范 博, 趙瑞玲, 丁 紅*, 徐雅貞

(1山西醫(yī)科大學(xué)藥劑學(xué)教研室, 太原 030001; 2山西省兒童醫(yī)院藥劑科; *通訊作者,E-mail:qdh26@sohu.com)

復(fù)方地塞米松乳膏是以醋酸地塞米松(dexamethasone acetate,DA)和鹽酸賽庚啶 (cyproheptadine hydrochloride,CH)為主藥的復(fù)方外用制劑,具有抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)及止癢作用。為了更好地反映和控制該制劑的質(zhì)量,故將鹽酸賽庚啶的含量測定也作為質(zhì)量控制的指標(biāo)之一。目前,文獻中關(guān)于鹽酸賽庚啶的含量測定方法報道較少,已報道的方法有紫外可見分光光度法[1,2]、高效液相色譜法[3]。本文建立了紫外分光光度法測定乳膏中鹽酸賽庚啶的含量,該法簡便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

1 材料與儀器

1.1 材料 復(fù)方地塞米松乳膏(自制,批號:20090302,20090412,20090516),鹽酸賽庚啶對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號:100502-200401),醋酸地塞米松(上海友盛化工科技有限公司),無水乙醇為分析純。

1.2 儀器 UV752型紫外-可見分光光度計(上海菁華科技儀器有限公司);BP-121S電子天平(天津儀器廠);HH-4型數(shù)顯電子恒溫水浴鍋(江蘇省金壇市宏華儀器廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品貯備液的制備 取鹽酸賽庚啶對照品25 mg,精密稱定,置 50 ml容量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,搖勻,得 0.50 mg/ml的對照品貯備液。

2.1.2 供試品溶液的制備 取乳膏 1.5 g(約相當(dāng)于含鹽酸賽庚啶 15 mg),精密稱定,置于燒杯中,加無水乙醇約20 ml,置80℃水浴中加熱攪拌溶解,再置冰浴中冷卻 1 h,待基質(zhì)凝固后,過濾;基質(zhì)再加入無水乙醇 10 ml,冰浴中冷卻 1 h,凝固,過濾,同法再提取 1次;合并 3次濾液至 50 ml量瓶中,用無水乙醇稀釋至刻度,搖勻。精密量取上述溶液 2.5 ml置50 ml量瓶中,無水乙醇稀釋至刻度,即得供試品溶液。

2.1.3 陰性對照液的制備 另制備不含鹽酸賽庚啶的乳膏產(chǎn)品,同法操作制成陰性對照液。

2.2 測定波長的選擇 取 15.0μg/ml的對照品溶液,按紫外分光光度法在 200-400 nm波長范圍內(nèi)掃描,另取陰性對照液在相同波長范圍內(nèi)掃描,結(jié)果見圖1。

圖1 鹽酸賽庚啶溶液和陰性對照液紫外掃描圖Fig 1 The ultraviolet scanning spectra of CH and negative control solution

結(jié)果表明,鹽酸賽庚啶的吸收峰為223 nm和284 nm,但陰性對照液在 284 nm處幾乎無吸收。故選擇 284 nm為測定波長。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍 分別精密量取對照品貯備液 0.5,1,1.5,2,2.5,3 ml于 50 ml量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度得系列對照品溶液。分別在284 nm波長處測定吸收度,以對照品溶液的濃度 C(μg/ml)為橫坐標(biāo),吸光度 A為縱坐標(biāo),求得回歸方程為:C=0.029 5A+0.030 3,r=0.999 9。結(jié)果表明,鹽酸賽庚啶在 5.0-30.0μg/ml范圍內(nèi),濃度與吸光度線性關(guān)系良好。

2.4 精密度試驗 取濃度為15.0μg/ml的對照品溶液,于 284 nm處連續(xù)測定 6次,結(jié)果 RSD=0.15%,符合測定要求。

2.5 重復(fù)性試驗 按 2.1項下配制相當(dāng)于濃度為15μg/ml的鹽酸賽庚啶供試品溶液 6份,依法測定,結(jié)果 RSD=0.39%,符合測定要求。

2.6 回收率試驗 精密稱取鹽酸賽庚啶對照品適量,加至一定量的不含鹽酸賽庚啶的乳膏產(chǎn)品中,攪勻,按 2.1.2項下同法操作,得到高中低三個濃度的供試液,每個濃度各 3份,依法測定回收率,結(jié)果表明,回收率符合要求,見表1。

表1 乳膏中鹽酸賽庚啶的回收率Tab 1 The recovery of CH in cream

2.7 穩(wěn)定性試驗 取鹽酸賽庚啶供試品溶液分別在配制后室溫放置 0,1,2,3,4,5,6 h后依法測定吸光度,結(jié)果表明,鹽酸賽庚啶在6 h內(nèi)吸光度穩(wěn)定不變。

2.8 含量測定 取乳膏 1.5 g(約相當(dāng)于含鹽酸賽庚啶 15 mg),精密稱定,置于燒杯中,按 2.1.2項下同法操作,制備 3份供試液進行測定,測量結(jié)果見表2。

表2 樣品的含量測定Tab 2 Content determination of samples

3 討論

3.1 試驗中發(fā)現(xiàn),由于乳膏中基質(zhì)成分較多,若將2.1.2項下樣品于 80℃溶解,室溫放置一定時間后會有一定量基質(zhì)析出,影響測定結(jié)果,故采用冰浴的方法可加速基質(zhì)析出,縮短分析測定時間。

3.2 本文考察了提取次數(shù)對樣品含量的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),提取 2次與提取 3次鹽酸賽庚啶含量有 10%的差異,而提取 3次與提取 4次鹽酸賽庚啶含量無差異,故確定提取次數(shù)為3次。

3.3 在已報道的紫外分光光度法測定鹽酸賽庚啶含量的文獻中均采用甲醇作為提取溶劑[1,2],本文采用無水乙醇作為提取溶劑,避免使用了毒性較大的甲醇,且方法簡便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好,故可用于該制劑的質(zhì)量控制。

[1] 何明超,王仲書.復(fù)方鹽酸賽庚啶凝膠劑的制備及質(zhì)量控制[J].制劑技術(shù),2006,15(12):31-32.

[2] 曾明輝,陳璐,朱九群,等.復(fù)方地塞米松乳膏的制備及質(zhì)量控制[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2009,3(16):25-26.

[3] 付志媛.高效液相色譜法測復(fù)方賽庚啶乳膏中鹽酸賽庚啶的含量[J].國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報,2006,12(19):72-73.