張金娟 仝 鐵 張貴林 貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)室(貴陽(yáng) 550004)

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的一類疾病。目前對(duì)腫瘤的主要治療手段是手術(shù)、放療和化療,放化療雖然在一定程度上可控制腫瘤的生長(zhǎng),延長(zhǎng)部分患者的生命,但其又存在毒副作用大、降低患者生活質(zhì)量、削弱患者抗病能力和信心等弊端。故尋找降低化療藥物的用量同時(shí)又保存其有效的抗腫瘤作用便成為一種值得探討的方法。中藥抗腫瘤具有毒副作用低,不易產(chǎn)生耐藥性和能保護(hù)患者抗病能力的特點(diǎn),近年來(lái)為人們所關(guān)注。我們?cè)鴪?bào)道蒲薏顆粒的抗癌作用和對(duì)化療藥物的增效作用[1、2、3],本研究旨在探討蒲薏顆粒與化療藥物聯(lián)合用藥后可能的減毒作用,為腫瘤患者多提供一種有益的用藥選擇。

1 試驗(yàn)材料 蒲薏顆粒貴州渝生制藥有限公司批號(hào):20030306;肝癌 H22瘤株華西醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所;5-氟尿嘧啶(5-Fu)上海旭東海普藥業(yè)有限公司,批號(hào):030405;電子分析天平梅特勒托利多儀器(上海)有限公司;DJ系列潔凈動(dòng)物飼養(yǎng)柜蘇杭實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技發(fā)展公司、蘇杭凈化設(shè)備廠;KM小鼠,雌雄兼用,體重 18～22g;貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(黔)2002-0001。

2 試驗(yàn)方法[4,5]在無(wú)菌條件下取生長(zhǎng) 8d的小鼠移植型肝癌 H22腹水,顯微鏡下計(jì)數(shù),用生理鹽水稀釋調(diào)整瘤細(xì)胞數(shù)為 2×107/mL的細(xì)胞懸液。于小鼠右腋皮下接種細(xì)胞懸液 0.2mL/只,造成荷瘤動(dòng)物模型。接種 24h后稱重,將荷瘤小鼠按體重隨機(jī)分為 6組:荷瘤對(duì)照組(生理鹽水 10mL/kg)、5-Fu高劑量組(15mg/kg)、5-Fu低劑量組(5mg/kg)、蒲薏顆粒高劑量加 5-Fu組 (18g/kg+ 5mg/kg)、蒲薏顆粒中劑量加 5-Fu組(9g/kg+ 5mg/kg)和蒲薏顆粒低劑量加 5-Fu組(4.5g/kg+5mg/kg),每組 10只 ,另再取 10只正常小鼠作為正常對(duì)照組(生理鹽水 10mL/kg)。各組動(dòng)物分別按各自藥物和劑量灌胃(ig)給藥,每日 1次,連續(xù) 10d。停藥次日稱重后,摘眼球取血作外周血象檢查 ,脫頸椎處死動(dòng)物,取胸腺和脾臟并稱重,按下式計(jì)算胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。剝離小鼠右股骨,提取骨髓,計(jì)數(shù)有核細(xì)胞。試驗(yàn)重復(fù) 3次(每次試驗(yàn)選同一性別動(dòng)物)。胸腺(脾)指數(shù)=胸腺(脾)重量(mg)/小鼠體重(g)

3 結(jié)果 3.1 一般情況及體重變化 5-Fu組小鼠在給藥后 6d起,出現(xiàn)被毛蓬松、漸失光澤,活動(dòng)和飲食減少,體重增長(zhǎng)明顯抑制,與正常對(duì)照組和荷瘤動(dòng)物組比較差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);蒲薏顆粒和 5-Fu聯(lián)合用藥 ,除個(gè)別小鼠活動(dòng)減少和有飲食降低等現(xiàn)象外,其余小鼠活動(dòng)情況、毛色等均正常,體重增長(zhǎng),與 5-Fu組比較有顯著性差異(P＜0.05),見(jiàn)表 1～表3。

3.2 對(duì)脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響 各試驗(yàn)組小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與正常對(duì)照組比較均明顯下降,尤以 5-Fu單純化療組降低最為明顯。聯(lián)合用藥后小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與 5-Fu組比較均有不同程度改善 ,差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);與荷瘤對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。提示蒲薏顆粒具有對(duì)抗化療藥物所致免疫器官萎縮,使小鼠脾臟和胸腺指數(shù)升高。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 1～表 3。

3.3 對(duì)外周血象的影響荷瘤對(duì)照組小鼠血小板數(shù)、白細(xì)胞、血紅蛋白明顯低于正常對(duì)照組(P＜0.05),荷瘤小鼠給予高、低劑量的 5-Fu后,血小板和白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白均顯著降低,與荷瘤對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01);聯(lián)合用藥后 PY+5-FU高、中劑量的上述指標(biāo)有不同程度改善,與 5-Fu組比較差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);提示蒲薏顆粒對(duì) 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白細(xì)胞和血紅蛋白降低有顯著的對(duì)抗作用。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 4～表 6。

3.4 對(duì)骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響 5-Fu高、低劑量組小鼠的骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低,與荷瘤對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01),聯(lián)合用藥后骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)較荷瘤對(duì)照組明顯降低,但較 5-Fu組顯著升高。與荷瘤對(duì)照組比較 PY+5-FU中、低劑量組有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01),與 5-Fu組比較 PY+5-FU高、中劑量組有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01),提示蒲薏顆粒具有對(duì)抗化療藥物所致骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)降低的作用。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表 4～表 6。

表1 對(duì)荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第一次試驗(yàn)結(jié)果,♂)

表2 對(duì)荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第二次試驗(yàn)結(jié)果,♂)

表3 對(duì)荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第三次試驗(yàn)結(jié)果,♀)

表4 對(duì)荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第一次試驗(yàn)結(jié)果)

表5 對(duì)荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第二次試驗(yàn)結(jié)果)

表6 對(duì)荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第三次試驗(yàn)結(jié)果)

4 小 結(jié) 蒲薏顆粒由蒲公英、薏苡仁、何首烏、靈芝、三棱等 5味藥組成,是一經(jīng)驗(yàn)方,臨床應(yīng)用 50余年。本研究觀察蒲薏顆粒與 5-Fu聯(lián)合應(yīng)用對(duì)肝癌 H22荷瘤小鼠一般情況、體重、胸脾指數(shù)、外周血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響,并與單用 5-Fu作比較,探討蒲薏顆粒對(duì)化療藥物 5-Fu的減毒作用,為蒲薏顆粒的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。試驗(yàn)結(jié)果表明:蒲薏顆粒與 5-Fu聯(lián)合應(yīng)用可改善 5-Fu引起的小鼠行為活動(dòng)減少、體重下降等毒性反應(yīng) ,可對(duì)抗 5-Fu所致免疫器官萎縮 ,使小鼠脾臟和胸腺指數(shù)升高,并可對(duì)抗 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白及骨髓有核細(xì)胞的降低,提示蒲薏顆粒具有降低化療藥物的毒性、增強(qiáng)免疫功能作用。蒲薏顆粒對(duì)腫瘤細(xì)胞和有一定的細(xì)胞毒作用;對(duì)環(huán)磷酰胺和 5-氟尿嘧啶的抗腫瘤作用有明顯的協(xié)同作用,具有增效減毒、扶正祛邪作用;臨床用于腫瘤病人的輔助治療應(yīng)具有積極的臨床意義。

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