馬道遠, 于道德, 肖永雙, 劉清華, 徐世宏, 李 軍, 肖志忠

(1. 中國科學院 海洋研究所, 山東 青島, 266071; 2. 山東省海水養(yǎng)殖研究所, 山東 青島, 266002)

條石鯛消化道發(fā)育的組織學觀察

馬道遠1, 于道德2, 肖永雙1, 劉清華1, 徐世宏1, 李 軍1, 肖志忠1

(1. 中國科學院 海洋研究所, 山東 青島, 266071; 2. 山東省海水養(yǎng)殖研究所, 山東 青島, 266002)

對人工養(yǎng)殖的條石鯛(Oplegnathus fasciatus)仔、幼稚魚消化道及消化腺的發(fā)育過程進行了系統(tǒng)的組織學觀察。研究表明：初孵仔魚 (體長1.66～2.20 mm)的消化道完全處于未分化狀態(tài)。1日齡仔魚全長1.83～2.32 mm, 消化道中部開始形成空腔, 為初始的消化道腔。2日齡仔魚全長2.61～2.98 mm, 小腸與食道打通。3日齡仔魚全長2.56～2.89 mm, 上下頜開啟, 口和肛門與外界開通, 部分仔魚開口攝食。此時消化道已經(jīng)分化為口咽腔、食道、胃前體、腸和直腸, 消化器官肝臟和胰腺及鰾原基出現(xiàn)。4日齡仔魚全長2.73～3.05 mm, 卵黃囊吸收殆盡, 油球殘存, 鰾原基進一步增生, 后腸已經(jīng)出現(xiàn)嗜伊紅囊。22日齡, 胃腺開始分化, 至45日齡, 大部分胃腺結(jié)構(gòu)上分化成熟。本研究結(jié)果將為優(yōu)化條石鯛產(chǎn)業(yè)化養(yǎng)殖的科學管理技術(shù)和其營養(yǎng)學的深入研究提供理論依據(jù)和技術(shù)資料。

條石鯛(Oplegnathus fasciatus); 消化道; 胃腺; 嗜伊紅囊

世界上任何魚類養(yǎng)殖品種的成功繁殖, 其育苗階段都被認為是一個重要的時期[1-3], 條石鯛(Oplegnathus fasciatus)也不例外, 雖然其育苗技術(shù)難關(guān)業(yè)已突破, 但是在進行工廠化人工育苗的過程中, 也出現(xiàn)了幾個高死亡期, 尤其是在開口階段以及配餌轉(zhuǎn)化階段, 這些死亡高峰期嚴重阻礙了條石鯛商業(yè)化養(yǎng)殖。所以有必要首先描述和了解其消化系統(tǒng)的發(fā)生, 同時聯(lián)合仔魚食物的消化和吸收過程。這樣也許能幫助揭示養(yǎng)殖模式中的限制因素, 減少育苗過程中的死亡率, 突破海水魚類苗種培育瓶頸,如開口和餌料轉(zhuǎn)換等[4]。

條石鯛屬鱸形目(Perciformes), 石鯛科(Oplegnathidae), 主要分布于中國黃海、東海、臺灣沿海, 日本北海道以南及韓國以南沿海海域, 其肉質(zhì)極為細致, 口感好, 抗病力強, 是一種具有較高食用價值和觀賞價值的優(yōu)良地方海產(chǎn)魚類。在中國雖然分布區(qū)域較廣, 全年皆產(chǎn), 但始終沒有形成明顯盛漁期。國外關(guān)于條石鯛育苗, 僅有日本和韓國有階段性進步。作者自馴養(yǎng)條石鯛以來, 成功突破育苗技術(shù)難關(guān), 養(yǎng)殖效果良好, 事實說明適合中國南北方沿海養(yǎng)殖, 發(fā)展前景樂觀廣闊。

目前, 關(guān)于條石鯛早期生物學研究主要包括延遲初次攝食(饑餓)對仔魚生長和存活率影響[5]和不同光照周期對條石鯛幼魚脅迫作用和生長影響[6]。而國內(nèi)僅見辛儉[7]和?？姑繹8]對條石鯛早期發(fā)育做了研究, 對條石鯛胚胎和仔稚魚形態(tài)學進行了描述,但是缺乏20日齡后的早期發(fā)育形態(tài)學觀察。而關(guān)于其早期發(fā)育組織學研究為空白。

因此, 本研究借助于組織切片技術(shù), 描述從孵化到變態(tài)完成(也就是苗種生產(chǎn)階段)條石鯛仔、稚、幼魚消化系統(tǒng)和消化腺的發(fā)生發(fā)育過程, 更進一步地了解其形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)聯(lián)性。同時結(jié)合苗種生產(chǎn)過程中死亡高峰期出現(xiàn)時間, 從內(nèi)部器官發(fā)生的形態(tài)與功能上尋找到其關(guān)鍵期出現(xiàn)的內(nèi)在因素,以及相應外源因素的影響, 從而為將來優(yōu)化其產(chǎn)業(yè)養(yǎng)殖的科學管理技術(shù)和條石鯛的營養(yǎng)學的深入研究提供理論依據(jù)和技術(shù)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗所用條石鯛魚苗于2007年6月～7月取自薛家島育苗場, 采用腹部擠壓法分別獲得成熟的卵子和精液, 人工干法授精獲取受精卵(將成熟的卵子擠入5 L塑料圓盆中, 加入適量精液, 搖勻后, 加入少量海水, 放置5～10 min; 加入1～2 L海水, 再放置 10 min, 洗卵)。在 22℃±0.5℃, 鹽度為 30的條件下, 卵子授精后經(jīng)過31 h仔魚孵出。孵出后的魚苗培育條件：水溫22℃±0.5℃, 海水鹽度30, pH為8.2左右, 日換水量為1/2, 不間斷充氣。從3日齡到25日齡, 投喂褶皺臂尾輪蟲(Branchionou plicatilis),密度為 2～15個/mL, 根據(jù)魚苗攝食情況進行調(diào)整;18日齡到 35日齡, 增喂鹵蟲(Artemiaspp.)無節(jié)幼體。密度為1～5個/mL, 輪蟲和鹵蟲無節(jié)幼體(開口后)投喂前分別用魚油(康克 A, 青島森淼公司)進行強化 8～12 h。從 28日齡開始進行魚糜馴化, 經(jīng)過7d可以完全馴化到魚糜。在投喂輪蟲同時添加以小球藻為主(Chlorellaspp.)單胞藻液, 進行綠水養(yǎng)殖方式。

1.2 實驗方法

育苗孵化后, 1～10日齡每天取樣1次, 11～30日齡每2 d或3 d取樣1次, 31～46日齡, 每4 d或5 d取樣1次, 取樣的總樣本數(shù)為60尾。MS-222麻醉, 30尾用于測量生長; 另30尾樣品用Bouin氏液室溫固定24 h, 50%乙醇洗脫, 70%乙醇保存?zhèn)溆?。常?guī)梯度乙醇脫水, 二甲苯透明, 石蠟包埋, 分別進行橫、縱和水平 3個方向的連續(xù)切片, 切片厚度 5～12 μm,H.E.染色, 中性樹膠封片, Nikon顯微鏡觀察和照相。

2 結(jié)果

2.1 口咽腔的形成

3日齡(2.56～2.89 mm)條石鯛仔魚消化道與外界完全接通, 口器形成, 開始攝食輪蟲, 口咽腔由單層扁平上皮覆蓋, 此時無黏膜下層和肌肉層發(fā)生,后部可見4個初始鰓弓(圖1-1)。隨著仔魚的進一步發(fā)育, 5日齡, 咽腔后部出現(xiàn)一薄層環(huán)形肌肉層, 口咽腔仍然為單層扁平上皮覆蓋。10日齡, 黏膜層增為復層扁平上皮, 黏膜下層的結(jié)締組織下方分化出縱行肌肉層, 咽腔后部可見散布的杯狀細胞和味蕾(圖1-2), 此時第二、第三鰓弓的上皮已經(jīng)增殖分化為原始鰓絲, 其上可見原始的脈管系統(tǒng)和少量的血細胞。12日齡, 上下頜齒從口器中凸顯出來, 初始鰓弓上的原始骨細胞增多, 同時血細胞分布逐漸豐富,預示發(fā)育中的鰓小片。16日齡, 咽齒出現(xiàn)(圖1-3)。25日齡, 咽腔分布的黏液細胞和味蕾進一步增多,鰓耙出現(xiàn)(圖1-4, 圖1-5, 圖1-6)。

圖1 條石鯛口咽腔發(fā)育過程Fig. 1 The ontogeny of buccopharyngeal cavity of Oplegnathus fasciatus

2.2 食道的形成

3日齡(2.56～2.89 mm)仔魚, 食道與消化道打通,由復層柱狀上皮構(gòu)成, 此時無肌肉層和杯狀細胞發(fā)生(圖2-1)。4日齡仔魚, 食道的黏膜層開始分化出微小的縱行褶皺, 此時出現(xiàn)環(huán)形肌肉層(圖2-2)。 10日齡, 食道前段分布少量杯狀細胞。

圖2 條石鯛食道發(fā)育過程Fig. 2 The ontogeny of esophagus in Oplegnathus fasciatus

15日齡, 隨著食道味蕾的出現(xiàn)和杯狀細胞的增多, 環(huán)行肌肉層進一步增厚(圖2-3)。此時, 隨縱行皺褶向食道后段延伸, 食道的復層扁平上皮在接近胃前體處逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)閱螌恿⒎缴掀せ虬鶢钌掀? 黏液細胞消失, 環(huán)行肌肉層過渡為平滑肌, 但是肌肉層厚度變化不大(圖2-4)。此后一直到胃腺大量出現(xiàn)前(28～30日齡), 食道無明顯分段的組織學結(jié)構(gòu), 僅僅是黏液細胞數(shù)量增多, 皺褶的加深及肌肉層的增厚。在28～30日齡, 隨著胃體向消化腔縱深的拉長和延伸以及胃腺的大量出現(xiàn), 食道逐漸開始延長, 并在組織學結(jié)構(gòu)上明顯分為兩部分：杯狀細胞和味蕾密集分布的前段以及杯狀細胞稀少, 無味蕾的后段(圖2-5, 圖2-6)。

2.3 胃的形成

3日齡仔魚, 食道后段膨大處形成胃原基, 黏膜層由單層矮柱狀上皮細胞構(gòu)成, 細胞核中位, 外部直接由食道延續(xù)下來的很薄的肌肉層包裹, 無結(jié)締組織發(fā)生, 其腹下方為正在吸收中的卵黃囊(圖3-1)。6～7日齡, 胃原基近腸端出現(xiàn)縱形褶皺, 黏膜層單層矮柱狀細胞轉(zhuǎn)化為柱狀上皮, 核中下位, 出現(xiàn)結(jié)締組織層和漿膜層, 同時肌肉層有所增厚(圖3-2)。14～16日齡, 胃原基出現(xiàn)紋狀緣, 柱狀上皮進一步拉長, 轉(zhuǎn)變?yōu)楦咧鶢钌掀? 細胞核以下位為主, 可見零星分布杯狀細胞。胃腸連接處的肌肉層驟然增厚, 為分化中的幽門括約肌(圖3-3)。

22日齡, 胃賁門部出現(xiàn)微小緊縊, 其肌肉層的加厚(即賁門括約肌)與食道分界明顯, 使胃在形態(tài)上成為一個獨立的器官。胃黏膜層的柱狀上皮進一步增高, 胃幽門部的上皮褶皺明顯增高, 肌肉層亦加厚。同時在胃底部出現(xiàn)少量由實心的細胞團組成的初始胃腺。

28～30日齡, 整個胃體形態(tài)開始卷曲, 胃體明顯分化為3部分：胃賁門部、胃底部和胃幽門部。胃底部的黏膜下層開始大量出現(xiàn)胃腺原基, 大部分胃腺原基仍然為實心的細胞團, 少量胃腺原基分化成管腺狀結(jié)構(gòu)。肌肉層較薄, 在幽門部括約肌增厚明顯(圖3-4)。

45日齡, 大部分胃腺分化成熟, 除少量分布在賁門胃部分外, 大部分集中于胃底部, 而幽門部完全缺乏胃腺。胃體肌肉層開始增厚, 尤其是幽門胃部分, 胃腺消失處的肌肉層十分發(fā)達, 同時在上皮分布一定數(shù)量的杯狀細胞, 此時胃體已經(jīng)具有幼魚和成魚的J形結(jié)構(gòu)(圖3-5)。

2.4 腸的形成

初孵仔魚腸道十分簡單, 尚未分化, 直管狀, 后端具腔。2日齡仔魚腸與食道相通。3日齡(2.56～2.89 mm)仔魚開口攝食, 腸壁上皮由單層柱狀細胞組成(圖4-1)。4日齡仔魚, 腸道分化為前腸和后腸, 后腸上皮細胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)嗜伊紅顆粒(圖4-2)。7日齡仔魚小腸中部形成微小緊縊, 此后形成腸瓣將小腸分化為前腸和中腸, 后腸形成紋狀緣。此時小腸僅形成低矮平滑的褶皺。10日齡, 仔魚腸道盤曲, 形成腸圈。前中腸上皮細胞胞質(zhì)內(nèi)的空泡樣結(jié)構(gòu)(圖4-3)。

圖3 條石鯛胃的發(fā)育過程Fig. 3 The ontogeny of stomach in Oplegnathus fasciatus

圖4 條石鯛腸道發(fā)育過程Fig. 4 The ontogeny of intestine in Oplegnathus fasciatus

17 日齡, 腸柱狀上皮及褶皺明顯增高, 細胞頂端稍平整, 前腸和中腸開始形成紋狀緣。腸道上皮可見少量杯狀細胞的存在(圖4-4)。26 日齡, 首先在接近幽門部的前腸附近形成囊狀的凹陷, 為分化中的幽門盲囊(圖4-5)。隨后在腸曲內(nèi)側(cè), 與彌散的胰臟臨近的位置亦發(fā)生幽門盲囊。幽門盲囊的組織學結(jié)構(gòu)與小腸類似, 其上皮分布有杯狀細胞, 只是在發(fā)生初期不具有上皮褶皺(圖4-6)。

嗜伊紅顆粒和空泡樣結(jié)構(gòu)一直持續(xù)到 28～30日齡, 胃腺大量形成后, 雖然個別個體在胃腺完全成熟后(45日齡), 仍然在中前腸存在空泡樣結(jié)構(gòu)。此后,隨著魚體發(fā)生的進行, 腸道的杯狀細胞增加, 黏膜褶皺增高, 結(jié)締組織增厚, 已初具成魚的特征(圖4-7)。4 日齡, 后腸的末端由立方上皮構(gòu)成的直腸與后腸的區(qū)別明顯, 缺乏嗜伊紅顆粒。而且在整個實驗的過程中, 直腸既無嗜伊紅顆粒和空泡樣結(jié)構(gòu)發(fā)生,也一直缺乏杯狀細胞的分布(圖4-8)。

2.5 肝臟和胰臟的形成

2日齡仔魚肝胰臟原基出現(xiàn), 為微嗜堿性的實心的細胞團。3日齡仔魚, 肝胰臟分化。4日齡, 仔魚開口攝食, 肝臟出現(xiàn)大量的空泡樣結(jié)構(gòu), 預示著對營養(yǎng)物質(zhì)(脂肪)的儲存(圖5-1)。10日齡,肝臟分葉,15 日齡仔魚, 肝細胞呈索狀排列, 空泡結(jié)構(gòu)逐漸增多, 肝細胞的大部分細胞質(zhì)被空泡結(jié)構(gòu)占據(jù), 細胞核被擠到一個周邊的位置, 肝索竇間散布少量紅細胞。此后, 隨著仔魚的生長, 肝門脈系統(tǒng)的進一步完善, 成熟, 內(nèi)充斥大量紅細胞(30日齡, 圖5-2)。3日齡仔魚, 肝胰臟分化, 胰臟實質(zhì)已經(jīng)出現(xiàn)大量酶原顆粒。4日齡仔魚, 嗜堿性較強的胰臟, 開始在消化腔內(nèi)分散分布, 胰臟主體分布于胃原基和小腸的背腹面之間, 其他分散的胰臟組織分散在脾臟、膽囊以及后腸等附近(圖5-3)。10 日齡, 胰臟中出現(xiàn)胰島。胰臟主要以腺泡結(jié)構(gòu)存在, 內(nèi)含大量的酶原顆粒具有強嗜酸性(圖5-4)。胰臟的腺泡細胞具有強嗜堿性的細胞質(zhì), 同時少量胰臟組織侵入肝臟組織, 形成肝胰臟。

3 討論

類似于大多數(shù)暖溫性硬骨魚類, 條石鯛消化道最主要的形態(tài)學變化也是發(fā)生在開口前, 即 1～3日齡。在這3 d內(nèi), 仔魚的消化系統(tǒng)迅速分化。口腔和肛門開通, 肝臟和胰臟從組織學上區(qū)分開來, 同時胰臟組織出現(xiàn)酶原顆粒, 預示其能進行外源營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。這與一些溫水性海水種類類似, 如牙鲆(Paralichthys olivaceus)[9]、真鯛(Pagrus major)[10]等。

圖5 條石鯛消化腺發(fā)育過程Fig. 5 The ontogeny of digestive glands in Oplegnathus fasciatus

一般來說, 硬骨魚類頜齒(包括上頜齒和下頜齒)的出現(xiàn)(發(fā)生)和分化要早于咽齒。正如本實驗觀察到的結(jié)果, 類似的其他報道還有夏鲆(Paralichthys dentatus)[11], 三長棘赤鯛(Pagrus auriga)[12], 緋小鯛(Pagellus erythrinus)[13]。從牙齒功能性的角度來看,牙齒的出現(xiàn)說明魚類攝食種類和其自身營養(yǎng)模式的轉(zhuǎn)變[11]。這正符合了海水魚類從開口到最終變態(tài)結(jié)束變?yōu)槌审w其餌料組成的變化趨勢, 經(jīng)典的餌料流程變化模式為：輪蟲/貝類幼體—鹵蟲無節(jié)幼體—鹵蟲成體—橈足類—魚糜, 最終為配合餌料。

條石鯛的頜齒出現(xiàn)在12日齡, 咽齒出現(xiàn)在16日齡, 但 30日齡仍然埋在口咽腔上皮內(nèi), 并沒有完全執(zhí)行其功能, 說明牙齒功能尚不完善; 此時的胃腺剛出現(xiàn), 亦沒有開始執(zhí)行胃腺的功能。與其他鯛科魚類比較, 條石鯛的牙齒的出現(xiàn)要晚許多, 如三長棘赤鯛的上下頜齒出現(xiàn)于 3～5日齡, 而咽齒出現(xiàn)于 6日齡; 但是卻早于夏鲆[11]等鲆鰈類。所有魚類的牙齒出現(xiàn)一般都是早于胃腺, 而且其功能的完善化都發(fā)生在胃腺形成階段, 這也許能很好的說明, 如果胃腺的出現(xiàn)是餌料轉(zhuǎn)換的必要條件的話, 牙齒的完善發(fā)育則是餌料轉(zhuǎn)換的不可或缺的前提條件; 這是因為餌料的硬度和在水中的保持形狀的特性永遠也達不到活餌料的生物學特性。

實際上, 這些發(fā)育時序的不同主要是受遺傳因素的影響, 而不是其他的外界條件, 像溫度、鹽度等環(huán)境因素。換句話說, 外界的影響因子對早期發(fā)育的影響不會超出科的范疇, 更具體地說, 就是在種屬的適合的外界條件內(nèi), 可以縱向地影響同種或同屬的發(fā)育速度。如本實驗中的孵化溫度是 22～23℃,比三長棘赤鯛 (19～22℃)高一些, 但是, 條石鯛的早期發(fā)育要比三長棘赤鯛晚許多, 不僅僅限于牙齒的發(fā)育, 同時也包括胃腺和幽門盲囊等其他重要的消化器官[14]。

關(guān)于胃腺發(fā)育的報道有很多, 而且一般認為,胃腺的出現(xiàn)預示著胃功能的成熟, 主要就是指胃腺分泌的胃蛋白酶的活性, 使蛋白消化的機制從胞飲作用以及細胞內(nèi)消化[15-18]轉(zhuǎn)化為細胞外消化和膜質(zhì)轉(zhuǎn)運。

雖然有的學者認為胰腺酶不能完全消化蛋白[19],但是Zambonino等[20]在1994年的報道卻指出：胃腺的缺乏并不影響蛋白的消化, 海鱸的胰腺和腸道已經(jīng)分泌了足夠的酶來水解和消化蛋白質(zhì)。這很有可能是無胃魚類和有胃魚類在面對蛋白消化(長期的飲食習慣)出現(xiàn)的適應性進化所至。具體來說, 無胃魚,除了沒有胃腺(胃蛋白酶外), 其胰腺和腸道的蛋白酶對蛋白的消化能力也很弱。而有胃魚類則完全不同, 即使在沒有胃蛋白酶的情況下, 其胰腺和腸道的蛋白酶能夠很好地消化蛋白質(zhì)。從這一點上來看,這完全是兩種魚類在長期選擇食物種類的基礎(chǔ)上進化的結(jié)果所至。并且許多營養(yǎng)學的實驗已經(jīng)證明：在胃腺出現(xiàn)前, 有些海水魚類能成功地進行餌料轉(zhuǎn)換,例如：海鱸(Dicentrarchus labrax)等[21-22]。甚至可以在開口時就進行餌料轉(zhuǎn)化, 在這一點上與淡水魚很像。

從另一個方面來說, 胃腺的出現(xiàn)也并不代表它們具有功能。例如：歐鰨(Solea solea), 胃腺首先出現(xiàn)在22日齡[23], 但是在200日齡才檢測到蛋白酶的活性[24], 這種典型的功能滯后也很可能和其短期內(nèi)飲食史的變化相關(guān), 這里涉及到進化的層面, 超出本文討論的范圍, 不再贅述。類似的報道也見于其他硬骨魚類, 如大菱鲆(Scophthalmus maximus)[25]和短須石首(Umbrina cirrosa)[26]等。因此, 從功能學的角度來看, 應該把蛋白酶的活性的出現(xiàn)作為稚魚向幼魚轉(zhuǎn)化的標志, 而不是胃腺或幽門盲囊[4,10-11,27]。

本研究中, 條石鯛仔魚胃腺最早出現(xiàn)于22日齡,與其他鯛科魚類相比要晚許多, 僅僅早于鯛科中的大西洋王鯛(Sparus auratus)[28](胃腺出現(xiàn)在 60日齡左右)。

幽門盲囊的數(shù)量和發(fā)生時序因種而異, 而且幽門盲囊以及胃腺的出現(xiàn)一般被指定為稚魚期向幼魚期轉(zhuǎn)化的標志。但是, 關(guān)于幽門盲囊的具體功能仍在討論中：目前的研究表明其功能主要有兩個, 分別是⑴ 增加消化道營養(yǎng)吸收的表面積[29]; (2)具有滲透壓調(diào)節(jié)功能[30]。 條石鯛幽門盲囊首先出現(xiàn)在24～26日齡, 稍晚于胃腺的出現(xiàn), 這與一般硬骨魚類胃腺和幽門盲囊的發(fā)育模式相同[4,28]。但也有相反的報道,如歐鱸(Dicentrarchus labrax)[31]和雜交鲆[32]等。

作為養(yǎng)殖業(yè)的新品種, 在條石鯛的育苗過程中也出現(xiàn)了幾個死亡高峰期, 也就是養(yǎng)殖臨界點。第一個發(fā)生在開口攝食階段, 原因是口徑的規(guī)格小, 只適合攝食小型輪蟲, 類似的報道也見于夏鲆, 雖然后者是由于頜骨的發(fā)育畸形所致。第二個死亡高峰發(fā)生在 12日齡左右, 可能與其鰾不充氣相關(guān), 如在其他硬骨魚類中發(fā)現(xiàn)的情況[33-36]。最后, 就是條石鯛在25日齡開始出現(xiàn)的自殘現(xiàn)象, 一直持續(xù)到幼魚初期, 除去自身遺傳的自殘?zhí)煨酝? 這主要是由于魚苗體長以及口裂的差異生長以及餌料的匱乏所導致的現(xiàn)象。而且, 由于鰾不充氣而導致的仔魚脊椎畸形等, 如脊椎前屈癥[36], 降低仔魚的游泳能力導致同樣能增大被殘食的幾率, 結(jié)構(gòu)導致死亡率升高。

[1]Calzada A, Medina A, Canales M L G. Fine structure of the intestine development in cultured sea bream larvae[J].Journal of Fish Biology, 1998, 53(2)：340-365.

[2]Dhert P, Divanach P, Kentouri M, et al. Rearing techniques of difficult marine fish larvae[J].World Aquaculture, 1998, 29(1)：48-55.

[3]Cataldi E, Albano C, Boglione C, et al.Acipenser naccarii：fine structure of the alimentary canal with references to its ontogenesis[J].Journal of Applied Ichthyology, 2002, 18：329-337.

[4]Hamlin H J, Herbing I H, Kling L J. Histological and morphological evaluations of the digestive tract and associated organs of haddock throughout post-hatching ontogeny[J].Journal of Fish Biology, 2000, 57(3)：716-732.

[5]Shan X, Quan H, Dou S. Effects of delayed first feeding on growth and survival of rock breamOplegnathus fasciatuslarvae[J].Aquaculture, 2008, 277(1-2)：14-23.

[6]Biswas A K, Seoka M, Ueno K, et al. Growth performance and physiological responses in striped knifejaw,Oplegnathus fasciatus, held under different photoperiods[J].Aquaculture, 2008, 279(1-4)：42-46.

[7]辛儉, 薛利建, 毛國民. 條石鯛的胚胎發(fā)育觀察[J].浙江海洋學院學報(自然科學版), 2005, 24(1)：31-36.

[8]常抗美, 毛建平, 吳劍鋒. 條石鯛胚胎及仔稚魚的發(fā)育[J].上海水產(chǎn)大學學報, 2005, 14(4)：401-405.

[9]張孝威, 何桂芬, 沙學紳. 牙鲆和條鰨卵子及仔、稚魚的形態(tài)觀察[J].海洋與湖沼, 1965, 7(2)：158-174.

[10]Sarasquete M C, Polo A, Yufera M. Histology and histochemistry of the development of the digestive system of larval gilthead seabream,Sparus aurataL[J].Aquaculture, 1995, 130(1)：79-92.

[11]Bisbal G A, Bengtson D A. Development of the digestive tract in larval summer flounder[J].Journal of Fish Biology,1995, 47(2)：277-291.

[12]Sanchez-Amaya M I, Ortiz-Delgado J B, Garcia-Lopez A,et al. Larval ontogeny of redbanded seabreamPagrus aurigaValenciennes, 1843 with special reference to the digestive system. A histological and histochemical approach[J].Aquaculture, 2007, 263(1-4)：259-279.

[13]Micale V, Garaffo M, Genovese L, et al. The ontogeny of the alimentary tract during larval development in common pandoraPagellus erythrinusL[J].Aquaculture, 2006,251(2-4)：354-365.

[14]Falk-Petersen I B. Comparative organ differentiation during early life stages of marine fish[J].Fish & Shellfish Immunology, 2005, 19(5)：397-412.

[15]Watanabe Y. Morphological and functional changes in rectal epithelium cells of pond smelt during postembryonic development[J].Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fishery, 1984, 50：805-814.

[16]Walford J, Lam T J. Development of digestive tract and proteolytic enzyme activity in seabass (Lates calcarifer)larvae and juveniles[J].Aquaculture, 1993, 109(2)：187-205.

[17]Zambonino Infante J L, Cahu C L. Ontogeny of the gastrointestinal tract of marine fish larvae[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part C：Toxicology &Pharmacology, 2001, 130(4)：477-487.

[18]Mai K, Yu H, Ma H, et al. A histological study on the development of the digestive system ofPseudosciaena crocealarvae and juveniles[J].Journal of Fish Biology,2005, 67(4)：1 094-1 106.

[19]Jany K O. Studies on the digestive enzymes of the stomachless bony fish,Carassius auratus[J].Comparative Biochemistry and Physiology, 1976, 536：31-38.

[20]Zambonino Infante J L, Cahu C L. Influence of diet on pepsin and some pancreatic enzymes in sea bass(Dicentrarchus labrax) larvae[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A：Physiology, 1994, 109(2)：209-212.

[21]Gatesoupe F J. Weaning of sole,Solea solea, before metamorphosis, achieved with high growth and survival rates[J].Aquaculture, 1983, 32(3-4)：401-404.

[22]Cahu C L, Infante J L Z, Barbosa V R. Effect of dietary phospholipid level and phospholipid：neutral lipid value on the development of sea bass (Dicentrarchus labrax) larvae fed a compound diet[J].British Journal of Nutrition, 2003,90(1)：21-28.

[23]Boulhic M, Gabaudan J. Histological study of the organogenesis of the digestive system and swim bladder of the Dover sole,Solea solea(Linnaeus 1758) [J].Aquaculture, 1992, 102(4)：373-396.

[24]Clark J, Murray K R, Stark J R. Protease development in Dover sole [Solea solea(L.)][J].Aquaculture, 1986,53(3-4)：253-262.

[25]Segner H, Storch V, Reinecke M, et al. The development of functional digestive and metabolic organs in turbot,Scophthalmus maximus[J].Marine Biology, 1994, 119(3)：471-486.

[26]Zaiss M M, Papadakis I E, Maingot E, et al. Ontogeny of the digestive tract in shi drum (Umbrina cirrosaL.) reared using the mesocosm larval rearing system[J].Aquaculture,2006, 260(1-4)：357-368.

[27]Govoni J J, Boehlert G W, Watanabe Y. The physiology of digestion in fish larvae[J].Environmental Biology of Fishes, 1986, 16：59-77.

[28]Elbal M T, Garcia Hernandez M P, Lozano M T, et al.Development of the digestive tract of gilthead sea bream(Sparus aurataL.). Light and electron microscopic studies[J].Aquaculture, 2004, 234(1-4)：215-238.

[29]Buddington R K, Diamond J M. Pyloric ceca of fish：a“new” absorptive organ[J].American Journal of Physiology, 1987, 252(1)：65-76.

[30]Veillette P A, White R J, Specker J L, et al.Osmoregulatory physiology of pyloric ceca：regulated and adaptive changes in chinook salmon[J].Journal of Experimental Zoology, 2005, 303A(7)：608-613.

[31]García H M P, Lozano M T, Elbal M T, et al. Development of the digestive tract of sea bass (Dicentrarchus labraxL).Light and electron microscopic studies[J].Anatomy and Embryology, 2001, 204(1)：39-57.

[32]Yu D, Xiao Z, Liu Q, et al. Ontogeny of gastrointestinal tract in hybrid flounder jasum,Paralichthys olivaceus×P.dentatus[J].Journal of the World Aquaculture Society,2010, 41(3)：344-357.

[33]Chatain B. La vessie natatoire chezDicentrarchus labraxetSparus auratus.The swimbladder inDicentrarchus labraxandSparus auratus. II. Influence of development anomalies on larval growth ：II. Influence des anomalies de developpement sur la croissance de la larve[J].Aquaculture, 1987, 65(2)：175-181.

[34]Chatain B. Abnormal swimbladder development and lordosis in sea bass (Dicentrarchus labrax) and sea bream(Sparus auratus) [J].Aquaculture, 1994, 119(4)：371-379.

[35]Chatain B, Dewavrin G. Influence des anomalies de developpement de la vessie natatoire sur la mortalite deDicentrarchus labraxau cours du sevrage. The effects of abnormalities in the development of the swim bladder on the mortality ofDicentrarchus labraxduring weaning[J].Aquaculture, 1989, 78(1)：55-61.

[36]Bein R, Ribi G. Effects of larval density and salinity on the development of perch larvae (Perca fluviatilisL.) [J].Aquatic Sciences, 1994, 56(2)：97-105.

Histological study of the ontogeny of the digestive tract inOplegnathus fasciatus

MA Dao-yuan1, YU Dao-de2, XIAO Yong-shuang1, LIU Qing-hua1, XU Shi-hong1,LI Jun1, XIAO Zhi-zhong1
(1. Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071, China; 2. Mariculture Institute of Shandong Province, Qingdao 266002 , China)

May, 26, 2010

Oplegnathus fasciatus; digestive tract; gastric gland; acidophilic supranuclear vesicles

Under artificial culture conditions, the developments of the digestive system and its associated glands were examined histologically inOplegnathus fasciatusfrom the first day until the 45th day post hatching (dph)．The digestive tube of the first hatching larva was undifferentiated and straight. On the 1st dph, the rudimentary digestive lumen formed as the larve developed. On the second dph (TL, 2.61～2.98 mm), the intestine began to connected with the oesophagus. On the third dph (TL, 2.56～2.89 mm), the upper and lower jaw moved with the mouth and anus opening, indicated the first external feeding. At this time, the digestive tract, consisting of buccopharynx, oesophagus, stomach anlage, intestine and rectum, and the digestive glands, including liver and pancreas, being accompanied by the gas bladder anlage, formed. On the 4th dph (TL, 2.73～3.05 mm), the yolk sac was almost completely absorbed, with residual oil globule, and the acidophilic supranuclear vesicles were seen in the rectum. On the 22 dph, the the gastric gland began to differentiate and was not functional until the 45th dph.

Q954.6 文獻標識碼：A 文章編號：1000-3096(2011)12-0028-08

2010-05-26;

2010-06-20

國家農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項目(05EFN2166000453); 中國科學院創(chuàng)新前沿項目(KSCX2-YW-N-47-08); 青島市科技發(fā)展計劃項目(05-1-HY-79)

馬道遠(1964-), 男, 山東青島人, 主要從事海洋魚類的繁育及相關(guān)生物學研究, 電話：0532-82898717, E-mail：madaoyuan1@163.com; 肖志忠, 通信作者, 電話：0532-82898729,E-mail：xzz@qdio.ac.cn

譚雪靜)