郭芮兵綜述,徐格林審校

目前越來越多的證據(jù)表明中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有潛在的自我修復(fù)能力,成體腦內(nèi)海馬(包括人類)齒狀回的亞顆粒層(subgranular zone,SGZ)和位于前腦側(cè)腦室的室周帶(subventricular zone, SVZ)可終生持續(xù)產(chǎn)生神經(jīng)干細(xì)胞。這些內(nèi)源性干細(xì)胞能夠自我更新,具有分化為神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的潛能,它們?yōu)槌审w腦內(nèi)的特定部位(海馬和嗅球)不斷提供新生細(xì)胞。研究者們已利用多種腦損傷的動(dòng)物模型(包括缺血缺氧、癲癇、腦外傷等)揭示了損傷后內(nèi)源性干細(xì)胞增殖、遷移和分化的變化規(guī)律,并探討了可能的影響機(jī)制,本文就近年來的研究進(jìn)展做一綜述。

1 腦損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的增殖及其影響因素

1.1 腦損傷刺激內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖 大量研究表明腦損傷能夠使內(nèi)源性干細(xì)胞的數(shù)量增加,包括大鼠雙側(cè)或單側(cè)前腦短暫腦缺血、大鼠皮質(zhì)局灶缺血[1]、猴的半球缺血[2]等,均能觀察到缺血損傷后腦內(nèi)增殖區(qū)新生細(xì)胞的數(shù)量明顯提高,特別在缺血后兩周內(nèi),但其后新生細(xì)胞的數(shù)量逐漸回復(fù)正常。此外,腦外傷后內(nèi)源性干細(xì)胞的增殖也出現(xiàn)明顯增加[3],機(jī)械損傷海馬齒狀回顆粒層可刺激神經(jīng)前體細(xì)胞增殖[4],增殖的細(xì)胞大部分標(biāo)有成熟神經(jīng)元標(biāo)記物鈣結(jié)合蛋白。癲癇發(fā)作可誘導(dǎo)前腦室管膜下區(qū)內(nèi)的神經(jīng)元增加,在某些細(xì)胞因子的作用下遷移至異常放電灶,替代異常神經(jīng)元,癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)作可增加齒狀回的神經(jīng)發(fā)生,然而,有研究者在額葉癲癇中發(fā)現(xiàn),新生的神經(jīng)干細(xì)胞也可能致癇[5]。在神經(jīng)變性疾病帕金森病(Parkinson disease,PD)的早期,局部多巴胺能神經(jīng)元丟失后,室管膜下區(qū)的神經(jīng)干細(xì)胞被激活,在因子的引導(dǎo)下靶向性遷移至丟失區(qū),使神經(jīng)系統(tǒng)得到一定的修復(fù)。在阿爾茨海默病(Alzheimer disease,AD)患者中,局部神經(jīng)元纖維纏結(jié)釋放出信號,激活神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)生增殖與遷移,但大部分比較嚴(yán)重的退行性疾病仍不能被修復(fù)。

1.2 影響增殖的幾種相關(guān)因素 近期研究提示有多種因子刺激神經(jīng)增殖,其中一些對腦損傷后內(nèi)源性干細(xì)胞的增殖起作用,包括神經(jīng)生長因子(nerve grow th factor,NGF)內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(endothelium growth factor,EGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、干細(xì)胞因子(stem cell factor,SCF)、促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)、誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(the inducible form of nitric oxide synthase,iNOS)、Wnt蛋白和凋亡前因子Bax等等,以下將分別敘述。

NGF對神經(jīng)系統(tǒng)具有重要的神經(jīng)營養(yǎng)和促進(jìn)神經(jīng)突起生長的生物效應(yīng)。腦損傷后,NGF可促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞增殖,保護(hù)受損神經(jīng)元,促進(jìn)神經(jīng)纖維再生,誘導(dǎo)軸突發(fā)育,從而使受損的神經(jīng)系統(tǒng)修復(fù)。研究發(fā)現(xiàn),在腦室內(nèi)連續(xù)注射NGF,可明顯改善重型顱腦損傷嬰兒的腦功能,減少腦軟化灶,改善腦組織局部灌注[6];有研究者[7]向大鼠腦室內(nèi)注入NGF抗體,結(jié)果可使皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞死亡增加,皮質(zhì)變薄,情感和認(rèn)知功能明顯受損,這說明NGF在維持神經(jīng)元存活及其功能中起著至關(guān)重要的作用。

EGF是一種能夠促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖的生長因子,另一個(gè)名為肝素接合的 EGF樣生長因子(HB-EGF)也通過EGF/ErbB1受體和EGF敏感受體起作用。有研究證實(shí)[8],缺氧后4 ～8小時(shí)鼠胚胎皮質(zhì)培養(yǎng)物中HB-EGF的含量即明顯增高,外源性HB-EGF能夠促進(jìn)BrdU合成到常氧環(huán)境培養(yǎng)物中。HB-EGF作用于側(cè)腦室也能促進(jìn)BrdU合成到SVZ和SGZ腦區(qū),且大多數(shù)BrdU+(5-溴脫氧尿苷)細(xì)胞是神經(jīng)元前體細(xì)胞。在新生大鼠,HB-EGF在單側(cè)頸動(dòng)脈結(jié)扎后16 ～24小時(shí)于損傷半球的表達(dá)明顯增加,表達(dá)最強(qiáng)的部位則是梗死灶周邊的神經(jīng)元。這些研究結(jié)果提示,EGF促進(jìn)缺血損傷后神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖。

bFGF是神經(jīng)干細(xì)胞的生長因子,一項(xiàng)利用bFGF基因敲除鼠進(jìn)行的研究bFGF在缺血損傷后神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖中有重要的作用[9]。缺血損傷時(shí) bFGF裸鼠海馬區(qū)的 BrdU+細(xì)胞數(shù)正常,但MCAO(大腦中動(dòng)脈阻斷法)后BrdU+細(xì)胞數(shù)較未行bFGF基因敲除的正常鼠明顯減少達(dá)55%。這說明bFGF確實(shí)在缺血損傷刺激神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖中起作用。近期一項(xiàng)研究表明,腦外傷后腦室內(nèi)注射bFGF能有效促進(jìn)內(nèi)源性干細(xì)胞的增殖,并讓這些新生的干細(xì)胞存活至損傷后4周[10]。

SCF也在缺血損傷刺激神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖中起作用[11]。缺氧后鼠胚胎皮質(zhì)培養(yǎng)物中bFGF和SCF的濃度均有增加,都能夠促進(jìn)BrdU合成到常氧環(huán)境培養(yǎng)物中。兩者的效應(yīng)不能疊加,提示二者的作用機(jī)制相似。在體試驗(yàn)證實(shí)SCF的受體—c-kit受體酪氨酸激酶存在于腦內(nèi)增殖區(qū),缺血可以誘導(dǎo)SVZ和SGZ區(qū)表達(dá)c-kit的細(xì)胞數(shù)量增加。同時(shí),SCF能夠提高BrdU+細(xì)胞數(shù)量,這些細(xì)胞大多為不成熟的神經(jīng)元細(xì)胞。

EPO是調(diào)節(jié)缺血損傷后神經(jīng)前體細(xì)胞增殖反應(yīng)的另一個(gè)較強(qiáng)的因子。免疫組化研究顯示成體動(dòng)物SVZ區(qū)既有EGF受體,又有EPO受體[12]。體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,單個(gè)神經(jīng)前體細(xì)胞能夠增殖成為粘在一起的細(xì)胞克隆,這些神經(jīng)前體細(xì)胞能夠自我更新,當(dāng)初級細(xì)胞團(tuán)被分離后,它可以增殖為次級細(xì)胞團(tuán)。如果移去培養(yǎng)介質(zhì)中的促有絲分裂源,神經(jīng)前體細(xì)胞可以分化成為神經(jīng)元或膠質(zhì)細(xì)胞。用含有EPO的常氧環(huán)境培養(yǎng)物或低氧環(huán)境培養(yǎng)物能夠使神經(jīng)元的產(chǎn)出率較前高2 ～3倍。缺氧4小時(shí),神經(jīng)前體細(xì)胞培養(yǎng)物中EPOmRNA的表達(dá)就會(huì)明顯提高。在體研究顯示,EPO作用于未損傷動(dòng)物的側(cè)腦室會(huì)戲劇性的減少SVZ區(qū)神經(jīng)前體細(xì)胞的數(shù)量,同時(shí)提高背外側(cè) SVZ區(qū)和 RMS區(qū)(rostal migratory stream)Mash1(bHLH家族成員之一,參與神經(jīng)元分化等)陽性前體細(xì)胞的數(shù)量。這些研究證明缺氧時(shí)神經(jīng)前體細(xì)胞EPO表達(dá)上調(diào),EPO可以促進(jìn)神經(jīng)前體細(xì)胞分化為神經(jīng)元,提示EPO可以增強(qiáng)卒中后的神經(jīng)增殖。

還有一個(gè)被證實(shí)與缺血損傷后神經(jīng)增殖有關(guān)的因子是iNOS[13]。成年大鼠MCAO損傷后同側(cè)DG區(qū)iNOS高水平表達(dá)。抑制iNOS的活性卻不影響其表達(dá)能夠減少缺血后BrdU合成到干細(xì)胞中的水平。用iNOS基因敲除鼠可以得到相同試驗(yàn)結(jié)果,然而這些動(dòng)物的梗死面積也明顯減小。這個(gè)結(jié)果使得判斷細(xì)胞增殖的下降到底是缺乏iNOS所致還是損傷減輕所致比較困難。但不管如何,這提示缺血損傷后還有另一種機(jī)制影響著神經(jīng)增殖。

Wnt蛋白[14]能夠維持缺血后SVZ區(qū)內(nèi)源性干細(xì)胞的存活并刺激其增殖。凋亡前因子Bax[15]是影響干細(xì)胞存活的一個(gè)關(guān)鍵因素,如果小鼠缺乏Bax則腦外傷后干細(xì)胞增殖明顯增加,并且它很有可能是通過鉀通道的Kv4家族起作用。

2 腦損傷后內(nèi)源性干細(xì)胞的遷移及其機(jī)制

2.1 腦損傷促進(jìn)內(nèi)源性干細(xì)胞向損傷區(qū)遷移 腦損傷后增殖只有在新生細(xì)胞能夠到達(dá)細(xì)胞缺失的腦區(qū)才是有意義的。對此,已有研究通過觀察到新生細(xì)胞能夠遷移出增殖區(qū)而間接證實(shí)。對MCAO損傷同側(cè)半球BrdU+/DCX+(DCX,一種神經(jīng)元前體細(xì)胞的早期標(biāo)志物)細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),這些前體細(xì)胞具有遷移細(xì)胞的形態(tài),能夠從SVZ區(qū)遷移到紋狀體區(qū),而在損傷對側(cè)未見此遷移,但這種現(xiàn)象提示新生細(xì)胞正向損傷區(qū)遷移。另有研究觀察了 PSANCAM(一種遷移細(xì)胞表達(dá)的粘附分子)在成年大鼠MCAO后的表達(dá)變化,并發(fā)現(xiàn)損傷后3天該分子在SVZ區(qū)的表達(dá)增加[16]。雖然此結(jié)論提示新生細(xì)胞正從其生發(fā)區(qū)遷移出來,但由于缺血損傷還可以刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)PSA-NCAM,因此無法區(qū)分這些PSA-NCAM+細(xì)胞到底是神經(jīng)前體細(xì)胞還是星形膠質(zhì)細(xì)胞。為此,有研究[17]將脂性熒光染料DiI于成體大鼠缺血損傷后2天注入側(cè)腦室,注射后2天可見DiI+細(xì)胞局限于后室周帶區(qū),而在缺血后4周,許多DiI+細(xì)胞出現(xiàn)在了損傷海馬的CA1 區(qū),更重要的是,88%的NeuN+細(xì)胞也是DiI+細(xì)胞;在無缺血發(fā)生的動(dòng)物中注射DiI后4周DiI+細(xì)胞仍局限于后室周帶區(qū)。這說明缺血后新生細(xì)胞確實(shí)遷移到了損傷區(qū)。

2.2 影響遷移的幾種相關(guān)因素 生長因子中的NGF可以促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的遷移,它僅出現(xiàn)在遷移期的神經(jīng)前體細(xì)胞,其受體erb表達(dá)于遷移期的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞,阻斷受體erb后,神經(jīng)前體細(xì)胞的遷移受到抑制,完成遷移后的放射狀膠質(zhì)細(xì)胞分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞。VEGF也促進(jìn)內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的遷移[18],它能夠促進(jìn)支架蛋白(IQGAP1)的表達(dá)[19],IQGAP1本身存在于神經(jīng)前提細(xì)胞和NSCs(神經(jīng)干細(xì)胞)的胞漿內(nèi),但可以和膜整合蛋白相互作用從而參與神經(jīng)前體細(xì)胞的遷移。炎癥因子可以作為炎性刺激物使體內(nèi)原有的神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生趨化因子參與干細(xì)胞的遷移。Belmadani等[20]發(fā)現(xiàn):小鼠的單核細(xì)胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)敲除后,神經(jīng)前體細(xì)胞向損傷處的遷移顯著減少,表明神經(jīng)損傷后,炎性細(xì)胞促進(jìn)趨化蛋白(趨化因子)的表達(dá),引導(dǎo)干細(xì)胞的遷移。腦外傷后,局部神經(jīng)組織發(fā)生變性,誘發(fā)炎癥反應(yīng),通過一些炎癥因子及趨化因子的表達(dá),激活神經(jīng)干細(xì)胞的遷移。許多炎癥因子還可以作為炎性刺激物使體內(nèi)原有的神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生趨化因子參與干細(xì)胞的遷移,一些炎性刺激物如:IFN-γ、gp120(一種包膜糖蛋白)可激活小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞合成大量趨化因子、細(xì)胞因子,參與神經(jīng)前體細(xì)胞的遷移[21]。

Slit蛋白可以通過排斥作用指導(dǎo)SVZ區(qū)神經(jīng)前體細(xì)胞的遷移;reelin蛋白可促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞在接受新的信息后向特定部位遷移并分化為有功能的成熟細(xì)胞。腦缺血后,新生細(xì)胞PSA-NCAM表達(dá)增加與新生細(xì)胞的遷移有關(guān),如果用PSA-NCAM受體的阻斷劑或者剔除PSA-NCAM的基因均會(huì)阻礙新生細(xì)胞的遷移。而腦外傷后神經(jīng)干細(xì)胞的遷移可能與外傷刺激干細(xì)胞受體C-kit的激活有關(guān)。

3 腦損傷后神經(jīng)前體細(xì)胞存活并分化為成熟細(xì)胞

一些研究探討了缺血后新生細(xì)胞是否能夠長期存活并分化為成熟細(xì)胞。有研究在成年大鼠MCAO后第1周內(nèi)注射BrdU,然后分析這些BrdU+細(xì)胞損傷后4周時(shí)的變化[22]。該研究發(fā)現(xiàn),損傷側(cè)紋狀體BrdU+/NeuN+細(xì)胞數(shù)量較對側(cè)或正常對照組增加31倍,而細(xì)胞密度之間的差異甚至比絕對細(xì)胞數(shù)之間的差異更大,這是因?yàn)槿毖獡p傷將部分受損的紋狀體分割成了小塊。BrdU+/NeuN+細(xì)胞的密度在第4周時(shí)比在第2 周時(shí)高了9.7倍,提示前體細(xì)胞在這4 周的損傷恢復(fù)期中不斷的成熟。BrdU+/DCX+細(xì)胞同時(shí)表現(xiàn)為Meis2和Pbx(兩種發(fā)育中紋狀體細(xì)胞的標(biāo)志物)染色陽性,也提示神經(jīng)前體細(xì)胞正在損傷的紋狀體中成熟。此外,在損傷后第5周,42%BrdU+/NeuN+細(xì)胞還表達(dá)DARPP-32(一種紋狀體成熟中間神經(jīng)元的標(biāo)志物)。這些都說明紋狀體中有部分新生細(xì)胞發(fā)育成為具備該區(qū)域細(xì)胞相應(yīng)特征的成熟細(xì)胞。對于海馬的研究也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果。

上述研究證明了缺血后部分新生細(xì)胞能夠發(fā)育成為成熟的神經(jīng)元,但這還是不夠的,還需要對這些細(xì)胞進(jìn)行更長時(shí)間的觀察,因?yàn)檫@些細(xì)胞要和腦內(nèi)局域其他細(xì)胞形成功能聯(lián)系還需要更長的時(shí)間。雖然目前的研究集中于神經(jīng)元的新生,有研究提示其他類型的細(xì)胞也在損傷修復(fù)中起作用。對星形膠質(zhì)細(xì)胞在缺血損傷后的反應(yīng)已有較多了解,而對少突膠質(zhì)細(xì)胞卻知之甚少。有研究表明缺血損傷后2周內(nèi)可見梗死灶周邊少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞數(shù)量明顯增多,但這些細(xì)胞的作用卻仍不明確。

影響分化的幾種相關(guān)因素:腦損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞的分化與環(huán)境密切相關(guān),它們可以在神經(jīng)營養(yǎng)因子的控制下分化成一定種類的神經(jīng)細(xì)胞。許多神經(jīng)營養(yǎng)因子可以通過與神經(jīng)干細(xì)胞上特異受體的結(jié)合激活細(xì)胞內(nèi)信號促使細(xì)胞分化。腦梗死后可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)營養(yǎng)因子,如腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、bFGF、NGF等。每種神經(jīng)營養(yǎng)因子均有不同時(shí)間和區(qū)域分布的特點(diǎn)。睫狀神經(jīng)細(xì)胞營養(yǎng)因子(CNTF)的含量在一過性MCAO 120分鐘后2天明顯增高,且在額葉、頂葉和枕葉處含量增加。CNTF可促使神經(jīng)干細(xì)胞分化為星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞,與梗死后病灶區(qū)星形細(xì)胞增加有關(guān)。有學(xué)者證實(shí),在大鼠MCAO后,海馬bFGF增加,并促使神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元。bFGF在神經(jīng)干細(xì)胞增殖的早期階段發(fā)揮促有絲分裂的作用,使神經(jīng)干組胞獲得對另一作用更強(qiáng)的促有絲分裂因子表皮生長因子的反應(yīng)性;而表皮生長因子在神經(jīng)干細(xì)胞增殖后期發(fā)揮作用[23],轉(zhuǎn)化生長因子β 1(TGFβ1)可促進(jìn)干細(xì)胞的分化并遠(yuǎn)離細(xì)胞分裂池向損傷處遷移[24]。

4 增強(qiáng)神經(jīng)前體細(xì)胞對腦損傷的反應(yīng)可以促進(jìn)功能恢復(fù)

腦損傷后外源性因子對神經(jīng)前體細(xì)胞增殖和成熟的促進(jìn)作用提示這些因子可以用來治療腦損傷。研究表明[17],在缺血損傷的第2 ～5 天將bFGF和EGF(兩種神經(jīng)前體細(xì)胞的促有絲分裂原)注入側(cè)腦室能夠促進(jìn)神經(jīng)前體細(xì)胞的增殖,并且,這些增殖的神經(jīng)前體細(xì)胞有一半以上表達(dá)NeuN,能夠存活6個(gè)月。還有研究證實(shí)生長因子可以促進(jìn)缺血后新生的細(xì)胞整合進(jìn)入海馬區(qū)局部神經(jīng)環(huán)路。在缺血后經(jīng)過較長時(shí)間的恢復(fù),用 MAP2(微管相關(guān)蛋白Ⅱ)和synapsin 1(突觸蛋白-Ⅰ)對海馬的CA1 區(qū)進(jìn)行染色,發(fā)現(xiàn)生長因子處理后樹突和突觸的數(shù)量明顯增多,其突觸形成乃通過電子顯微鏡觀察而證實(shí)。通過將逆行示蹤劑注射到海馬回下腳標(biāo)記CA1區(qū)的BrdU+細(xì)胞,證實(shí)新生神經(jīng)元在生長因子作用下整合進(jìn)了適當(dāng)部位。

腦損傷后的功能恢復(fù)是治療之最終目的。Nakatomi等[17]利用電生理學(xué)技術(shù)對海馬薄片培養(yǎng)物檢測后發(fā)現(xiàn),缺血損傷后局部的突觸后電位較假手術(shù)對照組明顯減弱。損傷后經(jīng)生長因子干預(yù)的缺血?jiǎng)游锲渚植繄鲭娢惠^對照組相有所增高。神經(jīng)功能評估也證實(shí)生長因子干預(yù)的缺血?jiǎng)游锩黠@恢復(fù)。缺血可以使動(dòng)物的認(rèn)知功能明顯下降,這可以通過莫里斯水迷宮試驗(yàn)(一種檢測動(dòng)物認(rèn)知功能的試驗(yàn))來證實(shí)。通過動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),動(dòng)物訓(xùn)練1周時(shí),缺血損傷后的動(dòng)物(不論是否給予生長因子)較正常動(dòng)物有明顯的缺陷;而動(dòng)物訓(xùn)練7周時(shí),缺血損傷后給予生長因子的動(dòng)物表現(xiàn)與正常動(dòng)物相同,而缺血損傷后未給予生長因子的動(dòng)物仍表現(xiàn)出明顯的認(rèn)知功能障礙,這可能與生長因子促進(jìn)神經(jīng)增殖有關(guān)。

5 展 望

綜上所述,神經(jīng)干細(xì)胞對機(jī)體的自我修復(fù)起著重要的作用,腦損傷能夠刺激內(nèi)源性干細(xì)胞的增殖并能促進(jìn)增殖的干細(xì)胞向損傷區(qū)遷移,雖然這種增殖和遷移僅發(fā)生在損傷早期。此外,他們還能分化為成熟的神經(jīng)元細(xì)胞[25]。這些研究為腦損傷患者帶來了曙光,但問題在于,這些新生細(xì)胞的存活率僅為20%,其中又只有0.2%能夠替代缺血后死亡的細(xì)胞[21]。因此,目前的主要任務(wù)是弄清楚內(nèi)源性干細(xì)胞對各種損傷反應(yīng)的細(xì)胞及分子機(jī)制。包括分析反應(yīng)期參與的特殊分子和影響內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞最終分化的局部因素。一旦弄清楚這些機(jī)制,就能提供明確的治療措施,這將為腦損傷的遠(yuǎn)期恢復(fù)提供更好的治療,很可能會(huì)戲劇性的改善因腦損傷而致殘的患者的生活質(zhì)量?？傊?內(nèi)源性干細(xì)胞為治療各種腦損傷提供了廣闊的前景。

[1] Chesselet MF.Mechanisms of subventricular zone expansion after focal cortical ischemic injury[J].J Comp Neurol, 2005, 488(2):201-214.

[2] Tonchev AB, Yamashima T, Zhao L, etal.Proliferation ofneural and neuronal progenitors after global brain ischem ia in young adult macaquemonkeys[J].Mol Cell Neurosci, 2003, 23(2):292-301.

[3] Chirumam illa S, Sun D, Bullock MR, etal.Traumatic brain injury induced cell proliferation in the adultmammalian central nervous system[J].JNeurotrauma, 2002, 19(6):693-703.

[4] Dash PK, Mach SA, Moore AN.Enhanced neurogenesis in the rodent hippocampus following traumatic brain injury[J].JNeurosci Res, 2001, 63(4):313-319.

[5] Kuruba R,Hattiangady B,Shetty AK.Hippocampal neurogenesis and neural stem cells in temporal lobe epilepsy[J].Epilepsy-Behav, 2009, 14(Suppl 1):65-73.

[6] Chiaretti A, Antonelli A, Genovese O, et al.Intraventricular nerve growth factor infusion improves cerebral blood flow and stimulates doublecortin expression in two infants with hypoxic-ischem ic brain injury[J].Neurol Res, 2008, 30(3):223-228.

[7] Mashayekhi F.Neural cell death is induced by neutralizing antibody to nerve growth factor:an in vivo study[J].Brain Dev,2008, 30(2):112-117.

[8] Jin K, Mao XO, Sun Y, et al.Heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor:hypoxia-inducible expression in vitro and stimulation of neurogenesis in vitro and in vivo[J].JNeurosci,2002, 22(13):5365-5373.

[9] Yoshimura S, Takagi Y, Harada J, et al.FGF-2 regulation of neurogenesis in adult hippocampus after brain injury[J].Proc Natl Acad Sci USA, 2001, 98(10):5874-5879.

[10] Sun D, Bullock MR, McGinn MJ, et al.Basic fibroblast growth factor-enhanced neurogenesis contributes to cognitive recovery in rats following traumatic brain injury[J].Exp Neurol, 2009, 216(1):56-65.

[11] Jin K, Mao XO, Sun Y, et al.Stem cell factor stimulates neurogenesis in vitro and in vivo[J].JClin Invest, 2002, 110(3):311-319.

[12] Shingo T, Sorokan ST, Shimazaki T, et al.Erythropoietin regulates the in vitro and in vivo production of neuronal progenitors by mammalian forebrain neural stem cells[J].JNeurosci, 2001, 21(24):9733-9743.

[13] Zhu DY, Liu SH, Sun HS, et al.Expression of inducible nitric oxide synthaseafter focal cerebral ischem ia stimulatesneurogenesis in the adult rodent dentate gyrus[J].JNeurosci, 2003, 23(1):223-229.

[14] Morris DC, Zhang ZG, Wang Y, et al.Wnt expression in the adult rat subventricular zone after stroke[J].Neurosci Lett,2007,418(2):170-174.

[15] Shi J, Miles DK, Orr BA, et al.Injury-induced neurogenesis in Bax-deficientmice:evidence for regulation by voltage-gated potassium channels[J].Eur JNeurosci,2007,25(12):3499-3512.

[16] Sato K, Hayashi T, Sasaki C, et al.Temporal and spatial differences of PSA-NCAM expression between young-adult and aged rats in normaland ischem ic brains[J].Brain Res, 2001, 922(1):135-139.

[17] Nakatom i H, Kuriu T, Okabe S, etal.Regeneration of hippocampal pyramidal neurons after ischemic brain injury by recruitment of endogenousneural progenitors[J].Cell,2002, 110(4):429-441.

[18] Tieron MC, RosselM, Moepps B, et al.Molecular interaction between projection neuron precursorsand invading interneurons via S Y Mneural progenitors in vivo and vascular endothelial growth factor triggered neural progenitor migration in vitro[J].JNeurosci,2007, 27(17):4716-4724.

[19] Gong X, He X, Qi L, et al.Stromal cell derived factor-1 acutely promotes neural progenitor cell proliferation in vitro by a mechanism involving the ERK 1/2 and PI-3K signal pathways[J].Cell Biol Int, 2006, 30(5):466-471.

[20] Belmadani A, Tran PB, Ren D.Chemokines regulate the migration of neural progenitors to sitesof neuroinflammation[J].JNeurosci,2006, 26(12):3182-3191.

[21] Fansa H, Keilhoff G.Comparison of different biogenic matrices seeded with cultured Schwann cells for bridging peripheral nerve defects[J].Neurol Res, 2004, 26(2):167-173.

[22] Arvidsson A, Collin T, Kirik D, etal.Neuronal replacement from endogenous precursors in the adult brain after stroke[J].Nat Med,2002,8(9):963-970.

[23] Tarasenko YI, Yu Y, Jordan PM, etal.Effectofgrowth factorson proliferation and phenotypic differentiation of human fetal neural stem cells[J].JNeurosci Res,2004, 78(5):625-636.

[24] Choi Y, Borghesani PR, Chan JA, et al.Migration from am itogenic niche promotes cell-cycle exit[J].J Neurosci, 2005, 25(45):10437-10455.

[25] 王毓斌,陳 斌.成體生殖干細(xì)胞研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào),2009,22(4):438-442.