熊小軍，冉承鋒

（1.湖南省麻陽(yáng)縣畜牧水產(chǎn)局，湖南 麻陽(yáng) 419400；2.湖南長(zhǎng)沙達(dá)可思生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙410014）

豬瘟血清學(xué)監(jiān)測(cè)在規(guī)?；i場(chǎng)中的應(yīng)用

熊小軍1，冉承鋒2

（1.湖南省麻陽(yáng)縣畜牧水產(chǎn)局，湖南 麻陽(yáng) 419400；2.湖南長(zhǎng)沙達(dá)可思生物科技有限公司，湖南 長(zhǎng)沙410014）

對(duì)一規(guī)?；i場(chǎng)前后幾次豬瘟疫苗免疫后抗體水平的檢測(cè)，進(jìn)行對(duì)比分析，著重就影響疫苗免疫抗體水平產(chǎn)生的一些因素進(jìn)行總結(jié)，給養(yǎng)豬生產(chǎn)提供了疾病防控的思路與解決措施。

規(guī)?；i場(chǎng)；豬瘟免疫；血清學(xué)監(jiān)測(cè)；應(yīng)用

在近幾年多地發(fā)生的“高熱病”的多數(shù)病例中，可檢出豬瘟抗體水平不合格，個(gè)別病例甚至出現(xiàn)典型的豬瘟病變。豬瘟如何防控仍然是值得探討的重要問(wèn)題，免疫預(yù)防是目前豬瘟流行地區(qū)控制豬瘟的主要手段。在使用疫苗的同時(shí)，應(yīng)選擇良好的檢測(cè)手段，建立和執(zhí)行免疫監(jiān)測(cè)來(lái)優(yōu)化免疫程序和保證免疫效果，才能最終達(dá)到控制豬瘟的效果。IDEXX豬瘟ELISA抗體檢測(cè)試劑盒與中和抗體緊密相關(guān)，是進(jìn)行抗體監(jiān)控的良好方法。近年來(lái)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)?；潭却蠓岣?，使實(shí)施免疫監(jiān)測(cè)成為必要和可能。但目前只有少數(shù)特大型豬場(chǎng)應(yīng)用這一方法控制豬病，大多數(shù)人還沒(méi)有給予足夠的重視，仍然停留在機(jī)械照般別人的免疫程序或“發(fā)病了，再打疫苗”的思想階段。

本文對(duì)一規(guī)?；i場(chǎng)前后幾次豬瘟疫苗免疫后抗體水平的檢測(cè)，進(jìn)行對(duì)比分析，著重就影響疫苗免疫抗體水平產(chǎn)生的一些因素進(jìn)行總結(jié)，以供同行交流與參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 血清來(lái)源于湖南某規(guī)?；i場(chǎng)（基礎(chǔ)母豬群500頭）不同類(lèi)別豬群，隨機(jī)采樣。操作嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室要求進(jìn)行，采集完畢后2～8?C保存，并立即送檢。本試驗(yàn)根據(jù)群體統(tǒng)計(jì)學(xué)原理，群體代表性在85%以上。

1.2 試劑盒 愛(ài)德士（IDEXX）FlockChek*ELISA豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒。

1.3 具體操作程序 嚴(yán)格參照ELISA試劑盒操作規(guī)程執(zhí)行。

1.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用微軟office Excel 2003進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。樣品阻斷率≥40為豬瘟抗體陽(yáng)性，樣品阻斷率≥50為有保護(hù)性，樣品阻斷率≤40為豬瘟抗體不合格。

2 結(jié)果與分析

第1次檢測(cè)結(jié)果表明，由于各個(gè)階段的豬抗體水平普遍較低，結(jié)合該場(chǎng)實(shí)際情況，疫苗不合格的可能性較大，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果沒(méi)有達(dá)到參考值的標(biāo)準(zhǔn)，豬群存在極大的豬瘟感染風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)第1次檢測(cè)的結(jié)果，對(duì)免疫進(jìn)行了調(diào)整，更換了合格的疫苗，全群2次免疫，2次免疫間隔時(shí)間為4周。見(jiàn)表1。

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在第2次免疫后2個(gè)月進(jìn)行了第2次檢測(cè)，檢測(cè)的結(jié)果比第一次有了很大的改善，基本上達(dá)到了參考的標(biāo)準(zhǔn)。第2次檢測(cè)同時(shí)檢查了15頭仔豬母源抗體的消長(zhǎng)情況，選擇23天、33天和43天未經(jīng)豬瘟疫苗免疫的仔豬群，隨機(jī)采樣進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明該場(chǎng)仔豬豬瘟疫苗首免時(shí)間應(yīng)確定在38日齡左右為宜。這是由哺乳母豬的抗體水平?jīng)Q定的。見(jiàn)表2。

3 結(jié)論與應(yīng)用

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目前很多豬場(chǎng)沒(méi)有對(duì)小豬進(jìn)行母源抗體的消長(zhǎng)規(guī)律的監(jiān)測(cè)，首免時(shí)間安全憑技術(shù)場(chǎng)長(zhǎng)的主觀判斷，沒(méi)有科學(xué)依據(jù)。這樣制定的小豬免疫程序，結(jié)果是首免沒(méi)有起到免疫的效果，抵消了母源抗體，在第2次免疫的時(shí)候才相當(dāng)于首免的效果，如果這樣，還需要再加強(qiáng)1次。在實(shí)際中小豬就要免疫3次，而實(shí)際操作中只免疫2次。這是在小豬在育肥階段豬瘟抗體很差的主要原因。

3.1 豬瘟抗體水平群體判斷標(biāo)準(zhǔn)

阻斷率在40以上的，群體占有率≥95%；阻斷率在50以上的，群體占有率≥95%；離散度≤20，平均值在65至75之間，免疫后高峰期越高越好。以上為標(biāo)準(zhǔn)適合于整個(gè)母豬群，以及各個(gè)階段的商品豬。對(duì)于參與配種的公豬，要求阻斷率在50以上的，群體占有率100%。

3.2 在豬場(chǎng)生產(chǎn)上的應(yīng)用

有條件的生產(chǎn)場(chǎng)，應(yīng)定期開(kāi)展豬瘟抗體水平檢測(cè)。并根據(jù)抗體的消長(zhǎng)規(guī)律，結(jié)合實(shí)際情況，制定相應(yīng)的免疫程序與生產(chǎn)措施。

3.2.1 后備豬：為確?；A(chǔ)生產(chǎn)群體的安全，后備豬應(yīng)在210日齡左右進(jìn)行抗體檢測(cè)，根據(jù)抽樣檢測(cè)結(jié)果確定是否進(jìn)行加強(qiáng)免疫。對(duì)于二免后不合格的堅(jiān)決不進(jìn)行配種，治療無(wú)效的堅(jiān)決淘汰，以免將隱性帶毒豬帶入群體中，影響以后的生產(chǎn)穩(wěn)定。

3.2.2 公豬：由于人工授精后公豬與基礎(chǔ)母豬比例在1:70左右，公豬是否健康直接對(duì)整個(gè)生產(chǎn)母豬群的影響甚大，如果公豬為隱性帶毒豬，就會(huì)在后代中進(jìn)行放大，倘若為擴(kuò)繁場(chǎng)或原種場(chǎng)，則后果不堪設(shè)想。因此，公豬必須100%具有保護(hù)力即阻斷率50%以上。對(duì)于不合格的公豬精液堅(jiān)決不參與配種，二免后仍不合格經(jīng)治療無(wú)效的公豬，做淘汰處理。

3.2.3 商品仔豬：對(duì)于商品仔豬的免疫，在母豬群抗體水平比較高的前提下，應(yīng)對(duì)不同日齡仔豬進(jìn)行抗體檢測(cè)分析，當(dāng)母源抗體阻斷率下降到50%時(shí)，要加強(qiáng)免疫豬瘟。發(fā)生豬瘟流行時(shí)，要采取超前免疫措施，減少仔豬感染幾率，確保生產(chǎn)穩(wěn)定。

3.2.4 注意事項(xiàng)：在2次免疫后，要及時(shí)淘汰豬瘟抗體阻斷率在40以下的豬，因?yàn)榻?jīng)過(guò)多次強(qiáng)化免疫，抗體水平仍然很低，說(shuō)明受到野毒感染或者出現(xiàn)了免疫抑制。尤其是公豬和后備豬，豬瘟抗體阻斷率大于50的公豬精液才能參加配種工作，有問(wèn)題的公豬堅(jiān)決淘汰，以免引起病原的擴(kuò)大與散播。后備豬的種源來(lái)自其他場(chǎng)，豬瘟抗體水平通常難以保證，出于安全考慮，可以考慮后備種豬一進(jìn)場(chǎng)就加強(qiáng)免疫豬瘟疫苗2次，以后的豬瘟疫苗再按照豬場(chǎng)自己制定的免疫程序進(jìn)行免疫，只有這樣才能確保后備母豬豬瘟抗體水平處于比較理想的水平。

3.3 加強(qiáng)免疫管理，確保理想的免疫抗體水平

3.3.1 制定適合的免疫時(shí)間與劑量

規(guī)?；i場(chǎng)首先要根據(jù)自身群體抗體水平情況，制定合適的免疫程序。尤其注意免疫時(shí)間與劑量。我國(guó)使用的豬瘟苗多為弱毒苗，會(huì)中和部分抗體，特別要注意當(dāng)母源抗體下降到50%以下時(shí)，仔豬方可加強(qiáng)免疫，否則免疫效果會(huì)比較差。不同的免疫劑量對(duì)抗體的產(chǎn)生也起關(guān)鍵作用。發(fā)生豬瘟疾病時(shí)，考慮加大免疫劑量。

3.3.2 選擇良好穩(wěn)定的疫苗品種

選擇疫苗要選擇正規(guī)且疫苗效價(jià)較為穩(wěn)定的廠家（是否還有BVDV-牛病毒性腹瀉病毒、疫苗雜膜蛋白是否超標(biāo)），在使用疫苗過(guò)程中不要隨意改換不同廠家的疫苗。為避免影響效價(jià)，弱毒苗從出廠到使用全程都要保證冷藏貯運(yùn)并且避免太陽(yáng)直曬，一般要求保存溫度要求在-15℃以下時(shí)，其保存期不超過(guò)12個(gè)月或18個(gè)月。豬瘟的免疫應(yīng)使用豬瘟單苗，不要用“豬瘟-豬肺疫-豬丹毒”三聯(lián)苗,尤其是乳前免疫和25日齡免疫,禁止使用三聯(lián)苗。豬瘟發(fā)病嚴(yán)重的場(chǎng)(戶(hù)),還可選用C株牛體反應(yīng)苗或脾淋苗。

3.3.3 加強(qiáng)細(xì)節(jié)管理，確保免疫措施有效到位

（1）根據(jù)場(chǎng)內(nèi)生產(chǎn)情況，考慮近期可能的疫苗使用量和疫苗有效期等，確定疫苗的購(gòu)入量，并檢查有效期、包裝有無(wú)破損等情況。離有效期還有2～3個(gè)月的豬瘟疫苗建議不要使用。

（2）運(yùn)輸疫苗時(shí)使用放有冰袋的保溫箱，并注意冰袋和疫苗在箱內(nèi)的放置順序和位置，并在盡可能短的時(shí)間內(nèi)到達(dá)場(chǎng)內(nèi)，保持疫苗冷鏈體系不中斷。

（3）稀釋豬瘟疫苗所使用的生理鹽水必須提前至少1天放置冰箱冷藏，稀釋時(shí)將疫苗和稀釋液放置室溫停置數(shù)分鐘，避免疫苗同稀釋液的溫度相差太大，而且已失真空的疫苗禁止使用。

（4）實(shí)施免疫前，根據(jù)所規(guī)定的免疫劑量、免疫頭數(shù)和免疫人員的工作能力來(lái)決定疫苗用量和稀釋次數(shù)，目的是做到現(xiàn)用現(xiàn)配和保證疫苗稀釋液在1小時(shí)內(nèi)用完。

（5）在疫苗液的整個(gè)使用過(guò)程中，疫苗液均要放在有冰袋的保溫箱中暫時(shí)保存，保持冷鏈體系的延續(xù)。防止疫苗液長(zhǎng)時(shí)間暴露于室溫中，增加疫苗損耗。

（6）吸取疫苗液時(shí)注意搖勻和更換針頭，并避免反復(fù)抽取，不能使用已注射過(guò)的針頭吸取疫苗液。免疫種群時(shí)做到1豬1個(gè)針頭。針頭應(yīng)選擇長(zhǎng)度為38～44mm的16#的針頭，并控制好注射速度和進(jìn)針角度，防止出現(xiàn)漏針、飛針等情況，確保疫苗液真正足量注射至肌肉層中。

（7）免疫接種前后所使用的容器、用具(特別是針頭)等及剩余的疫苗液、疫苗瓶子必經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒處理，確立并保持“不人為擴(kuò)散可能存在的污染”的意識(shí)。

（8）免疫接種疫苗前后應(yīng)注意盡可能避免一些劇烈操作，如轉(zhuǎn)群、采血等，防止豬群處于應(yīng)激狀態(tài)而影響免疫效果，而且在免疫接種疫苗的過(guò)程中也要采取必要措施來(lái)避免過(guò)分驅(qū)趕或抓取豬只。在實(shí)際生產(chǎn)中，豬場(chǎng)管理者和獸醫(yī)應(yīng)認(rèn)真考慮，使所采取的疫病防治措施和場(chǎng)內(nèi)的生產(chǎn)流程有機(jī)結(jié)合起來(lái)，發(fā)揮疫病防治措施在保證養(yǎng)豬生產(chǎn)中的最大作用。

（9）免疫接種前后7天內(nèi)，勿使用腎上腺素類(lèi)的激素藥物或免疫抑制性藥物(如鏈霉素、新霉素、卡那霉素、四環(huán)素、磺胺類(lèi)藥物等會(huì)影響淋巴細(xì)胞活動(dòng)，抑制抗體產(chǎn)生)，或抗病毒藥物。

（10）豬瘟免疫接種工作應(yīng)由場(chǎng)內(nèi)獸醫(yī)技術(shù)人員具體負(fù)責(zé)實(shí)施。及時(shí)認(rèn)真填寫(xiě)免疫接種記錄，包括疫苗名稱(chēng)、免疫日期、舍別、欄別、豬日齡、免疫頭數(shù)、免疫劑量、疫苗性質(zhì)、生產(chǎn)廠家、有效期、批號(hào)、接種人等。完整詳細(xì)的規(guī)范性記錄有利于估算近期的疫苗購(gòu)買(mǎi)量和防止豬群免疫中可能出現(xiàn)的漏免及重復(fù)免疫，也利于疫病監(jiān)測(cè)后的分析工作。

3.3.4 提高飼養(yǎng)管理水平，確保豬群健康穩(wěn)定

豬群在健康水平比較高時(shí)，進(jìn)行免疫方能產(chǎn)生良好的抗體水平。因此，豬場(chǎng)管理者必須確保豬群合理的飼養(yǎng)密度，保持良好的通風(fēng)與保溫狀態(tài)，提供豬群優(yōu)良的營(yíng)養(yǎng)水平，避免霉菌毒素的影響，確保良好的飼養(yǎng)管理和全價(jià)的營(yíng)養(yǎng)是保證豬自身健康的基礎(chǔ)。

3.3.5 完善豬場(chǎng)生物安全體系，嚴(yán)格的衛(wèi)生消毒防疫制度

一些疾病如藍(lán)耳、偽狂犬以及圓環(huán)病毒病會(huì)影響豬瘟抗體水平的產(chǎn)生，是常見(jiàn)的免疫抑制疾病。豬只感染該類(lèi)疾病后，難以產(chǎn)生比較好的抗體水平。因此。加強(qiáng)防疫消毒、創(chuàng)造清潔環(huán)境是減少豬群接觸病原或重復(fù)感染的保證。

3.4 豬瘟的（凈化）控制方案

在豬場(chǎng)穩(wěn)定的情況下，選用優(yōu)質(zhì)豬瘟疫苗對(duì)全場(chǎng)公豬、母豬免疫兩次，第二次免疫4周后對(duì)全場(chǎng)公豬、母豬采血檢測(cè)，淘汰阻斷率低于50%以下的公母豬，得到一個(gè)合格的種豬群體。

引入后備母豬、公豬必須在隔離欄完成兩次豬瘟疫苗免疫。第二次免疫4周后采血檢測(cè)，淘汰阻斷率低于50%的豬后混群，防止不合格后備豬進(jìn)入豬場(chǎng)成為新的污染源。

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S852.651

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1006-4907（2011）03-0017-03

10.3969/j.issn.1006-4907.2011.03.008

2011-04-26