胡 斌，林 彩，趙映蘭，鄧 莉，秦 露

(第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院藥劑科，重慶 400038)

復(fù)方醋酸曲安奈德溶液有抗炎、抗過敏、去角質(zhì)層的作用，主要用以治療神經(jīng)性皮炎、慢性皮疹、節(jié)結(jié)性癢疹、皮膚淀粉樣變、疥瘡結(jié)節(jié)等。醋酸曲安奈德是主要成分，測定其含量時以甲醇-水-乙醚為流動相[1]，乙醚易揮發(fā)，毒性強(qiáng)，且易受環(huán)境影響。筆者以乙腈-水[2]為流動相，操作簡單，干擾小，測定結(jié)果重現(xiàn)性好，精密度高，可有效控制復(fù)方醋酸曲安奈德溶液的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

810型高效液相色譜儀(美國Waters)，DU-650型分光光度計(美國Backman);KQ-400KDE型超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);YKH-Ⅱ型液體快速混合器(江西醫(yī)療器械廠);超純水器(美國 Milli-QPlus);LN9527-25型離心機(jī)(德國 Abbott);BP211D型天平(德國Sartorius)。醋酸曲安奈德對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為100125-200404);復(fù)方醋酸曲安奈德溶液(規(guī)格為30 mL/瓶，西南醫(yī)院藥劑科自制，批號分別為080902，081028，081212，090205，090325);乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

色譜柱:DiamonsilTMC18柱(200 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:乙腈-水(60∶40);檢測波長:240 nm;流速:1.0 mL/min;柱溫:30 ℃;進(jìn)樣量:10 μL;理論板數(shù)不低于3 000;保留時間:6.953 min。在此色譜條件下的色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

按復(fù)方醋酸曲安奈德溶液的處方，配制不含醋酸曲安奈德的陰性對照品溶液。精密吸稱取醋酸曲安奈德對照品19.60 mg，置100 mL量瓶中，用甲醇稀釋、定容，再取稀釋液5 mL，置10 mL量瓶中，制成質(zhì)量濃度為 98 μg/mL的對照品溶液。精密吸取樣品溶液5 mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀釋、定容，搖勻，再稀釋10倍制成約10 μg/mL的供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:分別精密量取制備好的醋酸曲安奈德對照品貯備溶液 0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6 mL，分別置7個10 mL的量瓶中，用甲醇稀釋、定容，搖勻，配制成質(zhì)量濃度為 5.88，7.84，9.80，11.76，13.72，15.68 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣10 μL，依法測定3次，記錄峰面積，取平均值。以醋酸曲安奈德的質(zhì)量濃度(μg/mL)對峰面積進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y=15.996 2+73.399 3 X，r=0.999 9(n=6)。結(jié)果表明，醋酸曲安奈德進(jìn)樣量在5.88～15.68 μg范圍內(nèi)與峰面積有良好線性關(guān)系，可用外標(biāo)法計算結(jié)果[3]。

精密度試驗:取醋酸曲安奈德同一供試品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，依法測定。結(jié)果醋酸曲安奈德對照品峰面積的 RSD為0.74%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗:取同一供試品溶液，在 0，2，4，8，12，16，24 h 和0，24，48，72，96 h進(jìn)樣測定。結(jié)果供試品中醋酸曲安奈德對照品峰面積的日內(nèi) RSD值為0.97%，日間 RSD值為1.21%，均小于2%，表明供試品溶液在96 h內(nèi)有良好的穩(wěn)定性。

重現(xiàn)性試驗:取樣品(批號為080902)6份，按供試品溶液制備方法制備溶液，依法獨立測定。結(jié)果醋酸曲安奈德峰面積的 RSD為1.17%(n=6)，表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗:精取已知含量的樣品9份，每份2.5 mL，置50 mL量瓶中，每3份一組，分別向每組加入98 μg/mL的對照品貯備溶液 0.3，0.5，0.7 mL，用甲醇稀釋、定容，搖勻，制成供試液，每個質(zhì)量濃度的溶液連續(xù)進(jìn)樣3次(進(jìn)樣量10 μL)，測定結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

取5批復(fù)方醋酸曲安奈德溶液各3份，按供試品溶液制備方法制備待測溶液，測定含量。結(jié)果批號為080902，081028，081212，090205，090325的5批樣品中醋酸曲安奈德的含量分別為100.20%，97.75%，101.00%，101.80%，97.70%(n=3)。

表1 醋酸曲安奈德加樣回收試驗(n=9)

3 討論

精密稱取醋酸曲安奈德對照品15.06 mg，用甲醇溶解，并稀釋成30.12 μg/mL的溶液。在200～600 nm范圍內(nèi)進(jìn)行紫外可見光掃描，結(jié)果醋酸曲安奈德的最大吸收波長為240 nm，故選擇240 nm作為檢測波長。

通常測定醋酸曲安奈德的流動相中都含有乙醚[1，4]，乙醚為無色透明液體，極易揮發(fā)，易燃燒，其蒸氣重于空氣，帶甜味，有特殊刺激性氣味，具麻醉性。其理化性質(zhì)不穩(wěn)定，加入流動相中會導(dǎo)致出峰時間改變大、基線不平等問題，筆者針對流動相含乙醚不穩(wěn)定的缺點，對流動相進(jìn)行了改進(jìn)，建立了新的測定醋酸曲安奈德的色譜條件，改進(jìn)后的流動相(乙腈-水)性質(zhì)穩(wěn)定，不易受外界環(huán)境的影響，采用該流動相后，結(jié)果重現(xiàn)性好，樣品處理簡單，用外標(biāo)法計算含量方便、快捷。方法學(xué)考察表明，新的色譜系統(tǒng)適用性好，結(jié)果可靠，測定方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于醋酸曲安奈德的含量測定。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:844.

[2]劉會榮，安軍永，張梅華.高效液相色譜法測定曲安奈德氯霉素溶液的含量[J].中國藥業(yè)，2008，17(6):30-31.

[3]張 娟，胡旺生.高效液相色譜法測定膚美松霜中醋酸曲安奈德的含量[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19(8):60.

[4]WS1-(X-136)-96Z，中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(復(fù)方醋酸曲安奈德溶液)[S].