唐時(shí)幸，康可人，李銀太

·述評(píng)·

疾病體外檢測(cè)和診斷技術(shù)的新發(fā)展

唐時(shí)幸，康可人，李銀太

從全球范圍來(lái)看，疾病體外檢測(cè)、診斷試劑的需求在不斷增長(zhǎng)，年增長(zhǎng)率達(dá)到 5.5％；我國(guó)診斷試劑的市場(chǎng)增長(zhǎng)率達(dá)到近 20％[1]。特異、敏感和快速的疾病體外檢測(cè)和診斷方法是預(yù)防和治療疾病的重要手段和前提。一些新的檢測(cè)技術(shù)和平臺(tái)正逐漸應(yīng)用于疾病的檢測(cè)和診斷，引起了越來(lái)越多的關(guān)注。隨著納米技術(shù)（nanotechnology）和材料的興起與蓬勃發(fā)展，依賴納米材料和技術(shù)的新的疾病診斷方法的研究正在成為疾病檢測(cè)和診斷的熱點(diǎn)；基于納米材料和技術(shù)的新的疾病診斷方法可能成為新一代疾病體外檢測(cè)和診斷方法而受到世界各國(guó)的廣泛重視。其他像芯片技術(shù)（microarray chip）、微流控技術(shù)（microfluidic device）和生物傳感器（biosensor）等也開始應(yīng)用于疾病的體外檢測(cè)，這些新技術(shù)相互結(jié)合為新的疾病檢測(cè)方法研發(fā)提供了更多的選擇。

1 納米材料與技術(shù)

一般講，納米技術(shù)指的是基于原子和分子水平的研究而導(dǎo)致的在納米標(biāo)尺（1 ～ 100 nm）的結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)的發(fā)展和實(shí)際應(yīng)用[2]。更重要的是這些納米標(biāo)尺的結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)因?yàn)槠洫?dú)特的大小而擁有了新的性質(zhì)和功能。納米材料所擁有的獨(dú)特的性質(zhì)和功能使它們能被用來(lái)解決一些我們以前的技術(shù)所無(wú)法解決的問(wèn)題，這就是這項(xiàng)新技術(shù)的生命力所在。比如不同大小的納米顆粒顯現(xiàn)的不同顏色的熒光信號(hào)，使之非常方便用于多指標(biāo)的同時(shí)檢測(cè)。Agrawal 等[3]采用兩種不同大小的量子顆粒（quantum dots）標(biāo)記抗呼吸道融合病毒（RSV）抗體，用于同時(shí)檢測(cè)病毒表面的不同蛋白，只需單個(gè)激發(fā)光源，就能同時(shí)獲得兩種不同的熒光信號(hào)，根據(jù)這兩種信號(hào)強(qiáng)度的差異，就可以區(qū)分變異病毒株，或者是判斷病毒表面病毒蛋白分子數(shù)量，是一種非常簡(jiǎn)單、快速、敏感的多指標(biāo)檢測(cè)方法[3]。納米顆粒在一定條件下發(fā)生聚集而導(dǎo)致納米溶液顏色的改變，這一變化可以直接用于樣本中生物標(biāo)志物的檢測(cè)[4]。比如納米金顆粒標(biāo)記上特異性抗體或寡核苷酸鏈后，分散狀態(tài)的納米金顆粒溶液呈現(xiàn)淡紅色。在特異的抗原或核酸存在時(shí)，納米金顆粒借助抗原抗體或核酸鏈雜交結(jié)合在一起，聚集的納米金顆粒溶液也因此由淡紅色轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙蚝谏?，借助納米溶液的顏色變化，就能判斷樣本中特定的生物標(biāo)志物。此外，納米顆粒標(biāo)記上核酸后可明顯提高核酸雜交的溫度，因而提高核酸檢測(cè)的特異性等。納米科技與生物科學(xué)、醫(yī)藥學(xué)的結(jié)合，正迅速成為新的熱點(diǎn)和前沿領(lǐng)域。納米醫(yī)學(xué)將推動(dòng)基因治療、分子靶向治療研究和疾病診斷的快速發(fā)展。在疾病檢測(cè)和診斷方面，納米材料和技術(shù)的應(yīng)用在提高檢測(cè)方法和診斷的敏感性和特異性方面展現(xiàn)了很好的前景。目前研究的重點(diǎn)在：

⑴納米材料的合成和修飾。早在 20 世紀(jì) 70年代末期納米金顆粒就被用于組織學(xué)免疫染色，當(dāng)時(shí)稱為膠體金（gold colloid），主要是利用抗原、抗體同納米金顆粒的物理吸附將它們標(biāo)記在金顆粒表面，用于相應(yīng)的免疫組織化學(xué)檢測(cè)。由于對(duì)這類材料研究不多，膠體金的應(yīng)用范圍非常有限。到 20世紀(jì) 90 年代末期，納米技術(shù)和納米材料被列為美國(guó)國(guó)家發(fā)展戰(zhàn)略計(jì)劃后，對(duì)這類新材料和技術(shù)的重視迅速升溫，納米材料的合成與修飾、標(biāo)準(zhǔn)化分析、對(duì)環(huán)境和人體健康的影響等研究迅速發(fā)展成為一門專門的學(xué)科，多種多樣的納米材料被研發(fā)出來(lái)，大大促進(jìn)了納米技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。比如把有機(jī)的熒光分子加入到納米顆粒中，每個(gè)納米顆?？砂先f(wàn)個(gè)熒光分子，這樣可以大大提高熒光信號(hào)的強(qiáng)度，因而提高檢測(cè)的敏感性。此外，在納米顆粒內(nèi)部，熒光分子被疏水分子層隔離，增加了熒光分子的穩(wěn)定性，減少了高濃度熒光分子產(chǎn)生的“漂白”現(xiàn)象[5]。再比如借助納米顆粒相對(duì)較大的表面積，在其表面標(biāo)記少量的抗體和數(shù)十個(gè)，乃至上百個(gè)寡核苷酸鏈，借助抗原抗體的特異結(jié)合來(lái)檢測(cè)特異抗原，通過(guò)測(cè)定納米顆粒表面的寡核苷酸鏈來(lái)實(shí)現(xiàn)信號(hào)的放大，因而提高檢測(cè)的敏感性[6-7]。Tang 等[6]在 20 nm 金顆粒表面標(biāo)記上抗 HIV p24 抗體和隨機(jī)寡核苷酸鏈用于檢測(cè) p24 抗原，每一個(gè)金顆粒表面可以結(jié)合約 70 個(gè)核苷酸分子。這樣理論上每一個(gè)抗原抗體分子結(jié)合反應(yīng)，將有 70 個(gè)核酸分子被釋放出來(lái)，因此蛋白信號(hào)也放大了至少 70 倍。同樣也可以在合成脂質(zhì)體（liposome）納米顆粒時(shí)，把寡核苷酸鏈包括在納米顆粒中心，最后檢測(cè)時(shí)把結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上納米顆粒溶解，釋放出其中的寡核苷酸鏈，通過(guò)檢測(cè)釋放的核酸鏈用于信號(hào)的放大檢測(cè)[8]。尤其是用 PCR 方法進(jìn)一步放大所釋放的核酸鏈，檢測(cè)的敏感性將進(jìn)一步提高。其他像在納米顆粒表面添加適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)基團(tuán)，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)抗原-抗體的共價(jià)結(jié)合，提高標(biāo)記的特異性和穩(wěn)定性等，可以進(jìn)一步提高基于納米材料的檢測(cè)試劑產(chǎn)品的穩(wěn)定性和改善質(zhì)量控制。

納米材料指的是直徑在 1 ～ 100 nm 的新材料，從形狀和結(jié)構(gòu)區(qū)分包括納米顆粒（nanoparticle）、納米管（nanotube）和納米膜（nanofilm）；從來(lái)源看包括合成的納米顆粒、偶遇的納米顆粒和自然存在的納米物質(zhì)（像病毒顆粒和病毒蛋白形成的納米級(jí)顆粒等）。納米碳管的直徑 ＜ 100 nm，但其長(zhǎng)度可以達(dá)到微米級(jí)，整個(gè)表面積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于單個(gè)納米顆粒，更適合標(biāo)記許多大的蛋白分子。比如 Wang 等[9]在 1 μm 長(zhǎng)的納米碳管上標(biāo)記 9600 個(gè)辣根過(guò)氧化物酶，用于免疫學(xué)檢測(cè)，檢測(cè) IgG 的濃度可達(dá)到 500 fg/ml，其敏感性就遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于常規(guī)的酶聯(lián)免疫學(xué)檢測(cè)。一些自然存在的蛋白納米顆粒，比如乙型肝炎病毒表面抗原形成的丹式顆粒，更容易消化、分解，對(duì)環(huán)境的影響和破壞會(huì)更小，應(yīng)該給予更多的關(guān)注。納米材料的物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)和功能都不同于大分子材料，一些利用納米材料的檢測(cè)方法，其敏感性和特異性較傳統(tǒng)方法有很大的提高，被越來(lái)越多地應(yīng)用，與納米材料獨(dú)特的理化性質(zhì)密不可分。新的納米材料的發(fā)現(xiàn)、合成、應(yīng)用，是推動(dòng)以納米材料為基礎(chǔ)的新檢測(cè)方法研發(fā)的重要環(huán)節(jié)，也是納米材料科學(xué)研究的重要內(nèi)容，有很多基礎(chǔ)理論問(wèn)題需要解決，需要化學(xué)、高分子材料、物理學(xué)、生物學(xué)等多學(xué)科的相互配合。當(dāng)然，納米材料的毒性和對(duì)環(huán)境的影響，也越來(lái)越受到關(guān)注，期待深入研究闡明。

⑵納米材料與傳統(tǒng)檢測(cè)方法的結(jié)合。現(xiàn)代疾病檢測(cè)方法經(jīng)歷了生化、酶化學(xué)、免疫學(xué)、核酸分子雜交和核酸基因體外擴(kuò)增及序列分析等幾個(gè)階段，相應(yīng)建立了許多檢測(cè)平臺(tái)，如膠體金快速檢測(cè)試紙、酶聯(lián)免疫方法和多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）等，這些原有的檢測(cè)平臺(tái)與新的納米材料結(jié)合，大大改善了原有方法的敏感性和特異性，而成為新的檢測(cè)平臺(tái)和系統(tǒng)。比如在2007 年我們研發(fā)的利用納米金顆粒和銀染色檢測(cè)艾滋病病毒核衣殼蛋白的方法，是在原免疫學(xué)檢測(cè)方法基礎(chǔ)上改進(jìn)的，用納米金顆粒取代傳統(tǒng)辣根過(guò)氧化物酶催化底物顯色，改進(jìn)后的方法檢測(cè)敏感性是原方法的 100 ～ 150 倍，能提前 3 ～ 4 天檢測(cè)出艾滋病病毒感染[6]。在2009 年，我們又用銪熒光納米顆粒（europium nanoparticle）取代納米金顆粒，因?yàn)橐粋€(gè)銪納米顆粒含有 3 萬(wàn)個(gè)熒光分子，能產(chǎn)生很強(qiáng)的熒光信號(hào)，改進(jìn)后的方法檢測(cè)敏感性比傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫方法提高 100 倍[5, 10]。Mason 等[8]把納米顆粒與 PCR 方法結(jié)合檢測(cè)霍亂毒素 β 亞單位，解決了蛋白質(zhì)無(wú)法在體外擴(kuò)增的難題，通過(guò) PCR 擴(kuò)增納米顆粒中攜帶的寡核苷酸鏈分子，實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢測(cè)毒素分子的間接放大，可以檢測(cè)到0.02 fg/ml（相當(dāng)于 10 個(gè)分子）。

⑶納米材料同新檢測(cè)技術(shù)的結(jié)合。納米材料也被大量用于一些新的檢測(cè)方法和平臺(tái)，像基因芯片技術(shù)、生物傳感器和微流控裝置等。在 2010 年我們發(fā)展了一種全基因的基因芯片檢測(cè)技術(shù)，該方法是直接將待檢測(cè)的核酸加到基因芯片上進(jìn)行雜交，借助標(biāo)記在納米金顆粒表面的核酸探針與待檢測(cè)的核酸分子雜交，再通過(guò)銀顯影液還原在納米金顆粒表面形成銀殼來(lái)“顯色”，其敏感性可以接近 PCR水平[11]。由于待檢測(cè)的核酸不需經(jīng)過(guò) PCR 放大，檢測(cè)所需時(shí)間大大縮短，也不用擔(dān)心 PCR 方法中常見的“污染”問(wèn)題。我們?cè)跈z測(cè)流感病毒時(shí)發(fā)現(xiàn)，如果待檢測(cè)樣品中的核酸量足夠大的話，雜交后形成的銀殼很大，結(jié)果可以直接用肉眼判讀或是借助簡(jiǎn)單的儀器判斷，不需要貴重的儀器設(shè)備。如果增加銀“染色”次數(shù)或是選擇用還原金顆粒在原來(lái)的金顆粒表面再形成一層金殼，因?yàn)檫€原后的金殼比銀殼更大，檢測(cè)的敏感性也因此更高。最后，納米金顆?？梢蕴岣吆怂汶s交的溫度，因此可以提高檢測(cè)方法的特異性，減少假陽(yáng)性，可以用于單個(gè)堿基突變的基因診斷。目前我們用該技術(shù)檢測(cè)流感病毒、西尼羅河病毒和 AIDS 病毒，可以檢測(cè)到1000 個(gè)病毒顆粒，比傳統(tǒng)的基因芯片雜交方法簡(jiǎn)單、快速[11]。Chin 等[12]將金顆粒加銀染色方法與微流控技術(shù)結(jié)合建立了快速檢測(cè)HIV和梅毒的移動(dòng)微流控芯片（mobile microfluidic chip，mChip）方法，只需要 1 μl 全血，該方法已經(jīng)在非洲現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用，檢測(cè) HIV 和梅毒的敏感性分別為 100％ （95％ 的可信限范圍為 98.6％ ～ 100％）和 95％ （85.4％ ～ 100％），特異性分別為 100％（99.2％ ～100％）和 81％（64.2％ ～ 97.7％）。

近十年來(lái)基因芯片技術(shù)（microarray technology）被越來(lái)越多地用于疾病診斷，其最大的優(yōu)點(diǎn)是可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)疾病指標(biāo)。但目前核酸檢測(cè)的基因芯片技術(shù)基本上是 PCR 和核酸雜交方法的結(jié)合，是先用 PCR 方法對(duì)待檢測(cè)的核酸加以放大，再通過(guò)核酸雜交方法來(lái)確定樣本中存在何種疾病的核酸。因此它仍然沒(méi)有克服 PCR 和核酸雜交技術(shù)的一些缺點(diǎn)。相反，基因芯片技術(shù)本身比較復(fù)雜，目前很難常規(guī)開展。此外，傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)芯片技術(shù)用蛋白（抗原或抗體）來(lái)檢測(cè)疾病標(biāo)志，問(wèn)題是沒(méi)能在體外對(duì)蛋白標(biāo)志物進(jìn)行放大，檢測(cè)信號(hào)較弱，因而沒(méi)能提高檢測(cè)的敏感性。納米顆粒用于標(biāo)記和芯片檢測(cè)，可以明顯改善檢測(cè)的敏感性和特異性。這些新技術(shù)和材料的結(jié)合應(yīng)用，將促進(jìn)芯片技術(shù)在疾病檢測(cè)的應(yīng)用。

生物傳感器（biosensor）是一類特殊的傳感器，它以生物活性單元（如酶、抗體、核酸、細(xì)胞等）作為生物敏感單元，將生物反應(yīng)或是理化反應(yīng)過(guò)程轉(zhuǎn)變成容易獲取和識(shí)別的光、電信號(hào)的分析裝置。最常用的生物傳感器就是血糖檢測(cè)儀，其利用葡萄糖氧化酶催化血糖降解，產(chǎn)生的電子被電極捕獲而感知血糖及其濃度。實(shí)際上，血糖檢測(cè)試紙也是最簡(jiǎn)單和最常見的微流控裝置。生物傳感器也大量應(yīng)用納米材料于檢測(cè)中，像利用表面等離子共振技術(shù)（surface plasmon resonance，SPR）檢測(cè)表面生物物質(zhì)的方法，在結(jié)合納米顆?；蚴菍?duì)表面進(jìn)行適當(dāng)處理后，SPR 信號(hào)差異就明顯加大，相應(yīng)的檢測(cè)平臺(tái)就更加實(shí)用。生物傳感器非常適合用于疾病快速檢測(cè)和診斷，因此是快速檢測(cè)試劑（point-of-care，POCT）平臺(tái)常用的技術(shù)。

2 微流控裝置

微流控是研究在微米甚至納米級(jí)微小環(huán)境中液體流動(dòng)的原理、精確控制和應(yīng)用。微流控裝置（microfluidic device）就是由若干微細(xì)管道（其中至少一個(gè)管道的直徑小于 1 mm）組成的網(wǎng)絡(luò)樣結(jié)構(gòu)，液體的流動(dòng)受若干控制閥門的控制。簡(jiǎn)單說(shuō)就是一張芯片上的實(shí)驗(yàn)室（lab-on-a-chip），能夠把需要在實(shí)驗(yàn)室完成的多步反應(yīng)放在由很多管道組成的若干個(gè)分區(qū)的玻片（或其他材質(zhì)）上完成[13]。因?yàn)闃颖竞鸵后w在狹窄的管道中流動(dòng)和混合，分子間接觸和碰撞加快，反應(yīng)可以快速完成，縮短了檢測(cè)時(shí)間。此外，狹小的反應(yīng)空間決定了相對(duì)小的反應(yīng)體積，所需的樣本量和試劑等相應(yīng)減少，一是可以減少對(duì)樣本的需求，便于檢測(cè)一些很難獲取的樣本；二是可以減少試劑用量，降低成本。微流控裝置的最大特點(diǎn)是容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)，減少對(duì)實(shí)驗(yàn)室和檢測(cè)人員的依賴，只需將待檢測(cè)樣品加入檢測(cè)孔，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程就能自動(dòng)完成，檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性也因此得到保障。從 20 世紀(jì) 80 年代開始，微流控技術(shù)主要用于噴墨打印機(jī)，現(xiàn)在被廣泛用于制備基因芯片、臨床檢測(cè)的微流控裝置等。應(yīng)當(dāng)看到微流控技術(shù)是未來(lái)疾病檢測(cè)方法的一個(gè)很有潛力的平臺(tái)，微流控技術(shù)正是一個(gè)冉冉升起的新興產(chǎn)業(yè)，到 2013 年其市場(chǎng)價(jià)值可達(dá)到 10 億 ～30 億美元[14-15]。幾項(xiàng)新的進(jìn)展如下：

⑴探索采用新的、廉價(jià)材料，如采用紙作為支撐物，研發(fā)適用于基層、資源貧乏地區(qū)以及快速檢測(cè)試劑（POCT）。比如美國(guó)西雅圖大學(xué) Yager 博士實(shí)驗(yàn)室近年來(lái)研發(fā)的二維紙網(wǎng)絡(luò)（2 dimentional paper-based networking，2-DPN）檢測(cè)系統(tǒng)，在原來(lái)的 POCT 檢測(cè)試紙基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，增加了洗脫和增強(qiáng)染色等步驟，進(jìn)一步提高了檢測(cè)的敏感性[16-17]。哈佛大學(xué) Whitesides 博士的實(shí)驗(yàn)室研發(fā)的硝酸纖維素膜微流控系統(tǒng)，用于血糖等的檢測(cè)，能匹配現(xiàn)有的血糖檢測(cè)儀，敏感性達(dá)到 4 mg/ml[18-19]。建立在硝酸纖維素膜上的芯片檢測(cè)方法，利用毛細(xì)管層析原理，進(jìn)行芯片檢測(cè)，對(duì)傳統(tǒng)芯片系統(tǒng)是巨大的改變，在多指標(biāo)檢測(cè)中展現(xiàn)了很好的應(yīng)用前景。

⑵核酸快速檢測(cè)系統(tǒng)。簡(jiǎn)單的微流控系統(tǒng)用于蛋白和小分子檢測(cè)，已經(jīng)有很多的報(bào)道。近年來(lái)用于核酸的快速檢測(cè)，把樣本處理、核酸提取、擴(kuò)增和檢測(cè)放在同一個(gè)微流控裝置中實(shí)現(xiàn)，并同傳統(tǒng)的利用納米金顆粒顯色的快速檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)合，實(shí)現(xiàn)核酸的快速檢測(cè)。英國(guó)劍橋大學(xué) Lee 博士實(shí)驗(yàn)室報(bào)道，采用同溫核酸放大和金顆粒標(biāo)記加免疫層析分析快速檢測(cè)方法建立了一種簡(jiǎn)單放大方法（simple amplification-based assay, SAMBA），可以在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)、肉眼觀察結(jié)果，能檢測(cè)到 500 拷貝/ml 的HIV-1 核酸，只比傳統(tǒng)的 PCR 方法差 10 倍左右[20]。納米材料與微流控技術(shù)結(jié)合的核酸快速檢測(cè)方法因其簡(jiǎn)單、快速，相應(yīng)的核苷酸鏈易于合成，特別適合快速建立新的檢測(cè)方法，為公共衛(wèi)生突發(fā)事件中病原體的快速檢測(cè)和鑒定，食品安全方面新出現(xiàn)的病原體等的快速檢測(cè)等提供了新的技術(shù)平臺(tái)，應(yīng)該受到更多重視。

⑶新檢測(cè)系統(tǒng)，如阻抗檢測(cè)、非標(biāo)記系統(tǒng)等。物理學(xué)和電化學(xué)檢測(cè)方法應(yīng)用于疾病檢測(cè)平臺(tái)，建立了很多新的簡(jiǎn)單的檢測(cè)系統(tǒng)。比如非標(biāo)記檢測(cè)(label free detection)，就是在檢測(cè)裝置的表面包被上特異性抗原或抗體，結(jié)合樣本中相應(yīng)的抗體或抗原，導(dǎo)致結(jié)合表面阻抗或者是光偏振的改變，借助相應(yīng)的物理學(xué)信號(hào)反映樣本中待檢測(cè)標(biāo)志物的存在和量。非標(biāo)記檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)是不需要標(biāo)記，使檢測(cè)方法研發(fā)更加簡(jiǎn)單、快速；減少了對(duì)生物原材料的需求，將原來(lái)的雙抗體（或抗原）夾心法轉(zhuǎn)變成簡(jiǎn)單單一抗原抗體反應(yīng)。將微流控平臺(tái)中的化學(xué)發(fā)光或電化學(xué)信號(hào)，轉(zhuǎn)變?yōu)閿?shù)字信號(hào)，相應(yīng)出現(xiàn)了所謂的數(shù)字免疫學(xué)方法（digital immunoassay），是微流控技術(shù)的一個(gè)發(fā)展。比如日本東京大學(xué)的 Iino 等[21]報(bào)告結(jié)合有單個(gè)生物標(biāo)志物的納米顆粒，在一個(gè)疏水的微孔陣芯片借助水油相的不混合性分離，每個(gè)孔中的信號(hào)經(jīng)過(guò)CMOS影像感應(yīng)器轉(zhuǎn)變成數(shù)字信號(hào)，可以直接記錄免疫反應(yīng)液中的單個(gè)生物標(biāo)志物，檢測(cè)敏感度可達(dá)到 78 zM。

⑷新用途，如基因序列分析、分子檢測(cè)等。斯坦福大學(xué) Quake 博士實(shí)驗(yàn)室發(fā)明的微流控?cái)?shù)字PCR 方法（microfluidic digital PCR）在基因組序列分析方面比新一代核酸序列分析儀（454，Solexa，SOLiD）有更多的優(yōu)勢(shì)，不需要對(duì)待檢測(cè)的分子進(jìn)行克隆篩選，可以對(duì)測(cè)序文庫(kù)直接定量，誤差小于10％[22]。

新技術(shù)和材料的發(fā)展和應(yīng)用是推動(dòng)疾病檢測(cè)方法發(fā)展的動(dòng)力，也是新一代疾病檢測(cè)方法發(fā)展的方向。這些新技術(shù)應(yīng)用的結(jié)果是進(jìn)一步改善了檢測(cè)方法的敏感性和特異性，使檢測(cè)儀器進(jìn)一步小型化、自動(dòng)化，能更好滿足快速檢測(cè)和研發(fā)適合資源缺乏、條件有限地區(qū)使用的檢測(cè)試劑和儀器。此外，這些新技術(shù)的相互結(jié)合、整合，也是今后疾病檢測(cè)方法發(fā)展的趨勢(shì)和方向。

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