張淑云，王 安，陳 娟，郭 麗

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，哈爾濱 150030）

血脂升高在動脈粥樣硬化和冠心病等形成過程中起重要作用，高血脂可破壞體內(nèi)自由基產(chǎn)生和清除的平衡。而自由基過多導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)在糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)病中起著重要的作用[1－2]?？梢娋S持機體正常的血脂及防止脂質(zhì)過氧化對動物的的健康具有重要的意義。

近年來的研究表明，維生素D（VD）和鈣具有一定的抗氧化作用，鈣在降血脂方面也具有重要的作用。孫長顥等研究表明，飼喂一定水平的鈣可降低大鼠血清中總膽固醇和甘油三酯的含量，改善高胰島素血癥，從而抑制高脂膳食誘導(dǎo)的肥胖[3]。目前對于VD和鈣這方面作用的研究多集中在鼠方面，在肉雞方面研究較少。另外，維生素D和鈣之間具有相互作用，目前對于兩者的交互作用對機體的抗氧化作用等方面的研究還未見報道。因此，本試驗通過研究VD和鈣及其交互作用對愛拔益加（AA）肉雞脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響，探索肉雞日糧中VD和鈣的合理添加量，為肉雞的健康養(yǎng)殖提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與分組

本試驗選用健康、體重相近的4周齡愛拔益加（AA）肉雞 144只隨機分為4個處理，每個處理設(shè)6個重復(fù)，每個重復(fù)6只雞，采用2×2完全隨機試驗設(shè)計，在基礎(chǔ)日糧中設(shè)2個鈣水平，分別為適鈣（0.90%）、高鈣（1.15%）；設(shè) 2個維生素 D水平，分別為適維生素 D（750 U·kg－1）、高維生素 D（5 000 U·kg－1）。即適 Ca適維生素 D 組（Ⅰ）、適鈣高維生素 D組（Ⅱ）、高鈣適維生素D組（Ⅲ）、高鈣高維生素D組（Ⅳ）。

1.2 基礎(chǔ)日糧

基礎(chǔ)日糧參考 NRC（1994）和我國（2004）家禽營養(yǎng)需要推薦水平配制，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表 1。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗期為 4周（4～7周齡）。試驗過程按肉雞常規(guī)免疫程序進行免疫，試驗雞飼養(yǎng)于三層層疊式金屬籠中，每個籠子飼養(yǎng)3只雞。

人工喂料，管道式自動飲水，保證試雞供料和飲水充足，光照和溫度適宜，保持通風(fēng)暢通，避免驚嚇和干擾，且各試驗組條件保持一致，其余同肉雞常規(guī)管理。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 測定指標(biāo)與方法

試驗結(jié)束后，每個重復(fù)隨機選取1只雞，于清晨空腹稱重，翅下靜脈采血10 mL，37℃水浴30 min后，3 000 rpm離心15 min，將所得血清－20℃保存?zhèn)溆?。采血后對試驗雞進行屠宰，取其肝臟，－20℃下保存?zhèn)溆谩Ｑ搴透闻K總抗氧化能力（TAOC）、丙二醛（MDA）含量、過氧化氫酶（CAT）在UV－2401紫外可見分光光度計上進行測定，所用試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（Glu）在日立CL7170型全自動生化分析儀上測定，所用試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SAS 8.0軟件的ANOVA法進行兩因素方差分析，用 Duncan′s極大復(fù)級差法（RRS）進行多重比較，所得結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 鈣和維生素D對肉雞血清脂質(zhì)過氧化的影響

鈣和維生素D對肉雞血清脂質(zhì)過氧化的影響見表2。

由表 2可知，鈣對血清中 T－AOC、CAT和MDA影響均不顯著（P＞0.05），隨鈣添加量的增加，T－AOC和CAT活性均有降低趨勢，維生素D對血清中T－AOC、CAT和MDA影響也不顯著（P＞0.05），但高水平維生素 D可升高 T－AOC和CAT活性，降低MDA含量。鈣和維生素D的交互作用對血清 T－AOC和CAT影響不顯著（P＞0.05），但對血清MDA影響極顯著（P＜0.01），在適鈣水平下增加維生素 D添加量，T－AOC和CAT活性升高，而MDA含量極顯著降低（P＜0.01）；但在高鈣水平下增加維生素D添加量，T－AOC和CAT活性降低，而MDA含量增加，可見適鈣高維生素D組血清抗脂質(zhì)過氧化能力最好。

表2 鈣和維生素D對血清T-AOC、CAT和MDA的影響

2.2 鈣和維生素D對肉雞肝臟脂質(zhì)過氧化的影響

鈣和維生素D對肉雞肝臟脂質(zhì)過氧化的影響見表3。

由表3可知，鈣對肝臟CAT和MDA影響不顯著（P＞0.05），但對 T－AOC 影響顯著（P＜0.05），高水平鈣可降低 T－AOC及CAT活性。維生素D對肝臟 T－AOC、CAT和 MDA影響均不顯著（P＞0.05），但高水平維生素D可升高肝臟 T－AOC和CAT活性，降低MDA含量。鈣和維生素 D的交互作用對肝臟 CAT影響不顯著（P＞0.05），但對 TAOC和MDA影響顯著（P＜0.05），適鈣水平下，增加維生素 D添加量可升高 T－AOC活性（P＜0.05）及CAT活性，顯著降低 MDA含量（P＜0.05）；但高鈣水平下增加維生素 D添加量，T－AOC和CAT活性降低，而MDA含量增加，可見適鈣高維生素D組肝臟抗脂質(zhì)過氧化能力最好。

表3 鈣和維生素D對肝臟T-AOC、CAT和MDA的影響

2.3 鈣和維生素D對肉雞血糖血脂含量的影響

鈣和維生素D對肉雞血糖血脂含量的影響見表4。

表4 鈣和維生素D對血清CHO、TG和Glu的影響

由表4可知，Ca對血清CHO、TG和Glu的影響均不顯著（P＞0.05），隨 Ca添加量的增加，CHO和TG略有降低趨勢，而Glu略有升高趨勢。VD對血清CHO、TG和Glu的影響均不顯著（P＞0.05），隨維生素D添加量的增加CHO、TG和Glu均略有降低趨勢。鈣和維生素D的交互作用對血清Glu的影響不顯著（P＞0.05），適量 Ca添加量下隨VD增加，血糖降低；鈣和維生素D的交互作用對血清CHO和TG影響顯著（P＜0.05），適量鈣添加量下增加維生素D添加量，CHO和TG降低，而高鈣添加量下增加維生素D添加量，CHO和TG會升高，適鈣高維生素D組血脂較其他組低。

3 討論

3.1 鈣和維生素D對脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響

CAT作為抗氧化系統(tǒng)的重要酶系，可清除氧自由基，使細(xì)胞免受氧化；T－AOC則可反映機體整體的抗氧化能力；而MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物，其含量可間接反映細(xì)胞損傷程度。高血脂高血糖常常是一些疾病的誘導(dǎo)因素，而血液中CHO和TG可直接反應(yīng)機體脂肪的代謝狀況[4]。本試驗結(jié)果表明，高水平鈣對血清和肝臟MDA幾乎沒有影響，但可降低T－AOC、CAT活性；高水平鈣可降低血清CHO和TG，但會升高Glu。這說明添加高水平鈣雖然有降血脂的趨勢，但對降低血糖和抗脂質(zhì)過氧化沒有作用。細(xì)胞內(nèi)鈣離子在細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)脂質(zhì)過氧化發(fā)生的過程中起著重要的作用，鈣可提高心肌細(xì)胞抗氧化酶系的活性，但對MDA的影響甚微[5－6]。飼糧中鈣添加過量會對動物機體產(chǎn)生一定損傷，因此在動物飼糧中應(yīng)適當(dāng)限制鈣的添加量[7]。Itoh等研究發(fā)現(xiàn)，日糧限飼鈣可顯著上調(diào)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶的表達，但對過氧化氫酶沒有顯著影響[8]。鈣與食物中的磷在一定條件下可形成不溶的沉淀物，然后與膽汁酸結(jié)合在一起隨糞便排出，導(dǎo)致合成脂肪酸的膽固醇量增加，內(nèi)源性膽固醇合成減少，使血液膽固醇濃度降低[9]。高鈣通過減少腸道脂質(zhì)的吸收而降低血脂水平和組織中的脂質(zhì)含量[10]。在脂肪組織中鈣對于胰島素介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)是必不可少的，只有當(dāng)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度控制在一個較窄的范圍內(nèi)時，才能使胰島素介導(dǎo)的各項功能達到最佳，這也可能是本試驗高水平鈣未能降低血糖的原因[11]。

本試驗結(jié)果表明，高水平維生素D可升高血清和肝臟T－AOC和CAT活性，降低MDA含量，降低血清CHO、TG和Glu水平，但作用均不顯著。這說明高水平維生素D不僅有降低血糖和血脂的作用，還可在一定程度上抵抗脂質(zhì)過氧化。研究發(fā)現(xiàn)，維生素D是細(xì)胞膜質(zhì)抗氧化劑，可以防止鐵依賴性脂質(zhì)過氧化，從而防止自由基對細(xì)胞的損傷，維生素D被認(rèn)為是膽固醇、麥角固醇、三苯氧胺，并與抗癌有關(guān)，可見維生素D也是以與膽固醇結(jié)構(gòu)相似的1,25(OH)2－VD3形式來發(fā)揮抗氧化作用[12－13]。呂錦芳等研究發(fā)現(xiàn)，隨蛋雞日糧中維生素D水平的增加，血清中總膽固醇逐漸降低[14]。這與本試驗研究結(jié)果一致。維生素D及其代謝產(chǎn)物可通過維生素D受體直接作用于胰島β細(xì)胞，影響胰島素的分泌，這可能是高水平維生素D降低血糖的原因[15]。

3.2 鈣和維生素D的交互作用對脂質(zhì)過氧化及血糖血脂的影響

本試驗研究發(fā)現(xiàn)，鈣和維生素D的交互作用可顯著影響MDA、CHO和TG（P＜0.05），在適鈣水平下增加維生素D添加量， T－AOC和CAT活性升高，MDA、CHO、TG和Glu降低，適鈣高維生素D處理組的降血脂血糖能力及抗脂質(zhì)過氧化能力均好于其他組。楊煥等研究發(fā)現(xiàn)，維生素D通過促進鈣吸收對脂質(zhì)代謝產(chǎn)生影響，在普鈣基礎(chǔ)上補充一定劑量維生素D可降低血液TG含量，在前15 d可降低血液膽固醇含量；但在高鈣基礎(chǔ)上補充同劑量維生素D則對脂質(zhì)代謝有不良影響[10]。鈣和維生素D攝入不足可破壞胰島β細(xì)胞內(nèi)外鈣離子池的平衡，影響胰島素的正常釋放，在葡萄糖負(fù)荷增加時這一作用尤其明顯[15]。這與本試驗研究結(jié)果一致。Rama Rao等研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加亞理想鈣和磷水平時，當(dāng)維生素D添加水平高于肉雞推薦水平時可以滿足肉雞的營養(yǎng)需要，且隨維生素D3水平的增加，肝臟中鐵、鋅和錳的沉積量呈非線性升高，這可能也是高維生素D適Ca組能增強生長肉雞抗氧化性能的原因[16]。

4 小結(jié)

高水平鈣有降血脂的趨勢，但對降低血糖和抗脂質(zhì)過氧化沒有作用；而高水平維生素D不僅有降低血糖和血脂的作用，還可在一定程度上抵抗脂質(zhì)過氧化。

鈣和維生素D的交互作用可顯著影響MDA、CHO和TG（P＜0.05），適鈣高維生素D組降低血脂血糖的效果及抗脂質(zhì)過氧化能力均好于其他組。

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