徐 嚴(yán),張永貴,季尚瑋,王江濱

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科,吉林長(zhǎng)春 130033)

乙型肝炎病毒基因型檢測(cè)的臨床意義

徐 嚴(yán),張永貴,季尚瑋,王江濱*

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科,吉林長(zhǎng)春 130033)

目的探討乙型肝炎病毒基因型分布及其對(duì)抗病毒療效的影響。方法對(duì)183例患者進(jìn)行基因分型,對(duì)應(yīng)用恩替卡韋及聚乙二醇干擾素a-2a抗病毒治療不同基因型患者療效進(jìn)行比較。率的比較采用 χ2檢驗(yàn)。結(jié)果183例慢性乙肝患者以C基因型為主,占53.6%,其次為B基因型(35.5%),C基因型患者HBeAg陽(yáng)性率(69.4%)明顯高于B基因型患者(47.7%),兩者比較P＜0.05。肝硬化患者C基因型所占比例較高(67.4%)。恩替卡韋抗病毒治療B、C基因型患者HBV DNA不可測(cè)率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似。聚乙二醇干擾素a-2a組抗病毒治療48周B基因型患者持久應(yīng)答率(75%)明顯高于C基因型患者(45.5%),兩者比較P＜0.05。結(jié)論C基因型患者疾病進(jìn)展比例高,對(duì)聚乙二醇干擾素a-2a抗病毒治療療效較差。而基因型對(duì)恩替卡韋抗病毒療效并無顯著影響。

基因型;乙型肝炎;抗病毒治療

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0061)

近年來,許多研究[1-2]發(fā)現(xiàn)HBV基因型是影響慢性乙肝臨床轉(zhuǎn)歸的主要決定因素之一,有關(guān)HBV基因型與臨床疾病的相關(guān)性研究越來越受到重視,引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。但是Palumbo E等[3]研究表明HBV基因型并不影響慢性乙肝患者的抗病毒療效。本研究對(duì)183例就診于中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科的慢性乙肝患者進(jìn)行乙肝病毒基因型檢測(cè),了解其分布狀況以及HBV基因型與HBeAg表達(dá)狀況及其病毒載量、臨床疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性,同時(shí)評(píng)價(jià)不同基因型患者的抗病毒療效,為臨床治療、預(yù)后評(píng)價(jià)提供進(jìn)一步的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 入選標(biāo)準(zhǔn) 選擇就診于中日聯(lián)誼醫(yī)院消化內(nèi)科的183名HBV DNA≥103拷貝/ml的慢性乙肝患者,診斷符合2005年“慢性乙型肝炎防治指南”中制定的標(biāo)準(zhǔn)[4]。所有患者進(jìn)行HBV DNA基因型檢測(cè)。對(duì)符合下列條件①HBV DNA≥104拷貝/ml;乙型肝炎肝硬化患者HBV DNA≥103拷貝/ml;②ALT≥ULN;乙型肝炎肝硬化患者ALT正常或升高。如用干擾素治療,ALT≤10倍正常值上限,TBIL＜2倍正常值上限;③肝穿組織學(xué)顯示Knodell HAI≥4。④除外妊娠期及哺乳期,無精神病史、癲癇、惡性腫瘤、有癥狀的心臟病,無吸毒或酗酒史等。應(yīng)用干擾素者除外失代償期肝硬化。其中84例應(yīng)用恩替卡韋治療(0.5 mg每日一次口服),男63例,女21例,HBeAg+49例。76例應(yīng)用聚乙二醇干擾素治療(Peg-IFNa-2a 180 μ g,每周一次皮下注射),男 53 例 ,女 23例,HBeAg+47例。所有患者抗病毒治療48周,干擾素組隨訪24周。

1.2 監(jiān)測(cè)指標(biāo) 接受治療前常規(guī)分析血清HBV DNA水平、生化學(xué)指標(biāo)及HBV血清學(xué)標(biāo)志。干擾素治療組治療前還應(yīng)檢查血常規(guī)、甲狀腺功能、血糖、尿常規(guī),血常規(guī)治療前4周每周1次,以后每4周1次。所有患者治療至第4周及12周檢測(cè)生化學(xué)指標(biāo)及HBV DNA水平,以后每12周檢測(cè)一次血清HBV DNA水平、生化學(xué)指標(biāo)及HBV血清學(xué)標(biāo)志。

1.3 檢測(cè)方法 ①血清學(xué)病毒標(biāo)志物檢測(cè):采用酶聯(lián)免疫吸附法。②肝功能檢測(cè):全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑購(gòu)自美國(guó)貝克曼公司。③HBV DNA定量檢測(cè)采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測(cè)血清中HBV DNA含量。最低檢測(cè)下限為1.0×103拷貝/ml。試劑盒購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安公司。④HBV基因型檢測(cè)采用PCR微量板核酸雜交酶聯(lián)免疫法。試劑盒購(gòu)自由廣州藍(lán)星生物科技開發(fā)公司。

2 結(jié)果

2.1 183例慢性乙肝患者HBV基因型分布及與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系 183例慢性乙肝患者以C基因型為主,占53.6%,其次為B基因型(35.5%)及未分出型患者(8.2%),而D基因型(1.6%)及A基因型者(1.1%)較少。46例乙型肝炎肝硬化患者C基因型所占比例(67.4%)明顯高于137例慢性肝炎患者C基因型所占比例(48.9%),兩者比較P＜0.05。

2.2 不同HBV基因型與HBeAg表達(dá)狀況及HBV DNA基線水平的關(guān)系 分析不同HBV基因型患者HBeAg表達(dá)狀況以及HBV DNA基線水平,結(jié)果顯示C基因型患者HBeAg陽(yáng)性率(69.4%)明顯高于B基因型患者(47.7%),兩者比較P＜0.05。C基因型患者的HBV DNA基線載量(5.87±1.17 log10拷貝/ml)與B基因型患者(5.22±1.27 log10拷貝/ml)相近。

2.3 恩替卡韋及Peg-IFNa-2a抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者療效 恩替卡韋組B基因型25例,C基因型49例,比較恩替卡韋抗病毒治療不同基因型患者48周療效,結(jié)果顯示B、C基因型患者HBV DNA不可測(cè)率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,詳見表1;Peg-IFNa-2a組B基因型24例,C基因型44例,抗病毒治療48周B基因型患者持久應(yīng)答率明顯高于C基因型患者,兩者比較 P＜0.05,詳見表2。

表1 恩替卡韋抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者的療效分析(%)

表2 Peg-IFNa-2a抗病毒治療不同基因型慢性乙肝患者的療效分析(%)

3 討論

HBV基因型的分布與地理因素、人種差異有關(guān)。國(guó)內(nèi)外有關(guān)不同基因亞型HBV流行特征的調(diào)查表明在亞洲地區(qū)以B、C基因型流行為主。與B基因型相比,C基因型患者疾病相對(duì)進(jìn)展快,肝組織學(xué)損傷嚴(yán)重,更易進(jìn)展為肝硬化。本研究對(duì)183例慢性乙肝患者HBV基因型分布進(jìn)行分析,結(jié)果顯示本地區(qū)患者以C基因型為主(53.6%),其次為B基因型(35.5%),與國(guó)內(nèi)報(bào)道相似[5]。進(jìn)一步分析肝硬化患者中基因型分布狀況,發(fā)現(xiàn)肝硬化患者中C基因型所占比例較高(67.4%),略高于 Yasuhito Tanaka[6]研究組調(diào)查的43.7%和Tomoyuki Sakamoto[7]研究組的41%,與Tatsuji Maeshiro[8]研究組調(diào)查的60%為C基因亞型的報(bào)道相接近。而我國(guó)不同地區(qū)調(diào)查的基因型分布狀況也表明在乙型肝炎肝硬化患者中均以C基因亞型為主[9-11],證實(shí)C基因亞型患者疾病進(jìn)展的比例的確高于其他基因亞型。Lindh[12]等報(bào)道C基因型感染者的HBV DNA水平較高,但是本研究結(jié)果顯示C基因型及B基因型患者的HBV DNA基線載量相似,提示兩者無明顯相關(guān)性。

AI-ZHONG ZENG等[13]研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用阿德福韋酯抗病毒治療B基因型患者療效明顯好于C基因型患者,Kao JH[14]研究組發(fā)現(xiàn)干擾素抗病毒治療B基因型患者療效亦優(yōu)于C基因型患者,但有研究表明不同基因型對(duì)核苷類似物及干擾素抗病毒療效并無顯著影響[3,15],各地區(qū)報(bào)道不盡相同。本研究84例應(yīng)用恩替卡韋抗病毒治療48周B、C基因型患者HBV DNA不可測(cè)率、ALT復(fù)常率以及HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相似,提示基因型對(duì)核苷類似物抗病毒療效并無顯著影響。而Peg-IFNa-2a治療48周B基因型患者的持久應(yīng)答率明顯高于C基因型患者,提示Peg-IFNa-2a對(duì)B基因型患者療效優(yōu)于C基因型患者。

總之,HBV基因組具有相當(dāng)復(fù)雜的自然異質(zhì)性,不同的HBV基因型以及感染后不同的感染過程、病毒的清除、對(duì)治療的療效和自然轉(zhuǎn)歸等影響已經(jīng)受到廣泛的重視。越來越多的證據(jù)表明,HBV基因型與慢性乙型肝炎發(fā)病機(jī)制、轉(zhuǎn)歸、抗病毒療效均有密切關(guān)系。但目前的研究結(jié)果不具有統(tǒng)一性,隨著我們對(duì)HBV基因型研究的不斷深入,新的核苷類似物等抗病毒藥物等的開發(fā)和研制,對(duì)指導(dǎo)慢性乙型肝炎的臨床治療以及預(yù)后判斷均有積極的作用。

[1]Watanabe K,Takahashi T,Takahashi S,et al.Comparative study of genotype B and C hepatitis B virus-induced chronic hepatitis in relation to the basic core promoter and precore mutations[J].J Gastroenterol Hepatol,2005,20:441.

[2]Chen CH,Lee CM,Lu SN,et al.Clinical significance of hepatitis B virus(HBV)genotypes and precore and core promotermutations affecting HBV e antigen expression in Taiwan[J].J Clin Microbiol,2005,43:6000.

[3]Palumbo E.Hepatitis Bgenotypes and response to antiviral therapy:a review[J].Am J Ther.,2007,14(3):306.

[4]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)、感染病學(xué)分會(huì).慢性乙型肝炎防治指南[J].中華肝臟病雜志,2005,13(12):881.

[5]Zeng G,Wang Z,WenS,et al.Geographic distribution,virologic and clinical characteristics of hepatitis B virus genotypes in China[J].J Viral Hepat,2005,12(6):609.

[6]Zhanhui Wang,Yasuhito Tanaka,Yuehua Huang,et al.Clinical and Virological Characteristics of Hepatitis B Virus Subgenotypes Ba,C1,and C2 in China[J].J Clinical Microbiology,2007,5:1491.

[7]Tomoyuki Sakamoto,Yasuhito Tanaka,Etsuro Orito,et al.Novel subtypes(subgenotypes)of hepatitis Bvirus genotypes Band C among chronic liver disease patients in the Philippines[J].Journal of General Virology,2006,87:1873.

[8]Tatsuji Maeshiro,Shingo Arakaki,Takako Watanabe,et al.Different natural courses of chronic hepatitis B with genotypes B and C after the fourth decade of life[J].World J Gastroenterol,2007,13(34):4560.

[9]胡盈瑩,江家驥,歐文湖等.福建省部分地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布及其臨床意義[J].中華流行病學(xué)雜志,2004,25(3):251.

[10]李 嘉,朱理珉,鄒懷賓等.天津地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布及其與臨床的關(guān)系[J].肝臟,2006,11(6):304.

[11]王融冰,江宇泳,吳云忠等.中國(guó)北方地區(qū)乙型肝炎病毒基因型分布的臨床意義[J].中華傳染病雜志,2005,23(6):384.

[12]Lindh M,Hannoun C,Dhillon AP,et al.Core promoter mutations and genotypes in relation to viral replication and liver damage in East Asian hepatitis B virus carriers[J].J Infect Dis,1999,179:775.

[13]AI-ZHONG ZENG,HUI DENG,CHUNG YANG,et al.Hepatitis BVirus Genotype-Associated Variability in Antiviral Response to Adefovir Dipivoxil Therapy in Chinese Han Population[J].Tohoku J.Exp.Med.,2008,216:205.

[14]Kao JH,Wu NH,Chen PJ,et al.Hepatitis B genotypes and the response to interferon therapy[J].J Hepatol,2000,33:998.

[15]Erhardt A,Reineke U,Blondin D,et al.Mutations of the core promoter and response to interferon treatment in chronic replicative hepatitis B[J].Hepatology,2000,31:716.

Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects

XUYan,ZHANGYong-gui,JI Shang-wei,et al.(Department of Gastroenterology,China-Japan Union hospital of JilinUniversity,Changchun130033,China)

Objectiveto analyze Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects.Methodsthe genotypes of 183 patients were detected,to analyze antiviral effects of entecavir and peg-IFNa-2a in patients with different genotypes.Results53.6%of 183 patients were classified as genotype C,35.5%were genotype B.The positive rate of HBeAg in the patients of genotype C was higher than that of genotype B(P＜0.05).The rate of genotype C(67.4%)was higher in the patientswith Hepatitis B virus-related cirrhosis.Similar proportions of different genotype patientswho were treatmentwith entecavir achieved HBV DNA＜1 000 copies/ml,ALT normalization andHBeAg seroconversion.The sustained response rate in the patients of genotype B(75%)was higher than that of genotype C(P＜0.05).ConclusionThe patients of genotype Cwith a high rate of disease progression,and poor antiviral effects to peg-IFNa-2a.Genotype is no significant impact on antiviral efficacy of entecavir.

genotype;Hepatitis B;antiviral therapy

R512.6+2

A

1007-4287(2010)01-0061-03

*通訊作者

2009-03-07)