任江劍，陳斌龍，俞旭平，王志安

（1.浙江省中藥研究所，浙江 杭州 310023；2.磐安縣中藥材研究所，浙江 磐安 322300）

不同白芍藥材中芍藥苷含量比較研究△

任江劍1*，陳斌龍2，俞旭平1，王志安1

（1.浙江省中藥研究所，浙江 杭州 310023；2.磐安縣中藥材研究所，浙江 磐安 322300）

目的：比較不同白芍樣品中芍藥苷含量，包括不同地方白芍藥材和浙江不同類型白芍藥材。方法：采用HPLC，測定不同白芍藥材中芍藥苷的含量。結(jié)果：浙江白芍樣品中芍藥苷含量都比較高，除了紫紅花白芍樣品中芍藥苷含量為2.600%，其他4個(gè)浙江白芍樣品中芍藥苷含量都高于3.0%，其中“浙芍1號”白芍樣品中芍藥苷含量為最高，達(dá)到3.572%。亳芍和江西白芍樣品中芍藥苷含量較低，但亳芍和江西白芍樣品中另一化學(xué)成分含量比較高。結(jié)論：不同白芍樣品中芍藥苷含量有一些差異，除了芍藥苷含量，還應(yīng)該綜合其他化學(xué)成分來綜合評價(jià)白芍藥材。

白芍；芍藥苷；質(zhì)量評價(jià)

白芍是毛茛科植物芍藥Paeonia lactifloraPall.的干燥根，具有養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，斂陰止汗，柔肝止痛，平抑肝陽的功能。用于血虛萎黃，月經(jīng)不調(diào)，自汗，盜汗，脅痛，腹痛，四肢攣痛，頭痛眩暈［1］。市售白芍藥材一般分為杭白芍和亳芍，前者主產(chǎn)于浙江東陽、磐安，后者主產(chǎn)于安徽亳州，其他地區(qū)也有種植。白芍藥材在一些產(chǎn)區(qū)具有悠久的種植歷史，經(jīng)過長久的人工種植，由于各產(chǎn)地氣候條件及栽培技術(shù)的不同，形成了各地不同的白芍樣品。在浙江白芍主產(chǎn)區(qū)，由于大部分種植戶自己留種，所以形成了許多不同類型的白芍樣品，可以根據(jù)花朵顏色、莖桿顏色、花朵形狀等分成不同類型。本文主要分析比較了浙江、安徽亳州和江西三地不同白芍樣品和浙產(chǎn)5個(gè)不同類型白芍樣品中芍藥苷含量，為白芍新品種選育和白芍質(zhì)量評價(jià)提供理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Agilent1100系列高效液相色譜儀及Agilent化學(xué)工作站，DAD檢測儀器，KQ－100DB型數(shù)控超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司，功率100W，頻率40kHz）。

1.2 材料

芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號110736-200933）。甲醇、乙腈為色譜純，乙醇、磷酸為分析純，水為重蒸餾去離子水。7個(gè)樣品種苗來源和植株特征見表1，7個(gè)樣品在磐安種植3年，于2009年7月進(jìn)行采收，采用產(chǎn)地傳統(tǒng)加工方法（去皮煮制加工法）進(jìn)行加工。經(jīng)浙江省中藥研究所俞旭平教授級高級工程師鑒定為芍藥Paeonia lactifloraPall.的根。

表1 芍藥樣品種苗來源及植株特征

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：鉆石C18（迪馬公司，250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（18∶82）；流速：1.0mL·min－1；檢測波長：230nm，柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL，理論塔板數(shù)按芍藥苷計(jì)算不低于2 000。

2.2 對照品溶液制備

精密稱取干燥至恒重的芍藥苷對照品適量，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1mL含0.065 6mg芍藥苷對照品溶液，用0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

2.3 供試品溶液制備

取樣品粉末約0.1g，精密稱定，置50mL容量瓶中，加稀乙醇35mL，超聲處理30min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，用0.45μm微孔濾膜過濾，即得。

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取上述對照品溶液4，8，12，16，20μL，分別注入液相色譜儀。以峰面積為縱坐標(biāo)，以對照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為線性方程Y＝1 309.38X－1.62，r＝0.999 6。結(jié)果表明芍藥苷在0.262 4～1.312 0μg呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一芍藥苷對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，每次10μL，結(jié)果平均峰面積為871.4，RSD＝0.47%（n＝6）。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一供試品（1號樣品）溶液，依上述色譜條件，分別于0，2，4，6，8h進(jìn)樣10μL，結(jié)果芍藥苷平均峰面積為737.0，RSD＝0.22%（n＝6），表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

分別取同一批白芍粉末（1號樣品）6份，每份約0.1g，精密稱定，按供試品溶液制備方法制備，并按上述色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果白芍藥材中芍藥苷平均含量為2.54%，RSD＝0.72%（n＝6）。

2.8 加樣回收率試驗(yàn)

取6份已知含量的供試品（1號樣品）約50mg，精密稱定，分別添加芍藥苷對照品1.312mg，按供試品溶液制備方法制備，依上述色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果見表2。

表2 白芍藥材中芍藥苷回收率試驗(yàn)

2.9 樣品含量測定

將不同白芍樣品，按上述方法進(jìn)行測定，結(jié)果見表3。結(jié)果表明，不同樣品中芍藥苷含量有一些差異，1號、2號、3號、5號中芍藥苷含量大于3.0%，其中1號樣品中芍藥苷含量最高，為3.572%，7號樣品中芍藥苷含量最低，為1.745%。芍藥苷對照品和7個(gè)樣品的HPLC圖見圖1～2。

表3 不同白芍樣品中芍藥苷含量

圖1 芍藥苷HPLC圖

圖2 7個(gè)白芍樣品HPLC圖

3 討論

《中國藥典》2010版一部中，白芍藥材以芍藥苷為指標(biāo)性成分，按規(guī)定，白芍藥材中芍藥苷含量不得少于1.6%。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，7個(gè)白芍樣品都符合《中國藥典》的規(guī)定。不同白芍樣品中芍藥苷含量有一些差異，浙江白芍樣品中，除了紫紅花白芍樣品中芍藥苷含量為2.600%外，其他4個(gè)白芍樣品中芍藥苷含量都超過3.0%；亳芍和江西白芍樣品中芍藥苷含量較低，亳芍樣品中芍藥苷含量為2.018%，江西白芍樣品中芍藥苷含量為1.745%。

比較不同白芍樣品色譜圖可以發(fā)現(xiàn)，不同白芍樣品色譜圖中化學(xué)成分有一些差異，除了芍藥苷外，還有其他幾個(gè)色譜峰，芍藥苷在6min左右出峰，4min和5min左右還有兩個(gè)比較明顯的峰，暫把4min左右出的峰定為1號峰，5min左右出的峰為2號峰。7個(gè)白芍樣品中都出現(xiàn)了1號峰，其中“浙芍1號”和江西白芍樣品中1號峰峰面積比較大，其他幾個(gè)樣品中1號峰面積都比較?。?號峰，除了白花白芍樣品中未檢測到，其他樣品中均有出現(xiàn)，但峰面積差異比較大，江西白芍和亳芍樣品中2號峰峰面積比較大，其中江西白芍樣品中2號峰峰面積大于芍藥苷峰面積，亳芍樣品中2號峰峰面積稍小于芍藥苷峰面積，其他4個(gè)樣品中2號峰峰面積都大大低于芍藥苷峰面積。參考文獻(xiàn)［2，3］，白芍中還含有其他的化學(xué)成分，包括芍藥苷內(nèi)酯、五沒食子酰葡萄糖、沒食子酸甲酯等。所以在白芍藥材質(zhì)量評價(jià)中，僅以芍藥苷含量來評價(jià)白芍藥材質(zhì)量有一定的局限性，還應(yīng)綜合考慮其他的化學(xué)成分。

［1］國家藥典委員會.中國藥典（一部）［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：97.

［2］鄒忠梅，徐麗珍，楊世林.芍藥總苷高效液相色譜指紋圖譜研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2003，38（1）：46-49.

［3］楊柳，許舜軍，田潤濤，等.白芍的高效液相色譜指紋圖譜研究［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，42（1）：71-74.

信息天地

封面植物介紹——芍藥

芍藥Paeonia LactifloraPall.為毛茛科植物，以干燥根入藥，栽培品干燥根稱之為白芍，野生品干燥根稱之為赤芍。

【植物形態(tài)】多年生草本，高40～70cm。根肥大，紡錘形或圓柱形，黑褐色。莖直立，上部分枝，基部有數(shù)枚鞘狀膜質(zhì)鱗片。葉互生；葉柄長達(dá)9cm；莖下部葉為二回三出復(fù)葉，上部葉為三出復(fù)葉；小葉狹卵形、橢圓形或披針形，長7.5～12cm，寬2～4cm，先端漸尖，基部楔形或偏斜，邊緣具白色軟骨質(zhì)細(xì)齒，兩面無毛，下面沿葉脈疏生短柔毛，近革質(zhì)?；▋尚?，數(shù)朵生莖頂和葉腋，直徑7～12cm；苞片4～5，披針形，大小不等；萼片4，寬卵形或近圓形，綠色，宿存；花瓣9～13，倒卵形，白色，有時(shí)基部具深紫色斑塊或粉紅色，栽培品花瓣各色并具重瓣；雄蕊多數(shù)，花藥黃色；花盤淺杯狀，包裹心皮基部，先端裂片鈍圓；心皮2～5，離生，無毛。蓇葖果3～5枚，卵形或卵圓形，先端具喙。花期5～6月，果期6～8月。

【性味與歸經(jīng)】白芍：苦、酸，微寒。歸肝、脾經(jīng)。赤芍：苦，微寒。歸肝經(jīng)。

【功能與主治】白芍：養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，斂陰止汗，柔肝止痛，平抑肝陽。用于血虛萎黃，月經(jīng)不調(diào)，自汗，盜汗，脅痛，腹痛，四肢攣痛，頭痛眩暈。

赤芍：清熱涼血，散瘀止痛。用于熱入營血，溫毒發(fā)斑，吐血衄血，目赤腫痛，肝郁脅痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕腹痛，跌撲損傷，癰腫瘡瘍。

Com parative Research on Content of Paeoniflorin in Different Paeoniae Radix Alba

Ren Jingjian1，Chen Binlong2，Yu Xuping1，Wang Zhi′an1
（1.Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou Zhejiang310023，China；2.Pan＇an Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Pan′an Zhejiang322300，China）

Objective：To compare the content of paeoniflorin in paeoniae radix alba samples from different regions and different types in Zhejiang.Methods：HPLC was used to determine the content of paeoniflorin in different paeoniae radix alba samples.ResultsThe content of paeoniflorin from Zhejiang samples were higher，with exception to sample with dark red flower was2.600%，the others were above 3.0%，especially“Zhe Zhao No.1”sample arrived highest to 3.572%.The content in the samples from Bozhou and Jiangxi were relatively lower，however an unknown chemical composition was higher.ConclusionThe content of paeoniflorin in paeoniae radix alba samples is different，except the content of paeoniflorin，the other chemical compositions should be also taken into consideration for quality of paeoniae radix alba.

Radix Paeoniae Alba；Paeoniflorin；Quality evaluation

國家科技重大專項(xiàng)（2009ZX09308-002），國家星火計(jì)劃項(xiàng)目（2008GA700006）

*任江劍，E-mail：jjren＠163.com

2010-04-19）