楊 劍，劉劍榮，黃永建，喻 斌

(江西省萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院，江西 萍鄉(xiāng) 337055)

新生兒溶血病一般特指母嬰血型不合而引起胎兒或新生兒的免疫性溶血性疾病(haemolytie disease of newborn，簡稱HDN)。新生兒ABO-HDN(ABO血型不合引起的新生兒溶血病)是因母嬰ABO血型不合，母親產(chǎn)生的抗胎兒紅細胞的免疫抗體IgG(抗A或抗B)通過胎盤進入胎兒體內(nèi)，致敏胎兒紅細胞在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)被識別、清除，而導(dǎo)致溶血的。為了解本院溶血三項試驗對新生兒ABO-HDN的診斷和防治提供的臨床價值，現(xiàn)采用微柱凝膠法進行新生兒ABO血型及RhD血型、直接抗人球蛋白試驗(DAT)、抗體釋放試驗、游離抗體試驗。

1 資料與方法

1.1 一般資料 115例被檢者為本院新生兒科2009年1月至2010年3月入院治療的新生兒，均表現(xiàn)為高膽紅素血癥，年齡1h～22d。母親血型均為“O”型 RhD 陽性。

1.2 試劑與儀器 人ABO血型反定型用紅細胞試劑盒為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品，新生兒ABO、RhD血型檢測卡(微柱凝膠)，血型不完全抗體檢測卡，酸放散試劑盒，專用檢測卡離心機和37℃孵育器均為長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本和試劑處理 取被檢者EDTA-K2抗凝血2ml，分離其血漿與紅細胞，將紅細胞用生理鹽水洗滌4次，配成0.5%的紅細胞懸液；同時采用壓積紅細胞進行酸放散處理，制備放散液。

1.3.2 血型鑒定和DAT取出新生兒ABO、RhD血型檢測卡(微柱凝膠)，此卡共6孔，第6孔為直接抗人球蛋白檢測孔，在檢測新生兒血型時，也可進行直接抗人球蛋白試驗。將配成的紅細胞懸液每孔滴一滴，放專用離心機離心后觀察結(jié)果。

1.3.3 游離試驗和抗體釋放試驗 取血型不完全抗體檢測卡，前3孔加被檢者血漿各一滴，后3孔加新生兒紅細胞懸液各一滴，將0.5%A型紅細胞懸液加入1號、4號管中各一滴，0.5%B型紅細胞懸液加入2號、5號管中各一滴，0.5%O型紅細胞懸液加入3號、6號管中各一滴，放37℃孵育器孵育15min后于專用離心機離心后觀察結(jié)果。

1.3.4 結(jié)果判讀 離心后紅細胞沉積在凝膠管底部者，表明紅細胞未發(fā)生凝集，為陰性反應(yīng)(-)；若紅細胞聚集在凝膠柱的上部，表明紅細胞發(fā)生凝集，為陽性反應(yīng)(+)。新生兒ABO-HDN判定見表1。

表1 新生兒ABO-HDN血清學(xué)試驗

2 結(jié)果

2.1 血型不完全抗體檢測卡前3孔為游離抗體檢查，有一孔為陽性反應(yīng)即報游離試驗陽性；后3孔為抗體釋放試驗，有一孔為陽性反應(yīng)即報抗體釋放試驗陽性。

2.2 通過檢測，其溶血三項試驗表現(xiàn)為以下幾種模式見表2。

表2 115例新生兒溶血三項檢測結(jié)果

2.3 115例新生兒RhD均為陽性，其中“A”型69例，“B”型 39 例，“O”型 7 例，其血型鑒定結(jié)果與溶血三項試驗結(jié)果分布見表3。

2.4 綜合表2和表3，得115例送檢標(biāo)本中7例為O型血，不為ABO血型不合引起的HDN，占6.08%；9例確診為ABO-HDN,占7.83%；85例為可疑ABO-HDN， 占73.9% ；14例為非ABO-HDN，占11.47%。

表3 115例新生兒血型鑒定結(jié)果與溶血三項試驗結(jié)果分布情況

3 討論

ABO-HDN多發(fā)生于O型母親和A型或B型的嬰兒，因為O型母親血清中含有免疫性的抗A或抗B抗體，由于其效價較高，所以AB0溶血病患兒的母親往往多數(shù)是0型[1]。本文115例患兒母親血型均為O型，但有7例患兒也為O型，其中有1例溶血三項試驗結(jié)果表現(xiàn)為模式二 (游離抗體試驗和抗體釋放試驗均為陽性)，說明此患兒為紅細胞ABO血型系統(tǒng)以外的血型不合引起的新生兒溶血病。由于本實驗室條件的限制，我們沒有進一步鑒定出具體哪種血型系統(tǒng)的母嬰血型不合導(dǎo)致的HDN。

同時觀察到，有的患兒黃疸、貧血很明顯，但ABO-HDN三項檢測皆為陰性。筆者認(rèn)為可能有以下原因：(1)抽樣時間較晚，使試驗結(jié)果成假陰性，因此強調(diào)早期抽樣的重要性[2]。(2)可能為其他原因造成新生兒溶血病。如：遺傳性葡萄糖-6-磷酸脫氫酶異常、遺傳性球形紅細胞癥以及血紅蛋白合成異常、由感染引起的紅細胞獲得性缺陷等等。因此，新生兒時期的溶血有很多原因，ABO-HDN檢測皆為陰性時尚需根據(jù)病史做相應(yīng)的檢查，及早診斷和治療。

新生兒ABO溶血癥是早期新生兒高膽紅素血癥主要原因之一，由于新生兒膽紅素代謝功能差，當(dāng)膽紅素大于2mg/L時或存在其他有利于膽紅素通過血腦屏障因素時，腦組織被未結(jié)合膽紅素黃染，形成高膽紅素腦病，從而對大腦造成不可逆損害，產(chǎn)生后遺癥，甚至臨床上無核黃疸表現(xiàn)，但腦干聽力誘發(fā)電位、閃光視覺誘發(fā)電位[3]、啼哭特性[4]及遠期智商已有異常[5]。提示未結(jié)合膽紅素易透過血腦屏障,損害神經(jīng)細胞,對大腦皮層產(chǎn)生毒性作用。溶血性高膽紅素血癥時危險性更大[6]。因此了解和掌握ABO溶血癥很重要。ABO溶血癥發(fā)病率約為1.4%[7]。本實驗雖然確診為ABO-HDN比率較低，為7.83%，但可疑ABO-HDN的占到了73.9%，同時結(jié)合病人的臨床表現(xiàn)，基本上將可疑患兒考慮為ABO-HDN，據(jù)臨床反饋，將可疑患兒進行ABO-HDN患者的相同處理，治療有效。說明在以后的工作中，本實驗室報告模式三(游離抗體試驗陽性)，本院臨床上可以將患兒當(dāng)作ABO-HDN進行治療，降低溶血性高膽紅素血癥帶來的危害，為患兒及早治療。同時為預(yù)防ABO-HDN，“O”型孕婦產(chǎn)前血清IgG抗A(B)抗體效價檢測尤為重要。一般認(rèn)為母嬰ABO血型不合導(dǎo)致的新生兒溶血病，當(dāng)抗體效價≥64時，有可能造成新生兒溶血病[8]，需要加強觀察。因此，筆者建議本實驗室開展血清IgG抗A(B)抗體效價檢測項目，以便ABO溶血病發(fā)現(xiàn)早,治療及時，黃疸輕，降低了高膽紅素血癥發(fā)生率，從而減少了聽力、智力及神經(jīng)系統(tǒng)等后遺癥。

[1]廖長征,黃衍鋒,許瑞環(huán),等.微柱凝膠技術(shù)用于新生兒溶血病診斷的效果評價[J].中國熱帶醫(yī)學(xué),2007,3(7):436-437.

[2]陳海兒.395例新生兒ABO溶血病檢測結(jié)果分析及臨床意義.中國優(yōu)生與遺傳雜志,2009,17(4):92-93.

[3]賁曉明,陳舜年,李佩紅,等.高膽紅素血癥新生兒閃光視覺誘發(fā)電位的檢測.中華兒科雜志,1996,34(4):223-225.

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[5]俞惠民,洪文瀾,施麗萍,等.新生兒高間接膽紅素癥患兒遠期隨訪觀察.中華兒科雜志,1966,34(5):324-326.

[6]俞善昌.新生兒膽紅素腦病的危險因素與發(fā)病機制.中國實用兒科雜志,1999,14(2):70-71.

[7]洪慶成,嚴(yán)國杰.中外兒科醫(yī)學(xué)文萃.天津:天津科技翻譯出版公司,1993:2-2.

[8]高 峰.輸血與輸血技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:99-99.