黃克江,楊立偉
(黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150001)
生肌膏由黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院制劑室制備,應(yīng)用于臨床數(shù)十年,主要成分為當歸、紫草、白芷、輕粉、血竭、松香、甘草、川大黃等,具有清熱解毒、生肌斂瘡之功效,應(yīng)用于臨床外科疾病的潰瘍收口期、創(chuàng)面愈合期,療效顯著。本實驗對生肌膏的生肌、抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實驗研究,為使之成為理想的創(chuàng)面用藥提供依據(jù),現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。
1.1 藥物 生肌膏(黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院制劑室制備并提供);馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏(武漢馬應(yīng)龍藥業(yè)集團股份有限公司,批號:060305);白凡士林(哈爾濱青云石化有限公司生產(chǎn),哈爾濱天鵝藥業(yè)有限公司分裝,原批號:20060704,分裝批號:20060340);二甲苯(GP,大慶有機合成化工廠,批號:040518)。
1.2 儀器 電熱恒溫水浴箱(上??档厢t(yī)療器械廠);梅特勒AL-204電子天平(梅特勒托利多(上海)儀器有限公司);美國斯密爾系統(tǒng)(Semile ASP200脫水機、Semile RM3255切片機、Semile HI1210攤片機、Semile HI1220烤片機、Semile ST5020染色機、Semile CV5030蓋片機、Semile DM60000B顯微鏡,Nussloch Comble公司生產(chǎn))。
1.3 動物 昆明種小鼠、SD大鼠(黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供,許可證號:SCXH(黑)2006-0006);鼠用全價飼料(黑龍江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供,許可證號:SCXH(黑)2006-0008);黑龍江省藥物研究所動物使用許可證號:SCXH(黑)2006-0002。
2.1 大鼠塑料環(huán)肉芽腫實驗[1,2]取SD大鼠30只,隨機分為3組:空白對照組(空白組)、馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組(陽性藥組)各10只。麻醉、備皮、消毒,將聚乙烯塑料環(huán)埋入大鼠背部皮下,縫合。術(shù)后第2天分組給藥,每天向各組大鼠塑料環(huán)涂相應(yīng)藥物1次,10天后斷頭處死大鼠,取下塑料環(huán),剝離肉芽組織,用電子天平稱重。之后將肉芽組織作病理組織學檢查,常規(guī)HE染色,觀察毛細血管數(shù)、纖維結(jié)締組織增生情況。
2.2 小鼠鎮(zhèn)痛實驗(熱板法)[3]實驗前對雌性小鼠進行篩選,取合格小鼠26只,隨機分為3組:空白對照組和馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組各8只,生肌膏組10只。各組均在給藥前痛閾值測完后左右后肢均涂敷給藥2次,間隔20min,末次給藥20、40、60min后分別測小鼠痛閾值1次。
2.3 小鼠耳廓急性炎癥實驗(二甲苯致小鼠耳廓腫脹法)[1]取體重18~23g雄性小鼠30只,隨機分為3組:空白對照組、馬應(yīng)龍麝香痔瘡膏組和生肌膏組各10只,連續(xù)鼠耳兩面涂藥,給藥3天。第3天給藥后30min,以二甲苯0.05mL涂于小鼠右耳兩面致炎,30min后再次給藥,30min后將小鼠脫頸椎處死,沿耳廓基線剪下兩耳,再用打孔器打耳片,電子天平稱重。以每鼠右耳片重量減去左耳片重量為腫脹程度,計算腫脹抑制率。
3.1 生肌膏的生肌作用 見表1~2。
表1 生肌膏對大鼠塑料環(huán)肉芽腫的影響
表2 各組肉芽組織毛細血管和成纖維細胞數(shù)的比較(±s)
表2 各組肉芽組織毛細血管和成纖維細胞數(shù)的比較(±s)
注:與空白組比較,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
5 3.4±0.55 7.6±1.81陽性組 5 6.6±1.52** 23.2±2.17***生肌膏組 5 7.6±2.88* 25.4±5.81毛細血管 成纖維細胞空白組組別 視野數(shù)(n)***
3.2 生肌膏的鎮(zhèn)痛作用 見表3。
表3 生肌膏對小鼠痛閾值的影響(±s)
表3 生肌膏對小鼠痛閾值的影響(±s)
注:與自身給藥前比較,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001。
組別 n給藥前痛閾值(s)給藥后痛閾值20min 40min 60min空白組8 22.6±3.2 17.0±5.1 21.3±5.9 26.1±4.5陽性組 8 23.8±4.5 28.0±9.2* 40.1±12.5** 37.6±13.2*生肌膏組 10 25.4±5.4 24.8±13.6 35.2±8.4***34.7±12.9
3.3 生肌膏的抗炎作用 見表4。
表4 生肌膏對小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s,mg)
表4 生肌膏對小鼠二甲苯耳廓腫脹的影響(±s,mg)
組別 動物數(shù)(n) 腫脹度 腫脹抑制率(%)空白組10 20.0±1.5-陽性藥組 10 15.1±5.3 24.5生肌膏組10 17.4±3.1 13.0
本實驗研究證明,生肌膏能顯著促進肉芽組織增生,肉芽病理組織學檢查也證實該藥能顯著增加視野內(nèi)毛細血管和成纖維細胞數(shù);成纖維細胞主要功能是合成膠原,膠原是創(chuàng)口愈合過程中細胞外的最主要基質(zhì),并能增加纖維結(jié)締組織增生,從而有利于創(chuàng)傷和潰瘍的修復。生肌膏能顯著提高小鼠熱板法痛閾值,抑制小鼠二甲苯致耳廓腫脹。實驗研究表明,生肌膏在生肌、抗炎、鎮(zhèn)痛方面具有顯著性作用,佐證了生肌膏的臨床療效,且為臨床應(yīng)用提供了必要的實驗依據(jù)。
[1] 陳奇.中藥藥理實驗方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1994:377,367.
[2] 張亞西,曾亞男.單氏丁桂散促進創(chuàng)瘍愈合的實驗研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志,2002,8(6):431.
[3] 文莉,舒成仁.寧血消痔栓鎮(zhèn)痛作用的研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2005,16(1):4.