厚度最大徑(d)，按以下公式測算出瘢痕增生指數(shù)(Hypertophic Index，HI):HI=［d-(b+c)］/a。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS軟件包(由廣東醫(yī)院統(tǒng)計學(xué)教研室提供)進行配對t檢驗和方差分析。

2 結(jié)果

2.1 瘢痕形成情況 在兔耳腹側(cè)形成創(chuàng)面后，傷口約13～15 d后愈合，愈合過程中上皮化時即能觸到硬塊，此硬塊不斷高于皮面，淡紅色，增生范圍不超過原創(chuàng)沿，19～22 d時增生到最高峰，厚度約為兔耳腹面皮膚厚度的2.8倍。

2.2 瘢痕增生指數(shù)對比情況 結(jié)果顯示:紫杉醇的濃度分別為 0 mg/L，9 mg/L，27 mg/L，81 mg/L 時，作用于兔耳瘢痕組織7 d后瘢痕增生指數(shù)分別(2.86±0.13)、(2.36±0.23)、(1.98±0.33)、(1.56±0.22)，瘢痕增生指數(shù)隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)，P=0.008，劑量組與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。

3 討論

增生性瘢痕的組織特征為成纖維細胞過度激活增殖同時伴隨大量的膠原合成堆積［3］。膠原的產(chǎn)生在瘢痕形成過程中起著決定性作用［4］。膠原代謝是一個多因素參與的復(fù)雜生物反應(yīng)過程，包括膠原的合成和分解代謝［5］。嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷及外科手術(shù)后常常遺留增生性瘢痕，影響外觀和功能。其發(fā)病機理尚未徹底闡明，也缺乏理想的治療方法。傳統(tǒng)的治療如手術(shù)切除、類固醇激素、抗代謝藥、免疫抑制劑和放射療法等，均因術(shù)后易復(fù)發(fā)或嚴(yán)重的全身性副作用而限制了臨床應(yīng)用［6］。篩選出療效確切、副作用小的抗瘢痕纖維化的有效藥物具有重要的臨床意義。但對于藥物防治瘢痕增生的研究手段，主要有三種途徑:一是細胞培養(yǎng)，尤其是成纖維細胞培養(yǎng)，通過藥物對成纖維細胞的作用來進行篩選;二是將人的病理性瘢痕組織移植到裸鼠的皮下，研究藥物對瘢痕組織作用產(chǎn)生的變化;三是通過藥物臨床實踐來總結(jié)有關(guān)藥物防治和瘢痕的經(jīng)驗。這些方法已經(jīng)取得了一定的成績。本實驗采用了兔耳瘢痕動物模型，使藥物對于瘢痕防治的研究手段有了進一步的發(fā)展。通過對兔耳增生塊瘢痕增生指數(shù)的測定，結(jié)果顯示，紫杉醇明顯抑制兔耳瘢痕增生，瘢痕增生指數(shù)隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)，與生理鹽水對照組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。我們認(rèn)為紫杉醇可能通過兩個途徑抑制瘢痕的增生:(1)直接抑制成纖維細胞的生長增殖，從而減少膠原的合成和分泌;(2)增加膠原酶產(chǎn)生、增強膠原酶活性，促使已形成的膠原纖維降解和纖維重吸收。紫杉醇具有藥性作用強，副作用小，有望成為預(yù)防和治療人皮膚增生性瘢痕的有效藥物，但尚需體內(nèi)實驗和臨床進一步研究證明。

［1］Morris DE，Wu Zhao LL，et al.Acute and chronic animal models fof excessive dermal scaring:quantitative studies.Plastic Recon-str Surg，1997，100(3);674-681.

［2］李薈元，劉建波，夏煒，等.增生性瘢痕動物實驗?zāi)Ｐ偷慕⑴c應(yīng)用.中華整形外科雜志，2001，17(5):276-278.

［3］胡大海，陳壁，朱雄翔，等.P物質(zhì)上調(diào)正常人真皮成纖維細胞TGF-β1的 mRNA 表達.中華整形外科雜志，2002，18(4):234-236.

［4］李高峰，羅成群.低氧對瘢痕形成的影響.中華整形外科雜志，2003，19(5):238-386.

［5］吳志遠，羅少軍，江黎明.諾新康對人皮膚瘢痕基因表達的影響.廣州醫(yī)藥，2007，6(38):22-23.

［6］商慶新，張滌生.丹參和川芎嗪對成纖維細胞生長的體外抑制實驗.中國修復(fù)重建外科，1998，12(6):321-323.