孫志平，韓文東，丁悅娜，瞿滌,2

1. 復(fù)旦大學(xué)三級生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，上海 200032； 2. 復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院教育部/衛(wèi)生部醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200032

近年來，嚴(yán)重急性呼吸綜合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)、高致病性禽流行性感冒(簡稱流感)和甲型H1N1流感等新發(fā)、突發(fā)傳染病不斷發(fā)生，提高了人們對實(shí)驗(yàn)室生物安全重要性的認(rèn)識，生物安全實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)也得到很大發(fā)展，在人類傳染病的發(fā)病機(jī)制和防治的研究中發(fā)揮重要作用。在實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的各環(huán)節(jié)中，感染性廢棄物的處理是控制實(shí)驗(yàn)室生物安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。切實(shí)安全地處理感染性廢棄物，必須充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴(yán)格執(zhí)行相應(yīng)的處理程序，從而保證對實(shí)驗(yàn)室感染和周圍環(huán)境影響的控制。根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《中華人民共和國固體廢物污染環(huán)境防治法》，生物安全實(shí)驗(yàn)室感染性廢棄物屬于醫(yī)療廢棄物，必須嚴(yán)格按照《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》進(jìn)行處置[1-3]。本三級生物安全(biosafety level 3，BSL-3)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行3年中，在處理感染性廢棄物時(shí)遇到了若干需要認(rèn)真對待的細(xì)節(jié)，現(xiàn)根據(jù)體會和經(jīng)驗(yàn)，提出相應(yīng)的解決措施和建議。

1 醫(yī)療廢棄物的分類

首先，必須正確分類醫(yī)療廢棄物，才能夠嚴(yán)格按照《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》進(jìn)行處置。與日本和美國的醫(yī)療廢棄物分類[4-7]相比，我國對醫(yī)療廢棄物的分類較為詳細(xì)，明確分為5類，并對各類醫(yī)療廢棄物作了明確規(guī)定。

1.1 國際上對醫(yī)療廢棄物的分類

在日本，醫(yī)療廢棄物是指從醫(yī)院、診所、衛(wèi)生防疫、保健、檢驗(yàn)等醫(yī)療衛(wèi)生有關(guān)單位排出的全部垃圾的總稱，包括感染性廢棄物、放射性廢棄物和非感染性廢棄物[3]。美國將醫(yī)療廢棄物分為感染性廢棄物、病理性廢棄物和一般廢棄物[4]。

1.2 我國對醫(yī)療廢棄物的分類

目前，我國根據(jù)《醫(yī)療廢棄物分類目錄》，將醫(yī)療廢棄物明確分為5類，即感染性廢棄物、病理性廢棄物、損傷性廢棄物、藥物性廢棄物和化學(xué)性廢棄物。感染性廢棄物是指攜帶病原微生物、具有引發(fā)感染性疾病傳播危險(xiǎn)的廢物；病理性廢棄物是診療過程中產(chǎn)生的人體廢棄物和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物尸體等；損傷性廢棄物是指能夠?qū)θ梭w產(chǎn)生傷害的廢棄醫(yī)用銳器；藥物性廢棄物包括過期，淘汰，變質(zhì)或者被污染的廢棄藥品、疫苗、血液制品等；化學(xué)性廢棄物是指具有毒性、腐蝕性、易燃易爆性的廢棄化學(xué)物品。

生物安全實(shí)驗(yàn)室涉及的感染性廢棄物主要為醫(yī)學(xué)標(biāo)本、患者血液和其他體液；實(shí)驗(yàn)室的菌毒株以及帶有菌毒株污染的物品，如培養(yǎng)基等。其中，含有菌毒株的感染性廢棄物是生物安全實(shí)驗(yàn)室最常見的醫(yī)療廢棄物，必須嚴(yán)格按照《醫(yī)療廢棄物管理?xiàng)l例》執(zhí)行。感染性廢棄物又分為固體和液體，其處置方法也不盡相同[1-3,7,8]。

2 BSL-3實(shí)驗(yàn)室固體感染性廢棄物的處理

《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2008)針對不同生物安全等級的實(shí)驗(yàn)室廢棄物，提出不同處理要求。對于BSL-3實(shí)驗(yàn)室的固體廢棄物，要求“應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)設(shè)置生物安全型壓力蒸汽滅菌器”，“對實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)不能用壓力蒸汽滅菌的物品應(yīng)有其他消毒及滅菌措施”[8,9]。

在BSL-3實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行過程中，對固體和液體感染性廢棄物的處置，均要求經(jīng)過壓力蒸汽滅菌后方可轉(zhuǎn)移至非防護(hù)區(qū)。然而在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)消毒處理與壓力蒸汽滅菌存在一定矛盾，需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體情況，綜合考慮，安全解決。

2.1 感染性廢棄物包裝與在防護(hù)區(qū)內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)中安全的矛盾

通常，在BSL-3實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū)內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，要求在生物安全柜內(nèi)將感染性固體廢棄物放入廢棄物包裝袋并封好袋口，然后轉(zhuǎn)運(yùn)至壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行滅菌[8,10,11]。為了驗(yàn)證國內(nèi)生產(chǎn)的壓力蒸汽滅菌袋的透蒸汽效果，我們將含有嗜堿芽胞桿菌芽胞的試管(ACE test?)放置于廢棄物包裝袋內(nèi)，密封或敞開袋口，在不同條件(溫度和時(shí)間)下進(jìn)行滅菌處理，然后取出試管，置于40 ℃培養(yǎng)。結(jié)果顯示，密封的廢棄物袋中嗜堿芽胞桿菌培養(yǎng)陽性(表1)，說明廢棄物包裝袋的密封會影響壓力蒸汽滅菌的效果。

Tab.1SterilizationofBacillusalcalophilusthroughautoclavingusingdifferentpackagingconditions

Sterilizing conditionOpen packagingClosed packaging121 ℃ 30 min-+132 ℃ 10 min-+Mock++

“-” indicates thatBacillusalcalophilusdid not grow after sterilization; “+”indicates thatBacillusalcalophilusgrew after sterilization.

因此，在經(jīng)濟(jì)條件允許情況下，廢棄物袋的材料應(yīng)具有透過水蒸氣且耐高溫、高壓的性能，如熱塑性聚氨酯，但此類材料的廢棄物袋成本相對較高。我們建議：在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，首先將感染性廢棄物放入包裝袋并密封，放入固體廢棄物收集容器，以保證在防護(hù)區(qū)內(nèi)搬運(yùn)轉(zhuǎn)移過程中的生物安全。然后在做好個(gè)人防護(hù)的情況下，于壓力蒸汽滅菌前適當(dāng)松開包裝袋口，以保證壓力蒸汽能夠穿透廢棄物，切實(shí)達(dá)到滅菌效果。

2.2 消毒劑的使用與壓力蒸汽滅菌的矛盾

在BSL-3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過程中為了防止污染擴(kuò)散，經(jīng)常使用消毒劑對物品及時(shí)消毒[1,8,12]。根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》，BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作中產(chǎn)生的感染性廢棄物應(yīng)經(jīng)過壓力蒸汽滅菌后方可運(yùn)離防護(hù)區(qū)，提示經(jīng)過消毒劑處理的感染性廢棄物仍需進(jìn)行壓力蒸汽滅菌處理。在BSL-3實(shí)驗(yàn)室工作中，我們會根據(jù)實(shí)驗(yàn)對象及消毒物品的不同選擇不同的消毒劑，但有些消毒劑在使用過程中會對壓力蒸汽滅菌器以及環(huán)境產(chǎn)生較大的影響。如含氯消毒劑、過氧化氫等高效消毒劑，可很快殺滅病原微生物。這類消毒劑的消毒效果是通過氧化作用實(shí)現(xiàn)的，在高溫、高壓條件下，其氧化能力會進(jìn)一步增強(qiáng)，造成壓力蒸汽滅菌器甚至實(shí)驗(yàn)室圍護(hù)結(jié)構(gòu)的氧化，從而降低滅菌器的使用壽命，也可能破壞實(shí)驗(yàn)室的密封性。另外，有些消毒劑如醛類，在壓力蒸汽滅菌過程中會產(chǎn)生大量刺激性氣味，對環(huán)境和工作人員不利[13]。

BSL-3實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)操作中產(chǎn)生的廢棄物均需經(jīng)過壓力蒸汽滅菌，所以應(yīng)盡量避免采用氧化性和刺激性強(qiáng)的消毒劑。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作的病原微生物特性，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)測試，選擇環(huán)境友好的消毒劑。

3 BSL-3實(shí)驗(yàn)室液體感染性廢棄物的處理

液體感染性廢棄物是BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作中產(chǎn)生的主要廢棄物之一?！秾?shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》[8]提出，BSL-3實(shí)驗(yàn)室應(yīng)使用可靠的方式處置液體感染性廢棄物。我們認(rèn)為，BSL-3實(shí)驗(yàn)室所有的液體感染性廢棄物均需經(jīng)過壓力蒸汽滅菌后方可排出，以切實(shí)達(dá)到滅菌效果。

建議：①應(yīng)使用硬質(zhì)、防漏且耐高溫高壓的容器盛裝液體感染性廢棄物，以防止液體意外潑灑，同時(shí)也便于表面消毒。②實(shí)驗(yàn)結(jié)束，容器口密封后方可移出生物安全柜，以免液體或氣溶膠外溢；但在進(jìn)行壓力蒸汽滅菌前應(yīng)適當(dāng)松開容器口，以利蒸汽進(jìn)入(注意個(gè)人防護(hù))。③實(shí)驗(yàn)過程如采用消毒劑對液體感染性廢棄物進(jìn)行消毒，除前面提及的對滅菌器的影響因素外，還應(yīng)考慮液體對消毒劑的稀釋作用，確保消毒劑濃度達(dá)到消毒效果。④液體感染性廢棄物經(jīng)壓力蒸汽滅菌時(shí)，切忌采用真空模式，以防未經(jīng)滅菌的液體被抽離滅菌器內(nèi)室，對滅菌器管道造成損害；⑤動物尸體或器官滅菌時(shí)，也不宜采用真空模式，以防油脂或體液堵塞滅菌器管道，應(yīng)采用緩慢進(jìn)、排氣方式。

4 消毒滅菌后廢棄物的處置

BSL-3實(shí)驗(yàn)室固體廢棄物的成分和性狀相對復(fù)雜，是實(shí)驗(yàn)室“三廢”中最具綜合性的一類，必須對感染性廢棄物產(chǎn)生至焚燒處理過程進(jìn)行嚴(yán)格管理[2,3,14,15]。為了保證BSL-3實(shí)驗(yàn)室安全，對固體感染性廢棄物的管理考慮如下：①應(yīng)確保感染性廢棄物經(jīng)滅菌處理后方可移出防護(hù)區(qū)，任何消毒滅菌處理的手段都應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，而不應(yīng)由操作人員隨意選定。壓力蒸汽滅菌器需定期由具資質(zhì)的第三方衛(wèi)生管理機(jī)構(gòu)檢測和備案，并時(shí)常進(jìn)行滅菌生物學(xué)自檢，以保證滅菌的有效性。②實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)配備標(biāo)志醒目的分類收集容器，并對所有操作人員進(jìn)行分類收集指導(dǎo)。固體廢棄物收集容器如果需要連同感染性內(nèi)容物共同就地滅菌和進(jìn)行室外運(yùn)輸，按照國家規(guī)定，容器應(yīng)具有不易破裂、防滲漏、耐高溫高壓、可密封特性。尤其是銳器收集容器，本身需兼具保護(hù)實(shí)驗(yàn)者的功能，制造材料更需有韌性，耐扎耐劃。③BSL-3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不允許堆積貯存感染性廢棄物，管理人員應(yīng)及時(shí)清理處置。根據(jù)《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》要求，醫(yī)療廢棄物貯存不得超過2 d。在廢棄物轉(zhuǎn)運(yùn)過程中，操作人員需做好相應(yīng)的個(gè)人防護(hù)。④感染性廢棄物視同醫(yī)療廢棄物，以集中處理為原則，采用焚燒方式處理。應(yīng)由具有感染性廢棄物焚化資質(zhì)的公司執(zhí)行，同時(shí)接受當(dāng)?shù)匦l(wèi)生主管部門和環(huán)境保護(hù)部門監(jiān)督。如違反《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》，將受到相關(guān)部門的處罰[2]。

5 結(jié)語

感染性廢棄物的處理是實(shí)驗(yàn)室生物安全的最后一個(gè)環(huán)節(jié)，也是實(shí)驗(yàn)室生物安全管理中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在嚴(yán)格認(rèn)真執(zhí)行國家法律、法規(guī)的同時(shí)，還有很多細(xì)節(jié)需要認(rèn)真考慮和對待。在實(shí)驗(yàn)室運(yùn)轉(zhuǎn)中必須及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題并加以總結(jié)和改進(jìn)，避免污染實(shí)驗(yàn)室或環(huán)境，以保證高等級病原微生物研究的順利進(jìn)行。

[1] 中華人民共和國國務(wù)院.病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例[ EB/OL ]. http://www.gov.cn/Iwgk/2005-05/23/content_256.htm.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生部. 醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法[EB/OL]. http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohzcfgs/s3576/200804/18353.htm.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部, 國家環(huán)境保護(hù)總局. 醫(yī)療廢棄物分類目錄 [EB/OL]. http//www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohyzs/s3573/200804/18361.htm.

[4] Alvim-Ferraz MC，Afonso SA. Incineration of different types of medical wastes: emission factors for particulate matter and heavy metals [J]. Environ Sci Technol, 2003, 37(14): 3152-3157.

[5] 高春梅, 劉宏，趙超英.醫(yī)院醫(yī)療廢棄物分類處理現(xiàn)狀分析[J]. 華北國防醫(yī)藥, 2009, 21(3): 58-60.

[6] 李前喜，岡本真一.日本的醫(yī)療垃圾處理系統(tǒng)[J]. 上海環(huán)境科學(xué)，2003, 22(7): 508-511.

[7] 畢建軍. 高級別生物安全實(shí)驗(yàn)室廢棄物安全處置[J]. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊, 2006, 30(4): 394-397.

[8] 實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求. GB194892-2008[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.

[9] 衛(wèi)生部衛(wèi)生法制與監(jiān)督司. 消毒技術(shù)規(guī)范(2002年版)[EB/OL].http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohwsjdj/pgz/200804/16508.htm.

[10] 陳軍. 高級別生物安全實(shí)驗(yàn)室的安全與防護(hù)[J]. 中國動物檢疫, 2009,26(8): 24-25.

[11] 趙英倫，李東紅. 醫(yī)療垃圾集中焚燒技術(shù)[J]. 城市管理與科技, 2002,4(4): 10-12.

[12] WHO. Laboratory Biosafety Manual [S]. Atlanta: CDC, 2004, 20-27.

[13] 閆彥芳, 張壯，王碩仁. 生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室有害試劑使用的防護(hù)及廢棄物的處理[J]. 分析儀器, 2009,(5): 102-105.

[14] 祁國明主編. 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全[M]. 北京:人民衛(wèi)生出版社,2005:112-118.

[15] 生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范. GB50346-2004[S].北京：中國建筑工業(yè)出版社，2004.