葉玉華，劉燦輝

（湖南省邵陽(yáng)市藥品檢驗(yàn)所，湖南 邵陽(yáng) 422001）

頸痛康膠囊的工藝研究

葉玉華，劉燦輝

（湖南省邵陽(yáng)市藥品檢驗(yàn)所，湖南 邵陽(yáng) 422001）

目的 優(yōu)選頸痛康膠囊的最佳提取工藝。方法 采用正交試驗(yàn)法，以提取液中葛根素含量及干膏量為指標(biāo)，綜合評(píng)分以優(yōu)選藥材的提取工藝，并考察成型顆粒的流動(dòng)性、堆密度、吸濕性及臨界相對(duì)濕度。結(jié)果 藥材較優(yōu)的提取工藝為加水煎煮2次，第1次加10倍量水煎3 h，第2次加8倍量水煎2 h；成型顆粒的流動(dòng)性好，堆密度為0.408 g/cm3，不容易吸濕，臨界相對(duì)濕度約為56%。結(jié)論 優(yōu)選的工藝操作簡(jiǎn)便，各活性部位提取率高，適用于生產(chǎn)；制得的顆粒間摩擦力小，流動(dòng)性好，不容易吸濕，可以滿足生產(chǎn)、貯存等需求。

頸痛康膠囊；葛根素；高效液相色譜法；正交試驗(yàn)

頸痛康膠囊是邵陽(yáng)市正骨醫(yī)院的醫(yī)院制劑，由葛根、延胡索、骨碎補(bǔ)、紅花、片姜黃、甘草等藥材組方而成，具有祛風(fēng)濕、益氣血、補(bǔ)肝腎、化瘀滯的功效，主治頸椎病證屬氣血虧虛、肝腎不足、脈絡(luò)閉阻者，可緩解頸項(xiàng)疼痛、沉重、活動(dòng)不利、頭痛、頭暈、肢端麻木、酸軟乏力等癥狀。筆者根據(jù)處方中有效成分的理化性質(zhì)和藥理作用，以葛根素含量和干膏量為指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法，優(yōu)選藥材的提取工藝條件，并考察了成型顆粒的流動(dòng)性、堆密度、吸濕性及臨界相對(duì)濕度，為生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

島津LC-20A型高效液相色譜儀；AB204-N型電子天平、AG 135型電子天平（梅特勒-托利多儀器＜上海＞有限公司）。葛根、延胡索、骨碎補(bǔ)等處方中藥材（邵陽(yáng)市松齡堂中藥飲片有限公司）；葛根素對(duì)照品（含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)為110752-200410）。甲醇（SCRC國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)為20080602）為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 總固體測(cè)定

取處方中除延胡索、紅花、骨碎補(bǔ)外的各味藥材，按1/10處方量稱取各藥材粗片，共9份，按因素水平表加熱煎煮，濾過(guò)，濾液濃縮成清膏，定容至200 mL。精密吸取上述清膏液25 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定質(zhì)量。

2.2 葛根素含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件[1]與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：UltimateTMXB-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流動(dòng)相：甲醇 -水（25 ∶75）；檢測(cè)波長(zhǎng)：250 nm；柱溫：35 ℃；流速：1.0 mL/min。在此色譜條件下，葛根素峰與其他組分色譜可達(dá)基線分離，且與相鄰色譜峰分離度大于1.5；理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)均在4 000以上。

2.2.2 溶液制備

取葛根素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含50!g葛根素的溶液，即得對(duì)照品溶液。精密吸取上述清膏3 mL，置50 mL量瓶中，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。取除葛根外的其余處方量藥材，按確定的制備工藝制備缺葛根的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備缺葛根的陰性樣品溶液。

2.2.3 方法學(xué)考察

干擾試驗(yàn)：分別精密吸取對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液與供試品溶液各10!L，注入液相色譜儀，測(cè)定并記錄色譜圖。結(jié)果色譜行為良好，各色譜峰均達(dá)基線分離，供試品溶液色譜中在與對(duì)照品溶液色譜峰相應(yīng)位置上檢出色譜峰，而缺葛根的陰性樣品溶液無(wú)相應(yīng)色譜峰，表明陰性樣品對(duì)測(cè)定無(wú)干擾（圖1）。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：分別精密吸取質(zhì)量濃度為0.092 32 g/L的葛根素對(duì)照品溶液2，5，10，15，20!L注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，以對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 A=4 777 351.282C+3 830.268，r=0.999 97（n=5）。結(jié)果表明葛根素進(jìn)樣量在0.184 64～1.846 4!g范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

加樣回收試驗(yàn)：精密吸取已知含量的供試品溶液1.5 mL，加入葛根素對(duì)照品適量，測(cè)定峰面積，計(jì)算得平均加樣回收率為100.7%，RSD 為 1.1%（n=9）。

2.3 煎煮工藝研究

2.3.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以加水量（因素A）、煎煮時(shí)間（因素B）、煎煮次數(shù)（因素C）為考察因素，所得干膏量和葛根素含量為考察指標(biāo)，按L9(34)表設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表1。

2.3.2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

測(cè)定所得干膏量和葛根素含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3.3 方差分析

以D項(xiàng)作為誤差項(xiàng)進(jìn)行方差分析，結(jié)果見(jiàn)表3和表4。

2.3.4 結(jié)果分析

直觀分析表明，對(duì)頸痛康膠囊水煎煮的影響因素為C＞A＞B。干膏量方差分析結(jié)果表明，因素C（煎煮次數(shù)）對(duì)頸痛康膠囊的水煎煮有非常顯著性影響，因素A（加水量）有顯著性影響；葛根素含量方差分析結(jié)果表明，因素C（煎煮次數(shù)）對(duì)頸痛康膠囊的水煎煮有非常顯著性影響。綜合考慮能源、生產(chǎn)日期等，確定其最佳工藝組合為A3B3(B2)C2，即加藥材8倍量的水浸泡1 h，加熱煎煮2次，第1次 3 h，第 2 次 2 h。

2.4 煎煮液濃縮條件確定

煎煮液應(yīng)采用減壓濃縮，真空度為-0.07～-0.08 MPa，溫度約80℃，并濃縮至干膏。

2.5 制粒條件確定

經(jīng)試驗(yàn)，上述粉末加80%乙醇制得的軟材軟硬適中，顆粒均勻。若加70%的乙醇，則所制軟材太黏，粘附篩網(wǎng)，顆粒太粗；若加90%的乙醇，則所制軟材較松散，難以手握成團(tuán)，且顆粒粉末太多。

表1 正交試驗(yàn)因素水平表

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 干膏量方差分析表

表4 葛根素方差分析表

2.6 顆粒流動(dòng)性測(cè)定[2]

分別取顆粒約50 g，置具1.25 cm小孔的漏斗中，距平板玻璃平面10 cm高度落下，分別測(cè)定堆積高度(H)和堆積半徑(r)，并按公式tanφ=H/r求出休止角 φ，以 φ表示內(nèi)容物的流動(dòng)性，φ愈小，表明流動(dòng)性愈好。共測(cè)3批顆粒，結(jié)果批號(hào)為070901，070902，070903 的 3 批顆粒休止角分別為 30.28°，30.26°，30.14°，平均30.23°（n=3）。

2.7 顆粒堆密度測(cè)定

取顆粒約100 g，通過(guò)一個(gè)玻璃漏斗緩緩傾倒至一量筒內(nèi)，測(cè)出內(nèi)容物的松容積（V），并按公式 d=m/V計(jì)算出內(nèi)容物的堆密度 d。共測(cè)3批顆粒，結(jié)果批號(hào)為070901，070902，070903的3批顆粒堆密度分別為 0.410，0.417，0.398 g/cm3，平均 0.408 g/cm3(n=3)。

2.8 顆粒吸濕百分率測(cè)定[3]

取底部盛有氯化鈉過(guò)飽和溶液的玻璃干燥器，放入25℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)恒溫24 h（相對(duì)濕度75%）。在已恒重的稱量瓶底部放入厚約2 mm的顆粒，準(zhǔn)確稱重后置盛有氯化鈉過(guò)飽和溶液的玻璃干燥器內(nèi)(稱量瓶蓋打開(kāi))，25 ℃恒溫培養(yǎng)箱保存，于 2，4，8，12，24，48 h后分別稱量，計(jì)算吸濕百分率。吸濕百分率=（吸濕后顆粒質(zhì)量-吸濕前顆粒質(zhì)量）/吸濕前顆粒質(zhì)量×100%。結(jié)果保存 2，4，8，12，24，48h后，測(cè)得顆粒吸濕百分率分別為3.11%，4.68%，6.86% ，8.45% ，9.87% ，10.57%（圖 2）。

2.9 顆粒臨界相對(duì)濕度（RHC）測(cè)定[3]

取顆粒干燥至恒重后，置已恒重的稱量瓶中(厚度約2 mm)，準(zhǔn)確稱量后置于分別盛有表5所列7種不同鹽的過(guò)飽和溶液的干燥器內(nèi)(稱量瓶蓋打開(kāi))，于25℃恒溫培養(yǎng)箱中保持4 d后稱量，計(jì)算吸濕百分率。以吸濕百分率數(shù)據(jù)為縱坐標(biāo)、相對(duì)濕度數(shù)據(jù)為橫坐標(biāo)作圖，得頸痛康顆粒的RHC約為56%。詳見(jiàn)表5和圖3。

圖2 吸濕百分率測(cè)定圖

表5 顆粒RHC測(cè)定結(jié)果（%）

2.10 工藝條件驗(yàn)證

取10倍處方量的藥材共3份，按優(yōu)選的工藝條件進(jìn)行驗(yàn)證，出膏率分別為17.9%，18.3%，18.0%，RSD=1.3%；葛根素含量分別為1.76，1.64，1.79 mg/粒，RSD=0.82%。結(jié)果表明該工藝重現(xiàn)性好，穩(wěn)定可行。

3 討論

方中葛根為君藥，參照《中國(guó)藥典》葛根素含量測(cè)定方法，用高效液相色譜法測(cè)定該制劑中的葛根素含量，結(jié)果方法準(zhǔn)確性好，精密度高，故選擇葛根素含量作為正交試驗(yàn)的一個(gè)考察指標(biāo)。

通過(guò)測(cè)定顆粒休止角及堆密度，說(shuō)明顆粒之間的摩擦力較小，流動(dòng)性較好，可以滿足生產(chǎn)過(guò)程中流動(dòng)性的需求。顆粒的臨界相對(duì)濕度約為56%，表明該藥物不容易吸濕，將藥物貯存在其臨界相對(duì)濕度以下的環(huán)境，能夠延長(zhǎng)藥物吸濕平衡到達(dá)的時(shí)間。

試驗(yàn)結(jié)果表明，該煎煮工藝可行，重現(xiàn)性好，可操作性強(qiáng)。參考文獻(xiàn)：

圖3 顆粒RHC測(cè)定圖

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TQ461

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1006－4931(2010）05－0038－02

2009－03－24）